Αφηρημένο

TH-302 είναι ένα υποξία-ενεργοποιείται προφάρμακο γνωστό ότι ενεργοποιούν επιλεκτικά υπό τις συνθήκες υποξίας που βρίσκονται συνήθως σε συμπαγείς όγκους. Αυτή τη στιγμή αξιολογείται σε κλινικές δοκιμές, συμπεριλαμβανομένων δύο δοκιμών σε παγκρεατικά πόρου αδενοκαρκινώματα (PDAC). Η παρούσα μελέτη έγινε για να αξιολογήσει βιοδείκτες απεικόνισης για την πρόβλεψη και την αντιμετώπιση της παρακολούθησης των TH-302 αποτελεσματικότητα σε μοντέλα ξενομοσχεύματος PDAC. Δυναμική αυξημένης αντίθεσης (DCE) και διάχυση σταθμισμένη (DW) απεικόνιση μαγνητικού συντονισμού (MRI) χρησιμοποιήθηκαν για την παρακολούθηση οξείες επιδράσεις στο αγγειακό σύστημα του όγκου και κυτταρικότητα, αντίστοιχα. Τρία ανθρώπινα ξενομοσχεύματα PDAC με γνωστές απόκλιση αποκρίσεις σε Th-302 απεικονίστηκαν πριν και στις 24 ώρες και 48 ώρες μετά από εφάπαξ δόση TH-302 ή οχήματος για να προσδιορίσει αν οι αλλαγές απεικόνισης προανήγγειλε αλλαγές στον όγκο του όγκου. DW-MRI έγινε σε πέντε τιμές b για να δημιουργήσει φαινόμενος συντελεστής διάχυσης του νερού (ADC) χάρτες. Για DCE-MRI, ένα πρότυπο κλινικά διαθέσιμο αντιδραστήριο Αντίθετα, Gd-DTPA, χρησιμοποιήθηκε για τον προσδιορισμό της ροής του αίματος στην περιοχή του όγκου που ενδιαφέρει. TH-302 προκάλεσε μία δραματική μείωση στην σταθερή μεταφορά DCE (Κ

trans) εντός 48 ωρών μετά τη θεραπεία στις ευαίσθητες όγκους, Hs766T και ΜΙΑ PaCa-2, ενώ TH-302 δεν είχε καμία επίδραση στη συμπεριφορά διάχυσης των ανθεκτικών SU .86.86 όγκων. Tumor κυτταρικότητα, εκτιμάται από ADC, αυξήθηκε σημαντικά 24 και 48 ώρες μετά τη θεραπεία σε Hs766T, αλλά δεν παρατηρήθηκε στα ΜΙΑ PaCa-2 και SU.86.86 ομάδες. Αξίζει να σημειωθεί ότι, η αναστολή της ανάπτυξης του Hs766T παρατηρήθηκε αμέσως (ημέρα 3) μετά την έναρξη της θεραπείας, αλλά δεν παρατηρήθηκε σε MiaPaCa-2 όγκους μέχρι 8 ημέρες μετά την έναρξη της θεραπείας. Με βάση αυτά τα προκλινικά ευρήματα, είναι DCE-MRI μέτρα των αγγειακών δυναμική αιμάτωσης και μέτρα ADC της κυτταρικής πυκνότητας προταθεί ως πιθανές TH-302 βιοδεικτών απάντηση σε κλινικές δοκιμές

Παράθεση:. Zhang Χ, Βοζτκόβιακ JW, Martinez GV, Cornnell HH, Hart CP, Baker AF, et al. (2016) MR απεικόνισης Biomarkers να παρακολουθούν έγκαιρη ανταπόκριση σε υποξαιμία-Activated προφάρμακο TH-302 σε καρκίνο του παγκρέατος ξενομοσχεύματα. PLoS ONE 11 (5): e0155289. doi: 10.1371 /journal.pone.0155289

Επιμέλεια: Roger Chammas, Universidade de São Paulo, Βραζιλία Αγρόκτημα

Ελήφθη: 11 Ιούν 2014? Αποδεκτές: 27 Απρ 2016? Δημοσιεύθηκε: May 26, 2016

Copyright: © 2016 Zhang et al. Αυτό είναι ένα άρθρο ανοικτής πρόσβασης διανέμεται υπό τους όρους της άδειας χρήσης Creative Commons Attribution, το οποίο επιτρέπει απεριόριστη χρήση, τη διανομή και την αναπαραγωγή σε οποιοδήποτε μέσο, ​​με την προϋπόθεση το αρχικό συγγραφέα και την πηγή πιστώνονται

Δεδομένα Διαθεσιμότητα:. Όλη η δεδομένα είναι μέσα στο χαρτί, και υποστήριξη αρχεία πληροφοριών της είναι διαθέσιμες μέσω Figshare (https://dx.doi.org/10.6084/m9.figshare.3179140)

Χρηματοδότηση:. η εργασία αυτή υποστηρίχθηκε από: ΗΠΑ National Institutes of Health: R01CA125627, R01CA077575 και U54CA143970? www.nih.gov? η χρηματοδότηση παραπάνω χρησιμοποιήθηκε στο σχεδιασμό της μελέτης, τη συλλογή και την ανάλυση των δεδομένων? Εργαστήριο Moffitt Κέντρο Καρκίνου Μικρών Ζώων Imaging, μια CCSG χρηματοδοτείται εγκατάσταση πυρήνα, CCSG Grant αριθμός: P30-CA76292? www.moffitt.org? η χρηματοδότηση παραπάνω χρησιμοποιήθηκε για μέρος των απεικόνιση μικρών ζώων. Φαρμακευτική όριο που προβλέπεται υποστήριξη με τη μορφή ενός μισθού για συγγραφέα CPH, αλλά δεν είχε καμία πρόσθετη ρόλο στο σχεδιασμό της μελέτης, τη συλλογή και ανάλυση των δεδομένων, η απόφαση για τη δημοσίευση, ή την προετοιμασία του χειρογράφου

Ανταγωνιστικά συμφέροντα.: Charles P. Hart απασχολείται και μέτοχος της Pharmaceuticals Threshold. Δεν υπάρχουν διπλώματα ευρεσιτεχνίας, τα προϊόντα για την ανάπτυξη ή την εμπορία προϊόντων που να δηλώνουν. Αυτό δεν αλλάζει την τήρηση των συγγραφέων σε όλες τις PLoS ONE πολιτικές για την ανταλλαγή δεδομένων και υλικών, όπως περιγράφεται λεπτομερώς σε απευθείας σύνδεση στον οδηγό για τους συγγραφείς.

