Abstract

Η ανοσολογική απόκριση είναι ουσιώδης για την επιβίωση με την καταστροφή των μικροοργανισμών και προ-καρκινικών κυττάρων. Ωστόσο, η φλεγμονή, μια πτυχή αυτής της απάντησης, μπορεί να οδηγήσει σε βραχυπρόθεσμη και μακροπρόθεσμη δηλητηριώδεις παρενέργειες.

Mclk1

+/- μεταλλαγμένα ποντίκια μπορεί να είναι μακρόβια, παρά την εμφάνιση ενός άκρας φλεγμονώδη απόκριση και χρονίως ενεργοποιημένα μακροφάγα, ως αποτέλεσμα της υψηλής μιτοχονδριακή παραγωγή ROS. Εδώ ζητάμε αν αυτό φαινότυπο είναι ευεργετική ή απλώς ανεκτή. Χρησιμοποιήσαμε τα μοντέλα της λοίμωξης από τον

Salmonella

οροποικιλιών και διαπίστωσε ότι

Mclk1

+/- μεταλλάξεις εξαπολύσουν μια ισχυρότερη ανοσολογική απόκριση, ελέγχει πολλαπλασιασμό των βακτηρίων καλύτερα, και είναι ανθεκτικά σε κυττάρων και ιστών ζημιών που προκύπτει από την αντίδραση, συμπεριλαμβανομένης της ίνωσης και των τύπων της οξειδωτικής βλάβης που θεωρούνται βιοδείκτες της γήρανσης. Επιπλέον, αυτά τα ίδια είδη της βλάβης του ιστού βρέθηκαν να είναι χαμηλή σε ακατέργαστα 23 μήνες η μεταλλάκτες. Εξετάσαμε, επίσης, την έναρξη της ανάπτυξης του όγκου μετά τη μεταμόσχευση των καρκινικών κυττάρων LLC1 ποντίκι στο

Mclk1

+/- μεταλλάξεις, καθώς και κατά τη διάρκεια της αυθόρμητης ογκογένεση στο

Mclk1

+ /-

Trp53

+/- διπλές μεταλλάξεις. Όγκου καθυστέρηση αυξήθηκε κατά το

Mclk1

+/- γονότυπο και στα δύο μοντέλα. Επιπλέον, χρησιμοποιήσαμε το μοντέλο μεταμόσχευσης για να δείξει ότι σπληνός CD8 + Τ λεμφοκυττάρων από

Mclk1

+/- μόσχευμα παραλήπτες εμφανίζουν ενισχυμένη κυτταροτοξικότητα εναντίον κυττάρων LLC1 in vitro.

Mclk1

+/- μεταλλάξεις εμφανίζουν έτσι μια ένωση ενισχυμένη ανοσολογική απόκριση με μερική προστασία από τις διεργασίες εξαρτάται από την ηλικία και από παθολογικές καταστάσεις παρόμοιες με αυτές που βρίσκονται με αυξημένη συχνότητα κατά τη διάρκεια της διαδικασίας γήρανσης. Αυτό υποδηλώνει ότι το ανοσοποιητικό φαινότυπος αυτών των μεταλλάξεων μπορεί να συμβάλει στη μακροζωία τους. Συζητάμε πώς τα ευρήματα αυτά υποδηλώνουν μια ευρύτερη άποψη για το πώς η ανοσολογική απόκριση μπορεί να επηρεάσει τη διαδικασία γήρανσης

Παράθεση:. Wang D, Wang Υ, Αργυρίου C, Carrière A, D Malo, Hekimi S (2012) Μια ενισχυμένη ανοσολογική ανταπόκριση του

Mclk1

+/- μεταλλαγμένα ποντίκια συνδέεται με την μερική προστασία από Ίνωση, Καρκίνος και την Ανάπτυξη της Biomarkers of Aging. PLoS ONE 7 (11): e49606. doi: 10.1371 /journal.pone.0049606

Επιμέλεια: Yann Herault, IGBMC /ICS, Γαλλία

Ελήφθη: 16 Αυγ. 2012? Αποδεκτές: 11 του Οκτωβρίου, 2012? Δημοσιεύθηκε: 14, Νοεμβρίου 2012

Copyright: © 2012 Wang et al. Αυτό είναι ένα άρθρο ανοικτής πρόσβασης διανέμεται υπό τους όρους της άδειας χρήσης Creative Commons Attribution, το οποίο επιτρέπει απεριόριστη χρήση, τη διανομή και την αναπαραγωγή σε οποιοδήποτε μέσο, ​​με την προϋπόθεση το αρχικό συγγραφέα και την πηγή πιστώνονται

Χρηματοδότηση:. Το έργο έχει χρηματοδοτηθεί με επιχορήγηση από το καναδικό Ινστιτούτο Έρευνας Υγείας για SH (MOP-97869) και το Πανεπιστήμιο McGill. Οι χρηματοδότες δεν είχε κανένα ρόλο στο σχεδιασμό της μελέτης, τη συλλογή και ανάλυση των δεδομένων, η απόφαση για τη δημοσίευση, ή την προετοιμασία του χειρογράφου

Αντικρουόμενα συμφέροντα:.. Οι συγγραφείς έχουν δηλώσει ότι δεν υπάρχουν ανταγωνιστικά συμφέροντα

