Abstract

απουρινική /απυριμιδινικές ενδονουκλεάσης 1 (APE1), που έχει τη διπλή λειτουργία τόσο της επιδιόρθωσης του DNA και τη δραστηριότητα οξειδοαναγωγής, έχει αναφερθεί ότι εκφράζεται υψηλά σε μη μικροκυτταρικό καρκίνο του πνεύμονα (NSCLC), και αυτό φαίνεται να είναι ένα χαρακτηριστικό που σχετίζεται με την αντίσταση χημειοθεραπεία. Σε αυτή τη μελέτη, αναγνωρίσαμε ορό αυτοαντισωμάτων APE1 (APE1-AAbs) σε ασθενείς με NSCLC και υγιείς μάρτυρες με ανοσοκηλίδωση και διερευνήθηκε η έκφραση του APE1-AAbs με έμμεση ELISA από τον ορό 292 ασθενών με NSCLC και 300 υγιείς ελέγχους. Επιπλέον, ο ορός αλλοιώσεις επίπεδο APE1-AAbs από 91 ασθενείς παρακολουθήθηκαν πριν και μετά τη χημειοθεραπεία. Τα αποτελέσματά μας έδειξαν ότι ο ορός APE1-AAbs μπορεί να ανιχνευθεί τόσο σε NSCLC ασθενείς και υγιείς μάρτυρες. Ορός APE1-AAbs ήταν σημαντικά υψηλότερα από εκείνα των υγιών ελέγχων και συνδέονται στενά με τα επίπεδα αντιγόνου APE1 τόσο σε ιστούς όγκων και το περιφερικό αίμα. Επιπλέον, η μεταβολή των επιπέδων του ορού APE1-AAbs σε NSCLC είναι στενά συνδεδεμένο με την ανταπόκριση στη χημειοθεραπεία. Αυτά τα αποτελέσματα δείχνουν ότι APE1-AAbs είναι ένας πιθανός δείκτης όγκου και προγνωστικός δείκτης της θεραπευτικής αποτελεσματικότητας σε NSCLC

Παράθεση:. Dai Ν, Cao Χ-J, Li Μ-Χ, Qing Υ, Liao L, Lu X-F, et al. (2013) Ορός APE1 αυτοαντισώματα: Ένα μυθιστόρημα Δυναμικό Tumor Marker και Predictor χημειοθεραπευτικών Αποτελεσματικότητα σε μη μικροκυτταρικό καρκίνο του πνεύμονα. PLoS ONE 8 (3): e58001. doi: 10.1371 /journal.pone.0058001

Επιμέλεια: Hiromu Suzuki, Σαπόρο Ιατρικό Πανεπιστήμιο, την Ιαπωνία

Ελήφθη: 6 του Νοεμβρίου του 2012? Αποδεκτές: 29 Ιαν 2013? Δημοσιεύθηκε: 5 Μαρτίου, 2013

Copyright: © 2013 Dai et al. Αυτό είναι ένα άρθρο ανοικτής πρόσβασης διανέμεται υπό τους όρους της άδειας χρήσης Creative Commons Attribution, το οποίο επιτρέπει απεριόριστη χρήση, τη διανομή και την αναπαραγωγή σε οποιοδήποτε μέσο, ​​με την προϋπόθεση το αρχικό συγγραφέα και την πηγή πιστώνονται

Χρηματοδότηση:. Αυτό το έργο υποστηρίχθηκε από το Εθνικό Ίδρυμα Φυσικών Επιστημών της Κίνας (Αρ 30872975 και Νο 81001000). Οι χρηματοδότες δεν είχε κανένα ρόλο στο σχεδιασμό της μελέτης, τη συλλογή και ανάλυση των δεδομένων, η απόφαση για τη δημοσίευση, ή την προετοιμασία του χειρογράφου

Αντικρουόμενα συμφέροντα:.. Οι συγγραφείς έχουν δηλώσει ότι δεν υπάρχουν ανταγωνιστικά συμφέροντα

Εισαγωγή

Με την αυξανόμενη επίπτωση και τη θνησιμότητα της, ο καρκίνος του πνεύμονα έχει γίνει η μεγαλύτερη αιτία των θανάτων από καρκίνο και ένα δύσκολο κλινικό πρόβλημα σε όλο τον κόσμο [1], [2]. Μη μικροκυτταρικός καρκίνος του πνεύμονα (NSCLC) είναι ο κύριος τύπος του καρκίνου του πνεύμονα, το οποίο συχνά διαγιγνώσκεται σε προχωρημένο στάδιο, ώστε οι ασθενείς να έχουν ελάχιστες πιθανότητες αποτελεσματικής και θεραπευτική αγωγή, και αυτό εκδηλώνεται με τα ποσοστά επιβίωσης 5 ετών & lt? 15 % [3].

Έλεγχος για την έγκαιρη βιοδείκτες NSCLC, ανάπτυξη θεραπευτικών προγνωστικούς παράγοντες αποτελεσματικότητας και νέων φαρμάκων είναι ζωτικής σημασίας παράγοντες για τη βελτίωση τόσο προγνώσεις και την επιβίωση των ασθενών [4], [5]. Ωστόσο, οι παρούσες βιοδείκτες και προγνωστικούς παράγοντες για NSCLC εξακολουθούν να στερούνται επαρκή ευαισθησία και ειδικότητα [6]. Το καρκινοεμβρυϊκό αντιγόνο είναι ένα από τα πιο ευρέως μελετηθεί καρκινικών δεικτών σε NSCLC, με μια συνολική ευαισθησία μόνο περίπου 40% [7]. Ορισμένα νέα υποψήφιοι δείκτη ορού όπως αγγειακού ενδοθηλιακού αυξητικού παράγοντα, παράγοντα αρχέγονων κυττάρων, αγγειογενετική κυτοκίνες, και αυξητικό παράγοντα ηπατοκυττάρων παράγοντας /διασποράς μπορεί να είναι δυνητικά σημαντική, αλλά οι περισσότεροι από αυτούς δεν έχει τεκμηριωθεί ότι είναι ανεξάρτητη κλινική προγνωστικών δεικτών [8]. Ως εκ τούτου, οι περισσότερες μελέτες που απαιτούνται για να ανακαλύψουν νέες βιοδεικτών για την υποβοήθηση στον έλεγχο των NSCLC, η οποία θα βελτιώσει σημαντικά το θεραπευτικό αποτέλεσμα αυτής της κακοήθους νόσου [9].

