Αφηρημένο

Στόχοι

Για να μετρήσετε y αντιγόνο Lewis και την έκφραση του αντιγόνου CD44 σε επιθηλιακό καρκίνο ωοθηκών και να συσχετίσει τα επίπεδα αυτών των αντιγόνων με την κλινική ανταπόκριση στη χημειοθεραπεία.

μέθοδοι

Οι περιπτώσεις μελέτη περιλάμβανε 34 περιπτώσεις καρκίνου των ωοθηκών με την αντίσταση σε χημειοθεραπευτικά φάρμακα, 6 μερικώς φάρμακο-ευαίσθητες περιπτώσεις, και 52 ναρκωτικά ευαίσθητες υποθέσεις (92 συνολικά).

Αποτελέσματα

τα ποσοστά εκφράσεως του y αντιγόνου Lewis και το αντιγόνο CD44 ήταν σημαντικά μεγαλύτερες στην ομάδα ανθεκτικών στο φάρμακο από ότι στα μερικώς ευαίσθητες ή ευαίσθητες ομάδες. Χειρουργικά στάδιο, υπολείμματα μέγεθος του όγκου και της έκφρασης του CD44 και του αντιγόνου Lewis Υ σε ιστούς καρκινώματος των ωοθηκών ήταν ανεξάρτητοι παράγοντες κινδύνου για χημειοθεραπευτική αντοχή φαρμάκου.

Συμπεράσματα

Η υπερέκφραση του Lewis Υ και CD44 αντιγόνο είναι ισχυρούς παράγοντες κινδύνου για χημειοαντοχή σε ασθενείς με καρκίνωμα των ωοθηκών

Παράθεση:. Hu Z, Gao J, Zhang D, Liu Q, Yan L, Gao L, et al. (2013) υψηλή έκφραση του Lewis Υ αντιγόνο και CD44 συσχετίζεται με αντίσταση στη χημειοθεραπεία σε επιθηλιακά ωοθηκών καρκίνους. PLoS ONE 8 (2): e57250. doi: 10.1371 /journal.pone.0057250

Επιμέλεια: Shannon M. Hawkins, Baylor College of Medicine, Ηνωμένες Πολιτείες της Αμερικής

Ελήφθη: 12 Ιουλ 2012? Αποδεκτές: 21 Ιαν 2013? Δημοσιεύθηκε: 28, Φεβρουαρίου, 2013

Copyright: © 2013 HU et al. Αυτό είναι ένα άρθρο ανοικτής πρόσβασης διανέμεται υπό τους όρους της άδειας χρήσης Creative Commons Attribution, το οποίο επιτρέπει απεριόριστη χρήση, τη διανομή και την αναπαραγωγή σε οποιοδήποτε μέσο, ​​με την προϋπόθεση το αρχικό συγγραφέα και την πηγή πιστώνονται

Χρηματοδότηση:. Αυτό το έργο υποστηρίζεται από το Εθνικό Ίδρυμα Φυσικών Επιστημών της Κίνας (Νο 30872757, 81072118, 81172491, 81101527)? Ph.D. Προγράμματα Ίδρυμα του Υπουργείου Παιδείας της Κίνας (Αρ 20112104110016, 20112104120019)? Επιστήμη Ίδρυμα της Επιτροπής της Shenyang City, Κίνα (Αρ F10-14-9-9-52)? Shengjing Δωρεάν Πρόγραμμα Ερευνητής (Νο 200807). Οι χρηματοδότες δεν είχε κανένα ρόλο στο σχεδιασμό της μελέτης, τη συλλογή και ανάλυση των δεδομένων, η απόφαση για τη δημοσίευση, ή την προετοιμασία του χειρογράφου

Αντικρουόμενα συμφέροντα:.. Οι συγγραφείς έχουν δηλώσει ότι δεν υπάρχουν ανταγωνιστικά συμφέροντα