Εισαγωγή

Το ανοσοποιητικό σύστημα είναι απαραίτητη για την άμεση επιβίωση σε απόκριση σε οξεία προκλήσεις από μόλυνση και καρκινικά κύτταρα. Ωστόσο, όπως συμβαίνει για άλλα όργανα, η λειτουργία του ανοσοποιητικού συστήματος φθίνει κατά τη γήρανση με έναν τρόπο που μπορεί να είναι δηλητηριώδη [1], [2], και των δεικτών immunosenescence συνδέονται αντιστρόφως ανάλογα με τη μακροχρόνια επιβίωση [3], [4]. Το ανοσοποιητικό σύστημα έχει επίσης εμπλακεί στη διαδικασία της γήρανσης με ένα διαφορετικό τρόπο. Έχει προταθεί ότι η δραστηριότητα του ανοσοποιητικού συστήματος θα μπορούσε στην πραγματικότητα να προκαλέσει μέρος του φαινοτύπου που παρατηρείται σε ηλικιωμένα άτομα [5]. Ειδικότερα, η διαδικασία της φλεγμονής, η οποία ενεργοποιείται από το έμφυτο ανοσοποιητικό σύστημα, έχει ενοχοποιηθεί στην ενεργοποίηση ή την επιδείνωση της ανάπτυξης χρόνιων ασθενειών της γήρανσης, συμπεριλαμβανομένου του διαβήτη, τύπου II [6], η αρτηριοσκλήρωση [7], η ανάπτυξη του όγκου [8] , και όλες οι μεταβολικές συνέπειες της παχυσαρκίας [9]. Επιπλέον, η χρόνια φλεγμονή οδηγεί σε προοδευτική ίνωση [10], μια απόκριση επούλωσης τραυμάτων που περιλαμβάνει την συσσώρευση πρωτεϊνών εξωκυτταρικής μήτρας και τη διασταυρούμενη σύνδεση των εξωκυτταρικών κολλαγόνου. Ίνωση είναι ένα χαρακτηριστικό γνώρισμα της γήρανσης σε μία ποικιλία οργάνων, συμπεριλαμβανομένων του ήπατος [11], και μπορεί να οδηγήσει σε ανώμαλη ιστικές δομές και να οδηγήσει σε σοβαρή δυσλειτουργία οργάνων. Επιπλέον, έχει προταθεί ότι, στους ανθρώπους, επεισόδιο ισχυρών φλεγμονής κατά την βρεφική ηλικία οδηγούν σε μακροπρόθεσμες επιβλαβείς επιδράσεις λόγω της αυξημένης φλεγμονώδεις διεργασίες στη μετέπειτα ζωή [12]. Αυτή η υπόθεση βασίζεται στην παρατήρηση ότι, ιστορικά, μείωση της θνησιμότητας γήρατος προηγήθηκε μείωση της θνησιμότητας νωρίς-ηλικία λόγω λιγότερων επεισόδια σοβαρής λοίμωξης και έτσι φλεγμονή.

Σε αντίθεση, η προηγούμενη μελέτη μας μακράς διάρκειας

Mclk1

+/- μεταλλάξεις του ποντικιού δεν υποστηρίζει την ιδέα ότι η φλεγμονή προκαλεί ή επιδεινώνει τη διαδικασία γήρανσης [13].

Mclk1

(γνωστός και ως

Coq7

) κωδικοποιεί ένα ένζυμο που εμπλέκεται στην ubiquinone (UQ) βιοσύνθεση [14], και την απώλεια της ένα αντίγραφο του

Mclk1

(στο

Mclk1

+/- μεταλλάξεις) έχει ως αποτέλεσμα i) μεταβαλλόμενη κατανομή UQ σε μιτοχονδριακές μεμβράνες [15], ii) εναλλασσόμενη λειτουργία της μιτοχονδριακής αναπνευστικής αλυσίδας [16], iii) μια αύξηση στην παραγωγή των μιτοχονδριακών αντιδραστικά είδη οξυγόνου (Μήτρος) [16], iv) μείωση του ρυθμού ανάπτυξης της οξειδωτικής βιοδείκτες της γήρανσης του πληθυσμού [17], και v) αυξημένη διάρκεια ζωής [17], [18]. Σε αυτούς τους μεταλλάκτες η αύξηση Μήτρος οδηγεί σε αυξημένη έκφραση του ανοσοποιητικού ρυθμιστή HIF-1α σε μακροφάγους [13]. HIF-1α έχει βρεθεί ότι είναι απαραίτητο για τις διάφορες πτυχές της λειτουργίας του ανοσοποιητικού, συμπεριλαμβανομένης ως έναυσμα της διαφοροποίησης των μακροφάγων κατά μήκος της φλεγμονώδους μονοπατιού ενεργοποίησης [19]. Σε συμφωνία με αυτές τις παρατηρήσεις βρήκαμε ότι

Mclk1

+/- μεταλλάκτες είχαν ενεργοποιημένα μακροφάγα, και ότι οι μεταλλάκτες αντιδρά με μια πολύ ισχυρότερη άμεση ανύψωση των κυκλοφορούντων φλεγμονωδών κυτοκινών κατά την επεξεργασία με πολύ χαμηλά επίπεδα λιποπολυσακχαρίτη (LPS ) [13]. Έτσι, σε

Mclk1

+/- μεταλλάκτες, σε αντίθεση με τις προσδοκίες, ένας υψηλός φλεγμονώδης αντιδραστικότητα βρέθηκε να σχετίζεται με μια αργή ανάπτυξη των βιολογικών δεικτών γήρανσης και με αυξημένη διάρκεια ζωής. Ένα σημαντικό ερώτημα είναι εάν το τροποποιημένο ανοσολογική απόκριση του

Mclk1

+/- μεταλλάξεις θα μπορούσαν να συμμετάσχουν στην επίτευξη του φαινοτύπου με μεγάλη διάρκεια ζωής.

Για να απαντηθεί αυτό το ερώτημα, ζητήσαμε αν η ενισχυμένη ανοσολογική απόκριση σε

Mclk1

+/- ποντίκια είναι στην πραγματικότητα επωφελής για τον οργανισμό από την άποψη της αντοχής σε βακτηριακή λοίμωξη, ο καρκίνος και το είδος των δεικτών της βλάβης που θεωρούνται βιοδείκτες της γήρανσης.

Αποτελέσματα

Mclk1

+/- Μεταλλαγμένων Καλύτερη Ελέγχου Λοιμώξεων από

Salmonella Typhimurium

Δοκιμάσαμε την απόδοση των

Mclk1

+/- μεταλλάξεις σε ένα μοντέλο λοίμωξης από

S

. Typhimurium. Χρησιμοποιήσαμε

Mclk1

+/- μεταλλάξεις και αδελφό άγριου τύπου μάρτυρες στο 129S6 /SvEvTac (129S6) γενετικό υπόβαθρο. Ποντίκια με αυτό το φόντο είναι άγριου τύπου στο

Slc11a11

τόπου και μπορεί να επιβιώσει

S

. λοίμωξη typhimurium, αλλά δεν μπορεί να καθαρίσει τα βακτήρια εντελώς και έτσι να αναπτυχθεί μια χρόνια λοίμωξη [20]. Εμείς εγχυθεί μεταλλάκτες και άγριου τύπου μάρτυρες ενδοφλεβίως σε δόση 1140 CFU ανά ποντικό και σημείωσε συκώτι βακτηριακό φορτίο (CFU ανά γραμμάριο ιστού) μετά από 40 ημέρες. Οι μεταλλάξεις δείχνουν μια μικρή αλλά στατιστικά σημαντική μείωση της τάξης του -9%, ενδεικτικό μιας κάπως πιο αποτελεσματικό ανοσοποιητικό έλεγχο του

S.

Μόλυνση Typhimurium (Εικόνα 1Α).

