Abstract

Ο καρκίνος-όρχεων (CT) οικογένεια αντιγόνων εκφράζεται σε μία ποικιλία κακοηθών νεοπλασμάτων. Στις περισσότερες περιπτώσεις, δεν αντιγόνο CT βρίσκεται σε φυσιολογικούς ιστούς, εκτός από τους όρχεις, καθιστώντας τα ιδανικά στόχοι για ανοσοθεραπεία καρκίνου. Μια πλήρης ανάλυση της έκφρασης του αντιγόνου CT δεν έχει ακόμη αναφερθεί στον καρκίνο του προστάτη. MAGE-C2 /CT-10 είναι ένα νέο CT αντιγόνο. Ο στόχος αυτής της μελέτης ήταν να αναλύσει την έκταση και προγνωστική σημασία του MAGE-C2 έκφραση /πρωτεΐνης CT10 στον καρκίνο του προστάτη. 348 καρκινώματα του προστάτη από συνεχόμενες ριζικές προστατεκτομές, 29 ευνουχισμό καρκίνο του προστάτη ανθεκτικού, 46 μεταστάσεις, και 45 της καλοήθους υπερπλασίας ανοσοϊστοχημικά αναλύθηκαν για την έκφραση MAGE-C2 /CT10 χρησιμοποιώντας μικροσυστοιχίες ιστό. έκφραση Πυρηνική MAGE-C2 /CT10 ταυτοποιήθηκε σε μόνο 3,3% των καρκινωμάτων του προστάτη πρωτογενή. έκφραση της πρωτεΐνης MAGE-C2 /CT10 ήταν σημαντικά πιο συχνή σε μεταστατικό (16,3% θετικότητα) και ο ευνουχισμός ανθεκτικό καρκίνο του προστάτη (17% θετικότητα? p & lt? 0.001). έκφραση της πυρηνικής MAGE-C2 /CT10 αναγνωρίστηκε ως προγνωστικός παράγοντας της βιοχημικής υποτροπής μετά από ριζική προστατεκτομή (p = 0,015), η οποία ήταν ανεξάρτητη από προεγχειρητικό PSA, το σκορ Gleason, το στάδιο του όγκου, και την κατάσταση χειρουργική περιθώριο στην πολυπαραγοντική ανάλυση (p & lt? 0,05). έκφραση MAGE-C2 /CT10 στον καρκίνο του προστάτη συσχετίζεται με το βαθμό κακοήθειας και δείχνει έναν υψηλότερο κίνδυνο για βιοχημικές υποτροπής μετά από ριζική προστατεκτομή. Περαιτέρω, τα αποτελέσματα δείχνουν MAGE-C2 /CT10 ως πιθανός στόχος για επικουρική και παρηγορητική ανοσοθεραπείας σε ασθενείς με καρκίνο του προστάτη

Παράθεση:. Νοη Boehmer L, Keller L, Mortezavi Α, Προβεντσάνο Μ, Σάις G, Hermanns Τ, et al. (2011) MAGE-C2 /CT10 η έκφραση της πρωτεΐνης αποτελεί ανεξάρτητο προγνωστικό της υποτροπής του καρκίνου του προστάτη. PLoS ONE 6 (7): e21366. doi: 10.1371 /journal.pone.0021366

Επιμέλεια: Ilya Ulasov, University of Chicago, Ηνωμένες Πολιτείες της Αμερικής

Ελήφθη: 18 Γενάρη του 2011? Αποδεκτές: 28 Μαΐου 2011? Δημοσιεύθηκε: 6, Ιουλίου, 2011

Copyright: © 2011 νοη Boehmer et al. Αυτό είναι ένα άρθρο ανοικτής πρόσβασης διανέμεται υπό τους όρους της άδειας χρήσης Creative Commons Attribution, το οποίο επιτρέπει απεριόριστη χρήση, τη διανομή και την αναπαραγωγή σε οποιοδήποτε μέσο, ​​με την προϋπόθεση το αρχικό συγγραφέα και την πηγή πιστώνονται

Χρηματοδότηση:. Αυτό το έργο υποστηρίχθηκε από Atlantic Philanthropies (Νέα Υόρκη, ΗΠΑ), Cancer Research Institute, το Ίδρυμα Επιστημών για την Ογκολογία, το Ίδρυμα Hanne Λίμπερμαν (Ζυρίχη), η Χάρτμαν Müller Ίδρυμα (Ζυρίχη), η Ζυρίχη Cancer League (Ζυρίχη), και ο Terry Fox Ίδρυμα (Γουίνιπεγκ, Καναδάς). Οι χρηματοδότες δεν είχε κανένα ρόλο στο σχεδιασμό της μελέτης, τη συλλογή και ανάλυση των δεδομένων, η απόφαση για τη δημοσίευση, ή την προετοιμασία του χειρογράφου

Αντικρουόμενα συμφέροντα:.. Οι συγγραφείς έχουν δηλώσει ότι δεν υπάρχουν ανταγωνιστικά συμφέροντα

