Αφηρημένο

μουκίνες έχουν συσχετιστεί με την επιβίωση σε διάφορους ασθενείς με καρκίνο, αλλά δεν έχουν υπάρξει μελέτες βλεννινών στο λεπτό έντερο καρκίνωμα (SBC). Σε αυτή τη μελέτη, ερευνήσαμε τις σχέσεις μεταξύ βλεννίνη έκφρασης και κλινικοπαθολογική παράγοντες σε 60 περιπτώσεις SBC, στις οποίες προφίλ έκφρασης των MUC1, MUC2, MUC3, MUC4, MUC5AC, MUC6 και MUC 16 στον καρκίνο και φυσιολογικούς ιστούς εξετάστηκαν με ανοσοϊστοχημεία. MUC1, MUC5AC και έκφραση MUC 16 αυξήθηκε σε SBC βλάβες σε σύγκριση με το φυσιολογικό επιθήλιο, και της έκφρασης αυτών των βλεννινών σχετιζόταν με κλινικοπαθολογική παράγοντες, ως εξής: MUC 1 [τοποθεσία του όγκου (ρ = 0,019), βάθος (p = 0,017) και ικανότητα σκλήρυνσης ( p = 0,007)], MUC5AC [τοποθεσία του όγκου (ρ = 0,063) και λεμφαδένα μετάσταση (p = 0,059)], και MUC 16 [φλεβική εισβολή (p = 0,016) και ικανότητα σκλήρυνσης (p = 0,016)]. Ανάλυση 58 περιπτώσεων με δεδομένα επιβίωσης αποκάλυψε πέντε παράγοντες που σχετίζονται με κακή πρόγνωση: πτωχά διαφοροποιημένο ή νευροενδοκρινών ιστολογικό τύπο (ρ & lt? 0.001), λεμφαδένα μετάσταση (ρ & lt? 0.001), λεμφική εισβολή (p = 0,026), φλεβική εισβολή (ρ & lt ? 0.001) και θεραπευτική εκτομή (ρ & lt? 0.001), εκτός από την έκφραση της MUC 1 (p = 0,042), MUC5AC (p = 0,007) και MUC 16 (ρ & lt? 0.001). Σε μεταγενέστερες πολυπαραγοντική ανάλυση με ικανότητα σκλήρυνσης ως συμμεταβλητή, λέμφο μετάσταση στους λεμφαδένες, φλεβική εισβολή, και MUC5AC και /ή έκφραση MUC 16 σχετίζονταν σημαντικά με την πρόγνωση. Πολυπαραγοντική ανάλυση σε θεραπευτική περιπτώσεις (n = 45) έδειξε ότι SBC με MUC5AC ή /και την έκφραση MUC 16 είχαν σημαντικά ανεξάρτητη υψηλού κινδύνου επικινδυνότητας μετά την προσαρμογή για τις επιπτώσεις της φλεβικής εισβολής (αναλογία κινδύνου: 5,6, 95% διάστημα εμπιστοσύνης: 1,8 έως 17) . Συμπερασματικά, η μελέτη δείχνει ότι ένα MUC5AC θετικά ή /και MUC 16-θετική κατάσταση είναι χρήσιμη ως προγνωστικό δείκτη κακής έκβασης σε ασθενείς με SBC

Παράθεση:. Shibahara Η, Higashi Μ, Κοριγιάμα C, Yokoyama S, Kitazono Ι, Kurumiya Υ, et al. (2014) τάστασις Επιπτώσεις της έκφρασης βλεννίνης (MUC) στην έκβαση του λεπτού εντέρου. PLoS ONE 9 (4): e86111. doi: 10.1371 /journal.pone.0086111

Επιμέλεια: Motoyuki Otsuka, Το Πανεπιστήμιο του Τόκιο, Ιαπωνία

Ελήφθη: 24, Ιουλίου, 2013? Αποδεκτές: 4 Δεκ 2013? Δημοσιεύθηκε: 10η, Απριλίου 2014

Copyright: © 2014 Shibahara et al. Αυτό είναι ένα άρθρο ανοικτής πρόσβασης διανέμεται υπό τους όρους της άδειας χρήσης Creative Commons Attribution, το οποίο επιτρέπει απεριόριστη χρήση, τη διανομή και την αναπαραγωγή σε οποιοδήποτε μέσο, ​​με την προϋπόθεση το αρχικό συγγραφέα και την πηγή πιστώνονται

Χρηματοδότηση:. Αυτή η μελέτη υποστηρίχθηκε εν μέρει από το Princess Τακαμάτσου Καρκίνο Ταμείο Έρευνας (11-24319) στο S. Yonezawa? Οι επιχορηγήσεις-in-Ενισχύσεις για την Επιστημονική Έρευνα (Β) 23.390.085 σε S. Yonezawa? Επιστημονική Έρευνα (C) 24590447 έως Μ Higashi? και Νέων Επιστημόνων (Β) 24.701.008 σε S. Yokoyama από το Υπουργείο Παιδείας, Επιστήμης, Αθλητισμού, Πολιτισμού και Τεχνολογίας, την Ιαπωνία? από το Ίδρυμα Kodama Memorial, την Ιαπωνία (Σ Yokoyama & amp? Μ Higashi)? και από USPHS χορηγήσει CA78590 από τα Εθνικά Ινστιτούτα Υγείας στο Σ Κ Batra. Οι χρηματοδότες δεν είχε κανένα ρόλο στο σχεδιασμό της μελέτης, τη συλλογή και ανάλυση των δεδομένων, η απόφαση για τη δημοσίευση, ή την προετοιμασία του χειρογράφου