Α. Ήπαρ βακτηριακά φορτία αξιολογήθηκαν 40 ημέρες μετά την μόλυνση σε 3 μήνες ηλικίας ποντίκια και ήταν χαμηλότερες σε

Mclk1

+/- μεταλλάκτες. Τρία ανεξάρτητα πειράματα διεξήχθησαν. Σε κάθε πείραμα, η μέση CFU ανά γραμμάριο ιστού του κάθε μεταλλάγματος (

Mclk1

+/-) και άγριου τύπου ζώο (

Mclk1

+ /+) ομαλοποιήθηκε με τον μέσο όρο της ομάδας άγριου τύπου σε αυτό το πείραμα. Συνολικά 35 άγρια ​​ζώα τύπου και 23 μεταλλάγματα ομαλοποιήθηκαν με αυτόν τον τρόπο και συγκεντρώνονται τα αποτελέσματα. Η μέση ± S.E.M. της πισίνας φαίνεται. * Υποδηλώνει p & lt? 0,05. B. ήπατος ίνωση προσδιορίσθηκε σε μολυσμένα και μη μολυσμένα ομάδες την ημέρα 40 μετά τη μόλυνση με τη χρήση picrosirius red χρώση. Το κλάσμα της περιοχής των τμημάτων που λεκιάζουν για το κολλαγόνο εμφανίζεται. Η μέση ± S.E.M. δειχνονται. Υπήρχαν 9-14 ζώα σε κάθε ομάδα. Γ και Δ οξειδωτική βλάβη στις πρωτεΐνες αξιολογήθηκε με την δοκιμασία Oxyblot. Όλα τα δείγματα που χρησιμοποιήθηκαν ήταν από ζεύγη της ίδιας γέννας. Ένα αντιπροσωπευτικό αποτέλεσμα παρουσιάζεται στο C. Η ένταση της χρώσης σε κάθε λωρίδα ποσοτικοποιήθηκε και κανονικοποιήθηκε από εκείνη του άγριου τύπου στο ίδιο κηλίδα. Η μέση ± S.E.M. κάθε ομάδας φαίνεται στο γράφημα και ζευγαρωμένα t-tests χρησιμοποιήθηκαν για συγκρίσεις. Ε Η οξειδωτική βλάβη στο DNA προσδιορίστηκε μετρώντας 8-OHdG επίπεδα χρησιμοποιώντας καθαρισμένο συνολικό DNA ήπατος. ζεύγη γέννας χρησιμοποιήθηκαν (

Mclk1

+/- εναντίον

Mclk1

+ /+): 5 ζευγάρια χωρίς μόλυνση και 6 ζευγάρια θυσιάστηκαν 40 ημέρες μετά τη μόλυνση. Η μέση ± S.E.M. από κάθε ομάδα φαίνεται στο γράφημα? paired t-test χρησιμοποιήθηκαν για συγκρίσεις. δραστηριότητα ALT F. πλάσματος μετρήθηκε 40 ημέρες μετά τη μόλυνση. Υπήρχαν 8-14 ζώα σε κάθε ομάδα και η μέση ± S.E.M. κάθε ομάδας δείχνονται. Για Β-F, οι διαφορές μεταξύ των μεταλλαγμένων και άγριου τύπου ομάδες είναι σημαντικές, αλλά όχι χωρίς, λοίμωξη σ & lt? 0,05. Όλα τα πειράματα σε αυτό το σχήμα πραγματοποιήθηκαν με άνδρες.

Η

Mclk1

+/- Μεταλλαγμένων Διατήρηση Λιγότερο βλάβη των ιστών σε απάντηση

S.

Typhimurium λοίμωξη

η βακτηριακή μόλυνση και η ανοσολογική αντίδραση εναντίον οδηγεί σε βλάβη των ιστών, συμπεριλαμβανομένων οξειδωτική βλάβη. Σε δείγματα ήπατος από τα ίδια ζώα όπως στην Εικόνα 1Α μπορούμε επίσης δοκιμαστεί ίνωσης (Σχήμα 1Β), οξειδωτική βλάβη στις πρωτεΐνες, χρησιμοποιώντας oxyblot (Σχήμα 1 C και 1 D), και οξειδωτική βλάβη στο DNA, με μέτρηση των επιπέδων του 8-OHdG (Εικόνα 1Ε). Στο δείγμα πλάσματος από αυτά τα ζώα μετρήσαμε αμινο-τρανσφεράσης αλανίνης (ALT), ένα μέτρο της βλάβης στα ηπατικά κύτταρα (Σχήμα 1 F). Υπήρξε μια μεγάλη αύξηση σε όλα τα τέσσερα μέτρα σε μολυσμένα ζώα σε σύγκριση με μη μολυσμένα ελέγχους. Ωστόσο, η αύξηση ήταν σημαντικά λιγότερο έντονη σε μεταλλαγμένα ζώα για όλα τα τέσσερα μέτρα. Στην πραγματικότητα, στην περίπτωση της ίνωσης δεν υπήρξε καμία αύξηση σε όλα. Τα επίπεδα της ίνωσης ήταν πολύ χαμηλή, αλλά η διαφορά μεταξύ των γονότυπων μετά τη μόλυνση είναι σημαντική, ωστόσο, και είναι επίσης συνεπής με άλλα ευρήματα της ευαισθησίας σε ίνωση στο

Mclk1

+/- μεταλλαγμένα ποντίκια (βλέπε παρακάτω ). Σημειώστε ότι σε αυτό το πείραμα δεν μπορούμε να εξακριβώσει κατά πόσον το χαμηλότερο επίπεδο της ζημίας οφείλεται στο μειωμένο βακτηριακό φορτίο ή μια αλλαγή στο επίπεδο της ζημίας που παράγεται από την ίδια την ανοσολογική απόκριση.

Mclk1

+/- Μεταλλαγμένων Προβολή ένα αλλαγμένο ανοσολογική αντίδραση στο

S.

Enteritidis μόλυνση

αρχικές παρατηρήσεις μας ότι το ανοσοποιητικό σύστημα επηρεάζεται από τις υψηλές μιτοχονδριακό οξειδωτικό στρες στο

Mclk1

+/- μεταλλάκτες διεξήχθη στο φόντο C57BL /6J [13]. Για παράδειγμα, είναι σε αυτό το φόντο που παρατηρήσαμε ότι οι μεταλλάκτες ανταποκρίθηκαν σε ένα χαμηλό επίπεδο της θεραπείας LPS με πολύ μεγαλύτερη αύξηση των κυκλοφορούντων κυτοκινών πλάσματος. Ωστόσο,

λοιμώξεις Typhimurium

S. Είναι θανατηφόρα για το φόντο /6J C57BL, η οποία φέρει μια απώλεια-του-λειτουργίας μετάλλαξη στο

Slc11a11

τόπο [21]. Σε αντίθεση, τα πειραματικά ενδοφλέβια μολύνσεις με ένα διαφορετικό σεροβάρ,

Salmonella Enteritidis

, μπορούν να διαγραφούν εντελώς από το ήπαρ 40 ημέρες μετά τη μόλυνση για την C57BL /6J φόντο [22]. Για να συνδέσετε ευρήματα με πειραματικές μολύνσεις σε προηγούμενη εργασία μας σε αυτό το πλαίσιο, πρέπει πρώτα να ελεγχθεί αν η ανοσολογική αντίδραση στο

S.