Εισαγωγή

Η ανάπτυξη ανθεκτικότητας στη χημειοθεραπεία στο επιθηλιακό καρκίνους των ωοθηκών περιλαμβάνει πολλούς μηχανισμούς. Τα τελευταία χρόνια, πρόσφυση με τη μεσολάβηση της αντοχής στα φάρμακα κυττάρων (CAM-DR) έχει καταστεί μια ενεργή περιοχή έρευνας στη μελέτη της ανθεκτικότητας στα φάρμακα όγκων. Για παράδειγμα, η υαλουρονάνη (ΗΑ) -ειδικές υποδοχέα, CD44, η οποία διαδραματίζει σημαντικό ρόλο στην πρόσφυση, έχει δειχθεί ότι εμπλέκεται στην CAM-DR μέσω αλληλεπιδράσεων με το πρόσδεμά του ΗΑ [1], [2]. Αρκετές μελέτες έχουν αποκαλύψει ότι CD44s εκφράζεται υψηλά in situ και μεταστατικούς καρκίνους των ωοθηκών και ότι η έκφραση CD44 συσχετίζεται με κακοήθη συμπεριφορά των καρκινικών κυττάρων των ωοθηκών, όπως προσκόλληση, εισβολή, και μετάσταση [3], [4]. CD44 τροποποιείται μετα-μεταφραστικά με γλυκοζυλίωση, η οποία έχει αποδειχθεί ότι επηρεάζουν CD44 μεσολάβηση CAM-DR [5]. Σε προκαταρκτικές μελέτες μας, έχουμε βρει ότι, αν και τα επίπεδα CD44 mRNA ήταν παρόμοια σε α1,2-φουκοζυλτρανσφεράση επιμολυσμένα καρκινικά κύτταρα των ωοθηκών (RMG-1-H) και τα μητρικά κύτταρα (RMG-1), τα επίπεδα έκφρασης πρωτεΐνης CD44 ήταν σημαντικά υψηλότερες στα κύτταρα RMG-1-H. Επιπλέον, βρήκαμε ότι η δι-φουκοζυλιωμένη Lewis Υ αντιγόνο ήταν ένα μέρος της σύνθεσης του CD44 και ότι η αυξημένη έκφραση αυτού του αντιγόνου συσχετίζεται με αυξημένη CD44 μεσολάβηση προσκόλληση των ωοθηκών κυττάρου και μετανάστευση [6]. Αυξημένη έκφραση του αντιγόνου y Lewis και CD44 σε RMG-1-Η κύτταρα που συνδέονται με την αυξημένη αντίσταση σε χημειοθεραπευτικά φάρμακα, συμπεριλαμβανομένων των 5-φθοριοουρακίλη, καρβοπλατίνη και πακλιταξέλη (Ταχοί ®) [7], [8]. Αν και οι επιδράσεις της εναλλακτικό μάτισμα και μετα-μεταφραστική γλυκοζυλίωση της CD44 στην αλληλεπίδραση της με ΗΑ έχουν ευρέως μελετηθεί τα τελευταία χρόνια, λίγες αναφορές έχουν περιγράψει τις επιδράσεις των μεταβολών σε φουκοσυλίωσης επί CD44 εξαρτώμενη CAM-DR των καρκινικών κυττάρων των ωοθηκών. Ως εκ τούτου, για να αντιμετωπίσει το θέμα αυτό, στην παρούσα μελέτη, έχουμε ποσοτικά αντίστασης των ωοθηκών καρκίνο των ναρκωτικών και της έκφρασης των y αντιγόνο Lewis και CD44 σε ιστούς από ασθενείς με καρκίνο των ωοθηκών. Στη συνέχεια χρησιμοποιήσαμε αυτά τα δεδομένα για τη διερεύνηση συσχετίσεων μεταξύ της έκφρασης του y Lewis αντιγόνου και CD44 και χημειοθεραπευτικά αντίσταση, εκτός από την αξιολόγηση της κλινική σημασία αυτών των συσχετισμών.

Υλικά και Μέθοδοι

Αυτή η μελέτη εγκρίθηκε από το Διοικητικό συμβούλιο Institutional Review της Shengjing Νοσοκομείου. Μεταξύ Μαΐου 2005 και Ιουλίου του 2009, 92 Κινέζοι ασθενείς διαγνώστηκαν με πρωτοπαθή επιθηλιακό καρκίνο των ωοθηκών από την χειρουργική επέμβαση και παθολογική ανάλυση έγιναν αναδρομικά εντοπίστηκαν από τα αρχεία του Shengjing Νοσοκομείο συνεργάζονται με την Κίνα Medical University. Όλοι οι ασθενείς υποβλήθηκαν σε θεραπεία για τον καρκίνο των ωοθηκών που περιελάμβανε χειρουργική debulking, ακολουθούμενη από 6-8 μετεγχειρητική κύκλους paclitaxel (Taxol @) συν καρβοπλατίνη (σχήμα TC) συμβατική χημειοθεραπεία. Το πρόγραμμα χημειοθεραπείας σχεδιάστηκε από την ημέρα της χειρουργικής επέμβασης. Οι ασθενείς παρακολουθήθηκαν για τουλάχιστον ένα έτος μετά την ολοκλήρωση της χημειοθεραπείας. πληροφορίες ασθενών, συμπεριλαμβανομένης της ηλικίας, χειρουργικά στάδιο, βαθμός, παθολογική υπότυπο, μετάσταση λεμφαδένα και υπολειμματικά μέγεθος του όγκου, συλλέχθηκαν από κλινικά και παθολογικά αρχεία (Πίνακας 1). επίπεδα βιοδεικτών όγκου και τα αποτελέσματα από απεικόνισης και γυναικολογικές εξετάσεις καταγράφηκαν επίσης κατά τη στιγμή της χημειοθεραπείας και κατά επανεξέταση. Τα σχετίζονται κλινικά δεδομένα και την παρακολούθηση των δεδομένων χημειοθεραπεία (≥2 έτη) για όλους τους ασθενείς ήταν πλήρης.

Η

Οι ασθενείς χωρίστηκαν σε ομάδες σύμφωνα με τα κριτήρια από τις κατευθυντήριες γραμμές NCCN 2012 (National Comprehensive Cancer Network). Με βάση αυτά τα κριτήρια, (1)

η χημειοθεραπεία ανθεκτική ομάδα

περιελάμβανε ασθενείς που είχαν μια κλινική ανταπόκριση στην αρχική χημειοθεραπεία TC, αλλά έμπειροι επακόλουθη υποτροπή, είτε στο όψιμο στάδιο της χημειοθεραπείας ή εντός 6 μηνών μετά την ολοκλήρωση της χημειοθεραπείας? (2)