Τα κυκλοφορούντα αντισώματα έναντι αντιγόνων που σχετίζονται με όγκο (ΤΑΑ) είναι μια κατηγορία νέων βιοδεικτών του ορού δείχνει εξαιρετικά ενδιαφέρουσες ιδιότητες, ιδιαίτερα στην πρώιμη διάγνωση για καρκίνους. Αυτοαντισώματα υπάρχουν στον ορό των ασθενών σε πρώιμο στάδιο όταν οι όγκοι δεν μπορεί να ανιχνευθεί κλινικά, ακόμη και πριν μπορούν να ανιχνευθούν ΤΑΑ [10], [11]. Η επιμονή και η σταθερότητα των αυτοαντισωμάτων στον ορό είναι βασικά πλεονεκτήματα σε σχέση με άλλες που χρησιμοποιούνται σήμερα βιοδεικτών του ορού [12]. Δείχνουν μεγαλύτερη διάρκεια ζωής (t

1/2 μεταξύ 7 και 30 ημερών) στον ορό σε σύγκριση με το ΤΑΑ, είναι πολύ σταθερά στο αίμα, και δεν υπόκεινται σε πρωτεόλυση, όπως άλλα πολυπεπτίδια [13], [14]. Επιπλέον, όπως βιοχημικά γνωστό μόρια, τα αντισώματα μπορούν να ανιχνευθούν με πολλούς διαθέσιμα αντιδραστήρια και τεχνικές, τόσο απλά και φθηνά. Κατά τα τελευταία χρόνια, ένας αυξανόμενος άρθρα έχουν αποδείξει ότι η παρακολούθηση ατόμων με αυξημένο κίνδυνο καρκίνου για την παρουσία αυτοαντισωμάτων στον ορό μπορεί να επιτρέψει την πρώιμη ανίχνευση ή /και την πρόγνωση σε διάφορες μορφές καρκίνου, συμπεριλαμβανομένων των NSCLC [15] – [19]. Τα αυτοαντισώματα προς ρ53, NY-ESO-1, survivin και ο κλωβός έχει αποδειχθεί ότι είναι διαγνωστικά βιοδείκτες για ασθενείς με καρκίνο του πνεύμονα [20] – [22]

απουρινική /απυριμιδινικές ενδονουκλεάσης 1 (APE1), η οποία έχει το. διπλές λειτουργίες τόσο επιδιόρθωση του DNA και αναγωγής-οξείδωσης (redox) δραστηριότητα, είναι η κύρια ΑΡ ενδονουκλεάση της οδού επιδιόρθωσης με εκτομή βάσης. Παίζει σημαντικό ρόλο στην εξέλιξη του NSCLC, καθώς και η διατήρηση της σταθερότητας γονιδιώματος [23]. Αυξημένα και έκτοπη έκφραση του APE1 σε ιστούς όγκων συνδέεται στενά με την κακή πρόγνωση και χημείο- και ραδιο-αντίσταση σε NSCLC [24] – [26]. Πρόσφατα, Katsumata et al εντοπίστηκε για πρώτη φορά APE1 αυτοαντισώματα (APE1-AAbs) σε ορό από ασθενείς με συστηματικό ερυθηματώδη λύκο [27], αλλά έχουμε λίγη γνώση για APE1-AAbs σε NSCLC. Εμείς υποθέσουμε ότι η ασυνήθιστα πλούσια ή έκτοπη πρωτεΐνη APE1 από ιστούς όγκων μπορεί να τεθεί σε ορό και ότι APE1-AAbs θα μπορούσε να ανιχνευθεί στο περιφερικό αίμα αυτών των NSCLC ασθενείς.

Σε αυτή τη μελέτη, διαπιστώσαμε APE1-AAbs χρησιμοποιώντας τόσο ανοσοαποτύπωση και δοκιμασία ELISA, στη συνέχεια, διερευνήθηκε η συσχέτιση μεταξύ APE1-AAbs, αντιγόνο APE1 ορού και την έκφραση της πρωτεΐνης APE1 σε ιστούς όγκων. Επιπλέον, αξιολογήσαμε διαγνωστική αξία APE1-AAbs και τη συσχέτιση με την θεραπευτική αποτελεσματικότητα σε ασθενείς με NSCLC. Για τις γνώσεις μας, αυτή είναι η πρώτη έκθεση εντοπισμό ορού APE1-AAbs στον καρκίνο του πνεύμονα.

Υλικά και Μέθοδοι

Ασθενείς

Αυτή η μελέτη εγκρίθηκε από την Επιτροπή Ηθικής και Έρευνας της σχολής Daping Ιατρικής, Τρίτη Στρατιωτικό Ιατρικό Πανεπιστήμιο, την Κίνα και την γραπτή συγκατάθεση λήφθηκε από όλους τους ασθενείς και υγιείς μάρτυρες. Ελήφθησαν δείγματα ορού από 292 ασθενείς με NSCLC και 300 υγιείς μάρτυρες από τον Ιανουάριο του 2007 έως τον Ιούνιο του 2008. Τα δημογραφικά χαρακτηριστικά και τα κλινικά χαρακτηριστικά των υπό μελέτη ομάδες απεικονίζονται στον Πίνακα 1. Ενενήντα ένας ασθενείς που έλαβαν δύο κύκλους σχήμα που περιείχε πλατίνη παρακολουθήθηκαν πριν και μετά τη χημειοθεραπεία. Η ιστοπαθολογική αξιολόγηση διεξήχθη χωριστά από δύο παθολόγους, και στη συνέχεια μια συναίνεση έγινε στις ασύμφωνα εκτιμήσεις. Το σύστημα σταδιοποίησης διεξήχθη σύμφωνα με την ταξινόμηση AJCC 2003. Θεραπευτική αποτελεσματικότητα προσδιορίστηκε με κριτήρια απόκρισης αξιολόγησης σε συμπαγείς όγκους, που κατατάσσουν την απάντηση σε τέσσερις κατηγορίες: πλήρης ανταπόκριση (CR), μερική ανταπόκριση (PR), σταθερή νόσο (SD) και προοδευτική ασθένεια (PD). Για την ανάλυση των δεδομένων, CR και PR συνδυάστηκαν ως ανταποκρινόμενες που ήταν ευαίσθητα στη χημειοθεραπεία, ενώ SD και PD ομαδοποιήθηκαν ως μη ανταποκρινόμενοι. Οι ασθενείς αποκλείστηκαν εάν είχαν ανοσολογικές διαταραχές, ενδείξεις οξείας ή πρόσφατης (& lt? 2 μήνες). Λοίμωξης, πρόσφατες σημαντικές τραύμα, χειρουργική επέμβαση ή θεραπεία με ανοσοκατασταλτικά φάρμακα

Η

Συλλογή ορού

δείγματα περιφερικού αίματος ελήφθησαν από τους υγιείς ελέγχους και από τους ασθενείς μετά τη διάγνωση, αλλά πριν από την τυχόν εργασίες. Για τους 91 ασθενείς που έλαβαν θεραπεία με NSCLC δύο κύκλο πλατίνα περιείχε χημειοθεραπεία, δείγματα ορού ελήφθησαν πριν από τη χημειοθεραπεία και ένα μήνα μετά τη χημειοθεραπεία. Τα δείγματα ολικού αίματος αμέσως φυγοκεντρήθηκαν στις 3000 rpm για 15 λεπτά και το υπερκείμενο αποθηκεύθηκε στους -80 ° C μέχρι τη χρήση.

