Αφηρημένο

Η κόπωση και η διάρροια είναι οι πιο συχνές ανεπιθύμητες ενέργειες της πυέλου ακτινοθεραπεία, ενώ αιτιολογίες τους είναι σε μεγάλο βαθμό άγνωστη . Ο σκοπός της παρούσας μελέτης είναι η διερεύνηση των συσχετίσεων μεταξύ κόπωσης, διάρροια και αλλοιώσεις στο έντερο μικροχλωρίδα που προκαλείται από πυελική ακτινοθεραπεία. Κατά τη διάρκεια της θεραπείας 5 εβδομάδων πυελική ακτινοθεραπεία σε 11 ασθενείς με καρκίνο, η γενική βαθμολογία κόπωσης αυξήθηκε σημαντικά και ήταν πιο εμφανή στους ασθενείς με διάρροια. Το σκορ κόπωση συσχετίζεται στενά με τη μείωση της κιτρουλλίνης ορού (ένας δείκτης της λειτουργικής μάζας εντεροκύτταρο) και τις αυξήσεις των συστημικών φλεγμονωδών πρωτεϊνών, συμπεριλαμβανομένων απτοσφαιρίνης, orosomuoid, α

1-αντιθρυψίνης και ΤΝΡ-α. Ορός επίπεδο του λιποπολυσακχαρίτη (LPS) επίσης αυξημένα, ιδιαίτερα σε ασθενείς με διάρροια υποδεικνύοντας επιθηλιακού φραγμού παραβίασης και ενδοτοξαιμία. Pyrosequencing ανάλυση του γονιδίου 16S rRNA αποκάλυψε ότι η μικροβιακή πολυμορφία, τον πλούτο, και το

Firmicutes /Bacteroidetes

αναλογία ήταν σημαντικά αλλοιωθεί πριν από την ακτινοθεραπεία σε ασθενείς οι οποίοι αργότερα ανέπτυξαν διάρροια. Πυελική ραδιοθεραπεία επάγεται περαιτέρω αλλαγές στη κοπράνων μικροβιακή οικολογία, μερικά από τα οποία ήταν ειδικά για τους ασθενείς με ή χωρίς διάρροια. Τα αποτελέσματά μας δείχνουν ότι εντέρου μικροβιακή dysbiosis πριν την ακτινοθεραπεία μπορεί να αξιοποιηθεί για την πρόβλεψη ανάπτυξης της διάρροιας και να καθοδηγεί τις επιλογές προληπτική θεραπεία. Ακτινοβολία επαγόμενη dysbiosis μπορεί να συνεισφέρει στην πυελική ασθένεια ακτινοβολίας, συμπεριλαμβανομένης της βλεννογονίτιδας, διάρροιας, συστηματικής φλεγμονώδους απόκρισης, και πυελική ραδιοθεραπεία σχετιζόμενη κόπωσης σε ασθενείς με καρκίνο

Παράθεση:. Wang Α, Ling Ζ, Yang Ζ, Kiela PR, Wang Τ, Wang C, et al. (2015) Gut Μικροβιακή Dysbiosis μπορεί να προβλέψει διάρροια και κόπωση σε ασθενείς που υποβάλλονται σε πυέλου Καρκίνος Ακτινοθεραπεία: μια πιλοτική μελέτη. PLoS ONE 10 (5): e0126312. doi: 10.1371 /journal.pone.0126312

Ακαδημαϊκό Επιμέλεια: Σεργκέι Grivennikov, Αντικαρκινικού Κέντρου Fox Chase, Ηνωμένες Πολιτείες |

Ελήφθη: 9 Σεπτεμβρίου, 2014? Αποδεκτές: 31 του Μάρτη 2015? Δημοσιεύθηκε: May 8, 2015

Copyright: © 2015 Wang et al. Αυτό είναι ένα άρθρο ανοικτής πρόσβασης διανέμεται υπό τους όρους της άδειας χρήσης Creative Commons Attribution, το οποίο επιτρέπει απεριόριστη χρήση, τη διανομή και την αναπαραγωγή σε οποιοδήποτε μέσο, ​​με την προϋπόθεση το αρχικό συγγραφέα και την πηγή πιστώνονται

Δεδομένα Διαθεσιμότητα: Όλα τα σχετικά δεδομένα είναι εντός του Υποστηρίζοντας αρχεία πληροφοριών του χαρτιού και

Χρηματοδότηση:. η εργασία αυτή χρηματοδοτήθηκε από το Εθνικό Ίδρυμα Φυσικών Επιστημών της Κίνας επιχορηγήσεων (NSFC) 81172600, 81272101 για να Aiping Wang, NSFC επιχορήγηση 81000831, 81271898 για να Junping Wang, Εθνική ιατρική επιστήμη «Η Δωδέκατη πενταετές σχέδιο» θεμελιώδους έργου της Κίνας BWS11J009 επιχορήγησης Junping Wang, Ανεξάρτητο Κονδυλίων Έρευνας του Εργαστηρίου κράτους κλειδί του τραύματος, εγκαύματος και τραυματισμού SKLZZ201114 συνδυασμένη, SKLZZ201021, SKLZZ201202 να Aiping Wang, τη χορήγηση ΝΙΗ 5R01-DK041274 να Pawel R. Kiela. Οι χρηματοδότες δεν είχε κανένα ρόλο στο σχεδιασμό της μελέτης, τη συλλογή και ανάλυση των δεδομένων, η απόφαση για τη δημοσίευση, ή την προετοιμασία του χειρογράφου

Αντικρουόμενα συμφέροντα:.. Οι συγγραφείς έχουν δηλώσει ότι δεν υπάρχουν ανταγωνιστικά συμφέροντα

Εισαγωγή

πυέλου καρκίνοι είναι από τα πιο συχνά διαγιγνώσκονται καρκίνοι σε όλο τον κόσμο [1], και πυελική ακτινοθεραπεία είναι συχνά ένα αναπόσπαστο μέρος των διεπιστημονικές προσεγγίσεις που χρησιμοποιούνται για τη θεραπεία της πυέλου όγκων [2,3]. Ωστόσο, ανεπιθύμητες ενέργειες μετά από πυελική ακτινοθεραπεία αποτελούν μείζονες επιπλοκές και έχουν συλλογικά ονομαστεί πυελική ασθένεια ακτινοβολίας (PRD) [4]. Η κόπωση είναι ένα διαδεδομένο PRD σύμπτωμα, η οποία επηρεάζει τη σωματική και ψυχοκοινωνική ευεξία των ασθενών, κατά συνέπεια οδηγεί σε ένα σύμπλεγμα άλλα συμπτώματα, όπως πόνο, αϋπνία, άγχος και [5]. εντεροπάθεια ακτινοβολίας (βλεννογονίτιδα), συνοδεύεται συχνά από διάρροια, είναι ένα άλλο σύμπτωμα PRD [6], η οποία μειώνει περαιτέρω την ποιότητα της ζωής [7]. Επιπλέον, η κούραση και η εντεροπάθεια μπορεί να αντιπροσωπεύει αλληλοεξαρτώμενα συμπτώματα όπως προτείνεται από την προοπτική μελέτη από Jakobsson et al. [8] με τις γυναίκες που υποβάλλονται σε πυελική ακτινοθεραπεία για πρωκτικό ή της μήτρας.