Εισαγωγή

Όταν ο καρκίνος του προστάτη είναι εντοπισμένος στον προστάτη, η θεραπεία εκλογής είναι η προστατεκτομή ή ακτινοβολία. Ωστόσο, όταν τα υποτροπές όγκου ή είναι ήδη μεταστατική κατά τη διάγνωση, θεραπεία είναι προβληματική. Ο ευνουχισμός ήταν η κύρια θεραπευτική επιλογή για ανεμπόδιστη νόσο για περισσότερο από 50 χρόνια. Ωστόσο, οι ασθενείς συχνά την πρόοδο μετά την ενδοκρινική θεραπεία [1]. Εμφάνισης ανθεκτικότητας ευνουχισμού σχετίζεται με κακή πρόγνωση και μόνο παρηγορητική θεραπεία είναι διαθέσιμη σε τέτοια προχωρημένα στάδια όγκου. Η ανοσοθεραπεία στόχευση του καρκίνου των όρχεων είναι (CT) αντιγόνα που υπόσχεται νέες μεθόδους θεραπείας για τον προχωρημένο καρκίνο του πνεύμονα, καρκίνο των ωοθηκών και ασθενείς με μελάνωμα [2], [3], [4], [5], [6], [7], [8 ], [9], αλλά CT αντιγόνα, εκτός NY-ESO-1 [10], δεν έχουν χρησιμοποιηθεί ως στόχοι εμβόλιο για τον καρκίνο του προστάτη.

στις περισσότερες περιπτώσεις, CT αντιγόνα εκφράζονται μόνο σε γεννητικά κύτταρα του ο ανθρώπινος όρχις. Μέχρι σήμερα, περισσότεροι από 100 CT αντιγόνα έχουν ταυτοποιηθεί, τα οποία ανήκουν σε τουλάχιστον 44 ξεχωριστές οικογένειες. CT αντιγόνα χαρτογράφηση σε χρωμόσωμα Χ αναφέρονται ως αντιγόνα ΟΤ-Χ και να διακρίνονται από μη-X CT αντιγόνα που βρίσκονται σε άλλα χρωμοσώματα [11]. Η έκφραση των αντιγόνων CT-X ποικίλλει σε μεγάλο βαθμό μεταξύ των διαφόρων τύπων όγκου και είναι πιο διαδεδομένη σε ανώτερο βαθμό και προχωρημένους όγκους στάδιο [12], [13], [14], [15]. Είναι πιο συχνά εκφράζονται σε μελανώματα [16], της ουροδόχου κύστης [17], [18], του πνεύμονα [12], των ωοθηκών [19], και του ηπατοκυτταρικού καρκινώματος [20], και δεν είναι συχνές σε νεφροκυτταρικό καρκίνωμα [21], ο καρκίνος του παχέος εντέρου [22], και αιματολογικές κακοήθειες [23].

Είναι ενδιαφέρον, ένα μέλος από τα αντιγόνα CT,

MAGE-A11

φαίνεται να συμβάλλουν άμεσα στην ανάπτυξη της ανάπτυξης του όγκου του προστάτη ανεξάρτητο των ανδρογόνων διεγείροντας η δραστικότητα του υποδοχέα ανδρογόνων [24].

MAGE-A11

η έκφραση ρυθμίζεται από την κατάσταση μεθυλίωσης του DNA: σε ευνουχισμό επαναλαμβανόμενες όγκους του προστάτη,

MAGE-A11

ρυθμίζεται προς τα πάνω, συσχετίζοντας με υπομεθυλίωση του διακριτές θέσεις CpG πλησίον της μεταγραφικής θέσης έναρξης της το γονίδιο, αντίθετα, η κατάσταση μεθυλίωσης των άλλων περιοχών του

MAGE-A11

προαγωγού CpG νησίδα δεν συσχετίζεται με την έκφραση του γονιδίου [24]. Επιπλέον, η θεραπεία των κυττάρων του προστάτη με δεκιταβίνη προκαλεί ρύθμιση προς τα πάνω του

MAGE-A11

έκφραση [24], [25]

Μελέτες έκφρασης του mRNA ανάλυση. [26], [27], [28] , [29], [30] και ανοσοϊστοχημικές αναλύσεις [31], [32], [33] αρκετών CT αντιγόνων έχουν διεξαχθεί. Υπάρχουν ενδείξεις ότι η εξέλιξη NY-ESO-1 έκφραση στις αλλαγές του όγκου από αρνητικό σε θετικό κατά τη διάρκεια της εξέλιξης της νόσου [34]. Στον καρκίνο του προστάτη, η οποία είναι γνωστό ότι είναι μια σχετικά αργή πρόοδο της νόσου, η έκφραση κυμαίνεται εξαρτώμενη από 5% στάδιο έως 30% [29], [31]. Πρόσφατα, ένα αντίσωμα έναντι MAGE-C2 /CT-10, μία νέα CT αντιγόνο έχει παραχθεί [35]. Το MAGE-C2 /CT-10 γονίδιο δείχνει σημαντική ομολογία με την MAGE C1-CT-7 γονίδιο και /αμφότερα τα γονίδια χάρτη κοντά στο χρωμόσωμα Xq27.13. MAGE-C2 /CT-10 ταυτοποιήθηκε αρχικά σε μια κυτταρική γραμμή μελανώματος. Μέχρι τώρα, η έκφραση MAGE-C2 /CT10 mRNA στον καρκίνο του προστάτη αναλύθηκε σε μερικά δείγματα προστάτη, μόνο:. Σε μια μελέτη με Prikler κ.ά., 12 ευνουχισμός-ανθεκτικές και οκτώ ευαίσθητες όγκοι ορμόνη ήταν CT10 αρνητικά. Επιπλέον, Lucas et al. βρέθηκε ένα από τα δέκα τους ιστούς του καρκίνου του προστάτη είναι CT10 θετική [28], [30].

