Abstract

υποδοχέα του επιδερμικού αυξητικού παράγοντα (EGFR) υπερέκφραση και ενεργοποίηση αποτέλεσμα σε αυξημένο πολλαπλασιασμό και τη μετανάστευση των συμπαγών όγκων συμπεριλαμβανομένου του καρκίνου των ωοθηκών. Τα τελευταία χρόνια, αυξανόμενες αποδείξεις δείχνουν ότι EGFR είναι μια άμεση και λειτουργική στόχος του miR-7. Σε αυτή τη μελέτη, βρήκαμε ότι miR-7 έκφραση ήταν σημαντικά προς τα κάτω σε ιδιαίτερα μεταστατικές κυτταρικές γραμμές επιθηλιακών καρκίνο των ωοθηκών (EOC) και μεταστατικούς ιστούς, ενώ η έκφραση του, EGFR συσχετίζεται θετικά με μετάσταση στα δύο EOC ασθενείς και κυτταρικές σειρές. Η υπερέκφραση του miR-7 κατέστειλε σημαντικά τις ικανότητες των κυτταρικών εισβολής και της μετανάστευσης και είχε ως αποτέλεσμα μορφολογικές αλλαγές από ένα φαινότυπο μεσεγχυματικά σε έναν επιθηλιακό φαινότυπο σε EOC. Επιπλέον, η υπερέκφραση του miR-7 απορυθμίζεται CK-18 και β-κατενίνης και έκφραση ρυθμίζεται προς τα κάτω την έκφραση βιμεντίνης, που συνοδεύεται με αναστολή EGFR και ΑΚΤ /ERK1 /2 αδρανοποίηση. Παρόμοια με miR-7 διαμόλυνση, αποσιώπηση του EGFR με αυτό το siRNA σε κύτταρα EOC επίσης ρυθμίζεται προς τα πάνω CK-18 και β-κατενίνης έκφρασης και ρυθμίζεται προς τα κάτω την έκφραση βιμεντίνης, και μειωμένη φωσφορυλίωση τόσο Akt και ERK1 /2, επιβεβαιώνοντας ότι ο EGFR είναι ένας στόχος του miR -7 στην αναστροφή EMT. Η φαρμακολογική αναστολή της PI3K-AKT και ERK1 /2 τόσο σημαντικά αυξημένη CK-18 και β-κατενίνης έκφρασης και η καταστολή της έκφρασης βιμεντίνης, υποδεικνύοντας ότι οι ΑΚΤ και ERK1 2 μονοπάτια /απαιτούνται για miR-7 διαμεσολάβηση EMT. Τέλος, η έκφραση του miR-7 και EGFR σε πρωτογενείς ΕΓΚ με συμφωνημένα ιστούς μετάσταση εξερευνήθηκε. Ήταν έδειξε ότι miR-7 συσχετίζεται αντίστροφα με EGFR. Στο σύνολό τους, τα αποτελέσματά μας πρότεινε ότι το miR-7 ανέστειλε την μετάσταση των όγκων και να αντιστραφεί EMT μέσω ΑΚΤ και ERK1 /2 οδό αδρανοποίηση με τη μείωση της έκφρασης EGFR σε κυτταρικές σειρές ΕΓΚ. Έτσι, miR-7 θα μπορούσε να είναι ένας πιθανός προγνωστικός δείκτης και θεραπευτικός στόχος για την παρέμβαση της μετάστασης του καρκίνου των ωοθηκών

Παράθεση:. Zhou Χ, Χου Υ, Dai L, Wang Υ, Zhou J, Wang W, et al. (2014) microRNA-7 Αναστέλλει μετάσταση όγκου και αντιστρέφει Τα επιθηλιακά-μεσεγχυματικά μετάβαση μέσω AKT /ERK1 /2 αδρανοποίηση με τη στόχευση του EGFR σε επιθηλιακό καρκίνο των ωοθηκών. PLoS ONE 9 (5): e96718. doi: 10.1371 /journal.pone.0096718

Επιμέλεια: Jung Weon Lee, Εθνικό Πανεπιστήμιο της Σεούλ, η Κορέα, Δημοκρατία της

Ελήφθη: 8η Δεκεμβρίου, 2013? Αποδεκτές: 10 Απριλίου, 2014? Δημοσιεύθηκε: May 9, 2014