Enteritidis ήταν διαφορετική στις μεταλλάξεις, όπως ήταν στο LPS. Χρησιμοποιώντας μια δοκιμασία (Luminex) με την οποία μπορεί να εκτιμηθεί ταυτόχρονα το επίπεδο των 10 κυτοκινών στο πλάσμα, που καθορίζουν τα επίπεδα κυτοκινών 7 ημέρες μετά τη μόλυνση με το

S.

Enteritidis (Εικόνα 2Α). Βρήκαμε ότι και οι δύο προ-φλεγμονώδεις κυτοκίνες Th1 (IL-1β, IL-6, και IFN-γ) και αντι-φλεγμονώδεις κυτοκίνες Th2 (IL-4 και IL-10) ήταν αυξημένα σε σύγκριση με τους μάρτυρες. Επιπλέον, IL-2, IL-5 και GM-CSF έδειξε μία σαφή τάση προς μια παρόμοια ανύψωση. Συνολικά, τα ευρήματα αυτά δείχνουν ότι πολλές πτυχές του ανοσοποιητικού αντίδραση στο

S.

Μόλυνση Enteritidis στο

Mclk1

+/- μεταλλάξεις είναι πιο έντονη από ό, τι στον άγριο τύπο.

Τρεις μήνες ηλικίας των αδερφών και των δύο γονότυπων μολύνθηκαν ενδοφλεβίως με 1800 CFUs ανά ποντίκι, το πλάσμα τους συλλέχθηκαν μετά από 7 ημέρες και αξιολογούνται για τα επίπεδα κυτοκινών. Για κάθε κυτοκίνη οι τιμές ομαλοποιήθηκαν στην μέση τιμή που μετρήθηκε για το

Mclk1

+ /+ ομάδα ελέγχου. Το μέγεθος του δείγματος ήταν 32-38 για κάθε γονότυπο. Οι αστερίσκοι αντιπροσωπεύουν p & lt? 0,05. B. Τρεις μήνες-παλιά ποντίκια για το ιστορικό C57BL /6L κατανεμήθηκαν σε 3 ομάδες των 9-12 ποντικιών για κάθε γονότυπο. Κάθε ποντικός μολυνθεί ενδοφλεβίως με 10

3 CFUs

S.

Enteritidis. Βακτηριακές φορτία στο ήπαρ μετρήθηκαν στις ημέρες 7, 21 και 42 μετά τη μόλυνση. δραστηριότητα ALT C. πλάσματος μετρήθηκε στις ημέρες 7, 21 και 42 ημέρες μετά τη μόλυνση. 5-13 ποντικοί σε κάθε ομάδα γονοτυπικό σε κάθε χρονικό σημείο χρησιμοποιήθηκαν, και η μέση ± S.E.M. φαίνεται. Όλα τα πειράματα σε αυτό το σχήμα πραγματοποιήθηκαν με ζυγούς αριθμούς των δύο αρσενικά και τα θηλυκά.

Η

Για να προσδιορίσετε αν η διαφορετική αντίδραση στη λοίμωξη, όπως αποδεικνύεται από τα υψηλότερα επίπεδα κυτοκινών μεταβάλλοντας την κάθαρση των βακτηρίων από το συκώτι καθορίζουμε το βακτηριακό φορτίο σε 7, 21 και 42 ημέρες μετά τη μόλυνση (Σχήμα 2Β). Δεν παρατηρήθηκε σημαντική διαφορά μεταξύ μεταλλάξεως και αγρίου τύπου βακτηριακό φορτίο παρατηρήθηκε σε οποιαδήποτε στιγμή μετά τη μόλυνση. Ωστόσο, παρά τις παρόμοιες βακτηριακού φορτίου, βλάβες στο συκώτι, όπως μετράται μέσω των επιπέδων ALT πλάσματος, μειώθηκε κατά την ημέρα 7 σε

Mclk1

+/- μεταλλάξεις και έδειξε την ίδια τάση μείωσης για την άλλες ημέρες (Σχήμα 2C).

Mclk1

+/- Μεταλλαγμένων διατηρήσουν μια βραδύτερη αύξηση του ιστού ζημίας πάροδο του χρόνου και σε απάντηση

S.

Enteritidis Λοίμωξη

σε μια προηγούμενη μελέτη, παρατηρήσαμε ότι η σταδιακή ανάπτυξη των μιτοχονδρίων και το οξειδωτικό βιοδείκτες της γήρανσης του πληθυσμού επιβραδύνθηκε στο

Mclk1

+/- μεταλλάξεις σε σύγκριση με το αδελφό

Mclk1

+ /+ ελέγχου [17]. Προκειμένου να συνεχίσει τις σπουδές μας στο παρασκήνιο /6J C57BL πρώτα διερευνηθεί κατά πόσον ορισμένες από τις δεικτών της βλάβης που είχε παρατηρηθεί να είναι χαμηλότερη μετά

S.

Λοίμωξη Typhimurium συμπεριφέρθηκε ως βιοδείκτες της γήρανσης σε C57BL /6J ποντίκια . Γι ‘αυτό προσδιορίζεται, πρώτον, ότι ίνωση του ήπατος, ένα μέτρο της σωρευτικής βλάβη των ιστών, και αμινοτρανσφεράσης της αλανίνης του πλάσματος (ALT) δραστηριότητα, ένα μέτρο σχετικά με τις τρέχουσες ηπατική βλάβη [23], αυξανόταν με την ηλικία στο πλαίσιο αυτό (Εικόνα 3Α και 3Β). Στη συνέχεια μετράται ίνωση και ALT σε νέους (ηλικίας 3 μηνών) και των παλαιών (23 μηνών-παλιό) μεταλλάξεις και τους ελέγχους για το ιστορικό C57BL /6J (Σχήμα 3C και 3D). Και για τις δύο δείκτες δεν υπήρχε διαφορά στα νεαρά ζώα, αλλά μία σημαντική μείωση στους μεταλλάκτες σε σύγκριση με ελέγχους παρατηρήθηκε στα ηλικιωμένα ζώα.