Αντικρουόμενα συμφέροντα:.. Οι συγγραφείς έχουν δηλώσει ότι δεν υπάρχουν ανταγωνιστικά συμφέροντα

Εισαγωγή

καρκίνωμα Μικρές εντέρου (SBC) είναι μια σπάνια κακοήθεια, σε αντίθεση με ορθοκολικό καρκίνωμα. Μια χειρουργική προσέγγιση χρησιμοποιείται κυρίως για τη θεραπεία του SBC [1] – [6], αλλά πολλοί ασθενείς έχουν κακή έκβαση μετά από θεραπευτική εκτομή. λεμφαδένα μετάσταση [1] – [3], μακρινή μετάσταση [6], κατάσταση του κύριου όγκου [2], [6] και της διαφοροποίησης του όγκου [1] έχουν αναφερθεί ως προγνωστικοί παράγοντες στην SBC

Οι βλεννίνες είναι. γλυκοπρωτεΐνες υψηλού μοριακού βάρους στις οποίες οι πρωτεΐνες πυρήνα τροποποιημένα με ο-γλυκοζίτη-συνδεδεμένων ολιγοσακχαριτών [7]. Οι δεκαοκτώ βασικών ανθρώπινων βλεννών (MUC1-MUC8, MUC12, MUC13, MUC15-17 και MUC19-21) έχουν ταυτοποιηθεί. Το πρώτο κλωνοποιημένο βλεννίνη, MUC1, είναι ένα σημαντικό ανθρώπινο αντιγόνο όγκου, καταλαμβάνοντας δευτερόλεπτα μετά WT1 [8]. Χρησιμοποιώντας ανοσοϊστοχημεία (IHC), έχουμε δείξει ότι η έκφραση MUC 1 και /ή MUC4 σχετίζεται με μια χειρότερη πρόγνωση, ενώ MUC2 έκφραση συσχετίζεται με καλύτερη πρόγνωση σε διαφόρους ανθρώπινους όγκους [7], [9]. Η ανώμαλη έκφραση των MUC3, MUC4, MUC5AC και MUC6 έχει περιγραφεί σε παγκρεατικά ενδοεπιθηλιακή νεοπλασία [10], [11], και αναφέρθηκε πρόσφατα ότι MUC 16 είναι υποψήφια ως φτωχό προγνωστικός παράγοντας σε χολαγγειοκαρκίνωμα [12].

Μέχρι σήμερα, μόνο δύο άρθρα έχουν συζητήσει βλεννινών στο SBC [13], [14] και η κλινική σημασία της έκφρασης βλεννίνης στο SBC είναι άγνωστη. Ως εκ τούτου, ο σκοπός της παρούσας μελέτης ήταν να διερευνηθεί κατά πόσον η έκφραση του βλεννών (MUC1, MUC2, MUC3, MUC4, MUC5AC, MUC6 και MUC 16) έχει προγνωστική σημασία σε ασθενείς με SBC χρησιμοποιώντας δείγματα που λαμβάνονται από χειρουργικά τμήματα σε πολλά νοσοκομεία.

Υλικά και Μέθοδοι

ασθενείς και ιστών δείγματα

Μεταξύ 1973 και 2011, 60 εκτομή δείγματα του SBC συλλέχθηκαν από την Toyota Kosei Νοσοκομείο, Chutoen Γενικό Ιατρικό Κέντρο, Τσίτα City Hospital, Anjo Kosei νοσοκομείο, Τογιοχάσι Δημοτικό νοσοκομείο, Ερυθρός Σταυρός της Ιαπωνίας Ναγκόγια Daiichi νοσοκομείο, Kasugai Δημοτικό νοσοκομείο, Handa City Hospital και Καγκοσίμα-shi Medical Hospital Association. Οι καρκίνοι του λήκυθο του Vater ή πιθανές μεταστατικό καρκίνο αποκλείστηκαν από τη μελέτη. Οι ασθενείς ήταν 28 άνδρες και 32 γυναίκες, με εύρος ηλικίας από 34 έως 90 (μέσος όρος 65) ετών. Οι θέσεις όγκου ήταν το δωδεκαδάκτυλο (24 περιπτώσεις), νήστιδα (20), τον ειλεό (14), και που δεν κατονομάζονται (2). Αυτή η μελέτη διεξήχθη σύμφωνα με τις κατευθυντήριες αρχές της Διακήρυξης του Ελσίνκι. Ενημέρωσε, γραπτή συγκατάθεση λήφθηκε από 6 ασθενείς, και εγκρίθηκε από την Επιτροπή Δεοντολογίας της Kagoshima-shi Ιατρική Νοσοκομείο Συλλόγου (KMAH 2011-02-02). Για τους άλλους ασθενείς, χωρίς εν επιγνώσει συναίνεση, το Διοικητικό Συμβούλιο Institutional Review της Toyota Kosei Νοσοκομείο (22-ST04), τις Επιτροπές Δεοντολογίας της Τογιοχάσι Δημοτικό Νοσοκομείο (43-2011), Ερυθρός Σταυρός της Ιαπωνίας Ναγκόγια Daiichi Νοσοκομείο (26 – 2.013), Kasugai Δημοτικό Νοσοκομείο (157-2013), Chutoen Γενικό Ιατρικό Κέντρο, Τσίτα City Hospital και Handa City Hospital, και ο διευθυντής του νοσοκομείου της Anjo Kosei νοσοκομείου μας έδωσε εγκρίσεις τους να χρησιμοποιούν τις εκτομή δείγματα (Δεν υπάρχει συγκεκριμένο αριθμό στα τελευταία τέσσερα νοσοκομεία), υπό την αυστηρή προϋπόθεση της προστασίας της ιδιωτικής ζωής σε σχέση με τις προσωπικές πληροφορίες των ασθενών.