Cell Culture

Ανθρώπινα κύτταρα αδενοκαρκινώματος του πνεύμονα (Α549) αγοράστηκαν από την American Type Culture Collection (Manassas, VA, USA) και καλλιεργήθηκαν σε RPMI 1640 (HyClone, Logan, UT, USA) συμπληρωμένο με 10% εμβρυϊκό βόειο ορό, 100 μονάδες /ml πενικιλλίνη και 100 μg /mL στρεπτομυκίνη. Τα κύτταρα αναπτύχθηκαν σε 5% CO2 στους 37 ° C.

Dot Blot και Western Blot Αναλύσεις

Η πλήρους μήκους πρωτεΐνη σύντηξης APE1 [με εξαϊστιδίνη tag (His), κατασκευάστηκε και καθαρίζεται εργαστηρίου μας] ήταν διάσπαρτη σε μεμβράνη NC. Η μεμβράνη μπλοκαρίστηκε για 2 ώρες στους 37 ° C με ρυθμιστικό αποκλεισμού (5% BSA σε TBST). Η μεμβράνη στη συνέχεια επωάστηκε στους 4 ° C όλη τη νύκτα με ορό από ασθενείς και υγιείς μάρτυρες αραιώνονται 1:500 σε ρυθμιστικό αποκλεισμού. Μετά από πλύση με TBST, η μεμβράνη επωάστηκε για 1 ώρα στους 37 ° C με αντι-ανθρώπινη IgG (1:10000 αραίωση, Sigma, USA) HRP-σημασμένο κατσίκα.

Οι εκφράσεις του ορού APE1-abbs ήταν αναλύθηκαν χρησιμοποιώντας τις αναλύσεις κηλίδος Western [27]. Η πρωτεΐνη εκχυλίζεται από τα κύτταρα Α549 και APE1-His πρωτεΐνη σύντηξης διαχωρίστηκαν με 10% SDS-PAGE και μετά μεταφέρθηκαν σε μεμβράνη NC. Η μεμβράνη μπλοκαρίστηκε για 2 ώρες στους 37 ° C με ρυθμιστικό διάλυμα αποκλεισμού. Η μεμβράνη στη συνέχεια επωάστηκε στους 4 ° C όλη τη νύχτα με μονοκλωνικό αντι-ανθρώπινο αντίσωμα APE1 (1:5000 αραίωση) και ορό από ασθενείς με καρκίνο του πνεύμονα και των υγιών μαρτύρων (1:500 αραίωση). Η μεμβράνη επωάστηκε για 1 ώρα στους 37 ° C με HRP-σημασμένο αντίσωμα κατσίκας αντι-ποντικού IgG (1:10000 αραίωση) και HRP-σημασμένο αντίσωμα κατσίκας αντι-ανθρώπινης IgG (1:10000 αραίωση).

ένζυμα Συνδέεται Δοκιμασία ανοσοαπορρόφησης (ELISA)

Έμμεση ELISA χρησιμοποιήθηκε για ανίχνευση του ορού APE1-AAbs και διεξάγεται ως ακολούθως: (1) πλάκες μικροτίτλου (450~500 ng /cm

2, 8 και 12 × λωρίδες , Costar Biosciences Inc, USA) επικαλύφθηκαν με 100 μΙ APE1-His πρωτεΐνη σύντηξης αραιώνεται με ρυθμιστικό διάλυμα επίστρωσης (0,1 mol ανθρακικού ρυθμιστικού διαλύματος /L, ρΗ 9,6) σε 1,0 μg /ml και επωάστηκαν στους 4 ° C όλη τη νύκτα? (2) Οι πλάκες πλύθηκαν τρεις φορές χρησιμοποιώντας ρυθμιστικό έκπλυσης (0,05% PBST), 300 μλ /φρεάτιο, τότε οι μη ειδικές θέσεις στα φρεάτια μπλοκαρίστηκαν με 200 μΐ ρυθμιστικού αποκλεισμού (5% BSA σε PBS) επωάστηκαν για 2 ώρες σε 37 ° C? (3) Μετά από τρεις πλύσεις, 100 μΙ /φρεάτιο δειγμάτων ορού αραιωμένα 1:300 επωάστηκαν για 1 ώρα στους 37 ° C, το PBS χρησιμοποιήθηκε ως έλεγχος βαθμονόμησης? (4) Οι μη δεσμευμένο ενώσεις πλύθηκαν μακριά, 100 μl /φρεάτιο από ΗΚΡ-σημασμένο αντίσωμα κατσίκας αντι-ανθρώπινης IgG (συγκέντρωση εργασίας προτείνουμε 1:50000 αραίωση) επωάστηκαν για 45 λεπτά στους 37 ° C? (5) Μετά από πλύση έξι φορές, 100 μΙ /φρεάτιο ΤΜΒ (Pierce, USA) διάλυμα υποστρώματος επωάζεται για 10 λεπτά στους 37 ° C? (6) Η ενζυματική αντίδραση διεκόπη με 2 mol /L H

2SO

4 (50 μΙ /φρεάτιο) και, στη συνέχεια, η οπτική πυκνότητα (OD) μετρήθηκε με φασματοφωτομετρία μικροπλάκας σε μήκος κύματος αναφοράς (450 nm). Όλα τα δείγματα ελέγχθηκαν δύο φορές σε δύο ξεχωριστά τρυβλία

Βελτιωμένη επαλληλίας ELISA χρησιμοποιήθηκε για να ανιχνεύσει το αντιγόνο APE1 ορού και διεξάγεται ως ακολούθως: (1). Οι πλάκες μικροτιτλοδότησης επικαλύφθηκαν με μονοκλωνικό αντίσωμα 100 μΙ ποντικού αντι-ανθρώπου APE1 ( 1:40000 αραίωση) επωάστηκαν στους 4 ° C όλη τη νύκτα? (2) τα φρέατα αποκλείσθηκαν επί 2 ώρες στους 37 ° C? (3) 100 μl /φρεάτιο δειγμάτων ορού επωάστηκαν για 1 ώρα στους 37 ° C, το PBS χρησιμοποιήθηκε ως έλεγχος βαθμονόμησης? (4) αντι-ανθρώπινο αντίσωμα 100 μΙ κουνελιού πολυκλωνικό APE1 (1:5000 αραίωση) επωάστηκαν για 1 ώρα στους 37 ° C? (5) 100 μl /φρεάτιο IgG αντι-κουνελιού HRP-σημασμένο κατσίκας (1:5000 αραίωση) επωάστηκαν για 45 λεπτά στους 37 ° C? (6) Μετά από πλύση έξι φορές, 100 μΙ /φρεάτιο διαλύματος υποστρώματος ΤΜΒ επωάστηκε για 10 λεπτά στους 37 ° C και διακόπηκε με 2 mol /LH

2SO

4, η οπτική πυκνότητα (OD) μετρήθηκε με μικροπλάκας φασματοφωτομετρία σε μήκος κύματος αναφοράς (450 nm). Όλα τα δείγματα εξετάστηκαν δύο φορές σε δύο ξεχωριστές πλάκες.