Έχουμε αναφερθεί MAGE-C2 /CT-10 σε ένα μεγάλο ποσοστό του ηπατοκυτταρικού καρκινώματος (HCC) [20]. Ενώ δοκιμή του MAGE-C2 /CT-10 αντισώματος σε ένα microarray ιστού πολλαπλών όγκων, εντοπίσαμε MAGE-C2 /έκφραση πρωτεΐνης CT10 σε μεμονωμένες περιπτώσεις PCa. Με βάση αυτή την παρατήρηση, πραγματοποιήσαμε μια ολοκληρωμένη ιστού μικροσυστοιχιών με βάση την ανάλυση του προστάτη. Έχουμε αποδείξει ότι η έκφραση της πρωτεΐνης του MAGE-C2 /CT10 βρίσκεται σε σημαντικό υποσύνολο του καρκίνου του προστάτη, κυρίως μεταστατικών και ανθεκτικών ευνουχισμός πρωτογενείς όγκους. Δείχνουμε επίσης ότι η έκφραση MAGE-C2 /CT10 αναγνωρίστηκε ως προγνωστικός παράγοντας της βιοχημικής υποτροπής μετά από ριζική προστατεκτομή, ανεξάρτητα από γνωστούς παράγοντες κινδύνου.

Υλικά και Μέθοδοι

μικροσυστοιχίες του προστάτη ιστό

ένα σύνολο 468 φορμόλη σταθερά, ιστούς παραφίνης προστάτη ανακτήθηκε από τα αρχεία του Ινστιτούτου Χειρουργικής Παθολογίας, Πανεπιστήμιο της Ζυρίχης, Ελβετία και μικροσυστοιχιών ιστού (TMA) κατασκευάστηκε όπως περιγράφηκε προηγουμένως [36]. Η TMA περιελάμβανε μια σειρά από 348 συνεχόμενα (μη επιλεγμένο) ριζική προστατεκτομή δείγματα με καρκίνο του προστάτη, 29 ευνουχισμός ανθεκτικά προστάτη δείγματα καρκίνου, μεταστάσεις κόμβο 18 της λέμφου, 28 απομακρυσμένες μεταστάσεις (οστών, του πνεύμονα, της ουροδόχου κύστης) και 45 δείγματα με καλοήθη υπερπλασία. H & amp? E-βάφονται διαφάνειες όλα τα δείγματα ήταν επαναξιολογούνται από έμπειρους παθολόγους (P.J.W., Η.Μ.) για τον εντοπισμό αντιπροσωπευτικές περιοχές για την κατασκευή TMA. το στάδιο του όγκου και το σκορ Gleason της κλάσης του έχουν ανατεθεί σύμφωνα με τη Διεθνή Ένωση κατά του Καρκίνου (UICC) και τα κριτήρια WHO /ISUP [37]. Διάμεση παρακολούθηση της κοόρτης ήταν 71 μήνες (0-163). Τα ανεπεξέργαστα δεδομένα του μικροσυστοιχιών ιστού έχουν κατατεθεί στο πλαίσιο (σύνδεσμος θα σταλεί). Η καντονιών επιστημονική επιτροπή ηθικής της Ζυρίχης για την παθολογία (ΚΕΚ) ενέκρινε τη μελέτη και παραιτήθηκε από την ανάγκη για συναίνεση (Κωδ. Αρ STV-Nr-05/2007).