Εισαγωγή

Το ποσοστό πενταετούς επιβίωσης για παγκρέατος αδενοκαρκίνωμα (PDAC) είναι μικρότερη από 6% και ακόμη πιο επιζώντες είναι εκείνοι οι ασθενείς με μια χειρουργική επιλογή. [1-5] Έτσι, η πλειοψηφία των καρκίνων του παγκρέατος αντιμετωπίζονται συστηματικά με χημειοθεραπεία, γενικά γεμσιταβίνη (GEM), σε συνδυασμό με άλλους παράγοντες. Αξίζει να σημειωθεί ότι, ειδικά στοχευμένες θεραπείες και τα βιολογικά προϊόντα, όπως cetuximab, trastuzamab ή bevacizumab έχουν δείξει μικρή επίδραση ενάντια PDAC. Ένα σχήμα που συνδυάζει 5-φθοριοουρακίλη, leucovorin, ιρινοτεκάνη και οξαλιπλατίνη (FOLFIRINOX) αυξήθηκε διάμεση συνολική επιβίωση (OS) σε 11,1 μήνες, σε σύγκριση με 6,8 μήνες μόνο για GEM [6] Πρόσφατα, συλλαμβάνω-πακλιταξέλη (ΑΒΙ-007?. Νανοσωματίδια-αλβουμίνης -πακλιταξέλη? Abraxane) έχει δείξει σημαντικό όφελος επιβίωσης σε συνδυασμό με GEM, και εξετάζεται για την κατάσταση στην πρώτη γραμμή [7, 8] ακόμα κι έτσι, η απάντηση εξακολουθεί να παραμένει φευγαλέα μόνο και, ως εκ τούτου, οι εναλλακτικές θεραπευτικές προσεγγίσεις απαιτούνται.. Μία πολλά υποσχόμενη λεωφόρος είναι η στόχευση φαινότυπος του καρκίνου, όπως η υποξία, η οποία συχνά παρατηρείται σε καρκίνους του παγκρέατος [9] Αυτό διερευνήθηκε στη Φάση Ι /ΙΙ (NCT01833546? NCT02047500). Δοκιμές TH-302 σε συνδυασμό με GEM, οι οποίες είναι πλήρης και φάσης ΙΙΙ (NCT01746979) δίκη του διπλή TH-302 + GEM είναι σε εξέλιξη. Περαιτέρω, μια Φάσης Ι /ΙΙ κλιμάκωση δοκιμαστική δόση του TH-302 + GEM + Abraxane έχει πρόσφατα ανοίξει συνδυασμό τριπλή (NCT02047500).

όγκων υποξία, η οποία χαρακτηρίζεται από μειωμένες συγκεντρώσεις οξυγόνου, είναι ένας σημαντικός παράγοντας που οδηγεί φυσιολογία του όγκου και αντίσταση στην θεραπεία του καρκίνου [10]. η κύρια διαφορά από κανονικό ιστό είναι η ακανόνιστη δομημένη μήτρα αγγείωση βρίσκονται σε στερεούς όγκους. Τα μικροαγγεία χαρακτηρίζεται από μεγάλα ανοίγματα στο ενδοθήλιο και απουσία λείο στρώμα μυών, οδηγώντας σε αυξημένη διαπερατότητα και συγκράτησης (EPR) των μακρομορίων. Οι παράγοντες αυτοί οδηγούν σε μια μη ισορροπημένη παροχή οξυγόνου και θρεπτικών ουσιών. Αυτό επιδεινώνει την εκβλάστηση και αναποτελεσματική ανάπτυξη νέων αιμοφόρων, η οποία οδηγεί σε μειωμένη οξυγόνωση του όγκου. [11, 12] Παρά το γεγονός ότι αρκετές καρκίνοι είναι γνωστό ότι είναι υποξικό, παγκρεατικό καρκίνοι είναι γνωστό ότι είναι βαθιά έτσι [13] και ενδοογκική υποξία σχετίζεται με μια κακή έκβαση. [14-16] Αυτό μπορεί να οφείλεται στα αυξημένα επίπεδα του παράγοντα επιβίωσης, HIF-1α [15-18], ή επιλογή για τα ελαττώματα στην αποπτωτική μηχανήματα. [17] Επιπλέον, η επίδραση της υποξίας μπορεί δεν πρέπει να διαμεσολαβείται αποκλειστικά από τα καρκινικά κύτταρα, αλλά μπορεί επίσης να περιλαμβάνει το στρώμα. Ο καρκίνος του παγκρέατος χαρακτηρίζεται από υπερβολική δεσμοπλαστικού ινοβλάστες (αστεροειδή κύτταρα), των οποίων η μετανάστευση, κολλαγόνο τύπου Ι έκφραση, και αγγειακού ενδοθηλιακού αυξητικού παράγοντα (VEGF) παραγωγή είναι όλα που επάγεται από υποξία. [18] Ουσιαστικά, υποξία αποτελέσματα από μια ανισορροπία μεταξύ της προσφοράς οξυγόνου και ζήτηση. Υποξική περιοχές του όγκου είναι γενικά ανθεκτικά στην κυτταροτοξική χημειοθεραπεία. Εν μέρει αυτό οφείλεται στην άμεση επίδραση της υποξίας σε προς τα πάνω ρύθμιση κυτταρικής επιβίωσης, αλλά μπορεί επίσης να οφείλεται σε περιφερειακό ελλειμμάτων αιμάτωσης, που έχουν ως αποτέλεσμα τόσο υποξία και υπο-θεραπευτική απελευθέρωση φαρμάκου. [14-16, 19, 20] Επιπλέον, υποξικά καρκινικά κύτταρα τείνουν να είναι αδρανή, πράγμα που επίσης οδηγεί σε αντίσταση στις θεραπείες που στοχεύουν στην κυτταρική διαίρεση. [21] Λόγω της σχέσης μεταξύ υποξία και μικρή ανταπόκριση, μία λύση για υποξία -σχετικών καρκίνο εισάγει υποξία-ενεργοποιημένα προ-φάρμακα (HAPS), οι οποίες ενεργοποιούνται επιλεκτικά υπό ακραίες υποξία και να παραδώσει τη χημειοθεραπεία υψηλής δόσης στις υποξικές περιοχές του όγκου με ελάχιστη βλάβη σε υγιείς ιστούς.