η μερικώς χημειοθεραπεία ευαίσθητη ομάδα

περιελάμβανε ασθενείς που εμφάνισαν υποτροπή του καρκίνου των ωοθηκών μέσα σε 6-12 μήνες μετά την ολοκλήρωση της χημειοθεραπείας? και (3)

η χημειοθεραπεία ευαίσθητη ομάδα

περιλαμβάνονται ασθενών που διατήρησαν την κλινική ανταπόκριση για ≥12 μήνες. Παράγοντες διαγνωστικών για υποτροπή του καρκίνου των ωοθηκών που περιλαμβάνονται συνεχώς αυξημένα επίπεδα CA125, στερεών βλάβες που προσδιορίζονται από γυναικολογική εξέταση, οι όγκοι που προσδιορίζονται από την απεικόνιση και τα σημάδια του ασκίτη. Σύμφωνα με τις κατευθυντήριες γραμμές NCCN που περιγράφονται παραπάνω, ασθενείς με καρκίνο των ωοθηκών αποδόθηκαν είτε στην χημειοθεραπεία ανθεκτική ομάδα (n = 34), το μερικώς χημειοθεραπεία ευαίσθητη ομάδα (n = 6) και η χημειοθεραπεία ευαίσθητη ομάδα (n = 52).

Ανοσοϊστοχημεία

η ανοσοϊστοχημεία χρησιμοποιήθηκε για την ανάλυση y αντιγόνο Lewis και τα επίπεδα έκφρασης CD44. Το αντι-Lewis Υ μονοκλωνικό αντίσωμα ποντικού (κλώνος Α70-C /C8, 1:160 αραίωση) και αντι-CD44 ποντικού μονοκλωνικό αντίσωμα (κλώνος F-4, 1:200 αραίωση) αγοράστηκαν από την Abcam (Abcam Co, Cambridge, UK ) και Santa Cruz Biotechnology, Inc. (Santa Cruz, CA, USA), αντίστοιχα. Η διαδικασία χρώσης εκτελέστηκε όπως περιγράφεται στα εγχειρίδια της SABC (Strept σύμπλοκο αβιδίνης-βιοτίνης) και SP (στρεπταβιδίνη-perosidase) κιτ.

Τομές ιστού θεωρήθηκαν θετικά εάν ανοικτό καφέ κόκκοι ήταν παρόντα στις κυτταρικές μεμβράνες και κυτταρόπλασμα. εικόνες χαμηλής ισχύος των τμημάτων βαθμολογήθηκαν με βάση την ένταση χρώσης, και όχι χρώση, ανοιχτό κίτρινο χρώση, ανοιχτό καφέ και καφέ χρώση βαθμολογήθηκαν ως 0, 1, 2 και 3, αντίστοιχα. Στη συνέχεια, επιλέχθηκαν συνολικά 5 πεδία υψηλής ισχύος σε σειρά από κάθε φέτα για τη βαθμολόγηση των μεμονωμένων κυττάρων. Τα μέσα ποσοστά της θετικώς χρωματισμένων κυττάρων Στη συνέχεια υπολογίστηκαν για κάθε πεδίο. Τα πεδία με λιγότερο από 5% θετικά κύτταρα βαθμολογήθηκαν ως 0? 5% έως 25%, όπως 1? 26% έως 50% ως 2? 51% έως 75% ως 3? μεγαλύτερη από 75% ως 4. Αυτά τα δύο βαθμολογίες στη συνέχεια πολλαπλασιάζονται για να δώσει το τελικό σκορ. Ένα τελικό σκορ από το 0 έως 2 θεωρήθηκε (-)? 3 έως 4 ήταν (+)? 5 έως 8 ήταν (++) και 9 έως 12 ήταν (+++). Οι Score≥3 όγκων θεωρείται θετικό για y αντιγόνο Lewis και CD44 στη στατιστική ανάλυση. Δύο ανεξάρτητοι παρατηρητές σκόραρε σε κάθε τμήμα για τον έλεγχο για το σφάλμα του παρατηρητή

Multi-μεταβλητή ανάλυση

επόμενο εκτελείται μια δυαδική ανάλυση λογιστικής παλινδρόμησης (προς τα εμπρός: υπό όρους). Λαμβάνοντας υπόψη την ηλικία, τη χειρουργική στάδιο, βαθμός, παθολογικές υποτύπου, τη μετάσταση των λεμφαδένων, υπολειμματικό μέγεθος του όγκου και την έκφραση του αντιγόνου y Lewis και CD44 υπηρέτησε ως συν-variates και αντοχής φαρμάκου ή ευαισθησία ως εξαρτημένη μεταβλητή, ανάλυση των παραγόντων που σχετίζονται με χημειοθεραπευτικούς αντίσταση σε ασθενείς με καρκίνο των ωοθηκών.

η σύγκριση των ποσοστών επιβίωσης

από το Μάιο του 2012, η ​​οποία ήταν 7 χρόνια μετά την εγγραφή του πρώτου ασθενούς και 3 χρόνια μετά την εγγραφή του τελευταίου ασθενούς, ο μέσος χρόνος παρακολούθησης ήταν 34,0 μήνες. Κατά τη διάρκεια αυτής της χρονικής περιόδου, 26 από 34 ασθενείς στη χημειοθεραπεία ανθεκτική ομάδα, 5 από τους 6 ασθενείς στο μερικώς χημειοθεραπεία ευαίσθητη ομάδα και 13 από 52 ασθενείς στη χημειοθεραπεία ευαίσθητη ομάδα πέθανε από υποτροπή του καρκίνου των ωοθηκών ή μετάστασης. Για να προσδιορίσετε αν ο Lewis Υ αντιγόνο και η έκφραση CD44 συσχετίστηκαν με τα αποτελέσματα καρκίνωμα των ωοθηκών, συγκρίναμε τα ποσοστά επιβίωσης των τριών ομάδων.