Η ανοσοϊστοχημεία

Η έκφραση της MAGE-C2 /CT10 αναλύθηκε ανοσοϊστοχημικά όπως αναφέρθηκε πρόσφατα [20]. Τα κλινικά και παθολογικά παραμέτρων των περιπτώσεων καρκίνου του προστάτη που περιλαμβάνονται στην ΤΜΑ συνοψίζονται στον Πίνακα S1. Διαδοχική 3 μm τομές κόπηκαν από το μπλοκ TMA και τοποθετούνται σε γυάλινες πλάκες (Super-Frost Plus, Menzel, Braunschweig, Γερμανία). Για ανοσοϊστοχημική χρώση ο Δείκτης Αναφοράς αυτοματοποιημένο σύστημα χρώσης Ventana (Ventana Medical Systems, Tucson, AZ) χρησιμοποιήθηκαν και Ventana αντιδραστήρια. Μετά αποπαραφίνωση σε ξυλόλιο, πλακίδια επανυδατώθηκαν σε μειούμενες συγκεντρώσεις αιθανόλης. Η ενδογενής υπεροξειδάση παρεμποδίστηκε με τη χρήση Ventana ενδογενούς υπεροξειδάσης εμποδίζοντας κιτ μετά ξεπλύνετε με απεσταγμένο νερό. Για αντιγόνο ανάκτηση πλακίδια θερμάνθηκαν με διάλυμα κλιματισμού κυττάρων (CC1, Ventana) σύμφωνα με τις οδηγίες του κατασκευαστή. Για την ανίχνευση του MAGE-C2 /CT-10, το mAb CT10 # 5 που δημιουργούνται προηγουμένως από την ομάδα μας [35], για την ανίχνευση του MAGE-C1 /CT7, ο κλώνος CT7-33, ϋΑΚΟ Α /δ και NY- ESO-1 ο κλώνος E978, ΖΥΜΕϋ απασχολούνταν και να προσαρμόζεται στο σύστημα Benchmark Ventana μετά την εκτέλεση ογκομετρήσεις (βέλτιστη αραίωση 1:100? 1:80, 1:50, αντίστοιχα). iVIEW-DAB χρησιμοποιήθηκε ως χρωμογόνο. Κανονική ορχικού ιστού επελέγη ως εσωτερικός θετικός έλεγχος για MAGE-C2 /CT10, MAGE-C1 /CT7 και ΝΥ-ΕδΟ-1 έκφρασης. έκφραση MAGE-C2 /CT10 ήταν πυρηνικά, MAGE-C1 /CT7 και ΝΥ-ΕδΟ-1 έκφραση ήταν κυτταροπλασματική και πυρηνική. Για αρνητικούς ελέγχους, το πρωτογενές αντίσωμα παραλείφθηκε. Δύο ερευνητές (L.v.B., Ε.Κ.) εκτελείται με τυφλό αξιολόγηση των διαφανειών για MAGE-C2 /CT10, MAGE-C1 /CT7 και ΝΥ-ΕδΟ-1 έκφρασης. Μη ερμηνεύσιμα αποτελέσματα, λόγω έλλειψης ιστού καρκινώματος, παρουσία νέκρωσης ή φλερτ τεχνούργημα, εξαιρέθηκαν από την ανάλυση. Τουλάχιστον 100 κύτταρα μετρήθηκαν σε κάθε πυρήνα TMA. Πυρηνική MAGE-C2 /CT10 ανοσοαντιδραστικότητα αξιολογήθηκε χρησιμοποιώντας ένα ημι-ποσοτική, βαθμιδωτή σύστημα βαθμολόγησης: αρνητική (0% των κυτταρικών πυρήνων κηλιδώθηκαν)? ασθενής πυρηνική χρώση (1-10% των πυρήνων χρωματίζονται)? μέτρια πυρηνική χρώση (11-50% των πυρήνων χρωματίζονται)? ισχυρή πυρηνική χρώση (51 και 100% των πυρήνων χρωματίζονται). Ψάχνοντας για αποκοπές με αμερόληπτο τρόπο είναι ένα σημαντικό πρόβλημα σε ανοσοϊστοχημικές μελέτες που ασχολούνται με συνεχή ανάγνωση. Το μεσαίο πυρηνική ανοσοδραστικότητα CT10 σε περιπτώσεις προστατεκτομή (διάμεση τιμή 0%) επιλέχθηκε ως αποκοπής. Κατά συνέπεια, θετική πυρηνική ανοσοδραστικότητα CT10 ορίστηκε ως πυρηνική χρώση σε τουλάχιστον 1% των κυττάρων-στόχων. ΝΥ-ΕδΟ-1 και CT7- χρώσης είναι κυτταροπλασματικό ή πυρηνικών, ανοσοαντιδραστικότητα αξιολογήθηκε χρησιμοποιώντας ένα ημι-ποσοτική, βαθμιδωτή σύστημα βαθμολόγησης: αρνητική (0% των κυττάρων βάφονται)? ασθενής πυρηνική χρώση (1-10% των κυττάρων χρωματίζονται)? μέτρια χρώση (11-50% των κυττάρων βάφονται)? ισχυρή χρώση (51 και 100% των κυττάρων βάφονται). Η διάμεση ΝΥ-ΕδΟ-1 και CT7 ανοσοαντιδραστικότητα (διάμεσος 0%) επιλέχθηκε ως αποκοπής. Κατά συνέπεια, θετική χρώση για ΝΥ-ΕδΟ-1 και CT7 ανοσοαντιδραστικότητα ορίστηκε ως πυρηνική ή κυτταροπλασματική χρώση σε τουλάχιστον 1% των κυττάρων-στόχων.

