Αφηρημένο

Ιστορικό

πυρηνικού παράγοντα κΒ (ΝΡκΒ) διαδραματίζει βασικό ρόλο στη ρύθμιση της απόπτωσης. Η λειτουργία του ΝΡκΒ αναστέλλεται με σύνδεση προς αναστολέα ΝΡκΒ (ΙκΒ), και διαταραχή της ισορροπίας του ΝΡκΒ και ΙκΒ σχετίζεται με την ανάπτυξη πολλών ασθενειών, συμπεριλαμβανομένων των όγκων. Ως εκ τούτου, υποθέσαμε ότι η

NFκB1 (-94del /insATTG)

και

NFκBIA

(2758 A & gt? G). Πολυμορφισμοί που σχετίζονται με καρκίνο του παχέος εντέρου ευαισθησία (CRC)

μέθοδοι

σε μια μελέτη ασθενών-μαρτύρων νοσοκομείο με βάση των 1001 ασθενών CRC και 1005 του καρκίνου χωρίς ελέγχους συχνότητας συνδυάζεται με την ηλικία και το φύλο, εμείς γονότυπου πολυμορφισμών με τη χρήση αλυσιδωτής αντίδρασης πολυμεράσης-πολυμορφισμό μήκους θραύσματος περιορισμού (PCR-RFLP) μέθοδο και εκτελούνται προσδιορισμοί λουσιφεράσης και ανάλυση Western κηλίδωση να προσδιορίσει αν γενετικές παραλλαγές στο

NFκBIA

αλλάξει γονίδιο εκφράσεις και τις λειτουργίες του και έτσι τον κίνδυνο εμφάνισης καρκίνου.

Αποτελέσματα

Βρήκαμε ότι και οι δύο

NFκB1-94 ins /delATTG

και

NFκBIA 2758 A & gt? G

πολυμορφισμοί συσχετίστηκαν με CRC κίνδυνο (OR = 1,47? 95% CI = 1,14 – 1,86, και OR = 1,38? 95% CI = 1,14 – 1,66, αντίστοιχα). Επιπλέον, όταν αξιολογούνται αυτά τα δύο πολυμορφισμούς μαζί, οι συνδυασμένες γονότυπους με 2 παραλλαγή (κίνδυνος) αλληλόμορφα (

2758GG

και

-94ins /ins + del /ins

) έχουν συσχετιστεί με αυξημένο κίνδυνο CRC (OR = 1,71? 95% CI = 1,23 – 2,38) σε σύγκριση με 0 παραλλαγή, καθώς και η σημαντική τάση για 2 παραλλαγή αλληλόμορφα (κίνδυνος) ήταν εντονότερη μεταξύ των υποομάδων της ηλικίας & lt? 60 χρόνια, οι γυναίκες, ποτέ πότες, ποτέ καπνιστές, άτομα με φυσιολογικό ΔΜΣ και εκείνοι με οικογενειακό ιστορικό καρκίνου (

P

τάση

& lt? 0,01). Επιπλέον, οι δοκιμασίες λουσιφεράσης έδειξαν ότι το αλληλόμορφο G στην 3’UTR μειώθηκε σημαντικά

NFκBIA

σταθερότητα του mRNA και το

Μια

ρύθμιση αλληλόμορφο από

miRNA449a in vitro

και ότι η NFκBIA επίπεδα έκφρασης της πρωτεΐνης του

AA + AG

φορείς παραλλαγή ήταν σημαντικά υψηλότερη σε περινεοπλασματικής ιστούς από εκείνες του

2758GG

γονότυπο.

Συμπέρασμα

NFκB1

και

NFκBIA

πολυμορφισμούς φαίνεται να συμβάλλουν από κοινού με τον κίνδυνο της CRC. Αυτές οι δύο παραλλαγές μπορεί να είναι μια γενετική τροποποιητή για CRC ευαισθησία σε αυτό το νότιο κινεζικό πληθυσμό

Παράθεση:. Song S, Chen D, Lu J, Liao J, Luo Υ, Yang Ζ, et al. (2011)

NFκB1

και

NFκBIA

πολυμορφισμοί σχετίζονται με αυξημένο κίνδυνο για Σποραδικές τον καρκίνο του παχέος εντέρου σε Νότια κινεζικού πληθυσμού. PLoS ONE 6 (6): e21726. doi: 10.1371 /journal.pone.0021726

Επιμέλεια: Donald Gullberg, Πανεπιστήμιο του Μπέργκεν, Νορβηγία

Ελήφθη: 23 του Μάρτη, 2011? Αποδεκτές: 6 Ιουν 2011? Δημοσιεύθηκε: 30, Ιουν 2011

Copyright: © 2011 Song et al. Αυτό είναι ένα άρθρο ανοικτής πρόσβασης διανέμεται υπό τους όρους της άδειας χρήσης Creative Commons Attribution, το οποίο επιτρέπει απεριόριστη χρήση, τη διανομή και την αναπαραγωγή σε οποιοδήποτε μέσο, ​​με την προϋπόθεση το αρχικό συγγραφέα και την πηγή πιστώνονται

Χρηματοδότηση:. Αυτό το έργο υποστηρίχθηκε από το Εθνικό Φυσικό Επιστημονικό Ίδρυμα υποτροφιών Κίνας [81072042 έως Lei Wang, 81072366 για να Jiachun Lu και 81001108 για να Yisheng Wei], τα Guangdong Provincial επιστημονική επιχορηγήσεις έρευνας [8151008901000059, 10251008901000008 να Lei Wang], η κυβέρνηση επαρχία Gongdong, Τμήμα Εκπαίδευσης της κινεζικής κυβέρνησης, Τμήμα Επιστήμης και Τεχνολογίας της κινεζικής κυβέρνησης [00590101220610034 να Jianping Wang], και το Ταμείο Έρευνας για το Διδακτορικό Πρόγραμμα της Ανώτατης Εκπαίδευσης της Κίνας [200805580074 σε Jianping Wang] και Yat-Sen Καινοτόμες Ταλέντα Πρόγραμμα Καλλιέργεια για Εξαιρετική Παιδαγωγοί [88000 -3126201 να Dianke Chen και Lei Wang] και υποστηρίζονται από τα θεμελιώδη Κονδυλίων Έρευνας για τις Κεντρικές πανεπιστήμια. Οι χρηματοδότες δεν είχε κανένα ρόλο στο σχεδιασμό της μελέτης, τη συλλογή και ανάλυση των δεδομένων, η απόφαση για τη δημοσίευση, ή την προετοιμασία του χειρογράφου