APE1 ανοσοϊστοχημεία και Scoring

Η έκφραση της πρωτεΐνης APE1 των ασθενών με NSCLC αναλύθηκαν χρησιμοποιώντας ανοσοϊστοχημεία. Τα πλακίδια κόπηκαν σε τομές πάχους 4 μm και επωάστηκαν με APE1 μονοκλωνικό αντίσωμα ποντικού αντι-ανθρώπου (αραίωση 1:2000). ιστολογική διάγνωση κάθε δείγμα επιβεβαιώθηκε από έναν παθολόγο και μελέτες στο παρελθόν με APE1 [26]. Ο ποσοστού σήμανσης των κυττάρων και η ένταση της χρώσης ως προηγούμενες μελέτες [28], [29], οι ιστοί που ταξινομούνται σε τέσσερις κατηγορίες: 0, 1, 2 και 3 αντιστοιχούν σε αρνητικό, αδύναμη, μέτρια και ισχυρή έκφραση. Η βαθμολογία 0 και σκοράρει 1 θεωρήθηκαν χαμηλή έκφραση, ενώ το σκορ 2 και να σκοράρει 3 θεωρήθηκαν υψηλή έκφραση.

Στατιστικές Αναλύσεις

Τα δεδομένα εκφράστηκαν ως μέση τιμή ή μέση τιμή ± τυπική απόκλιση (SD) . Συσχετίσεις μεταξύ κλινικών χαρακτηριστικών και αυτοαντισώματα APE1 ή αντιγόνου αξιολογήθηκαν από ανεξάρτητους

t-test

, chi-square test και μονόδρομη ανάλυση διακύμανσης. Η ένωση εκτιμήθηκε με δέκτης χρησιμοποιήθηκε για την αξιολόγηση της ευαισθησίας και της ειδικότητας που λειτουργούν χαρακτηριστικό (ROC) καμπύλη. δύναμης συσχέτισης εκτιμήθηκε με τη δοκιμασία συσχέτισης Spearman. Συσχετίσεις μεταξύ των επιπέδων APE1-AAbs της πριν και μετά τη χημειοθεραπεία αναλύθηκαν από ζεύγη

t-test

. Σε όλους τους υπολογισμούς,

σ

& lt? 0,05 θεωρήθηκε ως στατιστικά σημαντική. Όλες οι στατιστικές διαδικασίες πραγματοποιήθηκαν με τη χρήση GraphPad Prism λογισμικό, έκδοση 5.0 και το λογισμικό SPSS, έκδοση 13.0 για Windows.

Αποτελέσματα

Αναγνώριση του ορού APE1-AAbs στους υγιείς μάρτυρες και ασθενείς με ΜΜΚΠ

Χρησιμοποιώντας δείγματα ορού για dot blot και Western μπουλόνι αναλύσεις, βρήκαμε ότι και στις δύο NSCLC ασθενείς και υγιείς μάρτυρες, αυτοαντισώματα στον ορό αναγνωρίζεται καθαρίστηκε APE1-His πρωτεΐνη σύντηξης και της πρωτεΐνης APE1 σε Α549 ολόκληρο λύει κυττάρου (Εικ. 1Α και 1Β ). Επιπλέον, τα ανοσοαντιδραστικά τελεία και μπάντα σήματα από τους ασθενείς με NSCLC ήταν ισχυρότερη από τις υγιείς ελέγχους. Αυτά τα αποτελέσματα πρότειναν ότι APE1-AAbs μπορεί να ανιχνευθεί στον ορό τόσο από τους ασθενείς με NSCLC και υγιείς μάρτυρες.

Α, Αντιπροσωπευτικά αποτελέσματα ανίχνευσης ορών APE1-AAbs με προσδιορισμό στυπώματος κηλίδας. Λωρίδες 1~5: ορό υγιών ατόμων. Λωρίδες 6~10: στον ορό των ασθενών με NSCLC. Β, ορού APE1-AAbs υγιών και ασθενών NSCLC ανιχνεύθηκαν με ανάλυση κηλίδας Western. Λωρίδα Μ, δείκτες βάρους πρωτεΐνη μοριακού? APE1, πρωτεΐνη σύντηξης APE1 με την ετικέττα του? Α549, συνολικής κυτταρικής πρωτεΐνης που εξάγεται από κύτταρα Α549? Anti-His, η πρωτεΐνη σύντηξης APE1 ανιχνεύεται από το αντίσωμα Του.

Η

Η κατανομή των APE1-AAbs στον ορό των υγιών μαρτύρων και NSCLC Ασθενείς

Σύμφωνα με τα δημογραφικά χαρακτηριστικά και τα κλινικά χαρακτηριστικά των NSCLC ασθενείς και υγιείς μάρτυρες (που περιγράφεται στον πίνακα 1), δεν υπήρχε στατιστική διαφορά στην κατανομή της ηλικίας, του φύλου και της κατάστασης του καπνίσματος μεταξύ των δύο ομάδων. Έμμεση μέθοδος ELISA κτίστηκε (που περιγράφεται στο Σχ. S1) και χρησιμοποιήθηκε για την ανίχνευση του επιπολασμού των αυτοαντισωμάτων ορού έναντι APE1. Μεταξύ των 292 ασθενείς με ΜΜΚΠ, ο μέσος όρος με SD συγκέντρωσης APE1-AAbs ήταν 0,79 ± 0,40 (OD

450), η οποία ήταν σημαντικά υψηλότερη από 0,47 ± 0,22 (OD

450) σε υγιείς μάρτυρες (

p

= 0.000,

t

-τεστ) (Εικ. 2). Τα επίπεδα της APE1-AAbs έδειξε μια κανονική κατανομή.

Μεταξύ 292 ασθενών με NSCLC, η μέση με SD συγκέντρωσης APE1-AAbs ήταν 0,79 ± 0,40 (OD

450), η οποία ήταν σημαντικά υψηλότερη από 0,47 ± 0.22 (OD

450) σε υγιείς εθελοντές (

σ

= 0.000,

t

-τεστ).