A. Το επίπεδο της ηπατικής ίνωσης σε άγριου τύπου C57BL /6J ποντίκια διαφορετικών ηλικιακών προσδιορίστηκε. Τα μεγέθη των δειγμάτων ήταν από 5 έως 16 και τα μέσα ± S.E.M. κάθε ηλικιακή ομάδα εμφανίζεται. Οι αστερίσκοι δεικνύουν τη στατιστική σημαντικότητα σε σύγκριση με την αμέσως μικρότερη ηλικιακή ομάδα από ένα t-test. * Ξεχωρίζει για την P & lt? 0.05, ** P & lt? 0,01, και *** για την P & lt? 0.001. δραστηριότητα ALT Β πλάσματος του αγρίου τύπου C57BL /6J ποντικούς μετρήθηκε και η μέση ± S.E.M. κάθε ηλικιακή ομάδα εμφανίζεται. Τα μεγέθη των δειγμάτων ήταν από 5 έως 14. C. Το επίπεδο της ηπατικής ίνωσης σε μικρούς και μεγάλους

Mclk1

+/- μεταλλάξεις στο φόντο C57BL /6J και τους

Mclk1

+ /+ προσδιορίστηκε αδέλφια. Μέγεθος του δείγματος ήταν 5 για το 3 μηνών-παλιά ομάδα και 17-20 για την 23 μηνών-παλιά ομάδα. δραστηριότητας της ALT Δ στο

Mclk1

+/- μεταλλάξεις και

Mclk1

+ /+ αδέλφια στο φόντο /6J C57BL μετρήθηκε στους 3 μήνες και 23 μήνες της ηλικίας . Υπήρχαν 5 ποντικοί για κάθε γονότυπο εντός 3 μηνών ηλικίας ομάδα, και από 15 έως 16 ποντίκια στην 23 μήνες η ομάδα. E. Το επίπεδο της ίνωσης του ήπατος προσδιορίστηκε μετά από 3 γύρους

S.

Μόλυνση Enteritidis. Υπήρχαν 11-16 ποντίκια σε κάθε ομάδα? η μέση ± S.E.M. της κάθε ομάδας απεικονίζεται. Οι αστερίσκοι δεικνύουν τη στατιστική σημαντικότητα σε σύγκριση με την ομάδα άγριου τύπου από ένα t-test. * Ξεχωρίζει για την P & lt? 0,05. Όλα τα πειράματα σε αυτό το σχήμα πραγματοποιήθηκαν με ζυγούς αριθμούς των δύο αρσενικά και τα θηλυκά.

Η

Μια υπόθεση για να εξηγήσει τη χαμηλή ζημιές σε παλιά

Mclk1

+/- μεταλλάξεις είναι που προκύπτει από μια διάρκεια ζωής των λιγότερο επιβλαβή ανοσολογικών αποκρίσεων σε λοιμώξεις και άλλες φλεγμονώδεις διεργασίες (όπως προτείνεται από τα πειράματα με το

S.

Typhimurium). Για να δοκιμαστεί περαιτέρω αυτή η ιδέα που εκμεταλλεύτηκε το γεγονός ότι

S.

Enteritidis πλήρως διαγραφεί από το ήπαρ σε λιγότερο από δύο μήνες στο παρασκήνιο C57BL /6J [22]. Ως εκ τούτου, διεξάγεται μια μελέτη επαναλαμβανόμενης μόλυνσης στα οποία ποντίκια μολύνθηκαν 3 φορές σε διάστημα 2 μηνών αρχής γενομένης από 3 μήνες της ηλικίας, και ALT πλάσματος καθώς και ίνωση του ήπατος μετρήθηκαν ένα μήνα μετά την τελευταία μόλυνση. Όπως φαίνεται στο Σχήμα 3Ε, ηπατική ίνωση στον άγριο τύπο ήταν δραματικά αυξημένα σε σύγκριση με αντίστοιχης ηλικίας μη μολυσμένους ελέγχους. Το επίπεδο της βλάβης που παρατηρήθηκε ήταν στην περιοχή από αυτή που παρατηρήθηκε σε μη μολυσμένους, αλλά τα μεγαλύτερα του 13 μήνες ηλικίας ποντίκια (Σχήμα 3Α), επιβεβαιώνοντας έτσι ότι η ηπατική ίνωση είναι μια σωρευτική δείκτης ζημιά που επιταχύνεται από τη μόλυνση. Σε αντίθεση με την κατάσταση άγριου τύπου,

Mclk1

+/- μεταλλάκτες ήταν ανεπηρέαστες από τις 3 γύρους μολύνσεως (Σχήμα 3Ε), ενισχύοντας την ερμηνεία μας ότι το χαμηλότερο επίπεδο της ίνωσης σε μη προσβεβλημένους παλιά

Mclk1

+/- μεταλλάξεις (Εικόνα 3C) θα μπορούσε να είναι το αποτέλεσμα μιας ζωής λιγότερο βλαβερές ανοσολογικές αποκρίσεις, οι οποίες με τη σειρά του θα μπορούσε να είναι μέρος του τι επιτρέπει για τη μακροζωία των μεταλλάξεων ». Μελλοντικές μελέτες να κατανοήσουν το χαμηλό ινωτική απόκριση στο

Mclk1

+/- μεταλλάξεις θα πρέπει να περιλαμβάνει τη μελέτη της σηματοδότησης μέσω TGF-β, ένα μόριο που συνδέεται συχνά με τη ρύθμιση της ίνωσης.

σε αντίθεση με ίνωση, τα επίπεδα ALT ήταν εντελώς ανεπηρέαστες μετά από τρεις γύρους μόλυνσης (δεν φαίνεται). Αυτό είναι σύμφωνο με αυτό που είχε παρατηρηθεί μετά από ένα γύρο μόλυνσης από

S.

Enteritidis (Σχήμα 2C), όταν τα επίπεδα ALT, οι οποίες ήταν χαμηλότερες σε

Mclk1

+/- μεταλλάξεις αμέσως μετά τη μόλυνση ήταν πίσω σε κανονικό 40 ημέρες αργότερα. Αυτό έρχεται σε αντίθεση με αυτό που παρατηρήθηκε με το

S.

Λοίμωξη Typhimurium, η οποία δεν έχει εκκαθαριστεί, αλλά παραμένει χρόνια, και όπου τα επίπεδα της ALT εξακολουθούν να είναι αυξημένα σε μεγάλο βαθμό μετά από 40 ημέρες (Σχήμα 1 F). Αυτό επιβεβαιώνει ότι η ALT δεν είναι ένα μέτρο της συσσώρευσης ζημιών, αλλά μάλλον των συνεχιζόμενων ζημιών. Τα ευρήματα αυτά δείχνουν επίσης ότι τα υψηλά επίπεδα της ALT παρατηρήθηκαν σε γηραιά ζώα άγριου τύπου (Σχήμα 3D) είναι ένα μέτρο της συνεχιζόμενης παθολογικών διαδικασιών.