Στατιστική Ανάλυση

Θετικές τιμές αναλογία αξιολογήθηκαν χρησιμοποιώντας το

χ

2

δοκιμή, συσχέτιση αναλύσεις πραγματοποιήθηκαν με τη χρήση της σειράς κατάταξης συντελεστής συσχέτισης Spearman. καμπύλες επιβίωσης Kaplan-Meier σχεδιάσθηκαν χρησιμοποιώντας θανάτου από καρκίνο που σχετίζονται με τα τελικά σημεία και συγκρίθηκε χρησιμοποιώντας ένα τεστ log rank. Δυαδική λογιστική παλινδρόμηση χρησιμοποιήθηκε για την πολυπαραγοντική ανάλυση. Όλες οι στατιστικές αναλύσεις πραγματοποιήθηκαν με τη χρήση SPSS λογισμικό V13.0 (SPSS, Illinois, USA). Ένα δύο-ουρά

test p

αξία χρησιμοποιήθηκε σε όλες τις αναλύσεις? α

σ

-τιμές μικρότερες από 0.05 θεωρήθηκαν στατιστικά σημαντικές.

Αποτελέσματα

επίπεδα Lewis Υ αντιγόνο και έκφραση CD44 σε καρκινικούς ιστούς ωοθήκης από ασθενείς με διάφορους ευαισθησία σε χημειοθεραπεία

η χρώση για το αντιγόνο Lewis Υ αποκάλυψε ότι το μόριο ήταν παρούσα κυρίως στην κυτταρική μεμβράνη, αλλά επίσης και στο κυτταρόπλασμα (Εικόνα 1). Τα ποσοστά των θετικών έκφραση του αντιγόνου Lewis Υ στα ανθεκτικά στα φάρμακα, μερικώς ευαίσθητα και ευαίσθητες ομάδες ήταν 91,17%, 55,00% και 61,54%, αντίστοιχα (Πίνακας 1). Το ποσοστό των θετικών έκφραση y αντιγόνο Lewis στην ομάδα ανθεκτικών στα φάρμακα ήταν σημαντικά υψηλότερη από ό, τι στην μερικώς ευαίσθητη ομάδα και ευαίσθητη ομάδα (και τα δύο

σ

& lt? 0,05). Δεν παρατηρήθηκε σημαντική διαφορά στην έκφραση του y αντιγόνο Lewis παρατηρήθηκε μεταξύ των μερικώς ευαίσθητες και ευπαθείς ομάδες (

p = 0,915

)

(Μια ομάδα χημειοθεραπεία ανθεκτικό?. Β χημειοθεραπεία-ευαίσθητη ομάδα. × 200).

η

CD44 ήταν επίσης εντοπισμένο κυρίως στην κυτταρική μεμβράνη, αλλά παρατηρήθηκε επίσης στο κυτταρόπλασμα και στους ενδιάμεσους χώρους εκτός των κυττάρων του όγκου (Σχήμα 2). Τα ποσοστά των θετικών έκφραση των CD44 στα ανθεκτικά στα φάρμακα, μερικώς ευαίσθητα και ευαίσθητες ομάδες ήταν 91,17%, 66,67% και 51,92%, αντίστοιχα (Πίνακας 1). Το ποσοστό της έκφρασης του CD44 στην ομάδα ανθεκτικών στα φάρμακα ήταν σημαντικά υψηλότερη από ότι στην ευαίσθητη ομάδα (0,01 & lt?

ρ

& lt? 0,05), αλλά καμία σημαντική διαφορά δεν παρατηρήθηκε μεταξύ της ομάδας ανθεκτικών στα φάρμακα και η μερικώς ευαίσθητη ομάδα (

p = 0,154

).

η

Lewis Υ αντιγόνο και τα επίπεδα έκφρασης CD44 σε διαφορετικούς υποτύπους του

καρκινώματος ωοθηκών

από τις 92 περιπτώσεις που αναλύθηκαν, 58 ήταν περιπτώσεις ορώδες καρκίνωμα (34 ευαίσθητα, συμπεριλαμβανομένων των 4 μερικώς ευαίσθητα, 24 ανθεκτικών στα φάρμακα), 8 ήταν περιπτώσεις βλεννώδες καρκίνωμα (4 ευαίσθητο, 4 ανθεκτικών στα φάρμακα), 4 ήταν περιπτώσεις endomerioid καρκινώματος (3 ευαίσθητα), και 6 ήταν περιπτώσεις σαφούς καρκίνωμα (5 ευαίσθητα, συμπεριλαμβανομένων 1 μερικώς ευαίσθητα). Τα ποσοστά των θετικών έκφρασης y αντιγόνου Lewis και CD44 ήταν 91,17% και 95,83%, αντίστοιχα, στο ορώδες ομάδα ανθεκτική καρκίνος φάρμακο, οι οποίες ήταν υψηλότερες από εκείνες της ευαίσθητης ομάδας (56,67% και 53,33%, αντίστοιχα). Τα ποσοστά των θετικών έκφρασης y αντιγόνου Lewis και CD44 σε περιπτώσεις σαφούς καρκίνωμα καρκίνωμα και ενδομητριοειδές ήταν παρόμοια με εκείνα της ορώδης ομάδα, αν και ο αριθμός των περιπτώσεων σε αυτές τις ομάδες ήταν μικρές. Τα ανθεκτικά ναρκωτικών και ευαίσθητες ομάδες το καθένα είχε 4 περιπτώσεις βλεννώδες καρκίνωμα, και δεν παρατηρήθηκε σημαντική διαφορά στα ποσοστά ενδο-ομάδα y αντιγόνο Lewis και CD44 θετικότητα (Πίνακας 2).