Στατιστικές αναλύσεις των μικροσυστοιχιών ιστού

δεδομένα

SPSS έκδοση 17.0 (SPSS, Chicago, IL, USA) χρησιμοποιήθηκε για στατιστικές αναλύσεις. P-τιμές & lt? 0,05 θεωρήθηκαν σημαντικές. Σε περίπτωση πολλαπλών εξετάσεων εφαρμόστηκε η διαδικασία Bonferroni-Holm. της ανάλυσης του πίνακα έκτακτης ανάγκης και ακριβείς δοκιμές των δύο όψεων του Fisher χρησιμοποιήθηκαν για τη μελέτη των στατιστικών συσχετίσεων μεταξύ κλινικοπαθολογοανατομικών και ανοσοϊστοχημικές δεδομένων. Για τη σύγκριση των δύο ανεξάρτητων δειγμάτων υπολογίστηκε η μη παραμετρική Mann-Whitney U-test. Χρόνος για επανάληψη PSA (cut off≥0.1 ng /ml) επιλέχθηκε ως κλινικό τελικό σημείο. Επιβίωσης χωρίς υποτροπή (RFS) καμπύλες υπολογίστηκαν με τη μέθοδο Kaplan-Meier με σημασία αξιολογείται από τα στατιστικά στοιχεία των δύο όψεων log-rank. Οι ασθενείς λογοκρίθηκε κατά τη χρονική στιγμή της τελευταίας κλινικής επίσκεψή τους την παρακολούθηση του όγκου-free. Οι ασθενείς δεν φτάνουν στο ναδίρ PSA (& lt? 0,1 ng /ml) μετεγχειρητικά αποκλείστηκαν. Μια σταδιακή πολυπαραγοντικό μοντέλο παλινδρόμησης Cox προσαρμόστηκε, δοκιμάζοντας την ανεξάρτητη προγνωστική σημασία της MAGE-C2 /CT10 ανοσολογική αντίδραση. Η υπόθεση της αναλογικότητας για όλες τις μεταβλητές αξιολογήθηκε με συναρτήσεις κατανομής επιβίωσης log-αρνητική-log. Οι στατιστικές εκτιμήσεις όσον αφορά το μέγεθος του δείγματος που δίδεται στο Σχήμα 1. Οι υπολογισμοί έγιναν με τη χρήση των αντίστοιχων μοντέλων του λογισμικού PASS 2008 (ΕΚΚΑ, Kaysville, UT).

έκφρασης MAGE-C2 /CT10 μπορεί να παρατηρηθεί σε 11 από 341 (3,2%) δείγματα προστατεκτομή. Η εμφάνιση της έκφρασης MAGE-C2 /CT10 θα πρέπει να διπλασιάσει τον κίνδυνο υποτροπής του PSA κατά τη διάρκεια της παρακολούθησης, με αποτέλεσμα σε μια αναλογία κινδύνου περίπου 2.0. Κατά συνέπεια, η διαθέσιμη μέγεθος δείγματος 341 ασθενείς αναλυθεί θα ήταν επαρκής για να ανιχνεύσει μια διαφορά σχετικά με PSA επανάληψη με σημασία ρ & lt? 0,05 και μία δύναμη περίπου 86%. Για υψηλότερες αναλογίες κινδύνου (2.4, 2.8, 3.2) στατιστική δύναμη των περίπου 99% υπολογίστηκε.

Η

Αποτελέσματα

MAGE-C2 /CT10 έκφραση σε κανονικά και κακοήθη ιστό προστάτη

οι

Ολοκληρωμένες κλινικές και ιστοπαθολογικές δεδομένα δίνονται στον πίνακα S1. Συνολικά, 456 από 468 πυρήνες (97,4%) θα μπορούσαν να αξιολογηθούν για MAGE-C2 /CT10 ανοσοαντιδραστικότητα. Ένα αντιπροσωπευτικό πρότυπο χρώσης MAGE-C2 /CT10 παρουσιάζεται στο Σχήμα 2Α-C. έκφραση MAGE-C2 /CT10 δεν ανιχνεύθηκε σε υπερπλασία του προστάτη. καρκίνους των οργάνων-περιορίστηκε έδειξε MAGE-C2 έκφραση των πυρηνικών /CT10 στο 3,3% (11/330) περιπτώσεις, ενώ μεταστατικό και ανθεκτικό ευνουχισμό νόσο ήταν θετικά στο 16,3% (7/36) και 17% (5/23) των περιπτώσεων, αντίστοιχα . χρώση Πυρηνική MAGE-C2 /CT10 προοδευτικά αυξήθηκε από υπερπλασία του προστάτη σε καρκίνο του προστάτη-περιορισμένη σε μεταστατική και ανθεκτικά ευνουχισμό νόσο (Εικόνα 3? ρ & lt? 0.001). Όπως φαίνεται στο Σχήμα S1, διαφορική έκφραση CT10 μεταξύ φυσιολογικού και νεοπλαστικού ιστού θα μπορούσε να παρατηρηθεί: το ποσοστό των CT10 θετικότητας αυξήθηκε σημαντικά από καλοήθη υπερπλασία του προστάτη να περιορίζονται όργανο του καρκίνου του προστάτη σε ανθεκτικά ευνουχισμό του προστάτη και μεταστατική νόσο, συμπεριλαμβανομένων των λεμφαδένων και οστικές μεταστάσεις. Όπως περιγράφηκε προηγουμένως [1], νευροενδοκρινική διαφοροποίηση είναι πιο διαδεδομένη σε ανθεκτικά ευνουχισμό καρκίνο του προστάτη. Ωστόσο, δεν συνέκφραση των CT10 και νευροενδοκρινείς δείκτες όπως η συναπτοφυσίνη και χρωμογρανίνης θα μπορούσε να ανιχνευθεί (Σχήμα S2). Καμία συσχέτιση μεταξύ της MAGE-C2 έκφραση των πυρηνικών /CT10 και την ηλικία κατά τη διάγνωση, σκορ Gleason, το στάδιο του όγκου, κομβική θέση, κατάσταση χειρουργική περιθώριο ή προεγχειρητική επίπεδα PSA βρέθηκε (Πίνακας 1). Είναι ενδιαφέρον, CT10 σημαντικά συν-εκφράζεται με άλλες CT αντιγόνα, όπως NY-ESO-1 και CT7 (Σχήμα 2D-Ι.)