μιτοχονδριακή οξειδωτική στρες Per Se δεν διεγείρει την ανοσολογική απόκριση ούτε και να μειώσει Ινωτικές Βλάβη

οι μεταλλάκτες ετερόζυγο για ένα νοκ-άουτ του μιτοχονδριακού γονιδίου υπεροξειδική δισμουτάση

SOD2,

που είναι πλήρως βιώσιμο, εμφανίζουν αυξημένη μιτοχονδριακό οξειδωτικό στρες, όπως

Mclk1

+/- μεταλλάξεις [17 ], [24], [25]. Ερευνήσαμε αν η επίδραση του

Mclk1

+/- μετάλλαξη στην ανοσολογική απόκριση και ζημιές επίσης προκλήθηκε σε

SOD2

+/- μεταλλάξεις.

Mclk1

+/- μεταλλάκτες αντιδρούν σε πολύ χαμηλά επίπεδα του LPS (0,01 mg /kg) με μια δραματική αύξηση των επιπέδων κυτοκίνης στον ορό, ιδιαίτερα του ΤΝΡ-α, η οποία παρατηρήθηκε από την πολλαπλή-κυτοκίνης δοκιμή Luminex καθώς και από μια ΤΝΡ-α-ειδική ELISA [13]. Δοκιμάσαμε 3 μήνες ηλικίας

SOD2

+/- μεταλλάξεις για αντιδραστικότητα σε πολύ χαμηλό επίπεδο των LPS και δεν βρήκε κανένα ανύψωση του πλάσματος του TNF-α σε σύγκριση με τους ελέγχους φυσικού τύπου (Εικόνα 4Α). Δοκιμάσαμε επίσης το επίπεδο της ίνωσης του ήπατος σε ηλικιωμένα μεταλλάκτες (16 μήνες ηλικίας) (Σχήμα 4Β). Δεν υπήρχε μείωση της ίνωσης στους μεταλλάκτες, αλλά μια ισχυρή τάση που υποδηλώνει μια δραματική αύξηση στην ίνωση. Αυτά τα ευρήματα είναι συνεπή με την υπόθεση ότι η μείωση στην ηλικία και τη μόλυνση που εξαρτώνται από βλάβη, ιδίως ίνωση, που παρατηρήθηκαν σε

Mclk1

+/- μεταλλάξεις προκύπτουν από την αυξημένη ανοσολογική αντίδραση τους, και όχι από άλλους φυσιολογικές αλλαγές που μπορεί να προκληθεί από αυξημένη μιτοχονδριακό οξειδωτικό στρες.

A. ΤΝΡ-α επίπεδα στο πλάσμα 3 μηνών ηλικίας

SOD2

+/- μεταλλάκτες και ελέγχει δύο ώρες μετά την ένεση ΙΡ /kg LPS 0,01 mg, μετρήθηκε με ELISA. Ένα t-test δεν έδειξε καμία διαφορά στην TNF-α επίπεδα μεταξύ

SOD2

+/-

μεταλλάξεις και τους ελέγχους (n = 15-17? Μπάρες σφάλματος αντιπροσωπεύουν S.E.M.). B. Το επίπεδο της ηπατικής ίνωσης σε

SOD2

+/- μεταλλαγμένα αρσενικά και τους ελέγχους στους 16 μήνες της ηλικίας προσδιορίστηκε. Υπήρχαν 6 και 11 ποντίκια στο

SOD2

+/- και

SOD2

+ /+ ομάδες, αντίστοιχα. Όλα τα πειράματα σε αυτό το σχήμα πραγματοποιήθηκαν με άνδρες μόνο. ​​

Η

έμμεση απόδειξη για την καθυστέρηση του όγκου Κίνηση ή /και ανάπτυξη σε

Mclk1

+/- Μεταλλαγμένων

Αξιολογώντας οποιαδήποτε επίδραση του

Mclk1

+/- μεταλλαγμένο γονότυπο για τον καρκίνο είναι ενδιαφέρουσα για δύο λόγους:

i

) καρκίνου είναι σαφώς εξαρτώμενη από την ηλικία των ασθενειών και

ii

) το ποσοστό του καρκίνου πιστεύεται ότι διατηρείται σε χαμηλά επίπεδα με μηχανισμούς του ανοσοποιητικού επιτήρησης. Για να ελεγχθεί η πιθανότητα ότι ο φαινότυπος του

Mclk1

+/- μεταλλάξεις επηρεάζει την ανάπτυξη του καρκίνου κατασκευάσαμε ένα

Mclk1

+/-

Trp53

+/- διπλά μεταλλαγμένο στέλεχος για το C57BL /6J φόντο.

Trp53

+/- μεταλλάξεις αναπτύσσουν αυθόρμητα όγκους, ιδιαίτερα σαρκώματα, μετά από περίπου ένα χρόνο [26]. Εμείς παράγονται ομάδες

Trp53

+/- (n = 20) και

Mclk1

+/-

Trp53

+/- ( n = 37) γυναίκες από τη διέλευση

Trp53

– /- άνδρες για να

Trp53

+/-

Mclk1

+/- θηλυκά. Εξετάσαμε την επιβίωση αυτών των ζώων και μετράται το μέγεθος του ορατού σαρκωμάτων κατά τη στιγμή του θανάτου. Η μέση και η μέγιστη διάρκεια ζωής των διπλών μεταλλακτών αυξήθηκε σε σύγκριση με

Trp53

+/- ζώα (Σχήμα 5Α), υποδηλώνουν μια βραδύτερη έναρξη ή αύξηση όγκων. Ωστόσο, η συνολική επίπτωση της ανάπτυξης του σαρκώματος ήταν συγκρίσιμη μεταξύ των δύο γονότυπων (δεν φαίνεται) και το βάρος των σαρκωμάτων που θα μπορούσαν να ταυτοποιηθούν κατά την διάρκεια της νεκροψίας έδειξε μόνο μια τάση προς μικρότερους όγκους στους διπλούς μεταλλάκτες (Σχήμα 5Β). Ωστόσο, τα αποτελέσματα αυτά θα μπορούσαν να εξακολουθούν να επισημαίνουν τη βραδύτερη έναρξη ή την ανάπτυξη του όγκου επειδή οι όγκοι βαθμολογήθηκαν κατά τη νεκροψία και διπλά μεταλλάγματα επιβίωσαν περισσότερο, πράγμα που σημαίνει ότι τα ζώα είχαν περισσότερο χρόνο για να αναπτύξουν όγκους αρκετά μεγάλο για να σκοράρει.