Αντικρουόμενα συμφέροντα:.. Οι συγγραφείς έχουν δηλώσει ότι δεν υπάρχουν ανταγωνιστικά συμφέροντα

Εισαγωγή

Καρκίνος του παχέος εντέρου (CRC) είναι η τρίτη πιο κοινή μορφή καρκίνου στους άνδρες και η δεύτερη πιο κοινή μορφή καρκίνου στις γυναίκες σε όλο τον κόσμο, ενώ εκτιμάται ότι υπήρχαν περίπου 1,2 εκατομμύρια νέα κρούσματα CRC και 608.700 θανάτων που σχετίζονται με 2008 [1]. Εγγραφές από το δημοτικό μητρώο θάνατο της πόλης Guangzhou, Guangdong, Κίνα, δείχνουν ότι CRC είναι η πέμπτη πιο κοινή μορφή καρκίνου. Το ποσοστό θνησιμότητας αυξήθηκε δραματικά από 4,33 /10

5 άτομα το 1970 στα 12,13 /10

5 άτομα το 2000 [2]. Η πλειονότητα των περιπτώσεων CRC (περίπου 80%) είναι σποραδικές [3], αλλά μια κληρονομική προδιάθεση είναι παρόν σε 20-35% των ασθενών, υποδηλώνοντας ότι και οι δύο γενετικοί και περιβαλλοντικοί παράγοντες συμβάλλουν στην ανάπτυξη CRC [4]. Το αλκοόλ πόσιμο και καπνού χρησιμοποιούν [5], [6], διαιτητικά και παράγοντες του τρόπου ζωής [7], και φλεγμονώδης νόσος του εντέρου όπως η ελκώδης κολίτιδα [8], [9] έχουν δείξει ότι σχετίζονται με CRC κίνδυνο. Παρά το γεγονός ότι πολλοί άνθρωποι εκτίθενται σε αυτούς τους παράγοντες κινδύνου, μόνο μερικά από τα εκτεθειμένα άτομα να αναπτύξουν CRC, υποδεικνύοντας ότι η γενετική παραλλαγή καθορίζει εν μέρει ευαισθησία του κάθε ατόμου να του παχέος ογκογένεση.

Η απόπτωση, μια εξαιρετικά οργανωμένη κυτταρική διαδικασία, συμμετέχει στην ανάπτυξη, ιστό συντήρηση ομοιόσταση και εξάλειψη των ανεπιθύμητων κυττάρων [10]. Απορρύθμισης σε αυτή τη διαδικασία είναι πιθανό να συμβάλει στην ογκογένεση [11]. Τα βιοχημικά μονοπάτια της απόπτωσης είναι πολύπλοκη και εξαρτάται από όχι μόνο στα κύτταρα, αλλά και τους επαγωγείς της απόπτωσης. Ουσιαστική στοιχεία δείχνουν ότι η εμφάνιση και η ανάπτυξη του καρκίνου σχετίζεται τόσο με εκτεταμένη κυτταρική επιβίωση και αιωρήθηκε απόπτωσης σε προκαρκινικές αλλοιώσεις και, κατά συνέπεια, παρεκκλίνουσα απόπτωση μπορεί να επιτρέψει την ανεξέλεγκτη ανάπτυξη των κυττάρων [12].

πυρηνικού παράγοντα κάππα Β ( ΝΡκΒ) είναι ένας κύριος ρυθμιστής της μεταγραφής της ανοσολογικής απόκρισης, προσκόλληση κυττάρων, διαφοροποίηση, πολλαπλασιασμό και την απόπτωση [13]. Πέντε μέλη (p50 /ρ105, p65 /ΚεΙΑ, c-συνδεδεμένη, RelB, και ρ52 /P100) στην οικογένεια NFκB έχουν εντοπιστεί, και η διμερής μορφή NFκB1 P50 /ΚεΙΑ είναι η κύρια μορφή [14]. Στο κύτταρο ηρεμίας, ΝΡκΒ αδρανοποιείται στο κυτταρόπλασμα μέσω σύνδεσης με μία απομόνωσης ανασταλτική πρωτεΐνη, ΙκΒα, β ή γ, και η πιο κοινή πρωτεΐνη αυτής της οικογένειας είναι ο αναστολέας του ΝΡκΒ α (NFκBIA) [15]. Στην κλασσική οδό της ενεργοποίησης, ο φωσφορυλίωση και αποικοδόμηση των ανασταλτικών πρωτεϊνών οδηγούν σε ΝΡκΒ διάσταση από το συγκρότημα ΝΡκΒ και μετατόπιση προς τον πυρήνα, όπου μπορεί να ενεργοποιήσει τη μεταγραφή ενός μεγάλου αριθμού γονιδίων [16]. Ως ένα σημαντικό παράγοντα μεταγραφής, ΝΡκΒ μεσολαβεί στην απόκριση επιβίωσης με αναστολή ρ53-εξαρτώμενη απόπτωση και up-ρύθμιση αντι-αποπτωτικά μέλη της οικογένειας Bcl-2 και αναστολείς κασπάσης [17], [18]. Σε αντίθεση, ΝΡκΒ ενεργοποιείται επίσης τόσο από την εξωγενή και ενδογενή αποπτωτικά ερεθίσματα και μεσολαβεί αυξορρύθμιση του προ-αποπτωτικών γονιδίων όπως

TRAIL R2 /DR5

,

Fas

, και

Fas

συνδέτη [19], [20]. Μια ακατάλληλη ενεργοποίηση του ΝΡκΒ θα μπορούσαν να διαταράξουν την ομοιόσταση των ιστών και να οδηγήσει σε απορρυθμιστεί απόπτωση. Επιπλέον, η δραστηριότητα των ΝΡκΒ έχει παρατηρηθεί σε διάφορους τύπους καρκίνων συμπεριλαμβανομένων CRC [21], [22], που δείχνει ότι μπορεί να διαδραματίσει σημαντικό ρόλο στην ογκογένεση [23], [24].