Οι χειρουργικές επεμβάσεις ήταν μερική εκτομή του λεπτού εντέρου (31 περιπτώσεις), pancreaticoduodenectomy (8), υποσύνολο του στομάχου-διατήρηση pancreaticoduodenectomy (7), pylorus- διατηρώντας pancreaticoduodenectomy (4), ileocecal εκτομή (6), δεξιά ημικολεκτομή (3), και εκτομή όγκου (1). Pancreaticoduodenectomies σε 19 περιπτώσεις έγιναν για να εγγυηθεί μια ασφαλή χειρουργική περιθώριο και επαρκής ανατομή λεμφαδένα επειδή οι όγκοι στο δωδεκαδάκτυλο βρίσκονταν κοντά λήκυθο του Vater. Επιβεβαιώσαμε ότι όλα εκτομή δείγματα ήταν λεπτού εντέρου καρκινώματα χρησιμοποιώντας μακροσκοπικών και μικροσκοπικών παθολογικών ευρημάτων. Λεμφαδένων διεξήχθη σε 55 περιπτώσεις, δεν πραγματοποιείται σε 3 περιπτώσεις, και αυτή η πληροφορία ήταν άγνωστη σε 2 περιπτώσεις. Σαράντα έξι περιπτώσεις υποβλήθηκαν σε θεραπευτική εκτομή, 11 περιπτώσεις έλαβε μη θεραπευτική εκτομή λόγω των μακρινών μεταστάσεων που βρέθηκαν στην επιχείρηση, καθώς και οι λεπτομέρειες ήταν άγνωστες για 3 περιπτώσεις. Μεταξύ των 60 ασθενών, 23 πέθαναν από πρωτοπαθή νόσο και ένας πέθανε από metachronous πρωτογενούς προχωρημένο γαστρικό καρκίνο με καρκινωματώδη περιτονίτιδα. Η συνολική επιβίωση αναλύθηκε σε 58 ασθενείς, αλλά ήταν άγνωστο σε δύο ασθενείς.

Ανοσοϊστοχημεία

Όλα τα δείγματα μονιμοποιήθηκαν σε φορμαλίνη, εγκλείστηκαν σε παραφίνη και κόπηκαν σε 4-μm πάχους τομές για IHC, σε Εκτός από αιματοξυλίνη και ηωσίνη χρώση (ΗΕ). MUC1 ανιχνεύθηκε με μονοκλωνικό αντίσωμα (mAb) DF3 (IgG ποντικού, Toray-Fuji Bionics, Τόκιο, Ιαπωνία), MUC2 από MAb Ccp58 (Novocastra), MUC3 από MAb mMUC3-1 (που παράγεται από Κ Rousseau και DM Swallow), MUC4 με MAb 8G7 (που παράγεται από SK Batra), MUC5AC από MAb CLH2 (Novocastra), MUC6 από MAb CLH5 (Novocastra), και MUC 16 από MAb OC125 (Acris Αντισώματα GmbH). IHC πραγματοποιήθηκε με τη μέθοδο ανοσοϋπεροξειδάσης, ως ακολούθως. Το αντιγόνο ανάκτηση πραγματοποιήθηκε χρησιμοποιώντας ρυθμιστικό ανάκτηση αντιγόνου CC1 (ρΗ 8,5, EDTA 100 ° C 30 min, Ventana Medical Systems, Tucson, ΑΖ, USA). Οι τομές επωάστηκαν με ένα πρωτογενές αντίσωμα (DF3 αραιωμένο 1:50, 37 ° C, 32 min? Ccp58 αραιωμένο 1:200, 37 ° C, 24 min? 8G7 αραιωμένο 1:3000, 37 ° C, 32 min? CLH2 αραιωμένο 1:100, 37 ° C, 24 min? CLH5 αραιωμένο 1:100, 37 ° C, 24 min? OC125 αραιωμένο 1: 100, 37 ° C, 24 min) σε φωσφορικό ρυθμιστικό αλατούχο διάλυμα ρΗ 7,4 (PBS) με 1% αλβουμίνη βόειου ορού και χρωματίζονται σε ένα Benchmark XT αυτοματοποιημένη συσκευή κηλιδώσεως slide χρησιμοποιώντας ένα κιτ ανίχνευσης διαμινοβενζιδίνη (DAB ultraView, Ventana Medical Systems).