η υπεροχή της υποξίας σε PDAC καθιστά έναν ελκυστικό στόχο για HAPS [22], τα οποία έχουν αναπτυχθεί ως μια οικογένεια ενώσεων κατά τις τελευταίες δύο δεκαετίες. [23] οι HAPS μετατρέπεται σε μία δραστική μορφή υπό συνθήκες μειωμένου οξυγόνου, όπως έχουν σχεδιαστεί να υποστούν 1 -e

– ή 2-ε

– βιο-μειώσεις που είναι αναστρέψιμα με την παρουσία οξυγόνου. Αυτά μπορεί να είναι μη-ειδικά καταλύεται από μία ποικιλία oxoreductases, όπως Ρ450 NADPH κυτοχρώματος αναγωγάσης, POR, ή διεγέρσιμης συνθάσης νιτρικού οξειδίου, iNOS. [24] Η πιο κοινή κατηγορία των HAPS βασίζεται σε 2-νιτροϊμιδαζόλια, παραδειγματικά με Th- 302. TH-302 είναι ένα HAP δεύτερης γενιάς, που αυτή τη στιγμή δοκιμάζεται σε 12 διαφορετικές κλινικές δοκιμές από τη φάση Ι-Φάση ΙΙΙ. TH-302 κυκλοφορίες βρωμο-ισοφωσφοραμίδιο μουστάρδας (Br-IPM) κάτω από συνθήκες υποξίας, προκαλώντας την αλκυλίωση του DNA και cross-linking. Br-IPM μπορεί επίσης να διαχυθεί σε κοντινή οξυγονωμένο περιοχές για να αποτρέψει την εξέλιξη του όγκου μέσω «επιπτώσεις των παρευρισκομένων». Τόσο in vitro και in vivo πειράματα έδειξαν ότι η TH-302 ενεργοποιούνται επιλεκτικά στις περιοχές υποξικά όγκου και είναι επίσης παρόν στον περιβάλλοντα ιστό, αλλά σε μικρότερο βαθμό σε υγιείς ιστούς [25]. Προ-κλινικές μελέτες δείχνουν ότι TH-302 έχει σημαντική αντικαρκινική δράση όταν συνδυάζεται με αντι-αγγειογενετική θεραπεία. [26]

οι περιφέρειες

Υποξική συχνά χαρακτηρίζονται από εξαιρετικά αποδιοργανωμένη, διεσταλμένες και ελικοειδή αγγεία. [27] Αυτή η χαοτικό μοτίβο μπορεί να προκύψουν από ανισορροπίες αγγειογονικών μεσολαβητών όπως αγγειακού ενδοθηλιακού αυξητικού παράγοντα (VEGF) και αγγειοποιητινών. Υψηλής διαπερατότητας αγγείων του όγκου μπορεί να επηρεάζουν κυτταροκινών και αγγειογενετικών παραγόντων, η οποία μπορεί να μεταβάλλει δυναμικά τη δομή των τοίχων μικροαγγείων. [28] Συσσωρευμένα στοιχεία έχουν ήδη αποδείξει ότι η αγγειακή διαπερατότητα είναι πολύ πιθανό να είναι αυξημένα σε υποξικές περιοχές. [27] Έτσι, αποδεικτική και εμπειρικές συμφωνία μεταξύ διαπερατότητα σκάφος και υποξία είναι εγκατεστημένος. DCE-MRI χρησιμοποιεί κινητική μοντελοποίηση εγχέεται αντιδραστηρίων αντίθεση με τον χαρακτηρισμό αιμάτωσης. [29] μπορούν να δώσουν πληροφορίες σχετικά με τη ροή, τον όγκο, και το σημαντικότερο της διαπερατότητας των αγγείων. Έτσι είναι κατάλληλο για να υποθέσουμε ότι DCE-MRI θα μπορούσε να είναι ένα χρήσιμο υποκατάστατο βιοδείκτη της υποξίας. [30]

Διάχυση-σταθμισμένη MRI (DW-MRI) ανιχνεύει σχετικά μικρές αλλαγές στη δομή των ιστών σε κυτταρικό επίπεδο με βάση η εφαρμογή των ευαίσθητων κίνησης κλίσεις που μπορεί να ανιχνεύσει την κίνηση των πρωτονίων του νερού. Πολλές προκλινικές μελέτες έχουν δείξει ότι η DW-MRI έχει τεράστιες δυνατότητες για την παρακολούθηση της έγκαιρης μεταβολές στην κυτταροβρίθεια του όγκου που μπορεί να σχετίζονται με την ανταπόκριση στη θεραπεία. [31] Συνδυασμός DCE και DW-MRI μπορεί να παρέχει πιο ακριβείς πληροφορίες για την έγκαιρη διάγνωση και ανίχνευση των πρώιμων θεραπευτική ανταπόκριση . [32] Επιπλέον, αυτές οι δύο μέθοδοι απεικόνισης έχουν αναπτυχθεί εύκολα σε καθημερινή πρωτόκολλα κλινική. Ως εκ τούτου, είναι πολύ πιθανό ότι τα αποτελέσματα αυτής της μελέτης θα μπορούσε εύκολα να μεταφραστεί σε πρόσθετες δοκιμές κλινική.

Προηγούμενες μελέτες έχουν καταδείξει ξενομοσχεύματος όγκοι που προέρχονται από SU.86.86 ανθρώπινη παγκρεατική καρκινική κυτταρική γραμμή είναι ιδιαίτερα vascularized και καλά διαχέεται σε σύγκριση με τους όγκους που προέρχονται από την κυτταρική σειρά Hs766T. [33] Έτσι, υποξικές περιοχές παρατηρήθηκαν σε όγκους Hs766T είναι μεγαλύτερα από εκείνα που παρατηρούνται σε SU.86.86, ενώ οι όγκοι που προέρχονται από κυτταρική σειρά Mia PaCa-2 είναι υποξική σε ένα μέσο επίπεδο. Όπως υποξία θεωρείται ότι είναι ένας περιοριστικός παράγοντας για την ΤΗ-302 δραστηριότητα, έχει πειραματικά αποδειχθεί ότι Hs766T προερχόμενα όγκοι είναι πολύ ευαίσθητα σε Th-302 και ότι οι όγκοι SU.86.86 προερχόμενα είναι ιδιαίτερα ανθεκτικά, με Mia PaCa-2 έκθεμα . ενδιάμεση ευαισθησία [34] Η παρούσα μελέτη συνέκρινε την αποτελεσματικότητα του TH-302 σε αυτά τα παγκρεατικά καρκινικά μοντέλα ξένου μοσχεύματος με μετρήσεις της αιμάτωσης όγκου και κυτταρικότητα χρησιμοποιώντας δύο μεθόδους απεικόνισης:. DW-MRI και DCE-MRI

Υλικά και Μέθοδοι

καλλιέργειας κυττάρων

Su.86.86, Hs766T και Mia-PaCa2 κύτταρα αποκτήθηκαν από την ATCC (Manassas, VA). Όλα τα κύτταρα γραμμές ανάνηψη από χαμηλή διέλευση με όλα τα πειράματα που πραγματοποιήθηκαν με κύτταρα από τον αριθμό περάσματος μικρότερο από 15. Su.86.86 κύτταρα καλλιεργήθηκαν σε RPMI-1640 (Life Technologies) συμπληρωμένο με 10% FBS (HyClone Laboratories). κυτταρικές σειρές Hs766T και Mia-PaCa2 καλλιεργήθηκαν σε DMEM /F12 (Life Technologies) συμπληρωμένο με 10% FBS και 1% διάλυμα πενικιλλίνης /στρεπτομυκίνης (Sigma, St. Louis, ΜΟ). Όλες οι κυτταρικές σειρές αναπτύχθηκαν στους 37 ° C και 5% CO

2.