NFκB1

(κωδικοποίηση για ΝΡκΒ) χαρτογραφείται στο χρωμόσωμα 4q23-q24 και αποτελείται από 24 εξώνια [25], [26], και ανασταλτική γονίδιο του

NFκBIA

(κωδικοποίηση για ΙκΒ) έχει μήκος 3,5 kb, με έξι εξώνια, και βρίσκεται στο χρωμόσωμα 14q13 [27], [28]. Γενετικές μελέτες έχουν εντοπίσει πολυμορφισμούς μονών νουκλεοτιδίων (SNP) στο

NFκB1

και

NFκBIA

[29], [30]. Πρόσφατα, ένας κοινός εισαγωγής /διαγραφής (-94 εισαγωγής /deletionATTG rs28362491) πολυμορφισμού στο

NFκB1

περιοχή υποκινητή και μια 3 ‘-untranslated περιοχή (3’UTR) πολυμορφισμός 2758A & gt? G (rs696) σε

NFκBIA

παρατηρήθηκαν να συσχετίζεται σημαντικά με φλεγμονώδη νόσο του εντέρου [31], [32] και καρκίνων [33], [34], [35]. Επιδημιολογικές μελέτες έχουν επίσης διερευνηθεί η σχέση μεταξύ

NFκB1

πολυμορφισμούς και τον κίνδυνο CRC σε Γερμανούς και

NFκBIA

πολυμορφισμό και τον κίνδυνο της CRC στο σουηδικό με αντικρουόμενα αποτελέσματα [36], [37].

δεν έχει υπάρξει προηγούμενη έκθεση σχετικά με τη σύνδεση μεταξύ του

NFκB1

και

NFκBIA

πολυμορφισμών και CRC κίνδυνο. Καθώς το σύστημα NFκB /ΙκΒ παίζει σημαντικό ρυθμιστικό ρόλο στα μονοπάτια της απόπτωσης και απορυθμισμένη έκφραση του

NFκB1

και

NFκBIA

έχει παρατηρηθεί σε CRC, υποθέσαμε ότι οι συνδυασμένες

NFκB1

και

NFκBIA

πολυμορφισμοί μπορεί να σχετίζεται με αυξημένο κίνδυνο CRC. Για να ελέγξει την υπόθεση αυτή, είμαστε ο γονότυπος το

NFκB1-94 εισαγωγής /deletionATTG

και

NFκBIA 2758A & gt? G

πολυμορφισμών στην εν εξελίξει μελέτη ασθενών-μαρτύρων νοσοκομείο με βάση μας CRC σε ένα νότιο κινεζικό πληθυσμό, και περαιτέρω εκτελούνται προσδιορισμοί λουσιφεράσης και ανάλυση Western κηλίδωση να προσδιορίσει αν γενετικές παραλλαγές στο

NFκBIA

αλλάξει γονίδιο εκφράσεις και τις λειτουργίες του και έτσι τον κίνδυνο εμφάνισης καρκίνου.

Υλικά και Μέθοδοι

δήλωση Ηθικής

Το πρωτόκολλο της μελέτης εγκρίθηκε από τα θεσμικά διοικητικά συμβούλια αναθεώρηση του Sun Yat-Sen University. Γραπτή συγκατάθεση λήφθηκε από κάθε συμμετέχοντα μετά από μια πλήρη εξήγηση της μελέτης.

Τα άτομα της μελέτης και το δείγμα συλλογής

Από Ιούλιος 2002-Απρίλης 2010, συνολικά 1001 ασθενείς με ιστοπαθολογικά-επιβεβαιώνονται και ανεπεξέργαστων σποραδικές CRC προοπτικά προσληφθεί από την πρώτη και την έκτη Νοσοκομείο Συνδεδεμένες (γαστρεντερικού συστήματος & amp? πρωκτικό Νοσοκομείο) και Cancer Center της Sun Yat-Sen University, Guangzhou, Κίνα, το Ενταγμένο όγκων Νοσοκομείο της Guangzhou Medical College, Guangzhou, Κίνα, Guangdong Provincial Λαϊκού νοσοκομείο, Guangzhou, Κίνα, και το νοσοκομείο Panyu Λαϊκής, Guangzhou, Κίνα. Όλα αυτά τα θέματα ήταν γενετικά άσχετη εθνοτικών Κινέζων Χαν και ήταν από την πόλη της Guangzhou και τις γύρω περιοχές στη νότια Κίνα. Από τις 1001 περιπτώσεις που περιλαμβάνονται σε αυτή τη μελέτη, υπήρχαν 169 (16,9%) περιπτώσεις του δικαιώματος του καρκίνου του παχέος εντέρου, 309 (30,9%) περιπτώσεις αριστερά καρκίνου του παχέος εντέρου, και 523 (52,2%) του καρκίνου του ορθού. Σύμφωνα με την αμερικανική μεικτής επιτροπής για τον Καρκίνο Εγχειρίδιο στάσης, υπήρξαν 171 (17,1%) περιπτώσεις του σταδίου Ι, 320 (31,9%) το στάδιο ΙΙ, 345 (34,5%) το στάδιο ΙΙΙ, και 165 (16,5%) το στάδιο IV. Εν τω μεταξύ, ένα σύνολο 1005 καρκίνου χωρίς ελέγχους επιλέχθηκαν τυχαία από ένα θέμα της πισίνας πάνω από 10.000 άτομα που συμμετείχαν σε προγράμματα check-up για την υγεία στους σταθμούς της κοινότητας υγείας σε Guangzhou, Κίνα.

Η μελέτη οι συμμετέχοντες ερωτήθηκαν και δεδομένα σχετικά με το κάπνισμα, η χρήση αλκοόλ και άλλους παράγοντες συμπεριλαμβανομένων των οικογενειακό ιστορικό καρκίνου ελήφθησαν με τη χρήση δομημένου ερωτηματολογίου. το κάπνισμα, τη χρήση οινοπνεύματος και το οικογενειακό ιστορικό καρκίνου ορίστηκαν όπως περιγράφηκε προηγουμένως [38]. Υποκείμενα των οποίων ο δείκτης (ΒΜΙ) μάζα σώματος ήταν & lt? 18,5 kg /m

2 ταξινομήθηκαν ως λιποβαρή, τα θέματα των οποίων ΔΜΣ ήταν 18,5 – 24,0 kg /m

2 ήταν φυσιολογικό σωματικό βάρος, αυτοί που έχουν ΔΜΣ & gt? 24,0 kg /m

2 ήταν υπέρβαροι [39]. Περιπτώσεις που ανήκουν στην οικογενή αδενωματώδη πολυποδίαση και τις περιπτώσεις εκείνες που πληρούν τα κριτήρια του Άμστερνταμ για την κληρονομική μη-πολυποειδούς CRC αποκλείστηκαν.