για τη χρώση MUC3, οι τομές υποβλήθηκαν σε επεξεργασία στους 100 ° C για 10 λεπτά σε 0,01 Μ κιτρικό ρυθμιστικό διάλυμα σε ρΗ 6,0 και στη συνέχεια αναγωγή με 0.01 Μ διθειοθρεϊτόλης σε ρυθμιστικό διάλυμα 0,1 Μ Tris /HCl (ρΗ 8.0) για 30 λεπτά σε θερμοκρασία δωματίου και αλκυλιώθηκε με 0,025 Μ ιωδοακεταμίδιο σε 0.1 Μ ρυθμιστικού Tris /HCl (ρΗ 8.0) για 30 λεπτά [ ,,,0],10], [15]. Αυτά στη συνέχεια επωάστηκαν με mMUC3-1 στους 4 ° C για 16 ώρες και χρωματίστηκαν με τη μέθοδο συμπλόκου αβιδίνης-βιοτίνης. Τα προϊόντα της αντίδρασης δεν ήταν παρόντες όταν το μέσο καλλιέργειας υβριδώματος, φυσιολογικό ορό ποντικού, ή PBS αντί των πρωτογενών αντισωμάτων.

Η βαθμολόγηση των αποτελεσμάτων χρώσης

Τρεις τυφλή ερευνητές (SHMH και SY) αξιολογούνται τα δεδομένα κηλίδωσης ανεξάρτητα. Όταν η αξιολόγηση διέφερε μεταξύ των τριών, η τελική απόφαση ελήφθη με συναίνεση. Τα αποτελέσματα αξιολογήθηκαν με βάση το ποσοστό των θετικώς χρωματισμένων κυττάρων καρκινώματος. Αξιολογήσαμε χρώση του κυτταροπλάσματος και της κυτταρικής μεμβράνης, και τα κύτταρα καρκινώματος θεωρήθηκαν ότι είναι θετικά όταν τουλάχιστον ένα από αυτά τα συστατικά ήταν θετική. Ένας όγκος θεωρήθηκε θετική εάν βάφτηκαν περισσότερο από το 5% των κυττάρων καρκινώματος, σύμφωνα με προηγούμενες μελέτες μας με τη χρήση 5% ως αποκοπή για βλεννίνης έκφραση [16] – [21].

Στατιστική ανάλυση

Η επικράτηση της έκφρασης του κάθε βλεννίνης συγκρίθηκε μεταξύ αλλοιώσεων του καρκίνου και φυσιολογικό επιθήλιο χρησιμοποιώντας ένα τεστ chi-square. Συσχετίσεις μεταξύ βλεννίνη προφίλ έκφρασης και κλινικοπαθολογική παράγοντες εξετάστηκαν επίσης με το τεστ chi-square. Για την ανάλυση επιβίωσης, μια δοκιμασία log-rank χρησιμοποιήθηκε για να επιλέξετε βλεννών που σχετίζονταν σημαντικά με την πρόγνωση. Μια ανάλυση αναλογικών κινδύνων κατά Cox χρησιμοποιήθηκε για τον υπολογισμό δεικτών κινδύνου (HR) και τα αντίστοιχα διαστήματα εμπιστοσύνης 95% (ΠΙ) στην προσαρμογή για τις επιπτώσεις των άλλων κλινικοπαθολογική παράγοντες. Όλες οι αναφερόμενες τιμές ρ είναι δύο όψεων και η P & lt?. 0.05 θεωρήθηκε ως σημαντική

Αποτελέσματα

προφίλ έκφρασης των αντιγόνων βλεννίνης

Στο φυσιολογικό επιθήλιο του λεπτού εντέρου , καμία από τις 60 περιπτώσεις έδειξε έκφραση της MUC 1 (0%, 0/60) ή MUC 16 (0%, 0/60), αλλά μερικοί εξέφρασαν MUC2 (58,3%, 35/60), MUC3 (73,3%, 44/60 ), MUC4 (51,7%, 31/60), MUC5AC (15%, 9/60) και MUC6 (11,7%, 7/60) (Σχήμα 1, Πίνακας S1). MUC6 επίσης εκφράζεται σε δωδεκαδακτύλου Brunner αδένες στις περισσότερες περιπτώσεις. MUC2, MUC3 και MUC4 έδειξαν υψηλότερη έκφραση σε ειλεό (p = 0,035), νήστιδα (p = 0,011), και τον ειλεό (p = 0,002), αντιστοίχως, σε σύγκριση με άλλες περιοχές (Σχήμα 1, Πίνακας S1).

MUC1, MUC5AC και MUC 16 έδειξαν αυξημένη έκφραση? MUC4 και MUC6 έδειξε ίση έκφραση? και MUC2 και MUC3 έδειξαν μειωμένη έκφραση σε SBC σύγκριση με το φυσιολογικό επιθήλιο

Η

Τα ποσοστά έκφρασης σε βλάβες του καρκίνου (πάνω από το 5% των κυττάρων καρκινώματος βάφονται) ήσαν MUC1, 51,7% (31/60).? MUC2, 26,7% (16/60)? MUC3, 55% (33/60)? MUC4, 51,7% (31/60)? MUC5AC, 33,3% (20/60)? MUC6, 10% (6/60) και MUC 16, 8,3% (5/60) (Σχήμα 1).