Ξενομοσχεύματα

Όλες οι διαδικασίες ήταν, σύμφωνα με τον Οδηγό για τη Φροντίδα και Χρήση των εργαστηριακών ζώων Πόρων (1996 ), το Εθνικό Συμβούλιο Έρευνας, και εγκρίθηκε από την Υγειονομική υπηρεσία και την Επιτροπή Χρήσης, Πανεπιστήμιο της Νότιας Φλόριντα στο πλαίσιο του εγκεκριμένου πρωτοκόλλου R4033. Ανοσοκατασταλμένα ποντίκια που στεγάζεται σε ένα καθαρό εγκατάσταση με ειδικούς όρους, που περιλαμβάνουν HEPA φιλτράρεται αεριζόμενα συστήματα κλουβιών, κυψελωτό κρεβάτι, κυψελωτό στέγαση, αυτόκαυστο νερό, ακτινοβολείται ειδικές διαδικασίες αλλαγή κλουβί φαγητό και. Τα ποντίκια αντιμετωπίζονται κάτω από άσηπτες συνθήκες, συμπεριλαμβανομένης της φορώντας γάντια, ποδιές και καλύμματα υποδημάτων. Τα ποντίκια θυσιάστηκαν με εισπνοή διοξειδίου του άνθρακα

2 από ένα υπό πίεση δεξαμενή σε ένα θάλαμο ποντίκι.

Θηλυκά ποντίκια SCID ηλικίας 5-6 εβδομάδων εμβολιάστηκαν με SU.86.86, Hs766T ή κύτταρα Mia-PaCa2 (5×10

6) υποδορίως στο αριστερό πίσω πόδι. Οι όγκοι αφέθηκαν να αναπτυχθούν για έναν μέσο όρο τριών εβδομάδων σε μέσο μέγεθος του ~ 150 mm

3, όπως εκτιμάται με τη χρήση ηλεκτρονικών δαγκάνες και οι όγκοι των όγκων υπολογίζονται ως π /6 [(μικρός άξονας σε mm)

2 x ( επιμήκη άξονα σε mm)]. Τα ποντίκια στη συνέχεια τυχαιοποιήθηκαν και τοποθετήθηκαν σε ομάδες και αγωγή με αλατούχο (έλεγχος) ή TH-302 (50 mg /kg) εγχύθηκε ενδοπεριτοναϊκώς. Τα ποντίκια απεικονίστηκαν όπως περιγράφεται στο τμήμα των μεθόδων απεικόνισης μαγνητικού συντονισμού. Συνολικά 34 ποντίκια υποβλήθηκαν σε απεικονιστικές εξετάσεις MR. Η ομάδα SU.86.86 αποτελούνταν από 5 TH-302 αγωγή και 5 ζώα ελέγχου? Mia-PaCa2 αποτελούνταν από 6 TH-302 ζώα που έλαβαν θεραπεία και 5 έλεγχο? Hs766T αποτελούνταν από 7 TH-302 αγωγή και 6 ζώων ελέγχου. Καμία σημαντική απώλεια βάρους των ζώων παρατηρήθηκε κατά τη διάρκεια αυτής της μελέτης. Τα ζώα θυσιάστηκαν όταν οι όγκοι έφθασαν 2000 mm

3.

Imaging

Τόσο DCE-MRI και DW-MRI εκτελέστηκαν 24 ώρες πριν την θεραπεία (TH-302 ή όχημα), DW-MRI είχε προγραμματιστεί 24 ώρες και 48 ώρες μετά τη θεραπεία. Προκειμένου να εξασφαλιστεί επαρκής χρόνος για έκπλυση παράγοντα αντίθεσης και φυσιολογικά ανάκτησης, DCE-MRI πραγματοποιήθηκε μόνο 48 ώρες μετά την αγωγή. Όλα τα πειράματα MRI εκτελέστηκαν με ένα Varian 7 Τ MRI σαρωτή εξοπλισμένο με ένα μέγιστο πλάτος κλίση 400 mT /m. Όλα τα ζώα αναισθητοποιήθηκαν με εισπνεόμενη ισοφλουράνη (1,5% σε Ο2) σε 2,0 LPM και διασωληνώθηκαν στη φλέβα της ουράς. Ένα μπαλόνι πίεση μορφοτροπέα μαγνητοσκοπημένο στο στήθος του ζώου χρησιμοποιήθηκε για τη συνεχή παρακολούθηση του ρυθμού αναπνοής του. Οι θερμοκρασίες σώματος παρακολουθούνταν συνεχώς χρησιμοποιώντας ένα ορθού fluoroptic θερμόμετρο (SaII

®, SA Όργανα, Stony Brook, NY). Μια εξωτερική θερμάστρα χρησιμοποιήθηκε για τη διατήρηση της θερμοκρασίας του σώματος στους 37,0 ± 0,2 ° C και του αναπνευστικού ρυθμού παρακολουθήθηκε σε ένα εύρος 60-90 αναπνοών προ λεπτά κατά τη διάρκεια των πειραμάτων απεικόνισης. Το ζώο απαλά ασφαλίζεται σε μια πλαστική θήκη και φορτώνεται σε ένα 35-mm-ID απεικόνισης μικρών ζώων Litz πηνίο (Doty Επιστημονική, Columbia, SC, Ηνωμένες Πολιτείες της Αμερικής). MRI συνεδρία τόσο για DCE- και DW-MRI scan ήταν περίπου 1,5 ώρες? 0,5 ώρες για DW-MRI μόνο τμήμα.

πρωτόκολλο DCE-MRI περιλαμβάνει Τ

2-σταθμισμένων εικόνων για την ανατομική άποψη του όγκου, παραμετρική χάρτες των ενδογενών Τ

1 χρόνο χαλάρωσης και μια σειρά από Τ

1-σταθμισμένη εικόνες που μαρτυρούν τη δυναμική αλλαγή του παράγοντα αντίθεσης συμπεριλαμβανομένων των ΟΕΕ και πλύνετε-in και -out μέσα στο site του όγκου. Τ

2-σταθμισμένες εικόνες αποκτήθηκαν χρησιμοποιώντας μια ακολουθία παλμών γρήγορο γύρισμα echo (FSE) με μια ηχώ συντελεστή 4, δίνοντας μια αποτελεσματική ΤΕ 72 ms. μέθοδος ανάκτησης κορεσμού για Τ