Α (Εικ. 4):. Ριζική προστατεκτομή δείγματος (Gleason 4 + 3 ), Β: Bone μετάσταση του καρκίνου του προστάτη, C: Bone μετάσταση του καρκίνου του προστάτη, D: Ριζική δείγμα προστατεκτομή (Gleason 4 + 3), Ε: Ευνουχισμός ανθεκτικό καρκίνο του προστάτη (Gleason 5 + 5), F: παρηγορητική διουρηθρική εκτομή του καρκίνο του προστάτη (Gleason 4 + 5), G: Bone μετάσταση του καρκίνου του προστάτη, Η: παρηγορητική διουρηθρική εκτομή του καρκίνου του προστάτη (Gleason 5 + 4), Ι: Ευνουχισμός ανθεκτικό καρκίνο του προστάτη (Gleason 5 + 4). Αρχική μεγέθυνση: 200 ×? μπαρ μεγέθυνση: 20 μΜ

Η

BPH:. καλοήθους υπερπλασίας του προστάτη? ΑϋΟΑ: όργανο-περιορισμένο αδενοκαρκίνωμα του προστάτη? MTS: προστάτη μετάσταση του καρκίνου? CRPC:. Ευνουχισμό ανθεκτικό καρκίνο του προστάτη

Η

Η

MAGE-C2 /CT10 και πρόγνωση

Οι ασθενείς με MAGE-C2 /CT10 καρκίνων θετική του προστάτη σε σύγκριση με αρνητικό υποθέσεις που αφορούν RFS με μονοπαραγοντική ανάλυση παλινδρόμησης Cox (Πίνακας 2). έκφραση MAGE-C2 /CT10 συσχετίστηκε σημαντικά με μικρότερη RFS (p = 0.015? Σχήμα 5). Ασθενείς με MAGE-C2 /CT10 θετική όγκοι είχαν ένα μεσαίο RFS από 51 μήνες (95% διάστημα εμπιστοσύνης 17-86 μήνες) σε σύγκριση με 116 μήνες (95% διάστημα εμπιστοσύνης 107-125 μηνών) για ασθενείς με όγκους αρνητικούς MAGE-C2 /CT10 . Εκτός από την έκφραση του MAGE-C2 /CT10, αυξημένη σκορ Gleason (p & lt? 0.001), το στάδιο του όγκου (p & lt? 0.001), χειρουργικά όρια (p & lt? 0.001) και προεγχειρητική επίπεδο PSA (p & lt? 0.001) ήταν σημαντικά σχετίζεται με μικρότερο χρόνο RFS .

η

σε μια πολυπαραγοντική ανάλυση, ένα μοντέλο παλινδρόμησης Cox αναπτύχθηκε για την εκτίμηση του ποσοστού RFS. Τα χαρακτηριστικά των μεταβλητών παρουσιάζονται στον Πίνακα 3. Μόνο MAGE-C2 /έκφραση CT10, το σκορ Gleason, το στάδιο του όγκου, την κατάσταση χειρουργική περιθώριο και προεγχειρητικά επίπεδα του PSA θεωρήθηκαν. Όλες οι μεταβλητές, συμπεριλαμβανομένων της έκφρασης MAGE-C2 /CT10 (p = 0.03), παρέμεινε σημαντική. Η αναλογία κινδύνου για την έκφραση MAGE-C2 /CT10 ήταν 2.770 (95% διάστημα εμπιστοσύνης 1,106 έως 6,934).