Σημαντική πρόοδος για τη μείωση της τοξικότητας της θεραπείας με ακτινοβολία έχει γίνει τα τελευταία χρόνια, κυρίως με την αύξηση της ακρίβειας της παράδοσης της δέσμης ακτινοβολίας, καθώς και από φαρμακολογικές παρεμβάσεις [6]. Ωστόσο, ελλιπής κατανόηση της ακριβούς αιτιολογίας και αλληλένδετο μέσα στο πολύπλοκο δίκτυο της πυέλου συμπτώματα της ασθένειας ακτινοβολίας εμποδίζει την ανάπτυξη των βελτιστοποιημένων στρατηγικών πρόληψης [9].

πρόσφατη έκρηξη στις γνώσεις που απορρέουν από τον πολιτισμό-ανεξάρτητη ανάλυση των έντερο microbiota καταδεικνύει σαφώς τον κρίσιμο ρόλο της ισορροπημένης mutualistic αλληλεπιδράσεων μικρόβιο-ξενιστή ως μια ολοκληρωμένη σημείο στην παθογένεση όχι μόνο του τοπικού εντερικού φλεγμονώδη τόνος, αλλά επίσης στη ρύθμιση συστηματικό μεταβολισμό, εξωεντερικές φλεγμονωδών νόσων, καθώς και τη λειτουργία του κεντρικού νευρικό σύστημα [10]. Η μικροχλωρίδα του εντέρου είναι ένα δυναμικό οικοσύστημα και είναι ιδιαίτερα ευαίσθητα στις επιδράσεις του περιβάλλοντος, όπως διατροφικούς παράγοντες ή φλεγμονή. Σε μια μικρή μελέτη, Manichanh et al. [11] έδειξε ότι οι ασθενείς που υπέστησαν οξεία μετά από ακτινοθεραπεία διάρροια είχε μεταβληθεί εντέρου μικροβιακή ποικιλότητα, μια παρατήρηση ανακεφαλαιώνει πρόσφατα σε ποντίκια [12]. Χωρίς μικρόβια ποντίκια ήταν πιο ανθεκτικά στην ακτινοβολία που προκαλείται από εντερίτιδα [13], ενώ η χειραγώγηση της μικροχλωρίδας του εντέρου μέσω της χορήγησης προβιοτικών βελτίωσε τη γαστρεντερική τοξικότητα της ακτινοθεραπείας [14,15]. Αυτά τα δημοσιευμένα στοιχεία, μαζί με την αναδυόμενη συνάφεια του εντέρου μικροχλωρίδας στην παθογένεση της Φλεγμονώδους Εντέρου Diseases (IBD) υποδηλώνει ότι εντέρου μικροβιακή οικολογία μπορεί να αντιπροσωπεύει όχι μόνο ένα πιθανό εργαλείο για την αξιολόγηση του κινδύνου, αλλά και για τη μείωση των συμπτωμάτων της PRD μέσω χειραγώγησης της εντερική χλωρίδα [16].

είναι ενδιαφέρον, φλεγμονώδη αντίδραση που προκαλείται από την απελευθέρωση φλεγμονωδών μεσολαβητών έχει προταθεί να συμβάλει στην ανάπτυξη της κόπωσης [9]. Schubert et al. [17] περιέγραψαν μία σημαντική συσχέτιση μεταξύ κόπωσης και της απελευθέρωσης IL-6. Επιπλέον, η ένταση της κόπωσης συσχετίζεται θετικά με τη σοβαρότητα της διάρροιας [5]. Συλλογικά, τα διαθέσιμα στοιχεία δείχνουν ότι η κόπωση, βλάβη του βλεννογόνου και διάρροια, και dysbiosis είναι πραγματικά ένα συνεχές παρά ένα σύνολο ανεξάρτητων συμπτώματα. Ωστόσο, δεν έχουν ολοκληρωμένη και ενοποιητική μοριακές αναλύσεις πραγματοποιήθηκαν για να διερευνηθεί η οικολογία μικροβίων του εντέρου σε συνδυασμό με την κούραση και διάρροια που προκαλείται από πυελική ακτινοθεραπεία. Σε αυτή τη μελέτη, παρέχουμε την πρώτη απόπειρα να συνδέσει αυτές τις PRD συμπτώματα μέσω μικροβιακών προφίλ 16S rRNA που βασίζεται, και περιγράφουν τις ενώσεις μεταξύ των μικροβίων του εντέρου dysbiosis και την κούραση και διάρροια. πιλοτική μελέτη μας δείχνει επίσης ότι οι προϋπάρχουσες αλλαγές στη μικροβιακή εντερική οικολογία σε ασθενείς με καρκίνο μπορεί μόνο να μην παίζουν αιτιολογικό ρόλο στην ανάπτυξη της εντεροπάθεια μετά την ακτινοβολία, αλλά ότι μπορεί να χρησιμεύσει ως εργαλείο πρόβλεψης, η οποία μπορεί να καθοδηγήσει τις κλινικές προσεγγίσεις για την PRD πρόληψης.