η

επίσης, διερευνήθηκε η σχέση μεταξύ APE1- AAbs και τα κλινικά χαρακτηριστικά. Μεταξύ 300 υγιείς μάρτυρες, ο μέσος όρος με SD συγκέντρωσης APE1-AAbs υγιών καπνιστών ήταν 0,47 ± 0,01 (OD

450), η οποία ήταν σημαντική διαφορά με τους μη καπνιστές υγιών ελέγχων (0,48 ± 0,003, OD

450) (

σ

= 0,679,

t

-τεστ). Αυτά τα αποτελέσματα έδειξαν ότι τα επίπεδα ορού APE1-AAbs φάνηκε να μην ανταποκρίνεται στην κατάσταση του καπνίσματος. Επιπλέον, τα αποτελέσματα αποκάλυψαν ότι ο ορός APE1-AAbs των ασθενών με NSCLC δεν σχετίζεται με την κλινικές παραμέτρους όπως το φύλο, διαφορετικά στάδια TNM και ιστοπαθολογικές μορφές, συμπεριλαμβανομένης της κατάστασης του καπνίσματος, όπως φαίνεται στον Πίνακα 2 (

σ

& gt? 0,05) . Αν και οι ασθενείς στο στάδιο IV είχαν υψηλότερο APE1-AAbs θετικό ποσοστό (71/172, 41.28%) από ό, τι στο στάδιο ΙΙΙ (27/81, 33.33%), η διαφορά δεν ήταν στατιστικά σημαντική ((

σ

& gt ? 0,05)

Η

Η διαγνωστική αξία του APE1-AAbs σε NSCLC

Εμείς διερευνηθεί περαιτέρω το δυναμικό διαγνωστική αξία των APE1-AAbs σε NSCLC με βάση την αρχή της τιμής αποκοπής [.. ,,,0],30], το επίπεδο αποκοπής των APE1-AAbs υπολογίστηκε ως μέση τιμή + 2SD (0,47 + 2 χ 0,22 = 0,91) από 300 δείγματα ορού από υγιείς ελέγχους. Έτσι, 113 (38,70%) NSCLC ασθενών, έναντι 8 (2,67%) υγιείς έλεγχοι, ορίστηκαν ως APE1-AAbs θετική, η οποία έδειξε ότι η διαφορά μεταξύ των δύο ομάδων ήταν σημαντική (

σ

= 0.000,

chi-square

test).

η απόδοση όλων των δειγμάτων ορού συνοψίζεται με μια καμπύλη ROC. η προγνωστική απόδοση του επιπέδου APE1-AAbs προσδιορίστηκε από τη γραφική παράσταση της ευαισθησίας (αληθώς θετικά) έναντι 1-ειδικότητα (ψευδώς θετικές) τιμές. Για κάθε πιθανή περικοπή σημείο, η προκύπτουσα ευαισθησία και η ειδικότητα υποδείχθηκαν ως σημείο στο γράφημα. Η περιοχή κάτω από την καμπύλη (AUC) ήταν 0,745 (Εικ. 3), γεγονός που υποδηλώνει ότι η APE1-AAbs ήταν σημαντική ως μια πιθανή διαγνωστική βιοδείκτη.

συγκεντρώσεων του ορού των επιπέδων APE1-AAbs μεταξύ 292 ασθενών με NSCLC και 300 υγιείς έλεγχοι προσδιορίστηκαν με ELISA. Οι διαγνωστικές δυνατότητες της APE1-AAbs αξιολογήθηκαν από τις καμπύλες ROC. Η τιμή AUC ήταν 0,745.

Η

Ανάλυση συσχέτισης μεταξύ APE1-AAbs, Ορός APE1 Αντιγόνου και APE1 Protein Expression στον NSCLC ιστοί

Λαμβάνοντας υπόψη ότι για να συμβεί η αντίδραση APE1-AAbs, η APE1 αντιγόνο πρέπει να ανιχνευθεί για να δείξει τη σχέση τους. Ένα σύνολο 42 ιστών NSCLC διερευνήθηκαν την έκφραση της πρωτεΐνης χρησιμοποιώντας APE1 ανοσοϊστοχημεία. χρώση APE1 παρατηρήθηκε τρία υποκυτταρικές θέσεις σε ιστούς όγκων: τον πυρήνα (8/42, 19.05%), στο κυτταρόπλασμα (3/42, 7,14%) και τα δύο στον πυρήνα και το κυτταρόπλασμα (31/42, 73.81%), όπως φαίνεται στο Σχ . 4 και στον Πίνακα S1. Τα επίπεδα APE1-AAbs ορό του πυρήνα ομάδα έκφραση δεν ήταν στατιστικά σημαντική διαφορά με την έκτοπη έκφραση ομάδα (συμπεριλαμβανομένων κυτταρόπλασμα Η έκφραση του και του πυρήνα /κυτταροπλάσματος συνέκφραση) (

σ

= 0.610, φαίνονται στον Πίνακα S1). Έξι NSCLC περιπτώσεις (15%) έδειξε ισχυρή έκφραση APE1, 20 περιπτώσεις (50%) και 12 περιπτώσεις (30%) έδειξαν μέτρια και ασθενής έκφραση, αντίστοιχα. Η υψηλή έκφραση APE1 (σημειώσει 2 και 3) και χαμηλή έκφραση (σκορ 0 και 1) σε ιστούς NSCLC είχαν δείξει καμία σημαντική διαφορά μεταξύ ηλικία, το φύλο, το κάπνισμα, ιστολογικό τύπο και τα στάδια ΤΔΔ (

σ

& gt? 0.05,

chi-square test

, φαίνονται στον πίνακα S2), τα οποία ήταν η ίδια με την προηγουμένως πελατών [24], [31]. Είναι ενδιαφέρον ότι, ένας θετικός συσχετισμός μεταξύ ορού APE1-AAbs και η έκφραση πρωτεΐνης APE1 σε ιστούς NSCLC βρέθηκε, είναι στατιστικά σημαντική (

ρ

& lt? 0.001, Spearman) και με το συντελεστή συσχέτισης & gt? 0,50, όπως φαίνεται στον πίνακα S1.

Εκπρόσωπος APE1 ανοσοχρώση των ιστών NSCLC. χρώση APE1 παρατηρήθηκε τρία υποκυτταρικές θέσεις σε ιστούς όγκων: ο πυρήνας, το κυτταρόπλασμα και οι δύο στον πυρήνα και το κυτταρόπλασμα. Τα δείγματα βαθμολογήθηκαν ως ακολούθως: 0, απουσία ή ποσοστό θετικών κυττάρων μικρότερη από 25%? 1, το ποσοστό θετικών κυττάρων μεταξύ 25% και 50%? 2, το ποσοστό θετικών κυττάρων μεταξύ 50% και 75%? 3, το ποσοστό θετικών κυττάρων περισσότερα than75%.