Η

Συζήτηση

Στην παρούσα μελέτη, αναλύσαμε την παρουσία του MAGE- C2 /CT10 πρωτεΐνης σε ένα αντιπροσωπευτικό σειρά ασθενών με καρκίνο του προστάτη και βρέθηκαν MAGE-C2 /CT10 να εκφράζονται συχνά σε προχωρημένο καρκίνο του προστάτη? δηλαδή σε μεταστατικούς και ευνουχισμό ανθεκτική νόσο. Επιπλέον, εντοπίσαμε MAGE-C2 έκφραση των πυρηνικών /CT10 ως προγνωστικός δείκτης της βιοχημικής υποτροπής μετά από ριζική προστατεκτομή, η οποία ήταν ανεξάρτητη από τις καθιερωμένες προγνωστικοί παράγοντες συμπεριλαμβανομένων προεγχειρητικό PSA, το σκορ Gleason, το στάδιο του όγκου, και την κατάσταση χειρουργική περιθώριο.

Διαπιστώσαμε πυρηνική θετικότητα MAGE-C2 /CT10 στο 16,3% και το 17% των ασθενών με μεταστατικό και ανθεκτικό ευνουχισμό της νόσου αντίστοιχα, αλλά μόνο στο 3,3% του οργάνου περιορίζονται προστάτη. Αυτό το εύρημα είναι κλινικής σημασίας, επειδή μια υποομάδα ασθενών με ανθεκτική προηγμένη, ο ευνουχισμός του προστάτη μπορεί να θεωρηθεί για ανοσοθεραπεία στο μέλλον. Προηγούμενες μελέτες έχουν δείξει ότι η MAGE-C2 /CT10 είναι σε θέση να επάγουν ειδικές ανοσοαποκρίσεις στην αυτόλογη ξενιστή. Τα κυτταροτοξικά Τ λεμφοκύτταρα που κατευθύνονται έναντι MAGE /έχουν CT-10 επίτοποι έχουν βρεθεί σε ασθενείς με μελάνωμα και αντισώματα που κατευθύνονται έναντι MAGE-C2 /CT-10 ανιχνεύθηκαν σε μελάνωμα και ασθενείς [38], [39], [40], [12], [41].

MAGE-C2 /CT10 ανήκει στην MAGE-οικογένεια CT αντιγόνων [42]. Σε μια πρόσφατη μελέτη, Yang et al. έδειξε ότι το MAGE-C2 μπορούν να δρουν ως συν-καταστολέα του ρ53 με σύνδεση προς KAP1 ενίσχυση καταστολή της ρ53. Αυτά τα αποτελέσματα υποδηλώνουν ότι το MAGE-C2 συμβάλλει στην ανάπτυξη κακοηθειών παρέχοντας ένα πλεονέκτημα επιβίωσης [43]. γονιδιακής έκφρασης MAGE είναι επιγενετικώς καταστέλλεται από περιοχή προαγωγού μεθυλίωση στα περισσότερα κύτταρα, αλλά παράγοντες που ελέγχουν μεθυλίωση προαγωγού γονιδίου MAGE δεν έχουν πλήρως ταυτοποιηθεί. Yang et al. έχουν δείξει ότι η έκφραση του γονιδίου MAGE είναι επιγενετικώς ελέγχεται από την κινάση της τυροσίνης ΚΙΤ [44]. Η κατανόηση των παραγόντων που ελέγχουν την έκφραση του γονιδίου MAGE μπορεί να επιτρέψει πιο αποτελεσματικές θεραπευτικές στρατηγικές που στοχεύουν αντιγόνα MAGE [45], [46], [47].

Αν και η μελέτη μας επιβεβαιώνει προηγούμενες μελέτες που ανέφεραν χαμηλή επίπτωση CT αντιγόνων στο όργανο-περιορισμένο καρκίνο του προστάτη, η αυξημένη έκφραση του αντιγόνου MAGE-C2 /CT10 σε προχωρημένο προστάτη ήταν ένα απρόσμενο νέο εύρημα. Επίσης η έκφραση του αντιγόνου CT δεν έχει ακόμη αναλυθεί σε ένα μεγαλύτερο κοόρτη ασθενών προστάτη. Για τις γνώσεις μας, έχουν μόνο 30 όγκων αναλύθηκαν για έκφραση mRNA MAGE-C2 /CT10 προηγουμένως: θετικότητα αναφέρθηκε στα δείγματα 1/10 και 0/20 του όγκου [30], [32]. Σε άλλους όγκους, MAGE-C2 /CT10 πρωτεΐνη είχε προηγουμένως εντοπιστεί σε 34% -48% των ηπατοκυτταρικών καρκινωμάτων [20], [48], στο 43% του πολλαπλού μυελώματος [49], στο 20% των υψηλής ποιότητας καρκινώματα ουροφόρων του η ουροδόχος κύστη [18], σε 20% της κεφαλής και του τραχήλου [28], και στο 43% των μελανωμάτων, αντίστοιχα. Η αναφερόμενη 5% επιπολασμός της MAGE-C2 /CT-10 έκφραση σε καρκίνους του παχέος [50] μπορεί να συγκριθεί με το εύρημα μας από σπάνια MAGE-C2 /CT-10 έκφραση σε πρωτογενείς PCa. Μια φτωχή επιβίωση παρατηρήθηκε σε προχωρημένη MAGE-C2 /CT-10-θετικά καρκίνωμα ουροθηλίου της ουροδόχου κύστης, αλλά MAGE-C2 /CT-10 έκφραση δεν είχε προγνωστική επίδραση σε HCC.