Υλικά και Μέθοδοι

δημογραφικά στοιχεία των ασθενών και δειγματοληψία

Ένα σύνολο των 20 ασθενών, που έχει προγραμματιστεί να λάβει πυελική ακτινοθεραπεία για πρώτη φορά στο Chongqing Zhongshan Νοσοκομείο (Κίνα ), είχαν εγγραφεί για αυτή τη μελέτη. Τα κριτήρια αποκλεισμού περιελάμβαναν προηγούμενη χημειοθεραπεία, ή χορήγηση στεροειδών, ανοσοκατασταλτικά ή /και αντιβιοτικά μέσα σε ένα μήνα πριν από τη συλλογή του δείγματος. Δύο δείγματα κοπράνων διαδοχική συλλέχθηκαν από κάθε ασθενή σε χρονικά σημεία πριν και μόλις μετά την ακτινοθεραπεία. Τρία δείγματα αίματος αποκτήθηκαν από κάθε ασθενή στα χρονικά σημεία: αμέσως πριν, κατά τη 3

RD-εβδομάδων και 5

ου-εβδομάδα της ακτινοθεραπείας, αντίστοιχα. Επιπλέον, 4 φύλο και την ηλικία υγιών εθελοντών είχαν προσληφθεί για να παρέχει δείγματα ως μάρτυρες. Όλα τα δείγματα δειγματίστηκε και φυλάχθηκε στους -80 ° C μέχρι την περαιτέρω χρήση. Η μελέτη αυτή εγκρίθηκε από τις Επιτροπές Δεοντολογίας της Chongqing Zhongshan Νοσοκομείο και Τρίτη Στρατιωτικό Ιατρικό Πανεπιστήμιο, και σύμφωνα με τη Διακήρυξη του Ελσίνκι. Γραπτά έγγραφα ενημερώνεται-συγκατάθεση ελήφθησαν από όλους τους συμμετέχοντες σε αυτή τη μελέτη.

Αξιολόγηση της διάρροιας και της κόπωσης κατά τη διάρκεια της ακτινοθεραπείας

Παράλληλα με τα χρονικά σημεία στα δείγματα ορού, κάθε ασθενής συμπλήρωσαν ένα ερωτηματολόγιο να καθορίσει το βαθμό της διάρροιας που σχετίζεται με την ακτινοθεραπεία. Σύμφωνα με τα Κοινά Κριτήρια Ορολογίας για Ανεπιθύμητες Ενέργειες (CTCAE), η διάρροια ήταν κατατάσσονται σε πέντε κατηγορίες ανάλογα με τη σοβαρότητα της κατάστασης του ασθενούς [18]. Βαθμός 0 σημαίνει καμία διάρροια, βαθμός 1 αναφέρεται σε μια αύξηση του τέσσερα ή λιγότερα κόπρανα ανά ημέρα, βαθμού 2 αναφέρεται σε μια αύξηση τεσσάρων έως έξι κενώσεις ανά ημέρα, και βαθμού 3 αναφέρεται σε μια αύξηση του επτά ή περισσότερες κενώσεις ανά ημέρα. Βαθμός 4 δείχνει απειλητικές για τη ζωή συνέπειες.

Η ένταση της γενικής κόπωσης σε αυτή τη μελέτη αξιολογήθηκε χρησιμοποιώντας την τροποποιημένη Πολυδιάστατο Κόπωση Inventory (MFI-20) υποκλίμακα [19], η οποία αποτελείται από τέσσερις καταστάσεις (αισθάνομαι σε φόρμα, νιώθω κουρασμένος, είμαι ξεκούραστος, και κουράζονται εύκολα), Οι δηλώσεις βαθμολογία κατά μια κλίμακα πέντε σημείων από το «ναι, αυτό είναι αλήθεια» στο «όχι, αυτό δεν είναι αλήθεια», και ανέφερε την πάροδο του χρόνου. Η βαθμολογία κυμαίνεται από 4 έως 20 βασίζεται στις αναφορές των ασθενών της κόπωσης σε πρόσωπο με πρόσωπο συνεντεύξεις, σύμφωνα με την οποία μια υψηλότερη βαθμολογία δείχνει μεγαλύτερη κόπωση.

βιοχημικός δείκτης μέτρησης

Ορός κιτρουλίνη, orosomucoid , απτοσφαιρίνης και α

1-αντιθρυψίνης προσδιορίστηκαν χρησιμοποιώντας κιτ ELISA (USCN Life Science and Technology Co., Ltd, Wuhan, Κίνα). Ορός λιποπολυσακχαρίτη (LPS) μετρήθηκε επίσης χρησιμοποιώντας ένα κιτ ELISA (R &? D System, Inc., Minneaplis, ΜΝ). TNF-α μετρήθηκε χρησιμοποιώντας ένα κιτ microfluidic τσιπ (Millipore, Inc., Billerica, ΜΑ). Οι συντελεστές ενδο- και δια-δοκιμασίας διακύμανσης ήταν & lt? 5% και & lt? 10%, αντίστοιχα. Τα δείγματα ορού αραιώθηκαν κατάλληλα και προσδιορίστηκαν σύμφωνα με τις οδηγίες του κατασκευαστή.

Pyrosequencing και βιοπληροφορική ανάλυση

Τα δείγματα κοπράνων από τους ασθενείς και 4 υγιείς εθελοντές συλλέχθηκαν σε καθορισμένους χρονικά σημεία. Η βακτηριακή γενωμικό DNA εκχυλίζεται από δείγματα κοπράνων με χρήση DNA Mini Kit (QIAGEN, Hilden, Germany) σύμφωνα με τις οδηγίες του κατασκευαστή τροποποιημένο [20]. Καθολική βακτηριακή εκκινητές, οι οποίες αντιστοιχούν στις θέσεις 341-534 της διατηρημένης

Escherichia coli

16S rRNA αλληλουχία του γονιδίου, χρησιμοποιήθηκαν για να ενισχυθεί το γονίδιο υπερμεταβλητή V3-περιοχή 16S rRNA. βιβλιοθήκες αμπλικόνιο PCR δημιουργήθηκε για κάθε επιμέρους δείγμα DNA. Πριν από την ανάλυση αλληλουχίας, κάθε προϊόν PCR καθαρίστηκε με το Gel Extraction Kit (QIAGEN, Hilden, Germany) και ποσοτικά με τη χρήση NanoDrop ND-1000 φασματοφωτόμετρο (Thermo Electron Corporation). Αμπλικονίου Pyrosequencing διεξήχθη με πρότυπο 454 /Roche GS-FLX πρωτόκολλα τιτανίου, όπου συνενώθηκαν ισομοριακές ποσότητες του αμπλικονίου βιβλιοθηκών PCR από κάθε δείγμα. Ένα σύνολο 8-bp barcodes που σχεδιάστηκε από Fierer et al. [21] χρησιμοποιήθηκε για να συγκεντρώσουν και να ταξινομήσετε πολλαπλά δείγματα σε ένα ενιαίο 454 GS-FLX τρέξιμο.