Γονοτυπικές

Πέντε ml αίματος συλλέχθηκαν από κάθε συμμετέχοντα και γονιδιακό DNA εκχυλίζεται με τη χρήση του DNA Blood Mini Kit (Qiagen, Valencia, CA) σύμφωνα με τις οδηγίες του κατασκευαστή. Η γονοτύπηση εκτελέστηκε με την αλυσιδωτή αντίδραση πολυμεράσης-πολυμορφισμό μήκους θραύσματος περιορισμού (PCR-RFLP). Για τον προσδιορισμό του πολυμορφισμού

NFκB1

προαγωγό (rs28362491), το SNP που περιέχει θραύσμα ενισχύθηκε χρησιμοποιώντας τους ακόλουθους εκκινητές: 5′-TGGGCACAAGTCGTTTATGA-3 ‘(προς τα εμπρός) και 5′-CTGGAGCCGGTAGGGAAG-3’ (αντίστροφο) . PCR διεξήχθη στους 94 ° C για 3 λεπτά που ακολουθείται από 30 κύκλους των 94 ° C για 30 s, 56 ° C για 30 s, και 72 ° C για 60 s με μία τελική επέκταση στους 72 ° C για 10 λεπτά. Τα προϊόντα PCR (281/285 bp σε μέγεθος) υποβλήθηκαν σε πέψη με

ΠΟΣ

ΜΙ (Fermentas, Βίλνιους, Λιθουανία) στους 37 ° C επί μία νύκτα ακολουθούμενη από ηλεκτροφόρηση σε πήκτωμα αγαρόζης 2%. Για τον προσδιορισμό του πολυμορφισμού

NFκBIA

(rs696), το SNP που περιέχει θραύσμα ενισχύθηκε χρησιμοποιώντας τους ακόλουθους εκκινητές: 5′-GGCTGAAAGAACATGGACTTG-3 ‘(προς τα εμπρός) και 5′-GTACACCATTTACAGGAGGG -3’ (αντίστροφο). Το PCR διεξήχθη στους 94 ° C για 5 λεπτά που ακολουθείται από 32 κύκλους των 94 ° C για 30 s, 54,3 ° C για 45 s και 72 ° C για 60 s με μία τελική επέκταση στους 72 ° C για 10 λεπτά. Τα ενισχυμένα θραύσματα υποβλήθηκαν σε πέψη με

Hae

III (Fermentas, Βίλνιους, Λιθουανία) όλη τη νύκτα στους 37 ° C που ακολουθείται από ηλεκτροφόρηση σε πήκτωμα αγαρόζης 2%.

ανάλυση Γονότυπος έγινε με δύο πειραματιστές ανεξάρτητα οποίοι ήταν τύφλωσε με το καθεστώς των υποκειμένων ως ασθενή ή τον έλεγχο. Για την επικύρωση περαιτέρω τα αποτελέσματα προσδιορισμού του γονότυπου, επιλέξαμε τυχαία% δειγμάτων 10 για κάθε ένα από τα 2 SNPs να εκτελέσει τις επαναληπτικές αναλύσεις, και τα αποτελέσματα ήταν 100% συγκλίνουσες. Επιπλέον, το 5% των προϊόντων της PCR για κάθε γονότυπο στόχο καθαρίστηκαν και επιβεβαιώθηκε με άμεση αλληλούχιση (Σχήμα S1 και S2 Σχήμα).

Βιοπληροφορική ανάλυση

Για να διερευνηθεί αν γενετικές παραλλαγές του

NFκBIA

θα μπορούσε να συνδεθεί με microRNAs (miRNA), ψάξαμε για microRNAs στόχος των γενετικών παραλλαγών του

NFκBIA

χρησιμοποιώντας τα προγράμματα αλγορίθμου (https://www.targetscan.org και http: //microrna.sanger .ac.uk /cgi-bin /στόχων /V5 /search.pl).

κυτταρική καλλιέργεια

Τρεις ανθρώπινου ορθοκολικού αδενοκαρκινώματος κυτταρικές σειρές, HCT116, ΗΤ29 και SW480 αγοράστηκαν από την Συλλογή Καλλιεργειών κινεζική Ακαδημία Επιστημών (Σαγκάη, Κίνα) και συνήθως καλλιεργούνται σε Τροποποιημένο κατά Dulbecco Eagle του Medium ή RPMI 1640 συμπληρωμένο με 100 μονάδες /ml πενικιλλίνης, 100 μg /ml στρεπτομυκίνης, και 10% ορό εμβρύου βοός (FBS). Τα κύτταρα αναπτύχθηκαν στους 37 ° C με 5% CO2 σε υγροποιημένο εκκολαπτήριο.

παρεμβολή RNA, παροδικές επιμολύνσεις και δοκιμασίες λουσιφεράσης

MiR-449Α

μιμείται τη στόχευση

NFκBIA

, 5′-UGGCAGUGUAUUGUUAGCUGGU-3 ‘(νοηματικό) και 5′-CAGCUAACAAUACACUGCCAUU-3’ (αντι-νόημα),

miR-449Α

αναστολέα, 5′-ACCAGCUAACAAUACACUGCCA-3 ‘, miR -34b μιμείται στόχευσης

NFκBIA

, 5′-CAAUCACUAACUCCACUGCCAU-3 ‘(νοηματικό) και 5′-GGCAGUGGAGUUAGUGAUUGUU-3’ (αντι-νόημα), και

miR-34b

αναστολέα, 5 ‘ -AUGGCAGUGGAGUUAGUGAUUG-3 ‘συντέθηκαν από GenePharma Co. (Σαγκάη, Κίνα). Επιπλέον, η 3’UTR του

NFκBIA 2758A

αλληλόμορφο (2575-2955 bp σε σχέση με τη θέση έναρξης της μετάφρασης) που περιέχει το

miR-449Α

και

miR-34b

θέση σύνδεσης ενισχύθηκε χρησιμοποιώντας τις ακόλουθες δύο εναύσματα, 5′-CCGCTCGAGCAAAGGGGCTGAAAGAA-3 ‘(νοηματικό) και 5′-AAGGAAAAAAGCGGCCGCAAAATGTGGTCCTTCCATGA-3’ (αντι-νόημα). Τα ενισχυμένα θραύσματα περιορίζεται με

Xho

Ι και

Δεν

Ι (New England BioLabs, Ίπσουιτς, ΜΑ) και στη συνέχεια συνδέθηκε εντός του

Xho

Ι και

Δεν

Ι θέση περιορισμού του πλασμιδίου διπλής λουσιφεράσης, psiCHECK ™ -2 (Promega, Madison, WI). Επιπλέον, η 3′-UTR του

NFκBIA 2758G

αλληλόμορφο, το οποίο περιείχε ένα μεταλλαγμένο θέση σύνδεσης mRNA, ενισχύθηκε χρησιμοποιώντας PCR κατευθυνόμενης σε θέση μεταλλαξογένεσης και κλωνοποιήθηκε σε psiCHECK ™ -2. Για την επιμόλυνση, τα κύτταρα σπάρθηκαν σε πλάκες 24-φρεατίων σε 1 × 10