1 χαρτογράφησης με πέντε διαφορετικές χρόνο αποκατάστασης τιμές (TR) αποκτήθηκε πριν από την ένεση του παράγοντα αντίθεσης (TR = 5000, 2000, 800, 300, 150 ms, ΤΕ = 7,2 ms, FOV = 35 x 70 mm, μήτρα = 128 x 256, χωρική ανάλυση = 273 x 273 μm). Εννέα 1-mm πάχους στεφανιαίες τομές προσανατολισμένες πάνω από την αρτηρία του όγκου και για να εξασφαλιστεί μια έγκυρη λειτουργία αρτηριακής εισόδου (ΟΕΕ). Το ζώο ήταν καλά ασφαλισμένο με ταινία για την αποφυγή αντικείμενα κίνηση. Πριν, κατά τη διάρκεια και μετά τη χορήγηση εφ ‘άπαξ μιας μόνο δόσης της CA (0,15 mmol /kg Gd-DTPA), μια δυναμική σειρά από γύρισμα echo Τ

1-σταθμισμένη εικόνες (TR = 150 ms, ΤΕ = 7,2 ms) αποκτήθηκαν για 35 λεπτά. δεδομένων DCE-MRI υποβλήθηκε σε επεξεργασία χρησιμοποιώντας ένα γενικό κινητικό μοντέλο όπως περιγράφεται από Tofts et al. Μια πλήρης περιγραφή αυτών των μεθόδων έχει περιγραφεί προηγουμένως. [29, 35]

DW-MRI διεξήχθη για να μετρηθούν οι ποσοτικές τιμές ADC με ίδια γεωμετρία με DCE-MRI. παράμετροι αλληλουχίας περιλαμβάνουν πέντε β-τιμές: 12, 50, 500, 800, 1500 s /mm

2 με TR = 1500 ms και ΤΕ = 35? Έξι μέσος χρησιμοποιήθηκαν για τη μείωση των τεχνουργημάτων κινήσεως. χαρτών ADC παρήχθησαν από ένα σπιτικό πρόγραμμα Matlab που ταιριάζει β-τιμές στην εξίσωση Stejskal-Tanner, S = S

0 * EXP (-b * ADC), όπου S

0 είναι το πλάτος του σήματος, χωρίς στάθμιση διάχυσης και S είναι το πλάτος του σήματος με στάθμιση διάχυσης.

Περιοχές ενδιαφέροντος (ROIs) προσδιορίστηκαν με Τ

2W εικόνες με ακριβώς ίδια γεωμετρία των DCE- και DW-MRI εξαγορά. Αυτά τα ROI ήταν προεξέχοντας πάνω DCE- και DW-MRI δεδομένα ώστε να ελαχιστοποιείται η διακύμανση της ανθρωπικής παράγοντα. ιστογράμματα κατανομής λήφθηκαν για κάθε ROI που όγκου των DCE- ή DW-MRI. Τα δεδομένα παρουσιάζονται ως μέσος όρος και το τυπικό σφάλμα του. t τεστ του Student, ANOVA χρησιμοποιήθηκαν όπου ενδείκνυται. P & lt? 0,05 θεωρήθηκε ως στατιστικά σημαντική

Ανοσοϊστοχημεία

Μετά την ολοκλήρωση της θεραπευτικής και MRI πρωτόκολλα απεικόνισης, υδροχλωρική πιμονιδαζόλη. (60 mg /kg? Hypoxyprobe Inc.) εγχύθηκε Ι.Ρ. μία ώρα πριν την αφαίρεση του όγκου, στη συνέχεια σταθεροποιήθηκαν σε 10% φορμαλίνη, ενσωματωμένα σε παραφίνη, και υφίστανται περαιτέρω επεξεργασία για ανοσοϊστοχημεία. Tumor διατομές βάφτηκαν με ένα κουνέλι πρωτογενές αντίσωμα έναντι γ-Η2ΑΧ (Novus Biologicals, Littleton, CO) και το δευτερεύον αντίσωμα αντι-κουνελιού Ventana OmniMap (Ventana Medical Systems, Tucson, ΑΖ). Πιμονιδαζόλη θετικός ιστός ανιχνεύτηκε χρησιμοποιώντας αντιορούς κουνελιού ενάντια υδροχλωρική πιμονιδαζόλη (2627? Hypoxyprobe Inc.). Το σύστημα ανίχνευσης που χρησιμοποιήθηκε ήταν το Ventana ChromoMap Kit. Τα πλακίδια με αιματοξυλίνη & amp? ηωσίνη και σαρώνονται χρησιμοποιώντας τον Aperio ScanScope XT.

Αποτελέσματα

Οι κινητικές παράμετροι του DCE-MRI για την ποσοτικοποίηση αιμάτωσης όγκου εκτιμήθηκαν σε pixel-σοφός βάση από την εφαρμογή του μοντέλου Tofts όπως περιγράφεται στο [ ,,,0],35]. Αντιπροσωπευτικά K

trans χάρτες για κάθε τύπο όγκου φαίνεται στο σχήμα 1. τα ROI όγκου (περιοχές ενδιαφέροντος) προσδιορίστηκαν με Τ

2-σταθμισμένες εικόνες σε όλες τις τομές, και χρησιμοποιείται για να οριοθετηθούν pixels για αναλύσεις ιστόγραμμα. Όπως φαίνεται από τα ιστογράμματα, η Κ

trans παράγεται από εκπρόσωπο Hs766T και Mia-ΡΑΟΑ-2 όγκοι μειώθηκαν δραματικά 48 ώρες μετά TH-302 θεραπείας, σε σύγκριση με τις προ θεραπείας τιμές. Δεν υπήρξαν σημαντικές μεταβολές που παρατηρήθηκαν για SU.86.86 όγκων στο ίδιο χρονικό σημείο (Σχήμα 1). Παρά το γεγονός ότι ένα άτομο στην ομάδα SU.86.86 είχε σημαντική μείωση μετά από θεραπεία TH-302 (48 ώρες), οι μέσες μεταβολές μεταξύ των ομάδων σύγκρισης δεν ήταν στατιστικά σημαντικές. Τα Χρονικά μαθήματα κανονικοποιημένη μέση K

trans τιμές που παρουσιάζονται στο Σχήμα 2 (α). Οι μέσες τιμές των κανονικοποιημένων K

trans μειώθηκαν 69,2% για TH-302-ποντικούς που υπέστησαν αγωγή σε όγκους Hs766T, μειώθηκαν 46,1% για Mia PaCa-2 όγκων και την αύξηση 4,9% σε SU.86.86 όγκους. Και οι δύο αλλαγές για την Hs766T και PaCa-2 ομάδες θεραπείας Mia ήταν στατιστικά σημαντική (

P

& lt? 0,01) σε σύγκριση με τη δική τους ομάδα ελέγχου. Σε αντίθεση, η μέση αύξηση της αξίας για την ομάδα SU.86.86 δεν ήταν στατιστικά σημαντική (

P

= 0,15). Αυτές οι αλλαγές στην αγγειακή αιμάτωση συσχετίζεται με κάθε κυτταρικές σειρές θεραπευτική αντιμετώπιση TH-302 [36].