Υψηλής ποιότητας Pyrosequencing διαβάζει ελέγχθηκαν σύμφωνα με barcode- και εκκινητή ακολουθίας φιλτράρισμα όπως περιγράφηκε προηγουμένως [22]. Ακολουθίες ευθυγραμμίστηκαν με SILVA βάση δεδομένων ριβοσωμικού RNA και συγκεντρωμένα σε επιχειρησιακά ταξινομικές μονάδες (Otus) [23]. Η Otus που έφτασε σε επίπεδο ομοιότητας 97% χρησιμοποιήθηκε για την πολυμορφία άλφα (Shannon), ο πλούτος (Chao), την κάλυψη Good, και την ανάλυση καμπύλη αραίωσης με τη χρήση του λογισμικού mothur [24]. αναλύσεις ταξινομίας που βασίζεται έγιναν από την ταξινόμηση σε κάθε ακολουθία χρησιμοποιώντας το πρόγραμμα Naïve Bayesian ταξινομητής του Πανεπιστημίου Κέντρου Michigan State για Μικροβιακή Οικολογία Ριβοσωματιακής βάση δεδομένων βάση δεδομένων του Project (https://rdp.cme.msu.edu) με 50% bootstrap βαθμολογίας [25 ]. Φυλογενετική ποικιλομορφία βήτα μετρήθηκε χρησιμοποιώντας Otus για κάθε δείγμα, χρησιμοποιώντας τη μητέρα του λογισμικού [26].

Η στατιστική ανάλυση

Η στατιστική ανάλυση των δεδομένων μη-αλληλουχίας πραγματοποιήθηκε χρησιμοποιώντας το πακέτο λογισμικού SPSS (SPSS έκδοση 17.0, η IBM, Armonk, NY). Τα αποτελέσματα εκφράζονται ως μέσοι όροι ± τυπική απόκλιση (SD). Η στατιστική ανάλυση έγινε με ANOVA που ακολουθείται από Tukey τεστ post-hoc, σε συνδυασμό ή αταίριαστο

t-test

ή μη-παραμετρική Wilcoxon signed-rank test, ανάλογα με την περίπτωση. Οι συσχετισμοί υπολογίστηκαν με το Pearson και μερική δοκιμές συσχετισμού. Οι τιμές των

P

≤ 0,05 θεωρήθηκαν στατιστικά σημαντικές.

Οι αριθμοί προσχώρησης

Τα δεδομένα ακολουθίας από τη μελέτη αυτή έχει κατατεθεί στο Διαβάστε Αρχείο GenBank Sequence με τον αριθμό SRP035279 προσχώρηση .

Αποτελέσματα

τα χαρακτηριστικά των ασθενών

Είκοσι ασθενείς είχαν προβληθεί κατά τη διάρκεια της ακτινοθεραπείας. Εννέα ασθενείς, οι οποίοι πήραν στεροειδή, ανοσοκατασταλτικά και /ή αντιβιοτικά εντός ενός μηνός από τη συλλογή του δείγματος, ή δεν έχει παράσχει τις απαιτούμενες ερωτηματολόγια, ή /και να παρέχει διαδοχική δείγματα, αποκλείστηκαν από τη μελέτη. 11 ασθενείς συμπεριλήφθηκαν στην τελική ανάλυση, από τους οποίους οκτώ θηλυκά υπέφερε από καρκίνο του τραχήλου της μήτρας, ένα θηλυκό από καρκίνο του πρωκτού και δύο αρσενικά από καρκίνο του παχέος εντέρου. Η μέση ηλικία του ομάδα ήταν 51 έτη (εύρος, 41-64 ετών). Κανένας από αυτούς τους ασθενείς έλαβαν χημειοθεραπεία, και υποβλήθηκε σε πρώτη συμβατική ακτινοθεραπεία τους στη δόση των 1.8-2.0 Ογ /ημέρα, πέντε φορές την εβδομάδα κατά τη διάρκεια της περιόδου 5 εβδομάδων (αθροιστική δόση του 44-50 Gy) (Πίνακας 1).

Παρουσίες της κούρασης και της διάρροιας που προκαλείται από πυελική ακτινοβολία σε ασθενείς

η σύνοψη των ερωτηματολογίων σχετικά με δυσμενείς επιπτώσεις της πυελικής ακτινοθεραπείας αντανακλούσε ένα κοινό σύμπτωμα της κούρασης μεταξύ όλων των θεμάτων. Σύμφωνα με τα κριτήρια της CTCAE βαθμού διάρροια, 6 από τους 11 ασθενείς που υπέστησαν διάρροια με ποικίλης σοβαρότητας που καταγράφονται στις 3

ου και 5

ου εβδομάδα της ακτινοθεραπείας (Πίνακας 1). Πριν από τη θεραπεία, η MFI-20 γενική βαθμολογία της κόπωσης ήταν ίδια σε ασθενείς που έκαναν ή δεν αναπτύσσουν συμπτώματα της διάρροιας μετά από ακτινοθεραπεία (Σχήμα 1). Σε ασθενείς χωρίς διάρροια, η βαθμολογία κόπωση αυξήθηκε ελαφρά μετά την ακτινοθεραπεία, αλλά δεν ήταν στατιστικά σημαντική (Σχήμα 1). Ωστόσο, οι ασθενείς με διάρροια ανέφεραν δραματική αύξηση της βαθμολογίας κόπωση τόσο σε τρίτη και πέμπτη εβδομάδα της ακτινοθεραπείας (

ρ

& lt? 0,01? Σχήμα 1)., Υποδηλώνοντας έτσι ότι η διάρροια συμβάλλει στην κόπωση των ασθενών κατά τη διάρκεια της ακτινοθεραπείας

Κάθε σύμβολο αντιπροσωπεύει ένα δείγμα. Οριζόντιες γραμμές μπαρ αναφέρονται σε μέση τιμή σε κάθε ομάδα. * Υποδεικνύει στατιστικά σημαντικές διαφορές μεταξύ των προ-επεξεργασία χρονικό σημείο και 3

ου ή 5

ης εβδομάδας, αντίστοιχα, σε ασθενείς που ανέπτυξαν διάρροια (p & lt? 0.01, n = 6? Ζεύγη

t

– δοκιμή).