Η

Συσχέτιση Lewis επίπεδα αντιγόνου και έκφραση CD44 y σε ιστούς καρκίνου των ωοθηκών

Ανάλυση των 92 δειγμάτων καρκίνου του ιστού των ωοθηκών αποκάλυψε ότι το ποσοστό των θετικών έκφραση του αντιγόνου Lewis Υ στην ομάδα ανθεκτική σε φάρμακο ήταν υψηλότερη από εκείνη του ευαίσθητη ομάδα. Επιπλέον, η έκφραση του CD44 έδειξε επίσης παρόμοιες τάσεις στις δύο ομάδες. Τα αποτελέσματα από μια δοκιμασία Spearman rank συσχέτιση έδειξε ότι ο Lewis έκφραση y αντιγόνου ήταν σημαντικά θετική συσχέτιση με την έκφραση του CD44 (συντελεστής Spearman

r

s

= 0,3455,

σ

& lt? 0.05).

Multi-μεταβλητή ανάλυση των παραγόντων που σχετίζονται με χημειοθεραπευτικά αντίσταση σε ασθενείς με καρκίνο των ωοθηκών

Τα αποτελέσματα από δυαδική λογιστική ανάλυση παλινδρόμησης χειρουργική στάδιο, υπολειμματικό μέγεθος του όγκου και της έκφρασης των CD44 και ο Lewis Υ αντιγόνο σε ιστούς καρκινώματος των ωοθηκών ήταν ανεξάρτητους παράγοντες κινδύνου για χημειοαντοχή (Πίνακας 3).

η

Σύγκριση του καρκίνου των ωοθηκών επιβίωση των ασθενών

Τα αποτελέσματα από την παρακολούθηση αποκάλυψε ότι 26 ασθενείς (1 σταδίου Ι, 2 σταδίου II , 23 σταδίου ΙΙΙ? μέση ηλικία, 56.07? διάμεση ηλικία, 56) στη χημειοθεραπεία ανθεκτική ομάδα πέθανε από υποτροπή του καρκίνου των ωοθηκών και μετάσταση? 5 ασθενείς (1 σταδίου II, 4 σταδίου III? Μέση ηλικία, 64.6? Διάμεση ηλικία, 63) στο μερικώς χημειοθεραπεία ευαίσθητη ομάδα έχασαν τη ζωή τους και 13 ασθενείς (2 στάδιο Ι, 3 στάδιο II, 8 σταδίου ΙΙΙ? Μέση ηλικία, 54.58 ? διάμεση ηλικία, 54) στη χημειοθεραπεία-ευαίσθητη ομάδα έχασαν τη ζωή τους. Η συνολική επιβίωση ήταν σημαντικά μικρότερη σε χημειοθεραπεία ανθεκτική ομάδα (

ρ

& lt? 0.001, Εικόνα 3) σε σύγκριση με τις ευαίσθητες ομάδες. Ωστόσο, ως ένα μεγαλύτερο ποσοστό των θανάτων στην ομάδα ανθεκτικά χημειοθεραπεία ήταν από τους καρκίνους σταδίου ΙΙΙ, δεν μπορούμε με βεβαιότητα να αναφέρει ότι η γλυκοζυλιωμένη y Lewis αντιγόνο CD44 και σχετίζονται με τα αποτελέσματα της επιβίωσης.