Όπως καταδεικνύεται στο ιστόγραμμα, Κ

trans παράγεται από Hs766T και Mia-ΡΑΟΑ-2 όγκοι δραματικά μειωμένη 48 ώρες μετά την αγωγή TH-302 σε σύγκριση με τις τιμές προ της θεραπείας. Δεν υπήρχαν σημαντικές αλλαγές που παρατηρούνται για ένα ποντίκι SU.86.86 στο ίδιο χρονικό σημείο.

Η

Α) Χρονικά μαθήματα κανονικοποιημένη μέση K

trans τιμές. Οι μέσες τιμές των κανονικοποιημένων K

trans μειώθηκε 69% για ποντικούς που υπέστησαν αγωγή TH-302 σε όγκους Hs766T, μειώθηκαν 46% για Mia PaCa-2 όγκων και την αύξηση 5% σε SU.86.86 όγκους. Β) Αλλαγές στις κανονικοποιημένες μέσες τιμές ADC όγκου συναρτήσει του χρόνου. Μια σημαντική αύξηση σε σχετική μέση ADCs παρατηρήθηκε για την ομάδα που υπέστη αγωγή TH-302 σε μετα 24 και 48 ώρες (29% αύξηση για 24 ώρες, ρ & lt? 0,01? 17% αύξηση για 48 ώρες, ρ & lt? 0,01). ΜΙΑ PaCa-2 δεν είναι στατιστικά σημαντική διαφορετική μεταξύ διεξήχθη ομάδων (8% αύξηση για 24 ώρες,

P

& gt? 0,05? 4% αύξηση για 48 ώρες, p & gt? 0,05). Για SU.86.86, καμία σημαντική αλλαγή ανιχνεύθηκε από DW-MRI τόσο για TH-302 και ομάδα ελέγχου (3% μείωση για 24 ώρες, p & gt? 0,05? 0,5% αύξηση για 48 ώρες, p & gt? 0,05). Η ομαλοποίηση υπολογίστηκε από τον μέσο όρο της διαφοράς πριν και μετά τη θεραπεία σε ομάδα Th302 σχέση με το μέσο της διαφοράς πριν και μετά τη θεραπεία σε ομάδα ελέγχου. Οι ράβδοι σφάλματος σημαίνουν τυπική απόκλιση.

Η

DW-MRI χρησιμοποιήθηκε για την ποσοτικοποίηση κυτταρικότητα, και χρησιμοποιήθηκε επίσης για την ανίχνευση της απόκρισης των τριών ξενομοσχευμάτων όγκου προς Th-302. Έξι μέσοι όροι των DW-εξαγορών χρησιμοποιήθηκαν σε αυτή τη μελέτη για να μειώσει το δυναμικό για τεχνούργημα κίνηση. Οι χάρτες ADC από αντιπροσωπευτικά ζώα σε διαφορετικά χρονικά σημεία πριν και μετά τη θεραπεία φαίνεται στο Σχ 3. Όπως με τα δεδομένα DCE, εικόνες Τ2 χρησιμοποιήθηκαν για να οριοθετηθούν ROI όγκου, και περιγεγραμμένη εικονοστοιχεία στη συνέχεια χρησιμοποιείται για να παράγει ιστογράμματα. Οι αλλαγές στις κανονικοποιημένες μέσες τιμές ADC όγκου συναρτήσει του χρόνου παρουσιάζεται στο Σχήμα 2 (b). Μια σημαντική αύξηση σε σχέση με μέση ΚΔΚ παρατηρήθηκε για τα επεξεργασμένα Hs766T όγκους TH-302 σε 24 ώρες και 48 ώρες μετά τη θεραπεία (29% αύξηση για 24 ώρες, ρ & lt? 0,01? 17% αύξηση για 48 ώρες, ρ & lt? 0,01). Για SU.86.86, δεν υπάρχουν σημαντικές αλλαγές είχαν εντοπιστεί από DW-MRI τόσο για TH-302 και ομάδες ελέγχου (3% μείωση για 24 ώρες, p & gt? 0,05? Αύξηση 0,5% για 48 ώρες, p & gt? 0,05). Αν και φάνηκε ότι υπήρχε μια αύξηση στην ADC του MiaPaCa-2 στις 24 ώρες σε σύγκριση με την υποομάδα του οχήματος (8%, P & gt? 0.05), αυτές οι αλλαγές δεν ήταν στατιστικά σημαντικά διαφορετική από τους ελέγχους του οχήματος

Μια δραματικά. αυξημένη ADCs παρατηρείται σε HS766T, αλλά όχι στις άλλες δύο τύπους όγκων.

Η

στατιστικά σημαντικές αλλαγές σε Κ

trans παρατηρήθηκαν σε Hs766T και ΜΙΑ PaCa-22 όγκους που έλαβαν θεραπεία με TH-302 για 48 h μετά τη θεραπεία, όπως προσδιορίζεται με DCE-MRI. Κ

trans παρέμεινε αμετάβλητο στο SU.86.86 όγκους (Σχήμα 1). Η δραστική τελεστή του TH-302 είναι ένας παράγοντας διασταυρούμενης σύνδεσης DNA που φαίνεται στο παρελθόν για την αύξηση της πυρηνικής γ-Η2ΑΧ, ένα κλειδί βιοδείκτη για οδούς απόκριση βλάβης του DNA, in νίνο μετά μόλις 6 ώρες TH-302 θεραπεία των υστέρων σε μοντέλα παγκρεατικού όγκου [ ,,,0],37], υποδηλώνοντας πρώιμες αλλαγές στην αγγειακή διαπερατότητα που παρατηρείται σε αυτήν την μελέτη μπορεί να είναι συνέπεια του TH-302 κυτταροτοξικότητα. Για να σχεδιάσετε μια σχέση μεταξύ των μεταβολών της διαπερατότητας και της δραστηριότητας TH-302, όγκου διατομές από τις τρεις ομάδες όγκων ανοσοϊστοχημικά αξιολογήθηκαν για γ έκφρασης H2AX (Σχήμα 4Α). -H2AX Πυρηνική γ αυξήθηκε σε TH-302 αγωγή Hs766T και ΜΙΑ PaCa-2 όγκους σε σύγκριση με τον έλεγχο αλατούχου διαλύματος. Καμία ανιχνεύσιμη αλλαγή σε χρώση γ-Η2ΑΧ παρατηρήθηκε μεταξύ Su.86.86 επεξεργασμένου και θεραπεία με αλατούχο ορό όγκους. Ο κύριος καθοριστικός παράγοντας της ενεργοποίησης και της αποτελεσματικότητας TH-302 είναι η υποξία του όγκου. Ανοσοϊστοχημική ανίχνευση πιμονιδαζόλη, ενός δείκτη σωματικής υποξίας, έδειξαν μεγαλύτερη χρώση σε TH-302 ευαίσθητου Hs776t και ΜΙΑ PaCa-2 όγκους σε σύγκριση με TH-302 νεοπλασιών ανθεκτικών SU.86.86 (Σχήμα 4Β) την υποστήριξη πρότυπα έκφρασης γ-Η2ΑΧ εξής TH-302 θεραπεία. Αυτά τα δεδομένα υποστηρίζουν πρώιμες αλλαγές σε Hs766T και ΜΙΑ PaCa-2 αιμάτωσης όγκου σε 48 ώρες θα μπορούσε ενδεχομένως να οφείλεται στην κυτταροτοξική δράση των ΤΗ-302.