5 κύτταρα /φρεάτιο και, μετά από ολονύκτια επώαση, τα κύτταρα συν-επιμολύνθηκαν με το πλασμίδιο αναφοράς (2758G ή 2758A αλλήλιο) και miR μιμείται ή αναστολείς χρησιμοποιώντας Λιποφεκταμίνη 2000 (Invitrogen, Carlsbad, CA) ακολουθώντας το πρωτόκολλο του κατασκευαστή. Τα κύτταρα λύθηκαν 48 ώρες μετά την επιμόλυνση, και η δραστικότητα λουσιφεράσης μετρήθηκε χρησιμοποιώντας Dual-Luciferase Assay System Reporter (Promega, Madison, WI). Κάθε πείραμα έγινε εις τριπλούν και τουλάχιστον τρεις φορές ανεξάρτητα

κηλίδωση Western ανάλυση

Για να αναλύσουμε τη συσχέτιση μεταξύ των

NFκBIA

πολυμορφισμών σε 3’ΙΙΤΡ (2758A & gt του?. G ) και τα επίπεδα έκφρασης της πρωτεΐνης NFκBIA στους ιστούς, 32 ζεύγη όγκου και περιογκική ιστοί ελήφθησαν από σποραδικές ασθενείς CRC εκτομή στο έκτο Ενταγμένο Νοσοκομείο του Sun Yat-Sen University και αρχειοθετούνται στην τράπεζα του όγκου. Όλα τα δείγματα ιστών ιστολογικά επιβεβαιωμένη. Ανοσοκηλίδωση δοκιμασίες διεξήχθησαν όπως περιγράφηκε προηγουμένως [38] και τα αντισώματα έναντι NFκBIA και β-ακτίνης (Precision Ομάδα Task, Chicago, USA) χρησιμοποιήθηκαν για τη διαδικασία. Πρωτεΐνη πυκνότητας διεξήχθη χρησιμοποιώντας Gel-Pro Analyzer 4.0 λογισμικό (Media Cybernetics, Inc., Silver Spring, MD) και η έκφραση NFκBIA ομαλοποιήθηκε έναντι της β-ακτίνης.

Η στατιστική ανάλυση

Δύο όψεων chi-square τεστ χρησιμοποιήθηκαν για να αξιολογηθούν οι διαφορές στις κατανομές του ηλικία, το φύλο, το κάπνισμα, η χρήση αλκοόλ, ΔΜΣ, την ιστορία της εμμήνου ρύσεως, και το οικογενειακό ιστορικό καρκίνου μεταξύ ασθενών και μαρτύρων. Η ισορροπία Hardy-Weinberg (HWE) ελέγχθηκε με δοκιμή χ-τετράγωνο καλοσύνη-of-fit να συγκρίνουν τις αναμενόμενες συχνότητες γονοτύπου με παρατηρούμενες συχνότητες γονότυπο (p2 + 2pq + q2 = 1) στον καρκίνο χωρίς ελέγχους. Η συσχέτιση μεταξύ της κατάστασης ασθενών-μαρτύρων και κάθε SNP, που μετράται από το λόγο πιθανοτήτων (OR) και το αντίστοιχο 95% διάστημα εμπιστοσύνης του (CI), υπολογίστηκε χρησιμοποιώντας μια άνευ όρων μοντέλο λογιστικής παλινδρόμησης, με και χωρίς προσαρμογή για την ηλικία, το φύλο, το κάπνισμα , το καθεστώς κατανάλωση αλκοόλ, ΔΜΣ, θέση του όγκου, και το οικογενειακό ιστορικό καρκίνου. Πρόσφατες μελέτες δείχνουν ότι μια ανάλυση των συνδυασμένων γονότυπων μπορεί να είναι πιο επιστημονικά σημαντική από την ανάλυση ενός ενιαίου πολυμορφισμό στην πρόβλεψη των ενώσεων της νόσου. Ως εκ τούτου, τα συνδυασμένα δεδομένα γονότυπο περαιτέρω στρωματοποιημένη ανά ηλικία, το φύλο και την κατάσταση καπνίσματος, την κατάσταση κατανάλωσης αλκοόλ, ΔΜΣ, θέση του όγκου, και το οικογενειακό ιστορικό καρκίνου. Logistic μοντέλων παλινδρόμησης χρησιμοποιήθηκε επίσης για τη δοκιμή τάσης. t δοκιμή Student έγινε για να εξεταστεί η διαφορά στα επίπεδα της έκφρασης του γονιδίου αναφοράς της λουσιφεράσης μεταξύ διαφορετικών κατασκευασμάτων. Kruskal-Wallis μιας κατεύθυνσης ANOVA τεστ χρησιμοποιήθηκαν για την ανάλυση έκφρασης πρωτεΐνης NFκBIA σε περινεοπλασματικής ιστούς διαφορετικούς γονότυπους. Όλες οι δοκιμασίες ήταν δύο όψεων με τη χρήση του λογισμικού SAS (έκδοση 9.1? SAS Institute, Cary, NC).

P

& lt?. 0.05 θεωρήθηκε στατιστικά σημαντική

Αποτελέσματα

Χαρακτηριστικά του πληθυσμού της μελέτης

Η κατανομή των δημογραφικών χαρακτηριστικών των 1001 σποραδικές CRC περιπτώσεις και 1.005 χωρίς καρκίνο έλεγχοι παρουσιάζονται στον πίνακα 1. Συνολικά, δεν υπήρχε στατιστικά σημαντική διαφορά δεν παρατηρήθηκε σε ηλικία, φύλο και η κατάσταση καπνίσματος μεταξύ των περιπτώσεων και ελέγχων (

P

& gt? 0.05 στο σύνολο). Σε σύγκριση με την ομάδα ελέγχου, υπήρχαν περισσότερες ποτέ πότες (υποθέσεις εναντίον τους ελέγχους, 45,5% έναντι 23,6%) (

P

& lt? 0,01) στην ομάδα των περιπτώσεων CRC. Επιπλέον, σε σύγκριση με την ομάδα ελέγχου, CRC περιπτώσεις ήταν πιο πιθανό να έχουν ένα οικογενειακό ιστορικό καρκίνου ή υψηλότερο ΔΜΣ (

P

& lt? 0,05 και στις δύο). Κατά συνέπεια, αυτές οι μεταβλητές, προσαρμοσμένη στο πολυπαραγοντικό μοντέλο λογιστικής παλινδρόμησης για να αποφευχθεί πιθανή σύγχυση σχετικά με τις κύριες επιπτώσεις των SNPs υπό μελέτη. Είχαν, επίσης, χρησιμοποιούνται στην μετέπειτα διαστρωμάτωση και την ανάλυση της αλληλεπίδρασης γονιδίων-περιβάλλοντος.