Η

Συζήτηση

η χημειοθεραπεία παίζει ένα σημαντικό ρόλο στη διαχείριση του επιθηλιακού καρκίνου των ωοθηκών, αλλά επίκτητη αντοχή στην χημειοθεραπεία επηρεάζει έντονα θεραπευτική αποτελεσματικότητα και την επιβίωση των ασθενών. CAM-DR είναι μια πολύπλοκη διαδικασία που περιλαμβάνει αλληλεπιδράσεις μεταξύ των μορίων προσκόλλησης και των σχετικών υποδοχέων τους. Ένας τέτοιος υποδοχέας προσκόλλησης κυττάρου είναι CD44, μια ευρέως κατανεμημένη γλυκοπρωτεΐνη επιφανείας διαμεμβρανικής των κυττάρων. CD44 έχει μία πολύπλοκη και μεταβλητή δομή λόγω εναλλακτικό μάτισμα στο μεταγραφικό επίπεδο και πολλαπλές μετα-μεταφραστικές τροποποιήσεις. CD44 είναι η κύρια υποδοχέα ΗΑ, και την αλληλεπίδραση με το ΗΑ που εμπλέκονται στην προσκόλληση των καρκινικών κυττάρων και της μετανάστευσης [9]. Η δέσμευση του CD44 σε ΗΑ ρυθμίζεται από πολλούς παράγοντες, εκ των οποίων γλυκοζυλίωσης ή γλυκοζαμινογλυκάνη τροποποίηση είναι η πιο σημαντική. Το μοριακό βάρος του μη τροποποιημένου CD44 είναι 37 kDa, αλλά μετα-μεταφραστικά τροποποιημένο CD44 κυμαίνεται από 85 να 95 kDa [10]. Η γλυκοζυλίωση είναι απαραίτητη για την αλληλεπίδραση CD44-ΗΑ, και διαφορετικές τροποποιήσεις ολιγοσακχαριτών έχουν διαφορετικές επιδράσεις στη λειτουργία CD44. προκαταρκτικές μελέτες μας έχουν δείξει ότι δι-φουκοζυλιωμένη y Lewis αντιγόνο είναι ένα μέρος της σύνθεσης του CD44 και αυξημένα επίπεδα του αντιγόνου Lewis Υ σχετίζονται με την αυξημένη CD44 μεσολάβηση προσκόλλησης κυττάρου ωοθήκης (συμπεριλαμβανομένων πρόσφυση σε ΗΑ) και τη μετανάστευση [6]. Βρήκαμε επίσης ότι κυτταρικές σειρές που πολύ ρητή y αντιγόνο Lewis και CD44 εμφανίζουν αυξημένη αντίσταση σε χημειοθεραπευτικά φάρμακα, όπως η καρβοπλατίνη και πακλιταξέλη [7], [8].

Με βάση τις προκαταρκτικές μελέτες μας, ξεκινήσαμε το παρόν μελέτη για τη διερεύνηση της συσχέτισης μεταξύ της έκφρασης του CD44 και των συναφών δομική ολιγοσακχαριτών Lewis Υ αντιγόνο του και την αντίσταση στη θεραπεία και την πρόγνωση για τον καρκίνο των ωοθηκών. Τα αποτελέσματα μας έδειξαν ότι ο ρυθμός της έκφρασης CD44-θετικών στη χημειοθεραπεία ανθεκτική ομάδα ήταν σημαντικά υψηλότερη από εκείνη του μερικώς χημειοθεραπείας ευαίσθητη ομάδα (91,17% έναντι 66,67%?

ρ

& lt? 0,05) και ότι της χημειοθεραπείας-ευαίσθητη ομάδα (51,92%?

σ

& lt? 0.025). Αυτά τα δεδομένα υποδεικνύουν ότι η αυξημένη έκφραση του CD44 είναι στενά συνδεδεμένη με αντοχή φαρμάκου των καρκίνων των ωοθηκών, συμφωνεί με τα αποτελέσματα από διάφορες προηγούμενες μελέτες [11], [12].

επόμενο διερευνηθεί ο ρόλος του y αντιγόνου Lewis δομική μοτίβο σε αντοχή φαρμάκου των επιθηλιακών καρκίνων των ωοθηκών. Τα ποσοστά των Lewis Υ αντιγόνο-θετικότητα ήταν 91,67%, 50,00% και 61,54% στις χημειοθεραπεία ανθεκτικά, εν μέρει χημειοθεραπεία-ευαίσθητα, και χημειοθεραπεία ευαίσθητες ομάδες, αντίστοιχα, με μια σημαντική διαφορά ανάμεσα στην πρώτη ομάδα και οι δύο τελευταίες ομάδες (0.005 & lt?

σ

& lt? 0,01). Έκφραση των y αντιγόνο Lewis και του CD44 σχετίστηκαν θετικά (

r

s

= 0,3455,

σ

& lt? 0,05). Αυτή η παρατήρηση είναι συνεπής με την υπόθεση ότι φουκοσυλίωση του CD44 συσχετίζεται με αντοχή φαρμάκου σε καρκίνους των ωοθηκών. ανάλυση λογιστικής παλινδρόμησης πολλαπλών παράγοντας επιβεβαιώθηκε περαιτέρω ότι η έκφραση του αντιγόνου y Lewis και CD44, χειρουργικές στάδιο του καρκίνου των ωοθηκών, και το μέγεθος των υπολειμματικών αλλοιώσεων ήταν όλοι ανεξάρτητοι παράγοντες που σχετίζονται με χημειοθεραπευτικούς αντίσταση. Αυτά τα δεδομένα παρέχουν αποδείξεις που υποστηρίζουν έναν σημαντικό ρόλο της γλυκοζυλίωσης στην διαδικασία ανάπτυξης της αντίστασης στα φάρμακα σε καρκινικά κύτταρα.