(Α) Η ιστολογική χρώση γ-Η2ΑΧ, ένα δείκτη για DNA μηχανισμοί αντιμετώπισης βλάβης, σε PDAC όγκους πριν και 48 ώρες μετά το TH-302 θεραπεία (50 mg /kg). Η έκφραση της γ -H2AX αυξήθηκε σε TH-302 αγωγή Hs766T και ΜΙΑ PaCa-2 όγκους σε σύγκριση με έλεγχο άλμης. Καμία ανιχνεύσιμη αλλαγή σε χρώση γ-Η2ΑΧ παρατηρήθηκε μεταξύ Su.86.86 θεραπευθεί και αλατούχο όγκους. (Β) χρώση πιμονιδαζόλη ως βιοδείκτη της φυσικής υποξίας όγκου. Πιμονιδαζόλη Hydrochloride εγχύθηκε 2hr πριν από την αφαίρεση του όγκου. Η έκταση της υποξίας ήταν μεγαλύτερη σε όγκους Hs766T και τουλάχιστον σε SU.86.86 με Mia PaCa-2 όγκους μέτρια υποξική. Αυτές οι εικόνες είναι αντιπροσωπευτικές εικόνες για κάθε τύπο όγκου. Ράβδοι κλίμακας = 200 μΜ.

Η

Συζήτηση

Η αποτελεσματικότητα του TH-302 επηρεάζεται από πολλούς παράγοντες, όπως η βατότητα των πλοίων και το επίπεδο της υποξίας σε μια δεδομένη περιοχή. [38] Έχοντας την ικανότητα να μετρήσει τις αλλαγές στις παραμέτρους αυτές πάροδο του χρόνου σε απάντηση ενεργοποιημένη TH-302, είναι κρίσιμη. Τέτοιες αλλαγές μπορούν να χρησιμοποιηθούν για την αξιολόγηση της θεραπευτικής ανταπόκρισης. Τρέχουσα μη-απεικόνισης ή επεμβατικές μέθοδοι περιορίζονται για in vitro χρήση, ενώ η απεικόνιση βιοδείκτες μπορούν να δώσουν ποσοτικές μετρήσεις της εξέλιξης του όγκου ή παλινδρόμηση, χωρίς να μεταβάλλει σημαντικά το μικροπεριβάλλον. Οι δύο MRI λεπτομέρειες που χρησιμοποιούνται σε αυτή τη μελέτη, DCE-MRI και DW-MRI, μπορούν και οι δύο ξεχωριστά πληροί τις απαιτήσεις αυτές βασίζονται σε παρατηρήσιμα παραμετρική χάρτες, οι οποίοι παρέχουν πληροφορίες σχετικά με αγγείωση και κυτταροβρίθεια, αντίστοιχα. Επιπλέον, οι περισσότεροι όγκοι είναι γνωστό ότι είναι ετερογενείς, και ιδιαίτερα σε καρκίνο του παγκρέατος. Ως εκ τούτου, μεγάλο ενδιαφέρον που χωρικών πληροφοριών μπορεί να αξιολογηθεί ποσοτικά με βάση pixel-by-pixel είναι. [39] όγκων υποξία είναι ο ισχυρότερος προγνωστικός δείκτης της ανταπόκρισης του όγκου σε HAPS και μπορεί να μετρηθεί σε ασθενείς που χρησιμοποιούν απεικόνιση ΡΕΤ της 18F-ένδειξη 2 -νιτροϊμιδαζόλιο ιχνηθετών (F-MISO, FAZA, HX4). Ωστόσο, η απεικόνιση υποξίας PET είναι ακόμα σε πειραματικό στάδιο. Σε αντίθεση, MR μέτρα της αναντιστοιχίας αιμάτωσης-διάχυσης μπορεί να ποσοτικά σχετίζονται με υποξία. [24]

Η μελέτη επικεντρώθηκε στον εντοπισμό και τη σύγκριση των MR βιοδείκτες απεικόνισης για την ανίχνευση πρόωρη απάντηση TH-302 θεραπεία σε ευαίσθητα και ανθεκτικά μοντέλα όγκων PDAC. Πριν από την εργασία από την ομάδα μας είχε δείξει ότι MiaPaCa-2 όγκοι ανταποκρίθηκαν στο TH-302 με μια μικρή, αλλά σημαντική, μείωση στην Κ

trans, με καμία επίδραση στην ADC [30]. Τα αποτελέσματα αυτά επιβεβαιώθηκαν εδώ. Τα αποτελέσματα από DCE-MRI έδειξαν σαφή μείωση των Κ

trans και στα δύο μοντέλα Hs766T και Mia PaCa-2, τα οποία είναι σημαντικά πιο υποξική, σε σύγκριση με SU.86.86 όγκους, τα οποία δεν ανταποκρίνονται στις TH-302 με αλλαγή όγκο ή μια αλλαγή στην Κ

trans. Συνεπής με την προηγούμενη εργασία, Hs766T επιβεβαιώθηκε με πιμονιδαζόλη ανοσοϊστοχημεία (Σχήμα 4) για να έχουν το μεγαλύτερο κλάσμα υποξική μεταξύ αυτών των τριών μοντέλων? ΜΙΑ PaCa-2 ήταν ενδιαμέσως υποξική και SU.86.86 έχει ελάχιστη υποξία σε σύγκριση με τις άλλες δύο. [40] Έτσι, η μείωση της διαπερατότητας μπορεί να είναι το επακόλουθο της ενεργοποίησης TH-302 υπό τις συνθήκες χαμηλού οξυγόνου με αποτέλεσμα την αναστολή της σηματοδότησης VEGF. Αυτό είναι το αντίθετο, όπως φαίνεται σε μη υποξικά ιστούς όγκων. Ο βαθμός των μεταβολών διαπερατότητας μπορεί άμεσα να σχετίζεται με το βαθμό της υποξικής περιοχής. Το αποτέλεσμα αυτό επιβεβαιώνει τα προηγούμενα αποτελέσματα δείχνουν ότι TH-302 είναι πιο αποτελεσματική στην υποξική όγκων [36]