Η

PCR-RFLP μελέτη του

NFκB1

περιοχή του υποκινητή και το

NFκBIA

3 ‘ UTR περιοχή

διενεργείται ανάλυση του

NFκB1

περιοχή του υποκινητή με τη μέθοδο PCR-RFLP. Δύο ATTG επαναλήψεις είναι παρόντες στο

NFκB1

περιοχή του υποκινητή, και ένα αλληλόμορφο που έχει μια εισαγωγή ATTG (ins) διασπάστηκε σε 45-bp και ένα 240-bp μετά την πέψη με

ΠΟΣ

ΜΙ ενώ το άλλο αλληλόμορφο διαγραφή (del) που έχει μόνο μία ATTG κατά υποκινητή της δεν διασπάστηκε (Σχήμα 1.α). Επιπλέον, μετά από πέψη με

Hae

III, το

2758GG

γονότυπο παράγεται ένα 316-bp και ένα 108-bp ζώνη, ενώ ο γονότυπος 2758AA παρήγαγε ένα ενιαίο 424-bp ζώνη, και ετεροζυγώτες εμφανίζονται όλα 3 ζώνες (Σχήμα 1.β).

(α)

ΠΟΣ

MI προφίλ πέψη ζώνη του

NFκB1

γονίδιο στο 2% πηκτώματος αγαρόζης. Διαδρομή 1 Gene Χάρακας 100 bp χαμηλό εύρος Ladder, λωρίδες 2 και 7 del /ins ετερόζυγο γονότυπο, λωρίδες 4 και 6

ins /ins

γονότυπο, Lanes3, 5

del /del

γονότυπο. (Β)

Hae

III προφίλ πέψη ζώνη του

NFκBIA

σε 2% πηκτώματος αγαρόζης. Διαδρομή 1 Gene Χάρακας 100 bp χαμηλό εύρος Ladder, λωρίδες 3, 5 ομοζυγώτες G /G γονότυπο, διαδρομές 2 και 6 ομοζυγώτες A /A γονότυπο, λωρίδες 4, 7 ετερόζυγο A /G γονότυπο.

Η

Η

NFκB1-94ins /delATTG

(rs28362491) και

NFκBIA 2758A & gt? G

είναι (rs696) πολυμορφισμών που σχετίζονται με τον κίνδυνο της σποραδικής CRC

ο γονότυπος και αλληλόμορφου κατανομές των

NFκB1-94ins /delATTG

(rs28362491) και

NFκBIA 2758A & gt? G

(rs696) πολυμορφισμοί μεταξύ των περιπτώσεων και ελέγχων συνοψίζονται στον πίνακα 2. Η παρατηρούμενη συχνότητες γονοτύπου των δύο αυτών πολυμορφισμών ήταν όλα σε συμφωνία με την ισορροπία Hardy-Weinberg στα θέματα ελέγχου (

P

& gt? 0,05). Όπως φαίνεται στον Πίνακα 2, για rs28362491, η κατανομή του συν-κυρίαρχο γενετικό μοντέλο (del /del εναντίον ins /ins εναντίον del /ins), και το κυρίαρχο μοντέλο (ins /ins + del /ins εναντίον del /del) διέφερε σημαντικά μεταξύ των περιπτώσεων CRC και των ελέγχων (ins /ins: OR = 1,70? 95% CI = 1.29 έως 2.25?

P

& lt? 0,01? del /ins: OR = 1,33? 95% CI = 1,03 -1.74?

P

& lt? 0,01? ins /ins + del /ins: OR = 1,47? 95% CI = 1,14 – 1,86?

P

& lt? 0,01, αντίστοιχα). Για rs696, υπήρχε μια σημαντική διαφορά στην κατανομή των γονότυπων rs696 μεταξύ των περιπτώσεων CRC και τους ελέγχους (

P

& lt? 0,01). Σημαντικές διαφορές παρατηρήθηκαν επίσης στην κατανομή του υπολειπόμενου μοντέλο της rs696 (ΦΕΚ έναντι ΑΑ + AG) μεταξύ των περιπτώσεων και των ελέγχων CRC (OR = 1,38? 95% CI = 1,14 – 1,66?

P

& lt? 0,05) . Με συνέπεια, σημαντική συσχέτιση βρέθηκε μεταξύ των δύο SNPs και τον κίνδυνο σποραδικής CRC.

Η

ανάλυση Διαστρωμάτωση της ένωσης συνδυασμένων

NFκB1

και

NFκBIA

πολυμορφισμών με κίνδυνο CRC

Έχουμε αναλύσει περαιτέρω τις συνδυασμένες γονότυπους του

NFκB1

και

NFκBIA

πολυμορφισμών εξετάζοντας την ηλικία, το φύλο, το κάπνισμα, η κατανάλωση αλκοόλ, ΔΜΣ, θέση του όγκου, και την οικογένεια ιστορικό καρκίνου από λογιστικής παλινδρόμησης. Συνδυάσαμε το

NFκB1

και

NFκBIA

πολυμορφισμούς με βάση τον αριθμό των παραλλαγή αλληλόμορφα (κίνδυνος) (δηλαδή,

2758GG

και

-94ins /ins + del /ins

). Όπως φαίνεται στον Πίνακα 3, σε σύγκριση με το

NFκB1-94 del /del

και

NFκB1IA 2758AA + AG

γονότυπο, οι μεταφορείς μια παραλλαγή σε συνδυασμό με γονότυπο που ήταν & lt? 60 ετών είχαν υψηλότερη κίνδυνο CRC (OR = 1,57? 95% CI = 1,04 – 2,38) (

P

& lt? 0,05). Περαιτέρω ανάλυση διαστρωμάτωσης έδειξε ότι τα άτομα με δύο παραλλαγές είχαν σημαντικά υψηλότερο κίνδυνο CRC μεταξύ των υποομάδων των ασθενών ηλικίας & lt? 60 ετών (OR = 2,18? 95% CI = 1,37 – 3,44) (

P

& lt? 0,01) , οι γυναίκες (OR = 2,36? 95% CI = 1,35 – 4,10) (

P

& lt? 0,01), μη καπνιστές (OR = 2,05? 95% CI = 1.30 – 3.22) (

P

& lt? 0.01), ποτέ δεν πότες (OR = 1,87? 95% CI = 1,23 – 2,84) (

P

& lt? 0.01), τα άτομα με φυσιολογικό ΔΜΣ (OR = 1,80? 95% CI = 1,21 2.69) (

P

& lt? 0,01) και εκείνοι με οικογενειακό ιστορικό καρκίνου (OR = 4,57? 95% CI = 1,34 – 15,6,

P

& lt?. 0.05)

MiR-449Α

μιμείται κατέστειλε τις δραστηριότητες του

NFκBIA

2758 A & gt? G πολυμορφισμό

Εμείς αναλύεται περαιτέρω την 3’UTR του

NFκBIA

2758 A & gt? G πολυμορφισμό χρησιμοποιώντας έναν αλγόριθμο υπολογιστή και διαπίστωσε ότι ο πολυμορφισμός θα μπορούσε να επηρεάσει δεσμευτική miRNA.