μελέτες έχουν αναφέρει ότι η γλυκοζυλίωση παίζει σημαντικό ρόλο στην αντοχή φαρμάκου των καρκινικών κυττάρων. Για παράδειγμα, στην οξαλιπλατίνη ανθεκτικά ωοθηκών καρκινικά κύτταρα (IGROV-1 /ΟΗΡ), Ν-γλυκοζυλίωση της υψηλής έκφρασης, ΑΤΡ-συνδετικές πρωτεΐνες μεταφοράς MRP1 και MRP4 είναι παθολογικά αυξημένο [13]. Σε πλακώδη κύτταρα του στόματος καρκίνωμα (HSC-2) και εντερικά κύτταρα αδενοκαρκινώματος (LS174T), η αναστολή της Ν-γλυκοζυλίωσης χρησιμοποιώντας τουνικαμυκίνη εμποδίζει την ισχυρή αποπτωτική δραστικότητα της πρωτεΐνης πριόν ΡγΡ ° [14]. Επιπλέον, η έκφραση του α-1,6-φουκοζυλοτρανσφεράση έχει αναφερθεί να αυξηθούν σημαντικά σε στελέχη ανθεκτικά μιτοξαντρόνη καρκίνο του ήπατος κυττάρων (HLE-ΜΙΤ) [15]. Μαζί, αυτά τα ευρήματα εμπλέκουν έντονα γλυκοζυλίωση παίζει σημαντικό ρόλο στους μηχανισμούς αντοχής φαρμάκου σε πολλούς τύπους καρκίνου. Παρακολούθηση των 92 ασθενών με καρκίνο των ωοθηκών στην παρούσα μελέτη αποκάλυψε ότι το ποσοστό θνησιμότητας των ασθενών με χημειοθεραπεία ανθεκτικά ήταν σημαντικά υψηλότερη από εκείνη της χημειοθεραπείας-ευαίσθητους ασθενείς, όμως, ως ένα μεγαλύτερο ποσοστό των θανάτων στην ομάδα ανθεκτικά χημειοθεραπεία ήταν από το στάδιο ΙΙΙ καρκίνοι, δεν μπορούμε με βεβαιότητα να αναφέρει ότι γλυκοζυλιωμένη y Lewis αντιγόνο CD44 και σχετίζονται με τα αποτελέσματα της επιβίωσης.

τα τελευταία χρόνια, οι μηχανισμοί που διέπουν το ρόλο των CD44-ΗΑ στην αντίσταση των ναρκωτικών έχουν μελετηθεί ευρέως, αλλά όχι ομοιόμορφη συμπέρασμα σχετικά με τους ακριβείς μηχανισμούς που έχει επιτευχθεί. In vivo και in vitro μελέτες που διεξάγονται από Lakshman M et al [16], [17]. έχουν δείξει ότι CD44 εμπλέκεται στην αναστολή της ετοποσίδης επαγόμενη απόπτωση σε εντερικά κύτταρα καρκίνου. Υψηλή έκφραση του CD44 συσχετίστηκε με μειωμένη έκφραση της κασπάσης-3 και κασπάσης-9 και μειωμένη φωσφορυλίωση του ΑΚΤ, υποδηλώνοντας ότι CD44-διαμεσολαβούμενη αναστολή της απόπτωσης ρυθμιζόταν από οδούς μιτοχονδριακή σηματοδότησης. Τα αποτελέσματα από μια μελέτη από Bourgiugnon LY et al. [18] απεκάλυψε ότι το ΗΑ-δεσμευμένο ενεργοποιημένα CD44 RhoA και Rho σηματοδότηση κινάσης, αύξησε τη φωσφορυλίωση σερίνης /θρεονίνης του Grb2 που σχετίζονται με συνδετικό-1 (Gab-1), ενεργοποιείται ΡΙ3Κ, και προωθείται ΡΙ3Κ /Akt σηματοδότηση, με αποτέλεσμα κακοήθη εξέλιξη του καρκίνος του μαστού. Steven J et al [19] βρήκαν ότι το ΗΑ-CD44 αλληλεπίδραση ενεργοποιημένης τοποϊσομεράσης II (Τορο-ΙΙ) για να μειωθεί η κυτταροτοξικότητα ετοποσίδης σε όγκους κεφαλής και τραχήλου. Bourguignon LY et al. [20] περαιτέρω έδειξε ότι, σε κυτταρικές γραμμές καρκίνου ωοθηκών (MCF-7 και SKOV3), η σύνδεση του CD44 σε ΗΑ ενεργοποίησε τον Nanog-Stat3 οδού σηματοδότησης για να προκαλέσει δέσμευση με MDR1 ανκυρίνης, σχηματίζοντας ένα κανάλι εκροής φαρμάκου που προώθησε την εκροή του μαστού και χημειοθεραπευτικών παραγόντων (δοξορουβικίνη και taxinol). Η αλληλεπίδραση μεταξύ ΗΑ-CD44 και EGFR-ERK1 /ERK2 ταυτοποιήθηκε ως ένας μηχανισμός υποκείμενη αποτυχία της μεθοτρεξάτης συν σισπλατίνη χημειοθεραπεία στο κεφάλι και το καρκίνωμα του λαιμού πλακωδών κυττάρων (HNSCC) [21]. Marisa C [22] βρήκαν ότι το δυναμικό εισβολής του Pgp-θετικών, κύτταρα melanocytoma ανθεκτικά σε φάρμακο αυξήθηκε σημαντικά έναντι εκείνης των γονικών κυττάρων. Είναι σημαντικό, CD44 colocalized με το PGP στο κυτταρόπλασμα, όπου συνδυάστηκαν για να ενεργοποιήσετε την ERK1 /2 και p38-ΜΑΡΚ μονοπάτια σηματοδότησης, που οδηγεί σε μια επεμβατική και ανθεκτικά στα φάρμακα φαινότυπο.