η

Αλλαγές στα επίπεδα των βιοδεικτών του ορού ως απάντηση στην πυελική ακτινοθεραπεία και η συσχέτισή τους με την κούραση και διάρροια

για να εξερευνήσετε την αιτιοπαθογένεια της ακτινοβολίας που προκαλείται από την κούραση και διάρροια, ορό επίπεδα βιοδεικτών που σχετίζονται με την εντερική βλάβη και συστηματική φλεγμονή αναλύθηκαν. κιτρουλίνη Plasma, ένα άκρο του αζώτου προϊόν του μεταβολισμού γλουταμίνης στα εντεροκύτταρα, είναι μια καθιερωμένη δείκτης της λειτουργικής μάζας εντεροκυττάρων [27], και έχει περιγραφεί ως υποκατάστατος δείκτης της προκαλούμενης από ακτινοβολία του λεπτού εντέρου ατροφία του βλεννογόνου [28]. Ορός συγκέντρωση κιτρουλίνη μειώθηκαν σημαντικά κατά τη διάρκεια της ακτινοθεραπείας σε όλους τους ασθενείς, ανεξάρτητα από την επακόλουθη διάρροιας (Σχήμα 2Α). Ωστόσο, ήταν σημαντικά χαμηλότερη σε ασθενείς με διάρροια τόσο τριών και πέντε εβδομάδες από την έναρξη της ακτινοθεραπείας (Σχήμα 2Α). Αυτά τα αποτελέσματα υποδηλώνουν ότι η διάρροια συνδεόταν με μια πιο σημαντική εντερικά επιθηλιακά ατροφία κατά την διάρκεια πυελικής ραδιοθεραπείας. Επιπλέον, παρατηρήσαμε μια σημαντική αρνητική συσχέτιση (

r

= -0,648,

σ

= 0,031?

r

= -0,658,

σ

= 0,028 για 3

ου και 5

ου εβδομάδες αντίστοιχα) μεταξύ των ΝΧΙ-20 γενικής κόπωσης και της συγκέντρωσης κιτρουλίνη στη μετά τη θεραπεία 5 εβδομάδων.

Ορός κιτρουλίνη, απτοσφαιρίνης, orosomucid, και α1-αντιθρυψίνης αναλύθηκαν με ELISA, όπως περιγράφεται στο Υλικά και Μέθοδοι τμήμα. Οι διαφορές εντός των ομάδων αναλύθηκαν με ANOVA που ακολουθείται Tukey τεστ post-hoc. Οι διαφορές στα αντίστοιχα χρονικά σημεία μεταξύ των δύο ομάδων αναλύθηκαν με αναλύθηκαν με αταίριαστο

t-test

, *

σ

& lt? 0,05,

#

σ

& lt ?. 0.01

η

και οι τρεις πρωτεΐνες οξείας φάσης επιλεγεί ως συστημική δείκτες φλεγμονής, απτοσφαιρίνης, orosomucoid και α

1-αντιθρυψίνης, ήταν σημαντικά και ο χρόνος-εξαρτώμενο τρόπο αυξημένα σε όλους τους ασθενείς που λαμβάνουν πυελική ακτινοθεραπεία, φθάνοντας στατιστική σημαντικότητα στο 5

ου χρονικό σημείο την εβδομάδα (p & lt? 0,05? Σχήμα 2Β-2D). Από τις τρεις πρωτεΐνες, μόνο απτοσφαιρίνης έδειξε σημαντική περαιτέρω αύξηση σε ασθενείς που ανέπτυξαν διάρροια κατά τη διάρκεια 3- έως 5- θεραπεία εβδομάδες (Σχήμα 2Β). Στο 5

ης εβδομάδας χρονικό σημείο, γενική κόπωση συσχετίστηκε θετικά με απτοσφαιρίνης (

r

= 0,796,

σ

= 0,003), με ισχυρή μερική συσχέτιση υπό μεταβλητές ελέγχου των orosomucoid και α1-αντιθρυψίνης (

r

= 0.718,

σ

= 0,029). Σημαντικές θετικές συσχετίσεις βρέθηκαν επίσης μεταξύ γενικής κόπωσης και συγκεντρώσεις orosomucoid ορού τόσο του 3

ου και 5

ου χρόνου εβδομάδα σημεία (

r

= 0,612,

p

= 0.045 και

r

= 0.630,

σ

= 0,038, αντίστοιχα). Τα αποτελέσματα αυτά δείχνουν ότι η αύξηση της κόπωσης κατά τη διάρκεια της ακτινοθεραπείας θα μπορούσε να είναι, τουλάχιστον εν μέρει αποδίδονται σε συστηματική φλεγμονή που προκαλείται από πυελική ακτινοβολία.

Ορός TNFα συγκέντρωση έδειξε μια αυξανόμενη τάση σε όλους τους ασθενείς που λαμβάνουν πυελική ακτινοθεραπεία, με τη συγκέντρωση κυτοκίνης σημαντικά υψηλότερο σε ασθενείς με διάρροια, ιδιαίτερα κατά τη διάρκεια της εβδομάδας 3

ου (

σ

& lt? 0,01) (Σχήμα 3Α). Ενώ τα επίπεδα LPS στον ορό δεν επηρεάζονται από ακτινοθεραπεία σε ασθενείς που δεν ανέπτυξαν διάρροια, μια απόδειξη της ενδοτοξιναιμίας τεκμηριώθηκε σε ασθενείς με διάρροια, με την στατιστική διαφορά μεταξύ των δύο ομάδων που επιτεύχθηκε κατά 5

ου εβδομάδα θεραπείας (

p

& lt? 0,05) (Σχ 3Β)

TNF και LPS αναλύθηκαν με ELISA, όπως περιγράφεται στο Υλικά και Μέθοδοι τμήμα.. *

, # υποδεικνύει στατιστικά σημαντικές διαφορές μεταξύ «No διάρροια» και οι ομάδες «διάρροια» στο αντίστοιχο χρονικό σημείο (*

σ

& lt? 0,05,

#

σ

& lt? 0.01, μη παραμετρικό ζεύγη

t-test

, n = 5-6).