Α. Kaplan-Meier καμπύλες επιβίωσης των

Mclk1

+ /+

Trp53

+/- (n = 20) και

Mclk1

+ /-

Trp53

+/- (n = 37) ποντίκια. Η σημασία της διαφοράς ήταν P & lt? 0,05 το log-rank (Mandel-Cox) δοκιμή με τη χρήση GraphPad Prism έκδοση 5.00 για Windows (GraphPad Software, San Diego). Β Βάρη αυθόρμητης σαρκώματος σκόραρε κατά τη νεκροψία των ζώων στην Α, και εκφράζεται ως ποσοστό του σωματικού βάρους?

Mclk1

+ /+

Trp53

+/- (n = 9) και

Mclk1

+/-

Trp53

+/- (n = 19). Γ Σώματος βάρη την πάροδο του χρόνου από τα ζώα στον Α D.-F. Μια κοόρτη διακριτό από τα ζώα στο Α αναλύθηκε για σημάδια καχεξίας?

Mclk1

+ /+

Trp53

+/- (n = 12) και

Mclk1

+/-

Trp53

+/- (n = 8). Όλα τα ποντίκια με ευθανασία στις 54 εβδομάδες ηλικίας. Οπίσθιων άκρων βάρος των μυών μετρήθηκαν και εκφράστηκαν ως σχέση με το σωματικό βάρος (D). Τα επίπεδα έκφρασης του mRNA από δύο μυός ειδικών Ε3 λιγάσες ουβικιτίνης, Atrogin-1 και MuRF1, μετρήθηκαν με RT-PCR, που φαίνεται στο (Ε) και (F), αντίστοιχα. Σημασία για τις καμπύλες της γήρανσης ιδρύθηκε από μια δοκιμασία log-rank. Τα επίπεδα σημαντικότητας για τα δεδομένα σε Β και D.-F. ελέγχθηκαν με t-τεστ, με τους αστερίσκους στέκεται για p & lt? 0,05. Όλα τα πειράματα σε αυτό το σχήμα πραγματοποιήθηκαν με μόνο τα θηλυκά.

Η

Trp53

+/- μεταλλάξεις απότομα άρχισαν να χάνουν βάρος μετά από 54 εβδομάδες, προφανώς λόγω των όγκων που προκαλείται από καχεξία , αλλά αυτό το αποτέλεσμα ήταν πολύ λιγότερο σοβαρή στις διπλές μεταλλάξεις (Εικόνα 5C). Να εξετάσει το ζήτημα περαιτέρω θα παράγονται δύο επιπλέον ομάδες

Trp53

+/- (n = 12) και

Mclk1

+/-

Trp53

+/- (n = 8) διπλές μεταλλάξεις. Σε 54 εβδομάδες ηλικίας, αμέσως πριν από την παρατηρούμενη έναρξη της απώλειας βάρους στο αρχικό πείραμα, εξετάσαμε τις παραμέτρους που σχετίζονται με την καχεξία, όπως το βάρος των μυών και την έκφραση της καχεξίας που σχετίζεται με γονιδίων σε μύες, όπως αυτά που κωδικοποιούν για το συγκεκριμένο μυ- ubiquitin λιγάσες MuRF1 (

Trim63

) [27] και Atrogin-1 (

Fbxo32

) [28] (Σχήμα 5Ε-F). το βάρος των μυών ήταν υψηλότερη στους διπλούς μεταλλάκτες, και

MuRF1

και

Atrogin-1 έκφρασης

γονιδίου ήταν χαμηλότερη. Σημειώστε ότι η βραδύτερη ανάπτυξη της καχεξίας είναι συνεπής με την έννοια της πιο αργή έναρξη και την ανάπτυξη των όγκων.

άμεσες αποδείξεις για την καθυστέρηση την έναρξη του όγκου στο

Mclk1

+/- Μεταλλαγμένων

για να αποκτήσετε πιο άμεση απόδειξη για την επίδραση του

Mclk1

+/- για την έναρξη και την ανάπτυξη του όγκου χρησιμοποιήσαμε ένα μοντέλο [29], στην οποία 10

4 Lewis κύτταρα καρκίνου του πνεύμονα ( κύτταρα LLC1, γνωστός και ως κύτταρα 3LL) μεταμοσχεύθηκαν υποδόρια σε ηλικίας 3 μηνών μεταλλάκτες και τους ελέγχους (Σχήμα 6Α). Με αυτό το μοντέλο βρήκαμε ότι την έναρξη των όγκων καθυστέρησε σημαντικά σε

Mclk1

+/- μεταλλάξεις (Εικόνα 6Β). Μια τάση προς χαμηλότερη συχνότητα εμφάνισης όγκου παρατηρήθηκε επίσης, αλλά δεν ήταν σημαντική (δεν φαίνεται). Ωστόσο, όταν ένα ορατό όγκο είχε εμφανιστεί ο ρυθμός αύξησης του όγκου δεν ήταν διαφορετικό στις δύο γονότυπους (Σχήμα 6C).

Α. LLC1 πνεύμονα ποντικού καρκινικά κύτταρα με υποδόρια ένεση στη δεξιά υπερ-ωμοπλάτης περιοχή των 10 εβδομάδων

Mclk1

+/- μεταλλάξεις (n = 19) και αδελφών τους ελέγχους (n = 18) στην C57BL φόντο /6J σε δόση 10

4 κύτταρα /ποντικό. Ο χρόνος της πρώτης εμφάνισης των ορατών όγκων καταγράφηκε και την ανάπτυξή τους, στη συνέχεια ακολούθησε. Ο πίνακας απεικονίζει τα μεγέθη του όγκου την ημέρα 28 μετά τον εμβολιασμό. Β Μέση ημέρα της εμφάνισης του όγκου μετά τη μεταμόσχευση και στα δύο γονότυπους. Οι αστερίσκοι δεικνύουν βεβαιότητα στο Ρ & lt? 0.01 με t-test. Γ καμπύλες ανάπτυξης όγκου αποκαλύπτουν πάλι τη διαφορά στην λανθάνουσα κατάσταση, αλλά δείχνουν επίσης παρόμοιους ρυθμούς ανάπτυξης φορά έχουν εμφανιστεί όγκους. Δεδομένα μετά την 28η ημέρα δεν είναι διαθέσιμα για όγκους σε ζώα άγριου τύπου επειδή τα ζώα αυτά έπρεπε να ευθανασία ανώδυνα λόγω του μεγέθους του όγκου. D. Δύο ομάδες των 8-12 ποντικών για κάθε γονότυπο χρησιμοποιήθηκαν για να μετρηθεί σπληνός κυτταροτοξικότητα των λεμφοκυττάρων έναντι κυττάρων LLC1 in vitro μετά από 15 και 20 ημέρες μετά τον εμβολιασμό. Η μέση ± S.E.M. της κάθε ομάδας απεικονίζεται. Οι αστερίσκοι δεικνύουν βεβαιότητα στο ρ & lt? 0.05 με t-test. Όλα τα πειράματα σε αυτό το σχήμα πραγματοποιήθηκαν με άρτιους αριθμούς δύο άνδρες και γυναίκες.