προκαταρκτικές μελέτες μας αποκάλυψαν ότι σε επιμολυσμένα των ωοθηκών καρκινικά κύτταρα που εκφράζουν το πολύ y αντιγόνο Lewis (κύτταρα RMG-1-η), τα επίπεδα φωσφορυλίωσης ΑΚΤ αυξήθηκαν σημαντικά με την απουσία μιας αλλαγής στα επίπεδα ολικής πρωτεΐνης. Η θεραπεία με ZD1839 ή Υ αντισωμάτων Lewis μειώθηκαν σημαντικά τα επίπεδα της φωσφορυλιωμένης ΑΚΤ σε επιμολυσμένα κύτταρα ανεξάρτητα. Τα αποτελέσματα από προσδιορισμούς ΜΤΤ έδειξαν ότι η θεραπεία με LY294002, ένας αναστολέας ΡΙ3Κ-ειδικό, ανέστειλε τον πολλαπλασιασμό των επιμολυσμένων κυττάρων καρκίνου των ωοθηκών ιδιαίτερα που εκφράζουν το y αντιγόνο Lewis, υποδηλώνοντας ΡΙ3Κ σηματοδότηση /ΑΚΤ εμπλέκεται σε Lewis Υ αντιγόνο με τη μεσολάβηση του πολλαπλασιασμού των κυττάρων αυτών [23 ]. Μια άλλη μελέτη έδειξε ότι οδών PI3K /AKT /mTOR σηματοδότησης λειτουργούν ως κύριοι ρυθμιστές του με βάση την πλατίνα ευαισθησία των ναρκωτικών των καρκινικών κυττάρων των ωοθηκών [24]. Η παρούσα μελέτη έδειξε ότι η έκφραση του CD44 και του αντιγόνου Lewis Υ αυξήθηκε σε τομές ιστών από ασθενείς με καρκίνο των ωοθηκών ανθεκτικών στα φάρμακα. Επιπλέον, πολλαπλών μεταβλητών ανάλυση έδειξε ότι CD44 έκφραση αντιγόνου και y Lewis ήταν και οι δύο ανεξάρτητοι παράγοντες κινδύνου για την ανάπτυξη καρκίνου των ωοθηκών ανθεκτικών στα φάρμακα. Μαζί με τα αποτελέσματα από προκαταρκτικές μελέτες μας, τα ευρήματα αυτά υποδηλώνουν ότι η y αντιγόνο Lewis, ως ένα σημαντικό συστατικό της μοριακής δομής του CD44, προάγει τον πολλαπλασιασμό και αναστέλλει την απόπτωση των καρκινικών κυττάρων των ωοθηκών, που οδηγεί σε αντοχή φαρμάκου μέσω ενεργοποίησης του ΡΙ3Κ /ΑΚΤ μονοπατιών σηματοδότησης . προκαταρκτικές μελέτες μας αποκάλυψαν επίσης ότι η επιμόλυνση με φουκοζυλτρανσφεράση αποτελέσματα σε υπερέκφραση του Bcl-2, Τορο-Ι, και β Τορο-ΙΙ σε RMG-1-Η κύτταρα, εκτός από την αυξημένη έκφραση του αντιγόνου y Lewis. Αυξημένα επίπεδα του αντιγόνου Lewis Υ προώθησε την έκφραση του Τορο-Ι και Τορο-ΙΙ β μέσω της ρύθμισης του Bcl-2, με αποτέλεσμα βελτιωμένη επιδιόρθωση του DNA και η αναστολή της επαγόμενης από την καρβοπλατίνη απόπτωση. Αυτά τα ευρήματα δείχνουν ότι η y αντιγόνο Lewis μπορεί επίσης να προωθήσει την ανάπτυξη αντοχής φαρμάκου στα καρκινικά κύτταρα μέσω της τοποϊσομεράσης-dependent pathways [25]. Επίπεδα του mRNA p38MAPK αυξήθηκαν επίσης σημαντικά με την έκφραση του αντιγόνου Lewis Υ σε επιμολυσμένα κύτταρα. Επιπλέον, τα επίπεδα των p38MAPK και κασπάσης-3 mRNAs και οι δύο αυξήθηκαν σε καρβοπλατίνη-επεξεργασμένα κύτταρα RMG-1-Η, υποδεικνύοντας ότι y Lewis αντιγόνο απόπτωση των καρκινικών κυττάρων των ωοθηκών συνδέεται με την ενεργοποίηση του p38MAPK μονοπάτι σηματοδότησης [26] . Συμπερασματικά, προτείνουμε ότι η y αντιγόνο Lewis, ως δομικό συστατικό των CD44, ιντεγκρίνες α5β1 και ανβ3, καθώς και EGFR, παίζουν ρόλο σε διάφορες διεργασίες κυτταρικής προσκόλλησης που μεσολαβούν τόσο κυτταρική προσκόλληση και της αντοχής στα φάρμακα [6], [27 ], [28], [29].

στην παρούσα μελέτη, αναλύσαμε δείγματα ανθεκτικών στα φάρμακα κλινική καρκίνωμα ωοθηκών και διαπίστωσε ότι y Lewis αντιγόνο CD44 και συσχετίστηκαν με αντοχή στα φάρμακα καρκίνωμα των ωοθηκών. Υπό το φως των προηγούμενων μελετών μας, θεωρούμε ότι η y Lewis αντιγόνο αντιπροσωπεύει κλειδί μόριο που εμπλέκονται στην CAM-DR με δυναμικό ως νέου αντι-αποπτωτικό στόχος για τη θεραπεία του ανθεκτικού φαρμάκου καρκινωμάτων των ωοθηκών.