MiR-449Α

και

miR-34b

, τα οποία εμπλέκονται σε μια ευρεία ποικιλία των βιολογικών λειτουργιών, βρέθηκαν να έχουν μια θέση σύνδεσης εντός της 3′-UTR του

NFκBIA

2758 A & gt? G πολυμορφισμό (Σχήμα 2α). Για τον προσδιορισμό της αλληλόμορφο-ειδική επίδραση του

NFκBIA

2758 A & gt? Παραλλαγή G σχετικά με τη δραστηριότητα του 3’UTR και κατά πόσον αυτό τον πολυμορφισμό επηρεάζονται δεσμευτικός miRNA, εμείς επιμολυσμένες κυτταρικές σειρές SW480 CRC, ΗΤ29, και HCT116 με ανταποκριτή πλασμίδια που φέρουν το

2758G

ή

2758A

αλληλόμορφο και miR μιμείται ή αναστολείς (Σχήμα 2α). Βρήκαμε ότι, ελλείψει μιμείται miR ή αναστολείς, σε σύγκριση με το

2758A

αλληλόμορφο, το

2758G

αλληλόμορφο παρουσίασαν μειωμένο λουσιφεράσης δραστηριότητες (

P

& lt? 0,05) (Σχήμα 2β).

MiR-449Α

μιμείται θα μπορούσε να μειώσει τις σχετικές λουσιφεράσης δραστηριότητες του

2758A

αλληλόμορφο, ενώ

miR-449Α

αναστολείς σημαντικά up-ρυθμίζουν τις σχετικές δραστηριότητες της λουσιφεράσης του

2758A

αλληλόμορφο σε όλες τις τρεις κυτταρικές γραμμές (

P

& lt? 0,01 για ΗΤ29?

P

& lt? 0,05 για SW480 και HCT116) (Σχήμα 2β). Από την άλλη πλευρά,

miR-34b

μιμείται απέτυχε να ασκήσει οποιαδήποτε αξιοσημείωτες επιπτώσεις από τις σχετικές λουσιφεράσης δραστηριότητες του

2758G

αλληλόμορφο σε αυτές τις κυτταρικές σειρές (τα δεδομένα δεν παρουσιάζονται). Λαμβανόμενα μαζί, αυτά τα αποτελέσματα έδειξαν ότι η

2758G

αλληλόμορφο στην 3’UTR της

NFκBIA

μειωμένη δραστικότητα λουσιφεράσης κανονικοποιήθηκαν σε σχέση με το

2758A

αλληλόμορφο, πιθανόν αντιστοιχεί σε μειωμένη σταθερότητα του mRNA ή την αποτελεσματικότητα της μετάφρασης και ότι

miR-449Α

έχουν την ικανότητα να δεσμεύουν και μερικώς καταστέλλουν την έκφραση της λουσιφεράσης μέσω του τμήματος

NFκBIA

3’ΙΙΤΡ κατά τη μεταφορά του

2758A

αλληλόμορφο του

NFκBIA

2758 A & gt?. G πολυμορφισμό

(α) μια πιθανή θέση-στόχο του

miR-449Α και miR-34b

εξαιρετικά διατηρημένη στο

NFκBIA

mRNA 3’ΙΙΤΡ. (Β) psiCHECK-2 Διπλή δοκιμασία λουσιφεράσης σε τρεις κυτταρικές γραμμές: SW480, ΗΤ29 και HCT116. Τα κύτταρα επιμολύνθηκαν με πλασμίδια ανταποκριτές μόνη της ή συν-επιμολύνθηκαν με microRNA. Η έκφραση λουσιφεράσης μετρήθηκε 48 ώρες μετά την επιμόλυνση. Η δραστικότητα της λουσιφεράσης του κάθε κατασκευάσματος κανονικοποιήθηκε έναντι του εσωτερικού ελέγχου της λουσιφεράσης της Renilla. Στήλες, σημαίνει από τρία ανεξάρτητα πειράματα? μπαρ, SD. *,

P

& lt?. 0.05 για όλες τις συγκρίσεις της κάθε κυτταρικής σειράς μεταξύ των δραστηριοτήτων των κατασκευασμάτων γονιδίου αναφοράς

Η

Σύλλογος των

NFκBIA3’UTR

πολυμορφισμών με την έκφραση της πρωτεΐνης NFκBIA

έψαξαν και για να διερευνηθεί κατά πόσον η

NFκBIA3’UTR

πολυμορφισμών (

2758A & gt? G

) σχετίστηκαν με αυξημένη ή μειωμένη έκφραση της πρωτεΐνης NFκBIA . Συλλέξαμε 32 ζεύγη όγκου και περιογκική ιστών από τις CRC ασθενείς διαφορετικών γονότυπων χωρίς θεραπεία. Ανοσοαποτύπωση ανάλυση έδειξε ότι τα επίπεδα της NFκBIA (NFκBIA /αναλογία πρωτεΐνης β-ακτίνη) σε περινεοπλαστικό ιστούς των 12 περιπτώσεων της 2758AA

γονότυπο ήταν 0,80 ± 0,09 και εκείνων των 8 περιπτώσεις του

2758AG

γονότυπο ήταν 0,63 ± 0,11, δύο από τα οποία ήταν σημαντικά υψηλότερα από εκείνα των άλλων 12 περιπτώσεις του

2758GG

γονότυπο (0,47 ± 0,06) (ανάλυση των δοκιμών διακύμανσης,

P

& lt ? 0,05) (Σχήμα 3). Ωστόσο, στους ιστούς του όγκου, τα επίπεδα έκφρασης NFκBIA δεν διέφερε σημαντικά μεταξύ των περιπτώσεων των διαφορετικών γονότυπων (τα δεδομένα δεν παρουσιάζονται). Αυτά τα αποτελέσματα έδειξαν ότι τα επίπεδα NFκBIA ήταν σημαντικά υψηλότερη σε περινεοπλασματικής ιστούς από ασθενείς των

2758AA + AG

της γονότυπους από εκείνες του

2758GG

γονότυπους.