Copyright: © 2014 Zhou et al. Αυτό είναι ένα άρθρο ανοικτής πρόσβασης διανέμεται υπό τους όρους της άδειας χρήσης Creative Commons Attribution, το οποίο επιτρέπει απεριόριστη χρήση, τη διανομή και την αναπαραγωγή σε οποιοδήποτε μέσο, ​​με την προϋπόθεση το αρχικό συγγραφέα και την πηγή πιστώνονται

Χρηματοδότηση:. Αυτό το έργο υποστηρίχθηκε από επιχορηγήσεις από το Εθνικό Ίδρυμα Φυσικών Επιστημών της Κίνας (Grant Νο 81072138), Ιατρική-μηχανικής σταυρό του έργου της Σαγκάης Jiao Tong University (YG2010MS24). Οι χρηματοδότες δεν είχε κανένα ρόλο στο σχεδιασμό της μελέτης, τη συλλογή και ανάλυση των δεδομένων, η απόφαση για τη δημοσίευση, ή την προετοιμασία του χειρογράφου

Αντικρουόμενα συμφέροντα:.. Οι συγγραφείς έχουν δηλώσει ότι δεν υπάρχουν ανταγωνιστικά συμφέροντα

Εισαγωγή

ο καρκίνος των ωοθηκών είναι η κύρια αιτία των θανάτων από γυναικολογικών κακοηθειών και την 5η κύρια αιτία του καρκίνου που σχετίζονται με θανάτους μεταξύ των γυναικών στον κόσμο [1]. Σύμφωνα με την έκθεση του National Cancer Institute (NCI), περίπου 22.280 νέες περιπτώσεις θα διαγνωστούν με καρκίνο των ωοθηκών στην Αμερική το 2012, και 15500 ασθενείς θα πεθάνουν από την ασθένεια αυτή, και το ποσοστό επιβίωσης 5 ετών για αυτούς είναι περίπου 30%. Έχει σκεφτεί ότι η μετάσταση παραμένει η κύρια αιτία της υποτροπής και θανάτου από καρκίνο των ωοθηκών, και όμως οι μοριακοί μηχανισμοί που σχετίζονται με την εξαγορά της μεταστατικής ικανότητας στον ανθρώπινο καρκίνο των ωοθηκών είναι ελάχιστα κατανοητή.

Τα microRNAs (miRNAs) είναι μια κατηγορία των μικρών μη-κωδικοποίησης RNA περίπου 20-22 νουκλεοτιδίων καιρό ότι λειτουργούν ως μετα-μεταγραφικό ρυθμιστές μέσω στόχευσης 3 ‘αμετάφραστες περιοχές (UTR) του mRNAs και προκαλώντας είτε την αναστολή της μετάφρασης ή αποικοδόμησης του mRNA [2]. MiRNAs συμβάλλουν στην διάφορες κυτταρικές διεργασίες που συμπεριλαμβάνουν τον πολλαπλασιασμό, απόπτωση, εισβολή και μορφογένεση [3], [4], [5]. Επιπλέον, μια σειρά από miRNAs έχουν ταυτοποιηθεί ότι λειτουργούν ως κλασική ογκογονίδια ή γονίδια καταστολής όγκου [6], [7], [8]. MiR-7 έχει χαρακτηρισθεί ως καταστολέας όγκων σε αρκετούς ανθρώπινους καρκίνους. Απευθύνεται έναν αριθμό πρωτο-ογκογονιδίων, συμπεριλαμβανομένων μοιάζει με ινσουλίνη υποδοχέα αυξητικού παράγοντα-1 (IGF1R) [9] του υποδοχέα του επιδερμικού αυξητικού παράγοντα (EGFR) [10], ρ21-ενεργοποιημένη κινάση 1 (ΡΑΚ1) και συνδέονται cdc42 κινάση 1 (Ack1 ) [11]. Είναι απέδειξαν ότι η υπερέκφραση του miR-7 ανέστειλε την ανάπτυξη των κυττάρων σβάννωμα τόσο σε καλλιέργεια και σε μοντέλα ξενομοσχεύματος όγκου in vivo, η οποία συσχετίζεται με μειορύθμιση του EGFR, ΡΑΚ1 και Ack1 [11].