Αλλαγές MUC έκφρασης από το φυσιολογικό επιθήλιο με καρκινώματα

Σε σύγκριση με το φυσιολογικό επιθήλιο , MUC1 (ρ & lt? 0.001), MUC5AC (p = 0.019) και MUC 16 (ρ = 0,022) έκφραση ήταν σημαντικά αυξημένη σε SBC? έκφραση MUC4 και MUC6 έδειξε ίση έκφραση? και MUC2 (ρ & lt? 0.001) και MUC3 (p = 0.036) έκφραση ήταν σημαντικά μειωμένη σε SBC

Αντιπροσωπευτικά σχήματα έκφρασης βλεννίνης στα φυσιολογικό επιθήλιο και τον καρκίνο ιστούς δείχνεται στο Σχήμα 2. Μεταξύ βλεννίνες με αυξημένη έκφραση in. SBC, MUC1 (Σχήματα 2Α και 2Β) έδειξε κορυφής και κυτταροπλασματική έκφραση σε κύτταρα καρκινώματος αλλά όχι σε φυσιολογικό επιθήλιο? MUC5AC (Σχήματα 2C και 2D) έδειξαν κυτταροπλασματική έκφραση σε κύτταρα καρκινώματος αλλά όχι σε φυσιολογικό επιθήλιο? και MUC 16 (Σχήματα 2Ε και 2F) έδειξε κορυφαία έκφραση σε κύτταρα καρκινώματος αλλά όχι σε φυσιολογικό επιθήλιο. Για βλεννίνες με την ίδια έκφραση στο SBC και φυσιολογικό ιστό, MUC4 (Σχήματα 2G και 2Η) και MUC6 (σχήματα 2Θ και 2J) και οι δύο έδειξαν κυτταροπλασματική έκφραση στα κύτταρα καρκινώματος και φυσιολογικό επιθήλιο (ένθετα). Μεταξύ βλεννίνες με μειωμένη έκφραση σε SBC, MUC2 (Σχήματα 2Κ και 2L) έδειξε υπερπυρηνική έκφραση σε φυσιολογικό επιθήλιο, αλλά όχι σε κύτταρα καρκινώματος? και MUC3 (Σχήματα 2Μ και 2Ν) έδειξε ακραίο έκφραση σε φυσιολογικό επιθήλιο, αλλά όχι σε κύτταρα καρκινώματος.

βλεννίνες με αυξημένη έκφραση σε SBC, MUC1 έδειξε κορυφής και κυτταροπλασματική έκφραση σε καρκινικά κύτταρα, αλλά όχι στο φυσιολογικό επιθήλιο (Α και Β)? MUC5AC έδειξε κυτταροπλασματική έκφραση σε καρκινικά κύτταρα, αλλά όχι στο φυσιολογικό επιθήλιο (C και D)? και MUC 16 έδειξε ακραίο έκφραση σε καρκινικά κύτταρα, αλλά όχι στο φυσιολογικό επιθήλιο (Ε και F). Σε βλεννίνες με ίση έκφραση σε SBC, MUC4 έδειξε κυτταροπλασματική έκφραση σε φυσιολογικό επιθήλιο και καρκινικών κυττάρων (G και Η)? και MUC6 έδειξε κυτταροπλασματική έκφραση σε φυσιολογικό επιθήλιο (ένθετα) και καρκινικά κύτταρα (Ι και J). Σε βλεννίνες με μειωμένη έκφραση σε SBCs, MUC2 έδειξε κυτταροπλασματική έκφραση σε φυσιολογικό επιθήλιο, αλλά όχι σε καρκινικά κύτταρα (Κ και L)? και MUC3 έδειξε ακραίο έκφραση σε φυσιολογικό επιθήλιο, αλλά όχι σε καρκινικά κύτταρα (Μ και Ν).

Η

Σχέσεις μεταξύ MUC έκφραση σε καρκινικά κύτταρα και κλινικοπαθολογική χαρακτηριστικά

Οι σχέσεις μεταξύ βλεννίνης έκφρασης και οι κλινικοπαθολογικοί χαρακτηριστικά συνοψίζονται στον πίνακα S2. έκφραση MUC1 είχε σχέση με τη θέση του όγκου (υψηλή για στοματική πλευρά, p = 0,019), το βάθος εισβολή (υψηλότερη για βαθύτερη από ό, τι PSS (ρΤ3), p = 0,017), φλεβική εισβολή (υψηλό για θετική φλεβική εισβολή, p = 0.038), και ικανότητα σκλήρυνσης (υψηλή για μη θεραπευτική εκτομή, p = 0,007). έκφραση MUC2 σχετιζόταν με την τοποθεσία του όγκου (υψηλή για πρωκτική πλευρά, p = 0,034), αρνητικά λεμφική εισβολή (p = 0,041) και ιστολογικό τύπο (υψηλή για βλεννώδες καρκίνωμα, ρ = 0,005). MUC4 έκφραση σχετίζονται με την τοποθεσία του όγκου (υψηλή για πρωκτική πλευρά, ρ = 0.012). έκφραση MUC5AC ήταν οριακά σχετίζονται με την τοποθεσία του όγκου (ρ = 0,063) και λεμφαδένα μετάσταση (p = 0.059). MUC6 έκφραση σχετιζόταν με λεμφαδένα μετάσταση (υψηλή για τη θετική λεμφαδένα μετάσταση, p = 0,021). έκφραση MUC 16 σχετιζόταν με φλεβική εισβολή (υψηλό για θετική φλεβική εισβολή, p = 0,016) και ικανότητα σκλήρυνσης (υψηλό για μη θεραπευτική εκτομή, p = 0,016).