Οι δύο μέθοδοι απεικόνισης MR χρησιμοποιήθηκαν σε αυτή τη μελέτη είναι ριζικά διαφορετική:. Κινητικές παράμετροι αξιολογούνται από το DCE-MRI αξιολογήσει τις αλλαγές αγγείωση, ενώ οι τιμές ADC τοποθετηθεί από DW-MRI αντανακλούν τις αλλαγές της κυτταρικής πυκνότητας. Η DCE-MRI αντανακλά τη διαπερατότητα (ή ροής) αλλαγές που μπορεί να προκύψουν από κυτταροτοξικά αποτελέσματα επί των υποξικών καρκινικών κυττάρων και μειωμένη παραγωγή VEGF από την ενεργοποίηση του TH-302, ενώ DW-MRI είναι μια έμμεση μέτρηση των κυτταρικών συνέπειες που προκύπτουν πιθανώς παρακάτω η αλλαγή αγγείωση. [30] Είναι ενδιαφέρον ότι, παρατηρήσαμε ότι η αλλαγή ADC ήταν σημαντική μόνο στα πιο ευαίσθητα όγκους Hs766T, αλλά όχι στα άλλα δύο μοντέλα. Η έλλειψη αλλαγής στην ADC σε SU.86.86 είναι συνεπής με την έλλειψη επίδρασης του TH-302 στην ανάπτυξη του όγκου, και τη σχετική έλλειψη της υποξίας σε αυτό το μοντέλο. Είναι ενδιαφέρον ότι, ΜΙΑ PaCa-2 επίσης δεν δείχνουν απόκριση διάχυση προς Th-302, παρά το γεγονός ότι η ανάπτυξη του όγκου ανεστάλη. Αυτό ήταν σύμφωνο με τις προηγούμενες παρατηρήσεις, χρησιμοποιώντας αυτή τη γραμμή όγκου. [30] Αξίζει να σημειωθεί ότι η επίδραση της θεραπείας TH-302 στην ανάπτυξη του όγκου MiaPaCa-2 δεν ήταν εμφανής μέχρι την ημέρα 8 της θεραπείας, ενώ η επίδραση επί Hs766T ήταν άμεση. Ως εκ τούτου, η αλλαγή στο ADC μπορεί να είναι σε θέση να προμηνύουν αλλαγές όγκο του όγκου που συμβαίνουν μια ημέρα ή δύο αργότερα, αλλά δεν αλλάζει έξι ημέρες αργότερα.

Η επιλογή μιας συνάρτησης αρτηριακής εισόδου (ΟΕΕ) επηρεάζει άμεσα τις κινητικές παραμέτρους παράγεται από το υπόδειγμα Tofts. Παράγοντες για την εκτίμηση του ΟΕΕ μπορεί να προκαλέσει σφάλματα, συμπεριλαμβανομένης της μερικής αποτελέσματα όγκο, χαμηλή χρονική και χωρική ανάλυση, χαμηλής αντίθεσης προς θόρυβο (CNR) και σε πολλές περιπτώσεις DCE-MRI, μια κακή επιλογή των μεγάλων αρτηριών στο οπτικό πεδίο και κίνηση αντικείμενα. Σε αυτή τη μελέτη, η άμεση μέτρηση της αρτηριακής ήταν μια πρόκληση, δεδομένης της αναπνευστικής κίνησης κατά τη διάρκεια της απόκτησης MR. Αν και τεχνουργήματα κίνησης και το χαμηλό SNR θα μπορούσε να μειωθεί με την εφαρμογή μιας χρονικής spline-fit λειτουργία και χωρική Gaussian πυρήνα για την εξομάλυνση των δεδομένων σχετικά με τις αναλύσεις pixel-σοφός, η επιλογή των ΟΕΕ ROI παίζει μεγάλο ρόλο για τα τελικά αποτελέσματα, όπως συζητήθηκε στο [ ,,,0],35]. Αυτό ήταν το πιο κοινό πρόβλημα που επηρεάζει επαναληψιμότητα της DCE-MRI, έτσι μεγάλο μπαρ σφάλμα που παρατηρήθηκε στα αποτελέσματα DCE-MRI. Παρά τους περιορισμούς αυτούς, DCE-MRI ήταν σε θέση να διακρίνει τις διαφορές στο TH-302 απόκριση, μεταξύ των τριών τύπων όγκου, με έναν τρόπο που ήταν σύμφωνη με ιστολογικά ευρήματα.

αγγειακό σύστημα του όγκου είναι διαρκώς μεταβαλλόμενο, εν μέρει ως απάντηση στην υψηλή VEGF συγκεντρώσεις όγκου προκαλώντας παρεκκλίνουσα νέο-αγγείωση [41] και το άγχος στερεάς φάσης με αποτέλεσμα συμπίεση των εύθραυστων αγγείων [42], τα οποία αμφότερα συμβάλλουν στην μειωμένη ροή αίματος. Σε αυτή τη μελέτη, μετρήσαμε νωρίς μεταβολές στην αιμάτωση του όγκου μετά από αγωγή TH-302. Για να εξαλειφθεί η πιθανότητα ότι οι αλλαγές στην αιμάτωση του όγκου μετά TH-302 είναι αποτέλεσμα της φυσιολογικής δυναμικής φύσης του αγγειακού συστήματος του όγκου, του όγκου εγκάρσια τομές χρωματίστηκαν για ιστολογικά -H2AX πυρηνική γ, μια πρωτεΐνη που εμπλέκεται στην οδούς Βλάβη DNA Response [43], ένα μέτρο του TH-302 κυτταροτοξικότητα. Όπως αναμενόταν, TH-302 ευαίσθητου όγκους, Hs766T και ΜΙΑ PaCa-2, που παρουσιάζεται με αυξημένη -H2AX πυρηνική γ σε σύγκριση με τον έλεγχο των όγκων. Καμία σημαντική αλλαγή στην αιμάτωση του όγκου ή την πυρηνική γ -H2AX παρατηρήθηκε σε SU.86.86 όγκους, TH-302 ανθεκτικό. Αυτές οι αλλαγές υποστήριξη δεδομένων αιμάτωσης όγκου όπως μετρήθηκε με DCE-MRI μπορεί να χρησιμοποιηθεί ως βιολογικός δείκτης πρώιμης απόκρισης για θεραπεία TH-302.

Εν κατακλείδι, οι μελέτες μας δείχνουν ότι οι μεταβολές στην αιμάτωση του όγκου μετρήθηκε με DCE-MRI μπορεί να έχει δυναμικό ως πρώιμο δείκτη του TH-302 φαρμακοδυναμική και ότι DW MRI είναι ένας πιθανός βιολογικός δείκτης για την ενδεχόμενη ανταπόκριση του όγκου του όγκου.