Η

Επίσης, αναλύσαμε το αντιγόνο APE1 ορού σε 137 ασθενείς με ΜΜΚΠ που είχαν δοκιμαστεί για APE1-AAbs χρησιμοποιώντας βελτιωμένη δοκιμασία σάντουιτς ELISA. Η μέση με SD της συγκέντρωσης αντιγόνου APE1 στον ορό ήταν 0.73 ± 0.41 (OD

450), και δεν υπήρχε σημαντική διαφορά μεταξύ του αντιγόνου στον ορό APE1 και κλινικά χαρακτηριστικά (

σ

& gt? 0,05, φαίνονται στον Πίνακα S3 ). Όπως ήταν αναμενόμενο, βρήκαμε APE1 αντιγόνου και APE1-AAbs στο περιφερικό αίμα ήταν επίσης θετικά, με το συντελεστή συσχέτισης που είναι & gt? 0,50 και στατιστικά σημαντική (ρ & lt? 0.001, Spearman). Αυτά τα ευρήματα υποδεικνύουν ότι οι εκφράσεις του APE1 αυτοαντισωμάτων είχαν στενή σχέση με τα επίπεδα του αντιγόνου APE1.

Αύξηση του ορού APE1-AAbs μεταξύ πριν και μετά τη χημειοθεραπεία σχετίζεται με την θεραπευτική αποτελεσματικότητα

Για να προσδιορίσετε η συσχέτιση μεταξύ του επιπέδου του ορού APE1-AAbs και θεραπευτική ανταπόκριση, τα επίπεδα APE1-AAbs μεταξύ προ- και μετα-χημειοθεραπεία αναλύθηκαν σε 91 ασθενείς με NSCLC που έλαβαν 2 κύκλους σχήματος με βάση την πλατίνα. Σε γενικές γραμμές, το επίπεδο APE1-AAbs ορού αυξήθηκαν σημαντικά μετά από τη χημειοθεραπεία (

σ

= 0,008) (Σχ. 5Α). Μεταξύ των 91 ασθενών, 11 (12,09%) των ασθενών επιτεύχθηκε PD, 38 (41.76%) των ασθενών επιτεύχθηκε SD, 30 (32,97%) των ασθενών επιτυγχάνεται PR, και 12 (13,19%) των ασθενών επιτεύχθηκε CR. Προ-χημειοθεραπεία ορό APE1-AAbs των ασθενών οι οποίοι ήταν ευαίσθητοι στη χημειοθεραπεία ήταν σημαντικά χαμηλότερο από εκείνο των μη-ανταποκρινόμενους (

σ

= 0,000) (Εικ. 5Β). Ορός APE1-AAbs των διασωστών μετά τη χημειοθεραπεία ήταν σημαντικά αυξημένη (

σ

= 0.000), ενώ APE1-AAbs των μη ανταποκρινόμενοι δεν μεταβλήθηκε σημαντικά (

σ

= 0,393), όπως φαίνεται στο Σύκο. 5 και στον Πίνακα 3.

Το επίπεδο APE1-AAbs ορό ήταν πολύ υψηλότερη στην κακή ομάδα χημειοθεραπευτικών ανταπόκριση σε σχέση με την καλή ομάδα απόκριση (

σ

= 0.000). Υπήρχε μια σημαντική διαφορά στην ομάδα με καλή βάση την πλατίνα χημειοθεραπευτικούς απόκριση πριν και μετά τη χημειοθεραπεία (

ρ

& lt? 0.001), ενώ δεν υπήρχε διαφορά στην ομάδα με φτωχή βάση την πλατίνα χημειοθεραπευτικούς απόκριση πριν και μετά χημειοθεραπεία (

σ

= 0,393). * Πριν από τη χημειοθεραπεία έναντι μετά τη χημειοθεραπεία (

σ

& lt? 0.001).

σ

αξία ελήφθησαν μετά τη σύγκριση των επιπέδων APE1-AAbs της πριν και μετά τη χημειοθεραπεία, όπως καθορίζεται από ζεύγη

t-test

.

Η

Συζήτηση

Πειραματικές μελέτες έχουν δείξει ότι τα αυτοαντισώματα είναι πιθανοί βιοδείκτες για την έγκαιρη διάγνωση του καρκίνου και προγνωστικούς παράγοντες για την ανταπόκριση στη θεραπεία. Ωστόσο, επειδή τα αυτοαντισώματα είναι μέρος της φυσιολογικής ανοσολογικής απόκρισης, υποψήφιος αυτοαντισώματα για την έγκαιρη ανίχνευση και την πρόγνωση των καρκίνων του καρκίνου θα πρέπει να είναι κατά ογκογόνο σχετίζονται αντιγόνα. Από την άποψη αυτή, αυτοαντισώματα προς πρωτεΐνες επιδιόρθωσης DNA είναι υποσχόμενοι υποψήφιοι. πρωτεΐνες επιδιόρθωσης DNA παίζουν κρίσιμους ρόλους όχι μόνο στη διατήρηση γονιδιωματική σταθερότητα, αλλά και στην εξέλιξη του καρκίνου του πνεύμονα [32], [33]. Αμφότερα τα αντιγόνα και αντισώματα σε αντιγόνα εμπλέκονται σε οδούς επιδιόρθωσης του DNA, όπως το ρ53 [34] – [36] και Ku [37] – [39], έχουν επισημανθεί ως παράγοντες που εμπλέκονται στην ογκογένεση και ως βιοδείκτες στον καρκίνο του πνεύμονα, καρκίνο του μαστού, και λευχαιμία.

Ως μία από τις πρωτεΐνες επιδιόρθωσης DNA, APE1 παίζει επίσης σημαντικό ρόλο στην επιβίωση των κυττάρων, και την υψηλή έκφραση του συσχετίζεται με τα χαρακτηριστικά του όγκου [40], [41]. Έχοντας τη διπλή λειτουργία τόσο της επιδιόρθωσης του DNA και τη δραστηριότητα οξειδοαναγωγής, δεν είναι μόνο υπεύθυνος για την επισκευή τόπους DNA AP που προκαλούνται από οξειδωτική και βλάβη αλκυλίωσης προκειμένου να διατηρηθεί γονιδιωματική ακεραιότητα [42], αλλά λειτουργεί επίσης και ως παράγοντας οξειδοαναγωγής ρυθμίζουν τη δραστηριότητα δέσμευσης DNA παραγόντων μεταγραφής όπως ρ53, NF-κΒ και ΑΡ-1 που παίζουν κρίσιμους ρόλους στην καταστολή της καρκινογένεσης και την εξέλιξη του όγκου [43], [44]. Χρησιμοποιώντας RT-PCR και ανοσοϊστοχημική χρώση, προηγούμενες μελέτες έχουν δείξει ότι οι αλλαγές στα επίπεδα έκφρασης APE1 ή /και τα πρότυπα σε ιστούς NSCLC και περιφερικού αίματος εμφανίστηκε στις αρχές της περιόδου της ογκογένεσης και είχαν στενή σχέση με την ανάπτυξη του όγκου, της προόδου, και δυσμενή πρόγνωση [31 ], [45], [46]. Αυτές οι μελέτες πρότειναν ότι APE1 αντιγόνο θα μπορούσε να είναι υποψήφια για προσυμπτωματικό έλεγχο του καρκίνου, η έγκαιρη διάγνωση βοηθητικό, και προγνωστική και προβλεπτική αξιολόγηση σε πολλούς καρκινικούς ιστούς, συμπεριλαμβανομένων NSCLC [47], [48]. Η παρούσα μελέτη επικυρώνει μία δοκιμασία για την ανίχνευση των αυτοαντισωμάτων APE1 τόσο στο περιφερικό αίμα ασθενών με NSCLC, καθώς και υγιείς μάρτυρες. Χρησιμοποιώντας ανοσοκηλίδωση και ανάλυση προσδιορισμού ELISA, δείξαμε ότι APE1 είναι ένα συγκεκριμένο αυτοάνοσο αντιγόνο που διεγείρει οργανισμούς για να δημιουργήσει αντι-APE1 αντισώματα. Τα στατιστικά σημαντικές συσχετίσεις μεταξύ APE1-AAbs και NSCLC αποδείχθηκε για πρώτη φορά.