Σχέσεις της κλινικοπαθολογοανατομικών παράγοντες ή βλεννίνης έκφρασης με περίοδο επιβίωσης

Πληροφορίες για την επιβίωση ανακτήθηκε για 58 περιπτώσεις. Το συνολικό ποσοστό επιβίωσης 5 ετών και η διάμεση περίοδος επιβίωσης ήταν 49,7% και 1,9 ετών (95% CI: 01.03 – 03.03), αντιστοίχως (τα δεδομένα δεν παρουσιάζονται). Μια δοκιμασία log-rank έδειξε ότι ιστολογικό τύπο (ανεπαρκώς διαφοροποιημένο ή νευροενδοκρινών) (ρ & lt? 0.001), θετικός λέμφο μετάσταση στους λεμφαδένες (ρ & lt? 0.001), θετικός λεμφική εισβολή (p = 0,026), θετικός φλεβική εισβολή (ρ & lt? 0.001), και μη-θεραπευτική εκτομή (ρ & lt? 0.001) ήταν σημαντικά σχετιζόμενη με φτωχότερη πρόγνωση (Πίνακας S3). Η έκφραση των MUC 1 (p = 0,042), MUC5AC (p = 0,007) και MUC 16 (ρ & lt? 0.001) ήταν επίσης σημαντικά σχετίζεται με φτωχότερη πρόγνωση (Σχήμα 3, Πίνακας S3). Δεν υπήρχε συσχέτιση μεταξύ της έκφρασης των άλλων βλεννίνες (MUC2, MUC3, MUC4, και MUC6) και την επιβίωση.

Η έκφραση της MUC 1 (Α), MUC5AC (Β) και MUC 16 (C) ήταν φτωχότερες από εκείνες του ασθενείς χωρίς έκφραση της MUC 1 (p = 0,042), MUC5AC (p = 0,007) και MUC 16 (ρ & lt? 0.001), αντίστοιχα. δεδομένα επιβίωσης υπολογίστηκαν χρησιμοποιώντας τη μέθοδο Kaplan-Meier.

Η ανάλυση

Η πολυπαραγοντική των προγνωστικών παραγόντων

Η παραπάνω ανάλυση εντοπίστηκαν MUC1, MUC5AC και MUC 16 ως υποψήφιος προγνωστικούς παράγοντες στο SBC, εκτός από την πέντε κλινικοπαθολογικοί παράγοντες: ιστολογικός τύπος, λεμφικό μετάσταση στους λεμφαδένες, το λεμφικό εισβολή, φλεβική εισβολή και θεραπευτική εκτομή. Δεδομένου ότι το μέγεθος του δείγματος (n = 58) ήταν πολύ μικρή για να εκτιμηθεί ο κίνδυνος της επικινδυνότητας τη χρήση αυτών των παραγόντων κλινικοπαθολογική ως συμπαράγοντες στο ίδιο μοντέλο και συγγραμμικότητας μεταξύ αυτών των πέντε παράγοντες είναι πιθανό, ικανότητα σκλήρυνσης επιλέχθηκε ως συμμεταβλητή (Πίνακας 1). περιπτώσεις SBC με MUC5AC ή έκφραση MUC 16 έδειξε σημαντικά χειρότερη πρόγνωση. MUC 16 είχε το υψηλότερο HR (HR: 10, 95% CI: 2,8 έως 39)., Αλλά υπήρχαν μόνο πέντε MUC 16-θετικών κρουσμάτων

Η

Από MUC1, MUC5AC και MUC 16 έδειξαν αυξημένη έκφραση στο SBC βλάβες και σχετίζονταν με μια χειρότερη πρόγνωση, εξετάστηκε επίσης η επίδραση αυτών των βλεννινών σε συνδυασμό. περιπτώσεις SBC με MUC5AC ή /και την έκφραση MUC 16 είχαν σημαντικά χειρότερη πρόγνωση (HR: 3,6, 95% CI: 01.05 – 08.08) (Πίνακας 1). Η συσχέτιση αυτή παρέμεινε μετά την προσαρμογή για την επίδραση της φλεβικής εισβολής (HR: 4,5, 95% CI: 1,8 – 11), αλλά υποχώρησαν μετά την προσαρμογή για λεμφαδένα μετάσταση (HR: 2,4, 95% CI: 0,9 έως 6,2) (τα δεδομένα δεν εμφανίζονται ).

Για κλινικές εφαρμογές, περαιτέρω αναλύσεις διεξήχθησαν σε μια υποομάδα των 45 ασθενών που έλαβαν θεραπεία με θεραπευτική εκτομή. Μια υπόθεση χωρίς δεδομένα έκβαση αποκλείστηκε από το σύνολο των 46 ασθενών που έλαβαν θεραπεία με θεραπευτική εκτομή (Πίνακας S2). Στις 45 περιπτώσεις, MUC5AC ή /και την έκφραση MUC 16 ήταν ένα σημαντικό ανεξάρτητο παράγοντα κινδύνου υψηλής επικινδυνότητας μετά την προσαρμογή για την επίδραση της φλεβικής εισβολή ως συμμεταβλητή (Υπόδειγμα 1 στον Πίνακα 2, HR: 5,6, 95% CI: 1,8 – 17), αλλά όχι για την επίδραση της μετάστασης λεμφαδένα ως συμμεταβλητή (Model 2 στον πίνακα 2, HR: 2,7, 95% CI: 0,9 – 8,8) (Πίνακας 2). Εξετάστηκαν επίσης τα προφίλ έκφρασης των MUC2 και MUC3, δεδομένου ότι αυτές οι βλεννίνες είχαν μειωμένη έκφραση σε βλάβες του καρκίνου. Δεν υπήρξε καμία σημαντική αλλαγή στον κίνδυνο κίνδυνο με την έκφραση MUC2 ή MUC3, αν και δεν υπήρχαν θάνατοι σε MUC5AC-αρνητικό, MUC 16-αρνητικά και MUC3-θετικές περιπτώσεις (Πίνακας 2).