επιπέδων της πρωτεΐνης NFκBIA σε 32 σποραδικές CRC περινεοπλασματικής ιστών από άτομα με διαφορετικούς γονότυπους του

2758A & gt? G

. Τα επίπεδα έκφρασης πρωτεΐνης NFκBIA κανονικοποιήθηκαν με εκείνη της β-ακτίνης με υπολογισμό των σχετικών επιπέδων έκφρασης. Ατομική ονομασία γονότυπος: Για 2758A & gt? G, λωρίδες 1-3, 9-11, 17-20, 25-26, ΑΑ γονότυπο (n = 12)? λωρίδες 4-6,12-14, 21-24, 27-28, GG γονότυπο (n = 12)? λωρίδες 7-8, 15-16, 29-32, AG γονότυπο (n = 8).

Η

Συζήτηση

Στην παρούσα μελέτη, ερευνήσαμε τις ενώσεις του

NFκB1-94del /insATTG

και

NFκB1IA 2758A & gt? G

πολυμορφισμών με κίνδυνο CRC σε ένα νότιο πληθυσμό Κινέζων Χαν. Βρήκαμε ότι τόσο η

NFkB1-94del /ins ATTG

και

NFkBIA 2758A & gt? G

πολυμορφισμοί που σχετίζονται με αυξημένο κίνδυνο CRC. Για το

NFkB1

–

94del /insATTG

πολυμορφισμό, με τις

-94del /del

ως αναφορά, βρήκαμε ότι τα

-94 (ins /ins + del /ins)

γονότυπο σχετιζόταν με στατιστικά σημαντικά αυξημένο κίνδυνο CRC. Για το

NFKBIA 2758A & gt? G

πολυμορφισμό, με το

2758 (AA + GA)

ως αναφορά, βρήκαμε επίσης ότι το

2758GG

γονότυπο σχετιζόταν με στατιστικά σημαντικά αυξημένο κίνδυνο CRC. Επιπλέον, όταν θα αξιολογηθεί

NFkB1

και

NFKBIA

πολυμορφισμούς σε συνδυασμό, βρήκαμε ότι η συνδυασμένη

2758GG

και

-94ins /ins + del /ins

γονότυπος σχετίζεται με σημαντικά αυξημένο κίνδυνο CRC σε σύγκριση με εκείνους που δεν το

2758GG

και

-94ins /ins + del /ins

γονότυπο, και αυτή η αύξηση του κινδύνου ήταν πιο έντονη μεταξύ των νέων από 60 χρόνια, οι γυναίκες, ποτέ πότες, ποτέ καπνιστές, άτομα με φυσιολογικό ΔΜΣ και εκείνοι με οικογενειακό ιστορικό καρκίνου. Στις δοκιμασίες in vitro, βρήκαμε επίσης ότι, σε σύγκριση με το

2758A

αλληλόμορφο, το

2758G

παραλλαγή αλληλόμορφου έδειξε σημαντικά μειωμένη σταθερότητα του mRNA και /ή την αποτελεσματικότητα της μετάφρασης. Επιπλέον, βρήκαμε ότι τα επίπεδα NFkBIA σημαντικά υψηλότερα σε περινεοπλασματικής ιστούς από ασθενείς των

2758AA + AG

της γονότυπους από εκείνες των

2758GG

γονότυπους, γεγονός που υποδηλώνει ότι η

2758A & gt? G

πολυμορφισμός είναι δυνητικά λειτουργικό και ο πολυμορφισμός

2758A & gt? G

σε 3’UTR του

NFkBIA

θα μπορούσαν να επηρεάσουν την έκφραση του γονιδίου. Για το καλύτερο της γνώσης μας, αυτή είναι η πρώτη μελέτη για να διερευνήσει κατά πόσον

NFkB1

και

NFkBIA

πολυμορφισμό και σε συνδυασμό πολυμορφισμός τους συσχετίστηκαν με τον κίνδυνο της CRC.

Υπάρχουν αρκετές γραμμές των αποδεικτικών στοιχείων που υποστηρίζουν τα ευρήματά μας. Η

ΝΡκΒ

1 οδών φαίνεται να παίζουν έναν κρίσιμο ρόλο σε πολλές ασθένειες του ανθρώπου με τη ρύθμιση της μεταγραφής των γονιδίων που εμπλέκονται στην ανοσολογική απόκριση, τον πολλαπλασιασμό των κυττάρων, και την απόπτωση [13]. Έχει δειχθεί ότι οι μεταβολές του

ΝΡκΒ

1 έκφραση παίζει έναν σημαντικό ρόλο στην προστασία των κυττάρων από απόπτωση [40].

ΝΡκΒ

1 δραστικότητα έχει παρατηρηθεί σε διάφορους τύπους καρκίνου [41], συμπεριλαμβανομένου του καρκίνου του μαστού [42] και CRC [21], να συμβάλλει στην αγγειογένεση και την εξέλιξη [43] του όγκου. Υπάρχουν επίσης πολλά πειραματικά δεδομένα δείχνουν ότι NFκB1 /ΙκΒ μονοπάτι μπορεί να συμμετέχει σε εισβολή των καρκινικών κυττάρων, καθώς και [44]. Ως εκ τούτου, οι παραλλαγές του

NFκB1

και Αρκετοί συνδέσμου

NFκBIA

γονίδια, αν λειτουργικό, θα μπορούσε να αναμένεται να έχουν επίδραση επί του κυτταρικού θανάτου, και ως εκ τούτου, την καρκινογένεση.

μελέτες έχουν αναφέρει ότι η

NFκB1

και

NFκBIA

πολυμορφισμούς σχετίζεται με την ανάπτυξη φλεγμονωδών και άλλων ασθενειών συμπεριλαμβανομένης της ελκώδους κολίτιδας, της νόσου του Graves, και ο σακχαρώδης διαβήτης, και ευαισθησία σε όγκους συμπεριλαμβανομένου του μελανώματος, καρκίνο της ουροδόχου κύστης και CRC σε διαφορετικές εθνοτικές ομάδες [32], [36], [45], [46], [47], [48]. . Gao

et al

‘s μελέτη ανέφερε μια έλλειψη σύνδεσης μεταξύ της

NFκBIA2758 A & gt? G

πολυμορφισμός στο βόρειο τμήμα της Κίνας πληθυσμού, αλλά έδειξε μια σύνδεση με το σουηδικό πληθυσμό και τον κίνδυνο CRC [36 ].