Η

ενισχυμένη ανοσολογική αντίδραση ενάντια Tumor Cells σε

Mclk1

+/- Μεταλλάξεις

Σας ζητείται να καθοριστεί αν τη λειτουργία του ανοσοποιητικού έπαιξε ρόλο στο φαινότυπο λανθάνουσα κατάσταση του όγκου των

Mclk1

+/- μεταλλάξεις που παρατηρείται στο μοντέλο εμβολιασμού. Τα κυτταροτοξικά CD8 + Τ κύτταρα πιστεύεται ότι συμμετέχουν στην ανοσολογική αντίδραση κατά των καρκινικών κυττάρων [30], [31]. Έτσι, εξάγεται σπληνικά λεμφοκύτταρα από ξενιστές μοσχεύματος, απομονωμένα κύτταρα CD8 + Τ με μαγνητικό διαχωρισμό σφαιριδίων και ελέγχθηκαν κυτταροτοξικότητά τους έναντι κυττάρων LLC1 in vitro [29], [32]. Μετά από δύο 15 και 20 ημέρες μετά την εμφύτευση του κυτταροτοξικότητα των λεμφοκυττάρων από

Mclk1

+/- ήταν μεγαλύτερη από εκείνη των ελέγχων (Σχήμα 6D). Την ημέρα 15 και την ημέρα 20 υπήρχαν καθόλου ή μόνο πολύ μικροί όγκοι σε αυτά τα ζώα (παρόμοια με αυτό που παρατηρήθηκε στην ομάδα που φαίνεται στο Σχήμα 6C). Αυτό υποδηλώνει ότι η διαφορά στο ανοσοποιητικό σύστημα δραστικότητα εναντίον των μεταμοσχευμένων κυττάρων, οδηγώντας σε πιο ή πιο ενεργό, κυτταροτοξικά κύτταρα τελεστές θα μπορούσε να είναι υπεύθυνη για την καθυστέρηση στην έναρξη του όγκου.

Συζήτηση

Έχουμε προηγουμένως δείξει ότι

Mclk1

+/- μεταλλάξεις διατήρηση υψηλής μιτοχονδριακό οξειδωτικό στρες, όπως τα νεαρά ζώα [16], [17]. Αυτή ήταν μια έκπληξη, γιατί

Mclk1

+/- ηλικία μεταλλάξεις σιγά-σιγά, όπως εκτιμάται από βιοδείκτες της γήρανσης του πληθυσμού, και μπορεί να είναι μακράς διάρκειας ζωής, ενώ ο Μήτρος έχουν γενικά θεωρείται ότι είναι επιβλαβή και πιθανώς η αιτία της γηράσκων. Υπό το φως των πολυάριθμων ευρημάτων που ROS μόρια σηματοδότησης και ότι τα ζώα σαν γυμνή mole αρουραίους μπορεί να είναι μακρόβια, παρά τις αυξημένες οξειδωτικού στρες [33], [34], που έχουν ερμηνεύσει τα ευρήματά μας να σημαίνει ότι ο Μήτρος δεν προκαλούν γήρανσης αλλά μπορεί αντ ‘αυτού να συνδέεται με τη γήρανση, επειδή δρουν ως μόρια που μετατρέπονται σε μηχανισμούς προστασίας ως αντίδραση στην εξαρτώμενη από την ηλικία μοριακή βλάβη [35] σηματοδότησης, [36]. Σε μεταγενέστερες αναζήτησή μας για Μήτρος που εξαρτώνται από προστατευτικούς μηχανισμούς αποκαλύψαμε ότι το ανοσοποιητικό σύστημα του

Mclk1

+/- μεταλλάξεις ενεργοποιήθηκε και άκρως αντιδραστικά, ενδεχομένως μέσω της σταθεροποίησης του HIF-1α από Μήτρος στο ήπαρ και σε μακροφάγα και, ενδεχομένως, σε άλλους ιστούς [13].

Η υψηλή μιτοχονδριακό οξειδωτικό στρες στο

Mclk1

+/- μεταλλάξεις δεν μπορεί από μόνη της να είναι υπεύθυνη για την ευνοϊκή φαινότυπο τους, όπως η μείωση του οξειδωτικού στρες στα μιτοχόνδρια μπορούν να παράγουν ευεργετικές φαινότυποι [37], και ως

SOD2

+/- μεταλλάξεις, οι οποίες έχουν μιτοχονδριακό φαινότυπο πολύ παρόμοια με εκείνη του

Mclk1

+ /- μεταλλάγματα [17], δεν δείχνουν την ίδια αργή ανάπτυξη των βιολογικών δεικτών της γήρανσης του πληθυσμού [17]. Εδώ μπορούμε να δείξουμε επιπλέον ότι

SOD2

+/- μεταλλάξεις, σε αντίθεση με

Mclk1

+/- μεταλλάξεις, δεν δείχνουν μια υπερβολική ανύψωση του πλάσματος του TNF-α σε απόκριση σε LPS, ούτε χαμηλή ίνωση (Σχήμα 4). Η διαφορά μεταξύ των αποτελεσμάτων ότι η υψηλή μιτοχονδριακή οξειδωτικό στρες έχει στο

Mclk1

+/- και

SOD2

+/- μεταλλάξεις θα μπορούσαν να συνδέονται με το ρόλο της MCLK1 σε UQ βιολογία. Πράγματι βρήκαμε πρόσφατα ότι

Mclk1

+/- μεταλλάκτες έχουν χαμηλά επίπεδα UQ στην εσωτερική μιτοχονδριακή μεμβράνη, η οποία είναι πιθανόν υπεύθυνο για την μιτοχονδριακή φαινότυπο, αλλά δείχνουν επίσης αυξημένα επίπεδα UQ στην εξωτερική μιτοχονδριακή μεμβράνη , η οποία θα μπορούσε να αλλάξει τον τρόπο Μήτρος μήνυμα στον υπόλοιπο του κυττάρου [15].

Εδώ έχουμε ρώτησε αν η μεταβληθεί ανοσολογική απόκριση στο

Mclk1

+/- μεταλλάξεις είναι στην πραγματικότητα προστατευτικό και επομένως θα μπορούσαν να συμμετέχουν στην προώθηση της μακροζωίας. Σε προηγούμενη μελέτη μας [13] που ως επί το πλείστον διερευνηθούν φλεγμονή. Για παράδειγμα, ελέγξαμε την επίδραση του LPS επί κυκλοφορούντων κυτοκινών δύο ώρες μετά τη θεραπεία.