Ο μηχανισμός του πώς η πρωτεΐνη APE1 προκαλεί η ανοσολογική απόκριση δεν είναι ακόμη απολύτως σαφές. Υποθέτουμε ότι ο πιθανός μηχανισμός είναι: η πλειοψηφία των καρκινικών ιστών έχουν APE1 υπερ-έκφραση και μετατόπιση. Το κύτταρο όγκου πολλαπλασιασμού είναι υπερβολικά γρήγορη. Με αυθόρμητα συνεχή κυτταρική απόπτωση και νέκρωση, ένας μεγάλος αριθμός των κυτταρικών πρωτεϊνών απελευθερώνονται στο αίμα και δεν μπορεί να αφαιρεθεί έγκαιρα. Το ανοσοποιητικό σύστημα ανιχνεύει τις κυτταρικές πρωτεΐνες που υπερεκφράζονται σε καρκινογένεση, κυτταροπλασματική translocalization, απορυθμισμένης σταθεροποίηση, και μετάλλαξης ή αλλοιωθεί υποβάθμισης και στη συνέχεια παράγει αυτοαντισώματα σε απόκριση της παρουσίας αυτών των αντιγόνων παρεκκλίνουσας [49]. Έτσι, προσπαθήσαμε να εξακριβώσει κατά πόσον διάφορα τοποθεσία έκφραση APE1 θα μπορούσαν να συμβάλουν σε γενιά APE1-AAbs, αλλά το αποτέλεσμα έδειξε ότι τα επίπεδα ορού APE1-AAbs μεταξύ της ομάδας έκφρασης πυρήνα και την έκτοπη ομάδα έκφραση ήταν καμία διαφορά (

p

= 0,610). Το αποτέλεσμα αυτό θα πρέπει να διερευνηθεί σε μεγαλύτερο μέγεθος δείγματος στο μέλλον. Λαμβάνοντας υπόψη ότι η επιβάρυνση του όγκου θα μπορούσε να προκαλέσει ένα υψηλό επίπεδο APE1-AAbs, εμείς θα διερευνήσει επίσης τις APE1-AAbs πριν και μετά τη χειρουργική επέμβαση σε περαιτέρω μελέτες μας αποδεικνύουν αυτή την υπόθεση.

Στη μελέτη μας, η παρουσία των APE1- AAbs έδειξαν την δυνατότητα χρήσης ως βιοδείκτη για NSCLC. Το εύρημα της έκφρασης APE1-AAbs στον ορό του 38,70% (113/292) των ασθενών με NSCLC ήταν στατιστικά σημαντικά υψηλότερη από εκείνη των υγιών μαρτύρων (2,67%, 8/300) (

σ

= 0.000). Η αξία της περιοχής κάτω από την καμπύλη ROC του APE1-AAbs ήταν 0,745, έχει νόημα για ένα μοντέλο πρόβλεψης, επειδή στην ανίχνευση ELISA, μια τιμή AUC της 0.7~0.9 (70% -90%) δηλώνει μέτρια συσχέτιση μεταξύ της πρόβλεψης και αληθινή έκβαση [ ,,,0],50]. Επιπλέον, η APE1-AAbs αποδείχθηκε ότι συσχετίζονται καλά με τα επίπεδα αντιγόνου APE1 τόσο σε ιστούς NSCLC και περιφερικό αίμα στην παρούσα μελέτη. Σημειώσαμε ότι η συσχέτιση μεταξύ της έκφρασης APE1 mRNA σε NSCLC ιστούς, φυσιολογικούς ιστούς και το αίμα είχε αποδειχθεί ότι συσχετίζεται σημαντικά, γεγονός που πρότεινε ότι η μέτρηση των επιπέδων mRNA του APE1 σε δείγματα περιφερικού αίματος θα μπορούσε αντί των δειγμάτων ιστού για τον προσδιορισμό προγνωστικούς και προγνωστικοί παράγοντες σε NSCLC [31]. Κατά συνέπεια, θα μπορούσε να επιτρέψει να δοκιμάσει απλά με APE1-AAbs σε δείγματα περιφερικού αίματος αντί των δειγμάτων ιστού για να καθορίσει τη διάγνωση και προγνωστικούς παράγοντες σε ασθενείς με NSCLC.

Ωστόσο, αν και πολλά υποσχόμενη, αυτά τα νέα ευρήματα απαιτούν περαιτέρω έρευνα και προσεκτική ερμηνεία προκειμένου να επιτευχθεί αποφασιστική συμπεράσματα, επειδή η διαφορά των επιπέδων APE1-AAbs ορού μεταξύ NSCLC και υγιών μαρτύρων δεν ήταν πολύ υψηλό. Οι διακυμάνσεις της APE1-AAbs στον πληθυσμό της μελέτης είναι εξαιρετικά υψηλό, αν και τα επίπεδα ορού APE1-AAbs έδειξε μια κανονική κατανομή. Οι λόγοι για αυτές είναι ασαφής, αλλά μπορεί να σχετίζεται με την επιλογή των ασθενών, οι διαφορές στην ανίχνευση επιτόπων, ή οι περιορισμοί της συστοιχίας και η φύση των αποκρίσεων αυτοαντισωμάτων στον καρκίνο. Αξίζει να σημειωθεί ότι APE1-AAbs σε διάφορες μορφές καρκίνου, συμπεριλαμβανομένων των πιο εκτεταμένη δείγματα καρκίνου του πνεύμονα, πρέπει να επαληθεύονται, προκειμένου να διαπιστωθεί η κλινική σημασία των αντι-APE1 αντισώματα. Περαιτέρω μελέτες σχετικά με το εάν APE1-AAbs έχουν διαγνωστική αποτελεσματικότητα ή μπορεί να συνδυαστεί επωφελώς με άλλους δείκτες όγκου θα πρέπει να συνοψίζονται στην επόμενη μελέτη μας.