Η

Συζήτηση

υπήρξαν δύο προηγούμενες αναλύσεις της έκφρασης βλεννίνης στους ιστούς SBC σε 30 περιπτώσεις από Zang et al. [13] και σε 23 περιπτώσεις από τους Lee et al. [14] Στην παρούσα μελέτη 60 περιπτώσεων, βρήκαμε ότι η αυξημένη έκφραση των MUC1, MUC5AC και MUC 16 σε SBCs σχετιζόταν με κακή προγνωστικούς παράγοντες όπως η εμβάθυνση της εισβολής, φλεβική εισβολή, μετάσταση στους λεμφαδένες, και περιπτώσεις κατά τις οποίες μόνο μη θεραπευτική εκτομή ήταν δυνατό. Για βλεννίνες με ίση έκφραση σε SBC αλλοιώσεων και φυσιολογικό ιστό, η έκφραση MUC4 δεν σχετιζόταν με οποιαδήποτε προγνωστικούς παράγοντες, αλλά MUC6 σχετιζόταν με μετάσταση λεμφαδένα. Μεταξύ βλεννίνες με μειωμένη έκφραση στο SBC, η έκφραση MUC2 σχετιζόταν με αρνητικές λεμφική εισβολή (ευνοϊκή προγνωστικός παράγοντας), ενώ MUC3 δεν είχε σχέση με οποιαδήποτε κλινικοπαθολογική παράγοντες.

Ανάλυση της έκφρασης βλεννίνης σε 58 ασθενείς με πληροφορίες για την επιβίωση έδειξε ότι η αυξημένη έκφραση του MUC 1, MUC 16 και MUC5AC σε SBC σημαντικά σχετίζεται με μια χειρότερη πρόγνωση. Ως εκ τούτου, MUC1, MUC5AC και MUC 16 ταυτοποιήθηκαν ως υποψήφια προγνωστικούς παράγοντες και υποβλήθηκαν σε ανάλυση πολυμεταβλητή επιβίωση. MUC1 υπερεκφράζεται και παρεκκλίνοντα γλυκοζυλιωμένη στους περισσότερους καρκίνους, και ανύψωση του επιπέδου MUC 1 παίζει σημαντικό ρόλο στην εισβολή και μετάσταση όγκων [7], [9]. Μια δοκιμασία log-rank στους 58 ασθενείς έδειξε ότι η MUC1 έκφραση που σχετίζονται με κακή επιβίωση. Ωστόσο, στην πολυπαραγοντική ανάλυση, MUC1 δεν είχε σχέση με την πρόγνωση. Έτσι, σε σύγκριση με πολλές άλλες ανθρώπινες νεοπλάσματα [7], [9], η έκφραση MUC1 φαίνεται να είναι μικρή σημασία στο SBC. Σε αντίθεση με MUC1, πολυπαραγοντική ανάλυση έδειξε ότι MUC5AC ή έκφραση MUC 16 ήταν σημαντικά σχετίζεται με χειρότερη πρόγνωση σε SBC. Αυτή η σχέση δεν έχει εξεταστεί προηγουμένως. έκφραση MUC5AC ή MUC 16 ήταν σημαντικά σχετίζονται με κακή επιβίωση σε ασθενείς με SBC, και σε 45 ασθενείς που υποβλήθηκαν σε θεραπευτική εκτομή, περιπτώσεις με MUC5AC ή /και την έκφραση MUC 16 είχαν σημαντικά υψηλότερο παράγοντα κινδύνου κινδύνου.

Η υπερέκφραση της MUC5AC έχει έχουν συσχετιστεί με φτωχή πρόγνωση του καρκίνου του πνεύμονα, χολαγγειοκαρκίνωμα και τον καρκίνο του παγκρέατος [22] – [24]. Ωστόσο, μέχρι σήμερα ο μοριακός μηχανισμός της λειτουργίας του εξακολουθεί να είναι ασαφής. Οι knockdown μελέτες αποκάλυψαν ότι MUC5AC υπερέκφραση σε καρκινικά κύτταρα σχετίζεται με αυξημένη ανάπτυξη, προσκόλληση, εισβολή των καρκινικών κυττάρων και την αύξηση μεταστατικών τάση [25] – [27]. Περαιτέρω, συνδέεται με χαμηλότερα διήθηση των κυττάρων Β και ουδετερόφιλα στο μεταστατικές θέσεις [26]. Και, Inaguma et al., Παρατήρησαν ότι GLI1-απορυθμίζεται MUC5AC διευκολύνει τη μετανάστευση και την εισβολή των καρκινικών κυττάρων του παγκρέατος μέσω της εξασθένησης της Ε-καδερίνης μεσολάβηση διακυτταρικής προσφύσεως [28]. Έτσι, με την καταστολή της ανοσολογικής διείσδυση και την ενίσχυση της πρόσφυσης και της εισβολής των κυττάρων του όγκου, MUC5AC θα μπορούσε να εμπλέκεται σε κακή πρόγνωση των ασθενών με SBC.