Η

Altered εντέρου μικροβιακή οικολογία στις ασθενείς με καρκίνο πριν από την πυελική ακτινοθεραπεία

Συγκρίναμε το προφίλ σκαμνί microbiome μεταξύ των ασθενών και 4 υγιείς εθελοντές. Ένα σύνολο 170.021 αλληλουχιών υψηλής ποιότητας λήφθηκαν σε αυτή τη μελέτη. κάλυψη του αγαθού από κάθε ομάδα ήταν πάνω από 95%, δείχνοντας ότι οι αλληλουχίες 16S rRNA που προσδιορίζονται σε αυτές τις ομάδες που παριστάνονται την πλειοψηφία των βακτηρίων του εντέρου εμφανίζεται στα δείγματα (Πίνακας 2). Ανάλυση της διαφορετικότητας άλφα έδειξαν ότι πριν από την ακτινοθεραπεία, ασθενείς οι οποίοι αργότερα προχώρησαν σε διάρροια είχαν σημαντικά χαμηλότερα κοπράνων μικροβιακή ποικιλότητα όχι μόνο σε σύγκριση με υγιείς μάρτυρες (

ρ

& lt? 0,01), αλλά το πιο σημαντικό, σε σύγκριση με ασθενείς που δεν ανέπτυξαν διάρροια (

σ

& lt? 0,01). Αυτό ήταν ιδιαίτερα έντονη στο δείκτη ποικιλότητας Shannon, η οποία αντιπροσωπεύει τόσο για την αφθονία και την ομοιομορφία των σημερινών ειδών (Σχήμα 4Α). Παρόμοια τάση παρατηρήθηκε για τα είδη Chao1 πλούτο δείκτη, χωρίς όμως να φθάσει στατιστική σημασία (Σχήμα 4Β).

Η

Οι διαφορές στην πολυμορφία της μικροβιακής άλφα μεταξύ υγιών μαρτύρων και ασθενών με καρκίνο πριν την ακτινοθεραπεία που έκαναν ή δεν εμφανίζουν διάρροια υποδεικνύεται από το δείκτη ποικιλότητας του Shannon (Α) και Chao1 είδη πλούτο (Β). (C)

Firmicutes /Bacteroides

αναλογία στις ίδιες ομάδες ασθενών. * Και

# δείχνουν στατιστικά σημαντικές διαφορές σε

σ

& lt?. 0.05 και 0.01, αντίστοιχα (ANOVA που ακολουθήθηκε από Tukey τεστ post-hoc)

Η

Σε ταξινομική ανάλυση, με συνέπεια με άλλες εκθέσεις,

Firmicutes

και

Bacteroidetes

ήταν οι δύο κυρίαρχα φύλα σε όλες τις ομάδες. Είναι ενδιαφέρον, το

Firmicutes /Bacteroidetes

δείκτης αυξήθηκε σημαντικά σε σύγκριση με υγιείς μάρτυρες (Σχήμα 4C), η οποία ήταν μια αντανάκλαση της αυξημένης σχετικής αφθονίας των

Firmicutes

και μείωση σε ποσοστό

Bacteroidetes

συνομοταξία σε ασθενείς με καρκίνο πριν την ακτινοθεραπεία (Σχήμα 5Α). Στο επίπεδο γένους, οι σχετικές αφθονίες των 14 γένη βρέθηκαν σημαντικά διαφορετική μεταξύ των ασθενών υγιών ελέγχου και του καρκίνου πριν από την ακτινοθεραπεία (Σχήμα 5Β). Γένη

Alistipes

,

Bacteroides

,

Barnesiella

,

Oscillibacter

,

Parabacteroides

,

Prevotella

και

Ruminococcus

, οι οποίες αντιπροσωπεύουν πάνω από το 1% του συνόλου των βακτηριδίων, ήταν λιγότερο άφθονα στα ασθενείς με καρκίνο από ό, τι εκείνα των υγιών ατόμων. Γένη

Faecalibacterium

,

Clostridium_XI

,

Roseburia

και

Veillonella

ήταν σχετικά πιο άφθονα στους ασθενείς με καρκίνο. Περιέργως, πριν από την ακτινοθεραπεία, σε σύγκριση με τους ασθενείς που δεν εμφάνισαν διάρροια, όσοι δεν είχαν αυξημένη αφθονία του

Bacteroides

,

Dialister

,

Veillonella

, και μειωμένη αφθονία

Clostridium

XI και XVIII,

Faecalibacterium

,

Oscillibacter

,

Parabacteroides

,

Prevotella

και αταξινόμητη (γένος: άλλοι) ( Σχήμα 5Β).

(Α) σχετική αφθονία των πέντε κύριων βακτηριακή φύλα καθώς και αταξινόμητη «Άλλα», τα οποία περιλαμβάνουν

Chloroflexi

,

Deferribacteres

,

Chlorobi

,

Acidobacteria

,

Deinococcus-Thermus

,

Planctomycetes

,

Lentisphaerae

,

σπειροχαίτες

,

Synergistetes

,

Tenericutes

,

Verrucomicrobia

και

κυανοβακτήρια

. (Β) Επιλεγμένα γένη στατιστικώς διαφορετική μεταξύ ασθενών με καρκίνο πριν την ακτινοθεραπεία και υγιείς μάρτυρες. * Και # δείχνουν σημαντική differenence από υγιείς μάρτυρες (αταίριαστα έλεγχος Mann-Whitney). Σύμβολο + υποδεικνύει στατιστικά σημαντικές διαφορές μεταξύ των ασθενών με καρκίνο οι οποίοι έκαναν ή δεν εμφανίζουν διάρροια, ως αποτέλεσμα της ακτινοθεραπείας (αταίριαστα έλεγχος Mann-Whitney). (C, D) Οι επιδράσεις της ακτινοθεραπείας για τη σχετική αφθονία μικροβιακή στο επίπεδο γένους μεταξύ των ασθενών πριν και μετά την ακτινοθεραπεία εντός «διάρροια» και οι ομάδες «όχι διάρροια» (ζεύγη Mann-Whitney test). (Ε) Ταξινομική διαφορές στο επίπεδο γένους μεταξύ ασθενών με καρκίνο χωρίς και με διάρροια μετά την ακτινοθεραπεία (ασύζευκτα Mann-Whitney test). *

σ

& lt? 0,05,

#

σ

& lt? 0,01,

+

σ

& lt?. 0.01

Η

μικροβιακή δομή της κοινότητας στο έντερο μεταβάλλεται σημαντικά μετά από πυελική ακτινοθεραπεία

και στις δύο ομάδες ασθενών (αυτών που ανέπτυξαν διάρροια και εκείνων που δεν έκανε), ακτινοθεραπεία οδήγησε σε περαιτέρω επιδείνωση της διαφορετικότητας μικροβιακών άλφα, που αντικατοπτρίζεται ιδιαίτερα από το δείκτης Shannon (Πίνακας 2). Σε επίπεδο φύλο, αν και

Firmicutes

και

Bacteroidetes

παρέμεινε το κυρίαρχο δύο φύλα, μετά την ακτινοθεραπεία, η σχετική αναλογία αφθονίας του