Ιστολογίας είναι ένα βασικό διαγνωστικό δείκτη σε ασθενείς με ΜΜΚΠ [51]. Ως φαινότυπο, μπορεί να είναι πιο αναπαραγώγιμο και συνεπή σε σχέση με πληροφορίες για τις συνήθειες καπνίσματος, ειδικά σε αυτό το είδος της αναδρομικής μελέτης [23]. Mitsudomi

et al

ανέφεραν ότι αυτοαντισώματα p53 ήταν σημαντικά πιο διαδεδομένη στους ασθενείς με καρκίνωμα πλακωδών κυττάρων (27%) σε σχέση με εκείνους με αδενοκαρκίνωμα (15%) (

σ

= 0,05), ενώ υπάρχει ήταν επίσης στατιστικά σημαντική διαφορά στην επίπτωση των αυτοαντισωμάτων p53 μεταξύ της ομάδας πρώιμο στάδιο της νόσου (στάδιο Ι και II) (14%) και η προηγμένη ομάδα νόσο (στάδιο IIIa~IV, 30%) (

ρ = 0

0.0079) [52]. Οι Villin1 και CK18 αυτοαντισώματα θεωρούνται ότι είναι χρήσιμοι δείκτες στην αδενοκαρκίνωμα του πνεύμονα [53]. Ως εκ τούτου, ερευνήσαμε τη σχέση μεταξύ των επιπέδων της APE1-AAbs και histotype καρκίνο του πνεύμονα. Βρήκαμε ότι το επίπεδο του ορού APE1-AAbs δεν σχετίζεται με την ιστοπαθολογική τύπους (ακανθοκυτταρικό καρκίνωμα ή αδενοκαρκίνωμα) και τα διάφορα στάδια ΤΝΜ ή κλινικές παραμέτρους, όπως το φύλο και το κάπνισμα. Αυτά τα δεδομένα ήταν παρόμοια με προηγούμενες μελέτες της APE1 πρωτεΐνης σε ιστούς καρκίνου του πνεύμονα [31], [54].

υψηλή έκφραση APE1 πρωτεΐνης έχει αναφερθεί να συνδέσει στενά με αντίσταση σισπλατίνη στον καρκίνο των ωοθηκών [29], το κεφάλι και τραχήλου πλακωδών κυττάρων [31], και NSCLC [26]. Τα δεδομένα σε αυτό το χειρόγραφο επιβεβαιώνουν περαιτέρω αυτή τη σχέση μεταξύ APE1 και με βάση την πλατίνα χημειοαντίσταση. Πριν τη χημειοθεραπεία, παρατηρήσαμε ότι τα επίπεδα APE1-AAbs των ομάδων CR + PR που ήταν ευαίσθητα σε θεραπεία με βάση την πλατίνα ήταν σημαντικά χαμηλότερη από εκείνη των ομάδων SD + PD που ήταν ανθεκτικά σε χημειοθεραπεία (

p =

0.000). Επιπλέον, τα επίπεδα APE1-AAbs αυξήθηκαν σημαντικά μετά τη χημειοθεραπεία, ειδικά στην ομάδα θετική απόκριση (

σ

= 0,000). Μέχρι σήμερα, ο μηχανισμός της APE1 που εμπλέκονται στην αντοχή στην πλατίνα χημειοθεραπεία με βάση παραμένει ασαφής. Chattopadhyay

κ.ά.

έδειξε ότι ακετυλιωμένα APE1 μπορούσε σταθερώς να αλληλεπιδρούν με Y-box-πρωτεΐνη σύνδεσης 1 και την ενίσχυση της δέσμευσης του με το στοιχείο Y-box που οδηγεί στην ενεργοποίηση του γονιδίου ανθεκτικότητας σε πολλά φάρμακα MDR1 [55]. Wu

κ.ά.

ανέφεραν ότι κυτταροπλασματική APE1 θα μπορούσε να ενισχύσει πνεύμονα κακοήθειας του όγκου μέσω της ενεργοποίησης του ΝΡ-κΒ, γεγονός που υποδηλώνει ότι ο συνδυασμός σισπλατίνης με ειδικούς αναστολείς οξειδοαναγωγής θα μπορούσε να βελτιώσει χημειοθεραπευτικό απόκριση [56]. Υποθέτουμε ότι τα αντιδραστήρια πλατίνα μπορεί να σκοτώσει τα κύτταρα καρκίνου του πνεύμονα, επάγουν κυτταρική νέκρωση, απελευθέρωση APE1 πρωτεΐνη από το βάρος του όγκου στο εξωκυτταρικό περιβάλλον και την κυκλοφορία, και στη συνέχεια ενεργοποιούν την ανοσοαπόκριση να αναπτύξουν APE1-AAbs. Θεωρητικά, ανθεκτικά χημειοθεραπεία οι ασθενείς θα έχουν λιγότερα καρκινικά κύτταρα θάνατο μετά τη θεραπεία, απελευθερώνουν λιγότερο αντιγόνο APE1 στο αίμα και να προκαλέσουν σε μια μικρότερη αύξηση του ορού APE1-AAbs. Αντίθετα, οι ασθενείς που είναι ευαίσθητοι σε πλατίνα χημειοθεραπεία με βάση θα πρέπει να περιέχει περισσότερο APE1-AAbs στο περιφερικό αίμα τους μετά τη θεραπεία. Επιπλέον, πριν από τη χημειοθεραπεία, οι ασθενείς έχουν περισσότερες APE1-AAbs στο περιφερικό αίμα, αναφέροντας ότι περισσότερο APE1 πρωτεΐνη είναι παρούσα σε ιστούς όγκου σε σύγκριση με τον φυσιολογικό ιστό, οδηγώντας έτσι σε αντίσταση στη θεραπεία με βάση την πλατίνα. Τα δεδομένα μας επαληθεύονται ακριβώς αυτά τα σημεία. Ως εκ τούτου, πιστεύουμε ότι οι APE1-AAbs μπορεί να χρησιμοποιηθεί για να προβλέψει την απόκριση σε χημειοθεραπεία σε NSCLC πριν και μετά τη θεραπεία με βάση την πλατίνα.

Εν κατακλείδι, εντοπίσαμε ότι αυτοαντισώματα έναντι APE1 πρωτεΐνη ήταν παρούσα σε ορό τόσο από καρκίνο του πνεύμονα ασθενείς και υγιείς μάρτυρες.