Περίπου το 70% των επιθηλιακών καρκίνο των ωοθηκών (EOC) εκφράζουν ενεργοποιημένο EGFR [12]. υπερέκφραση EGFR και αποτέλεσμα ενεργοποίηση σε αυξημένο πολλαπλασιασμό και τη μετανάστευση των συμπαγών όγκων συμπεριλαμβανομένου του καρκίνου των ωοθηκών [13]. Η ενεργοποίηση του EGFR αποτελέσματα κινάσης τυροσίνης σε ενεργοποίηση ενός αριθμού ενδοκυτταρικών σημάτων που πιστοποιείται όχι μόνο τον πολλαπλασιασμό των κυττάρων, αλλά και άλλες διαδικασίες που είναι ζωτικής σημασίας για την πρόοδο του καρκίνου, συμπεριλαμβανομένης της μετανάστευσης των κυττάρων, αγγειογένεση, μετάσταση, και επιθηλιακά-μεσεγχυματικά μετάβαση (ΕΜΤ). Αυτά τα γεγονότα με τη μεσολάβηση διαφόρων κατάντη στόχοι του EGFR (π.χ. πρωτεϊνική κινάση (ΑΚΤ) και εξωκυτταρικό σήμα κινάση ρυθμιζόμενη 1/2 (ERK1 /2)) [14], [15], [16]. Είναι ενδιαφέρον, είναι ότι φαίνεται miR-7 στοχεύει άμεσα EGFR mRNA 3′- UTR, και στη συνέχεια, αναστέλλει την έκφραση του mRNA και της πρωτεΐνης [17] της. Αν και σηματοδότηση EGFR είναι σημαντικό και καλά μελετηθεί σε σχέση με την εξέλιξη της EOC, λίγα είναι γνωστά για το πώς miR-7 μεσολαβήσει EGFR σηματοδότησης για τη ρύθμιση της μετάστασης των κυττάρων του ΕΓΚ.

Στην παρούσα μελέτη, έχουμε εντοπίσει για πρώτη φορά ότι το miR -7 διαδραματίζει σημαντικό ρόλο στην EOC μετάσταση. Επιπλέον, δείχνουμε ότι το miR-7 αντιστρέφει EMT μέσω AKT /ERK1 /2 αδρανοποίηση με τη στόχευση του EGFR στην EOC, η οποία παρέχει μια νέα εικόνα των μηχανισμών που διέπουν τη μετάσταση του καρκίνου των ωοθηκών.

Υλικά και Μέθοδοι

ασθενείς και Δεοντολογίας

Αξιόπιστες δείγματα των πρωτογενών επιθηλιακών ιστών καρκίνου των ωοθηκών και μεταστατικών ιστών (επίπλουν ή του περιτοναίου) ελήφθησαν από ασθενείς με ΦΥΓΩ σταδίου III-IV προχωρήσει ΕΓΚ που είχαν υποβληθεί σε όγκο debulking σε Renji Νοσοκομείο, Σχολή Medicine, Shanghai Jiao Tong University μεταξύ 2010 και 2012. μεταξύ αυτών, 17 ζεύγη δειγμάτων καταψύχθηκαν ακαριαία σε υγρό άζωτο και αποθηκεύτηκαν στους -80 ° C για την εκχύλιση αργότερα RNA, 25 ζευγαρωμένα δείγματα σταθεροποιήθηκαν με φορμαλίνη και εμβαπτισμένες σε παραφίνη. Δείγματα κλινικά και παθολογικά φαίνεται να επισημαίνονται σωστά. Η μελέτη εγκρίθηκε από την επιτροπή δεοντολογίας της Renji Νοσοκομείο, Ιατρική Σχολή, Shanghai Jiao Tong University και γραπτή συγκατάθεση λήφθηκε από όλους τους ασθενείς. Όλα κλινική έρευνα διεξήχθη σύμφωνα με τις αρχές που διατυπώνονται στη Διακήρυξη του Ελσίνκι.

Υλικά