Είναι σημαντικό, η μελέτη μας προσδιορίζονται MAGE-C2 /CT-10 ως ανεξάρτητος προγνωστικός δείκτης της βιοχημικής υποτροπής μετά από ριζική προστατεκτομή, παρέχοντας μια πιθανή βάση για την καλύτερη πρόγνωση και θεραπεία διαστρωμάτωση των ασθενών με προστάτη. Η ευρέως διαδεδομένη χρήση του ειδικού προστατικού αντιγόνου (PSA) διαλογή του ορού οδήγησε στην ταυτοποίηση ενός αυξανόμενου αριθμού ασυμπτωματικών όγκων χαμηλής στάδιο σε νεότερους άνδρες [51], [52]. Ένα ακόμη αναπάντητο σημαντικό κλινικό ερώτημα είναι αν αυτές οι ασθενείς χρειάζονται θεραπεία και αν ναι, πόσο επιθετικά θα πρέπει να είναι αυτή η δυνατότητα θεραπείας. Οι ασθενείς με εντοπισμένη νόσο κατά προτίμηση σε θεραπεία είτε με ριζική προστατεκτομή ή ακτινοθεραπεία, τόσο με θεραπευτική πρόθεση [53], [54]. Επί του παρόντος, πρόγνωση και θεραπεία διαστρωμάτωση κατά τη στιγμή της διάγνωσης βασίζονται σε κλινικό στάδιο, βιοψία Gleason βαθμού, και τα επίπεδα του PSA στον ορό. Σε περιπτώσεις αντιμετωπίζονται από ριζική προστατεκτομή, η πρόγνωση μπορεί να βελτιωθεί με τη χρήση παθολογική στάδιο και βαθμό Gleason. Ωστόσο, αυτές οι προγνωστικοί δείκτες δεν προβλέψουμε με ακρίβεια την κλινική έκβαση για μεμονωμένους ασθενείς. Οι βελτιωμένους δείκτες που απαιτούνται για να καθορίσουν ποιοι ασθενείς είναι σε κίνδυνο και θα πρέπει, συνεπώς, να αντιμετωπίζονται πιο επιθετικά. MAGE-C2 /CT-10 θα πρέπει να προστεθεί στον κατάλογο των προτεινόμενων δεικτών πρόγνωσης της προόδου των όγκων, περιλαμβανομένων των MUC1 [55], AZGP1 [55], ΕΖΗ2 [56], E2F3 [57], Ki67 [58], [59], και CD10 [60].

Εν κατακλείδι, τα στοιχεία μας παρέχουν αποδείξεις ότι MAGE-C2 /CT-10 μπορεί να είναι υποψήφιος για την επικουρική και παρηγορητική εμβολιασμού σε ένα υποσύνολο των ασθενών με προχωρημένο καρκίνο του προστάτη. Επιπλέον, MAGE-C2 /CT-10 έκφρασης σε πρώιμα στάδια όγκου υποδεικνύει υψηλότερο κίνδυνο για βιοχημικής υποτροπής μετά από ριζική προστατεκτομή.

Υποστήριξη Πληροφορίες

Εικόνα S1. έκφραση

Διαφορική CT10 μεταξύ φυσιολογικού και νεοπλαστικού ιστού: το ποσοστό των CT10 θετικότητας ανά πυρήνα μικροσυστοιχιών ιστού σημαντικά αυξημένη από καλοήθη υπερπλασία του προστάτη να περιορίζονται όργανο του καρκίνου του προστάτη σε ευνουχισμό ανθεκτικές προστάτη και μεταστατική νόσο, συμπεριλαμβανομένης λεμφαδένα και οστικές μεταστάσεις

. doi: 10.1371 /journal.pone.0021366.s001

(ΔΕΘ)

Εικόνα S2.

Ολόκληρα τμήματα της CT10 θετικά μετάσταση στα οστά από δύο ασθενείς υπέστησαν βαφή για χρωμογρανίνη (CRGA) και συναπτοφυσίνη, δύο δείκτες neuroendokrine. Δεν συνέκφραση της CT10 και νευροενδοκρινείς δείκτες θα μπορούσαν να ανιχνευθούν

doi:. 10.1371 /journal.pone.0021366.s002

(ΔΕΘ)

Πίνακα S1.

κλινικοπαθολογοανατομικών χαρακτηριστικά και τα αποτελέσματα της ανοσοϊστοχημείας για ασθενείς που λαμβάνουν ριζική προστατεκτομή

doi:. 10.1371 /journal.pone.0021366.s003

(XLS)

Ευχαριστίες

Οι συγγραφείς θα ήθελα να ευχαριστήσω Martina Storz, Susanne Dettwiler και Silvia Behnke για την εξαιρετική τεχνική βοήθεια.