Firmicutes

να

Bacteroidetes

άλλαξε από 1,79 να 0,83 σε ασθενείς χωρίς διάρροια και, από 2,15 να 0,63 σε ασθενείς με διάρροια (Σχήμα 5Α). Σε ασθενείς οι οποίοι ανέπτυξαν διάρροια, αλλά όχι σε εκείνους που δεν το έκαναν, ακτινοθεραπεία οδήγησε σε σημαντική αύξηση στην αταξινόμητη βακτήρια. (Συνομοταξία: άλλοι) (προς 2,47% έναντι 0,88%, αντίστοιχα)

Η μικροβιακή σύνθεση ήταν επίσης σημαντικά διαφορετικό σε επίπεδο γένους πριν και μετά την ακτινοθεραπεία σε αμφότερες τις ομάδες των ασθενών με καρκίνο. Όπως φαίνεται στο Σχ 5C και 5D, επιλεγμένα γένη έδειξε παρόμοια απόκριση στην ακτινοβολία, ανεξάρτητα από την ανάπτυξη της διάρροιας, η σχετική πληθώρα του

Bacteroides

και

Clostridium_XIVa

αυξήθηκαν σημαντικά μετά την ακτινοθεραπεία, ενώ άλλες κυρίαρχη γένη, όπως

Faecalibacterium

,

Lachnospiracea

,

Oscillibacter

,

Roseburia

, και

Streptococcus

, μειώθηκαν. Ωστόσο, επιλεγμένα γένη παρουσίασαν απέναντι απάντηση μεταξύ των δύο ομάδων του καρκίνου. Μεταξύ αυτών, είναι αυξημένες σε ασθενείς με διάρροια και μειωμένη σε μη-διάρροια ομάδα ήταν

Clostridium

XI και XVIII, και αταξινόμητη (άλλοι), ενώ

Veilonella

έδειξε την αντίστροφη τάση (Σχήμα 5C και 5D ).

Όταν συγκρίθηκαν οι δύο μετά από ακτινοθεραπεία ομάδες των ασθενών με καρκίνο (χωρίς διάρροια vs. διάρροια), περίπου δέκα βακτηριακά γένη, τα οποία αποτελούν πάνω από 1% του συνόλου των κοπράνων βακτήρια, ήταν σημαντικά διαφορετικές (Σχ 5Ε ). Η σχετική αφθονία των

Alistipes

,

Bacteroides

,

Clostridium_XI

,

Erysipelotrichaceae

,

Escherichia

,

Lachnospiracea

,

Megamonas

, και αταξινόμητη (γένος: άλλοι) ήταν σημαντικά υψηλότερη, ενώ

Clostridium_XIVa

και

Sutterella

ήταν σημαντικά χαμηλότερη στους ασθενείς που ανέπτυξαν διάρροια, σε σύγκριση με εκείνοι που δεν έκαναν (Σχήμα 5Ε). Είναι ενδιαφέρον ότι, κάποιες γένη, όπως

Alistipes

,

Bacteroides

και

Roseburia

, άλλαξε αντιστρόφως μετά πυελική ακτινοθεραπεία, σε σύγκριση με υγιείς μάρτυρες (Σχήμα 5Β-5Ε).

Συζήτηση

Η έννοια της θεραπείας με ακτινοβολία ίχνη πίσω στην ανακάλυψη των ακτίνων Χ το 1895 από τον Βίλχελμ Κόνραντ Ρέντγκεν, και με τις πρόσφατες τεχνολογικές εξελίξεις στην ακτινοβολία, ένας αυξανόμενος αριθμός των ασθενών με κοιλιακό κακοήθειες αντιμετωπίζονται με πυελική ακτινοθεραπεία στο μέλλον. Ωστόσο, γαστρεντερικά συμπτώματα που προκαλούνται από πυελική ακτινοθεραπεία παραμείνει μια μακροχρόνια και άλυτο πρόβλημα. Ειδικά, η κούραση και η διάρροια, που συχνά βιώνουν οι ασθενείς πυελική ακτινοθεραπεία, έχουν επιβλαβείς επιπτώσεις στην ποιότητα ζωής των ασθενών και όχι σπάνια να οδηγήσει σε αναστολή της θεραπείας [29]. Σε αυτή την πιλοτική μελέτη, αξιολογήσαμε τα συμπτώματα της κούρασης και της διάρροιας, των φλεγμονωδών δεικτών, και κοπράνων μικροβιακή οικολογία των 11 ασθενών με καρκίνο σε διάστημα πέντε εβδομάδων πυελική ακτινοθεραπεία τους. Εντός του περιορισμού του μικρού κοόρτης του ασθενούς, περιγράφουμε ότι η κόπωση συσχετίζεται θετικά με διάρροια και συστηματική δείκτες φλεγμονής. Επιπλέον, δείξαμε ότι έντερο μικροχλωρίδας δεν επηρεάστηκε μόνο από την ακτινοθεραπεία, αλλά το πιο σημαντικό, ότι οι προ-υπάρχουσες αλλαγές στην οικολογία μικροβίων του εντέρου μπορεί να χρησιμεύσει ως προγνωστικό εργαλείο για τον εντοπισμό των ασθενών που είναι πιο πιθανό να προχωρήσουν σε διάρροια μετά από ακτινοβόληση της πυέλου.

Βρήκαμε ότι τα επίπεδα της απτοσφαιρίνης, orosomucoid και α

1-αντιθρυψίνης ορού, οι δείκτες συστηματικής φλεγμονής [30], ήταν σημαντικά αυξημένα μετά πυελική ακτινοθεραπεία. Οι θετικές συσχετίσεις μεταξύ κόπωση και την ανύψωση αυτών των τριών πρωτεϊνών υποδηλώνουν ότι η φλεγμονή μπορεί να συνεισφέρει στη έμπειρους κόπωση. Συνεπής με μια προηγούμενη μελέτη [5], παρατηρήσαμε επίσης ότι οι ασθενείς με διάρροια υποφέρει από πιο σοβαρή κόπωση. Είναι εύλογο ότι αυτοί οι ασθενείς βιώνουν πιο σοβαρή φλεγμονή, καθώς τα επίπεδα των φλεγμονωδών βιοδεικτών του ορού ήταν αυξημένα περισσότερο σημαντικά σε ασθενείς αναφέρουν υψηλότερες βαθμολογίες κόπωση (Σχήματα 2 και 3). Αυτό υποδηλώνει επίσης ότι η φλεγμονή ενεργοποιεί την παθοφυσιολογία της διάρροιας.