MUC 16 είναι επίσης υπερεκφράζεται σε πολλούς κακοήθειες, συμπεριλαμβανομένων των καρκίνων των ωοθηκών, του παγκρέατος και του μαστού [29 ] – [31] και η υπερέκφραση του σχετίζεται με κακή πρόγνωση. MUC 16 είναι επίσης γνωστή ως πιθανή βιοδείκτη για το επόμενο καρκίνο των ωοθηκών μετά από διάφορες θεραπείες. Lakshmanan et al. έχουν καθιερώσει πρόσφατα ο λειτουργικός ρόλος του MUC 16 στον πολλαπλασιασμό κυττάρων καρκίνου του μαστού [31]. Haridas et al. απέδειξαν επίσης ότι η αυξημένη έκφραση του MUC 16 στην πρόοδο του καρκίνου του παγκρέατος [30]. Παρομοίως, στην παρούσα μελέτη έχουμε παρατηρήσει υπερέκφραση του MUC 16 σε 5 από 60 ιστών SBC (8,3%) σε σύγκριση με την κανονική λεπτό έντερο (0%). Ο αριθμός των MUC 16 θετικές περιπτώσεις είναι μικρό, αλλά η έκφραση MUC 16 ήταν σημαντικά σχετίζεται με κακή πρόγνωση των ασθενών με SBC.

MUC4 και MUC6 έδειξε ίση έκφραση στο SBC και φυσιολογικό ιστό. MUC4 έκφραση είναι κακό προγνωστικό παράγοντα σε διάφορα ανθρώπινα νεοπλάσματα [7], [9], αλλά βρήκαμε καμία συσχέτιση μεταξύ της έκφρασης των MUC4 και την επιβίωση σε ασθενείς με SBC. Έτσι, σε σύγκριση με τα νεοπλάσματα άλλων οργάνων, η έκφραση MUC4 έχει μικρή σημασία στην SBCs, παρόμοια με MUC1. MUC6 είναι ένας χρήσιμος δείκτης για την ταξινόμηση των pancreatobiliary νεοπλασμάτων [32], [33]. Σε SBCs, όμως, η έκφραση MUC6 δεν είχε καμία επίδραση στην επιβίωση, παρά το γεγονός ότι είχε σχέση με μετάσταση στους λεμφαδένες.

προφίλ έκφρασης των MUC2 και MUC3 θεωρήθηκαν επίσης, δεδομένου ότι αυτές οι βλεννίνες έδειξε μειωμένη έκφραση στο SBC. προηγούμενες μελέτες μας έδειξαν ότι η έκφραση MUC2 σχετίζεται με καλή πρόγνωση σε νεοπλάσματα του παγκρέατος, του χοληδόχου πόρου και του στομάχου [7], [9]. MUC3 έκφραση σχετίζεται με κακή πρόγνωση σε γαστρικό καρκίνο [34]? Ωστόσο, λίγα είναι σήμερα γνωστά για το λειτουργικό ρόλο της MUC3 στην παθολογία καρκίνου του [7]. Στην παρούσα μελέτη, δεν υπήρξε καμία σημαντική αλλαγή στην κίνδυνοι κινδύνου με την έκφραση MUC2 ή MUC3. Είναι σημαντικό να σημειωθεί ότι δεν υπήρξαν θάνατοι σε ασθενείς SBC με MUC5AC-αρνητικό, MUC 16-αρνητικών και θετικών MUC3 προφίλ έκφρασης.

Εν κατακλείδι, τα αποτελέσματα αυτής της μελέτης δείχνουν ότι ένα MUC5AC-θετικών και /ή MUC 16-θετικά βλεννίνη πρότυπο έκφρασης είναι ένας χρήσιμος δείκτης για την πρόβλεψη κακή έκβαση σε ασθενείς με SBC. Αυτό το πρότυπο διαφέρει από τα μοτίβα έκφρασης που περιλαμβάνουν MUC1, MUC2 ή MUC4 που σχετίζονται με κακή πρόγνωση σε νεοπλάσματα άλλων οργάνων.

Υποστήριξη Πληροφορίες

Πίνακα S1.

MUC έκφραση στο φυσιολογικό επιθήλιο

doi:. 10.1371 /journal.pone.0086111.s001

(XLS)

Πίνακας S2.

Σχέση της έκφρασης των MUC1, MUC2, MUC3, MUC4, MUC5AC, MUC6 και MUC 16 και κλινικοπαθολογοανατομικές χαρακτηριστικά του μικροκυτταρικού καρκίνου του εντέρου (n = 60)

doi:. 10.1371 /journal.pone.0086111.s002

(XLS)

πίνακα S3.

επιβίωση σε ασθενείς με μικροκυτταρικό καρκίνο του εντέρου με τη δοκιμασία log-rank (n = 58)

doi:. 10.1371 /journal.pone.0086111.s003

(XLS)

Ευχαριστίες

Οι συγγραφείς ευχαριστήσω τον Δρ Ντάλας Μ Swallow και ο Δρ Suzanne Crawley (Galton Laboratory, University College London, Λονδίνο, Ηνωμένο Βασίλειο) για την παροχή αντι-MUC3 αντισώματος και για την πολύτιμη συζητήσεις. Μπορούμε επίσης να ευχαριστήσω τον κ Γ Atsuchi, κα C. Μπάμπα, ο κ Σ Matuo, κα Γ Nishimura και η κα Σ Yoshimura για τεχνική βοήθεια τους, και η κα Γ Tokura για τη βοήθειά της με την ηθική της η μελέτη στο διοικητικό συμβούλιο θεσμική αναθεώρηση.