Η αιτιολογία της ανώμαλης φλεγμονή, που συνήθως απαντώνται σε ασθενείς κατά τη διάρκεια της ακτινοθεραπείας, είναι πιθανόν πολυπαραγοντική. Νέκρωσης όγκου και παράπλευρες σε φυσιολογικούς ιστούς συνοδεύεται από εντερική βλάβη, σε κίνδυνο του επιθηλιακού φραγμού και αυξημένη εντερική διαπερατότητα και αυξημένη μετατόπιση των βακτηρίων και προφλεγμονωδών αυλού συστατικά. Η άποψη αυτή υποστηρίζεται από τα ευρήματα της μελέτης μας και τις προηγούμενες εκθέσεις ότι η σημαντική μείωση στη συγκέντρωση κιτρουλίνη ορό, γεγονός που δείχνει την προοδευτική εντερικού επιθηλίου ατροφία [28,30], συνοδεύτηκε από αύξηση των επιπέδων στον ορό του TNFα και LPS κατά τη διάρκεια της θεραπείας, ειδικά σε ασθενείς που ανέπτυξαν διάρροια (Σχήμα 3). Το γεγονός ότι η ενδοτοξαιμία παρατηρήθηκε κυρίως σε ασθενείς με διάρροια που έδειξε επίσης πιο αυξημένες συγκεντρώσεις TNFα, δείχνει ότι βλεννογονίτιδα και να μεταβληθεί αλληλεπιδράσεις μικροβιακό ξενιστή βρίσκονται στο επίκεντρο της πυελικής νόσου ακτινοβολίας.

Ο βασικός ρόλος του εντέρου μικροχλωρίδας σε PRD έχει υποτεθεί με βάση την αντίσταση εάν ελεύθερα μικροβίων ποντικών σε προκαλούμενη από ακτινοβολία εντερίτιδα [13], με μετα-ακτινοθεραπεία αλλαγές στο έντερο μικροβιακή ποικιλότητα [11,12], και τη μερική ανακούφιση της γαστρεντερικής τοξικότητας της ακτινοθεραπείας με προβιοτικά [14, 15]. Ως εκ τούτου, δεν ήταν έκπληξη για να βρείτε ότι η ακτινοθεραπεία είχε μια βαθιά επίδραση στην κοπράνων μικροβιακή οικολογία στην ομάδα μας ασθενή.

Αρκετές μελέτες έδειξαν ότι οι ασθενείς που λαμβάνουν κυτταροτοξική και ακτινοθεραπεία εμφανίζουν σημαντικές αλλαγές στην εντερική μικροχλωρίδα, με πιο συχνή μείωση στο

Bifidobacterium

,

Clostridium

σύμπλεγμα XIVa,

Faecalibacterium prausnitzii

, και την αύξηση του

Enterobacteriaceae

και

Bacteroides

(πρόσφατα αναθεωρηθεί από Touchefeu κ.ά. [31].). Αυτές οι αλλαγές μπορεί να συμβάλει στην ανάπτυξη της βλεννογονίτιδας, ιδίως διάρροια και βακτηριαιμία. Στη μελέτη μας, μια σημαντική διαφορά στην αναλογία αφθονίας του

Firmicutes

να

Bacteroidetes

παρατηρήθηκε στους ασθενείς με καρκίνο πριν και μετά την πυελική ακτινοθεραπεία. Επιπλέον, βρήκαμε επίσης μια αξιοσημείωτη μείωση στην ποικιλομορφία και τον πλούτο της χλωρίδας του εντέρου μετά από θεραπεία ακτινοθεραπεία, καθώς επίσης και σημαντικές διαφορές στη σχετική αφθονία των επιλεγμένων γενών μεταξύ ασθενών που ανέπτυξαν ή δεν ανέπτυξαν διάρροια. Το τελευταίο εύρημα μπορεί να σχετίζεται με τις διαφορές στη σοβαρότητα των τοπικών φλεγμονωδών αποκρίσεων του βλεννογόνου, ή με τις αλλαγές στην επιθηλιακή μεταφορά ή περισταλτισμό, παράγοντες που δεν είχαν μελετηθεί σε ασθενείς μας.

Μια πιο εντυπωσιακή παρατήρηση σχετίζεται με τις αλλαγές στην εντέρου μικροβιακή οικολογία πριν από την πυελική ακτινοθεραπεία. Ασθενών που προχώρησαν σε διάρροια είχαν σημαντικά χαμηλότερη ποικιλομορφία μικροβιακή άλφα και υψηλότερη Firmicutes /αναλογία Bacteroides σε σύγκριση με εκείνους που δεν εμφάνισαν διάρροια. Σε ταξινομική ανάλυση των δύο ομάδων ασθενών προ-ακτινοθεραπεία, βρήκαμε σημαντικές διαφορές στη σχετική αφθονία των

Veillonella

,

Prevotella

,

Parabacteroides

,

Oscillibacter

,

Faecalibacterium

,

Dialister

,

Bacteroides

,

Clostridia

συστάδες XI και XVIII, και αταξινόμητη (γένος: άλλοι) (Εικόνα 5Β) . Παρά το γεγονός ότι με βάση τα αποτελέσματά μας δεν είναι δυνατόν να causatively σύνδεσμος οποιαδήποτε από τις κατηγορίες που στην αιτιολογία της ακτινοθεραπείας που προκαλείται διάρροια, είναι ενδιαφέρον ότι

Clostridia

σύμπλεγμα XVIII, η οποία έχει συνδεθεί με την προαγωγή των ρυθμιστικών Τ κυττάρων επέκταση και προστασία από κολίτιδα και αλλεργικών διάρροια [32], ήταν σημαντικά λιγότερο άφθονες σε ασθενείς που ανέπτυξαν διάρροια. Παρόμοια περίπτωση μπορεί να γίνει για

Faecalibacterium

γένους, το οποίο περιλαμβάνει ένα προστατευτικό συμβιωτικών,

F

.

prausnitzii

. [33] Από την άλλη πλευρά,

Clostridium

σύμπλεγμα XI, το οποίο περιλαμβάνει ένα γνωστό διαρροϊκές παθογόνο

C

.

dificile

, αν και λιγότερο άφθονα πριν από την ακτινοθεραπεία σε ασθενείς που αργότερα αναπτύσσουν διάρροια, έχει επεκταθεί σημαντικά μετά τη θεραπεία, ενώ σε μη-διάρροια ασθενείς που ακολούθησαν την αντίθετη τάση.