PLoS One: Η ενδονεοπλασματική α-SMA Ενισχύει την προγνωστική ισχύς του CD34 σχετίζονται με τη συντήρηση των μικροαγγείων Ακεραιότητα σε ηπατοκυτταρικό καρκίνωμα και καρκίνο του παγκρέατος

Ιούνιος 13th, 2015 elhealth του καρκίνου άρθρα

Αφηρημένο

μικροαγγειακή πυκνότητα (MVD) ως προγνωστικός δείκτης της αγγειογένεσης είναι αναποτελεσματική per se στην πρόγνωση του καρκίνου. Αξιολογήσαμε προγνωστικές αξίες του συνδυασμού εντός του όγκου άλφα-λείου μυός ακτίνη (α-SMA) -θετικό στρωματική κυτταρική πυκνότητα και MVD μετά θεραπευτική εκτομή σε υπεραγγειακών ηπατοκυτταρικό καρκίνωμα (HCC) και υποαγγειακές καρκίνο του παγκρέατος (PC). μικροσυστοιχίες ιστού κατασκευάστηκαν από όγκους των 305 HCC και 57 ασθενείς PC που υποβλήθηκαν σε θεραπευτική εκτομή και αναλύθηκαν για α-SMA και την έκφραση CD34 με ανοσοχρώση. Εξετάστηκαν Προγνωστικές αξιών των δύο αυτών πρωτεϊνών και άλλων κλινικοπαθολογοανατομικές χαρακτηριστικά. Τόσο χαμηλή πυκνότητα α-SMA και υψηλής MVD-CD34 συνδέθηκαν στο HCC με την παρουσία ενδοηπατική μετάσταση και μικροαγγειακή εισβολή, και είχαν σχέση με τη συμμετοχή των λεμφαδένων και μικροαγγειακή εισβολή στον υπολογιστή (

& lt? 0,05) . Αν και CD34 μόνη της, αλλά όχι α-SMA, ήταν ένας ανεξάρτητος προγνωστικός παράγοντας για τη συνολική επιβίωση και την επιβίωση χωρίς υποτροπή, ο συνδυασμός των χαμηλών α-SMA και υψηλής CD34 ήταν ένας προάγγελος της χειρότερη πρόγνωση για τους δύο τύπους όγκων και είχε μια καλύτερη εξουσία να προβλέψει το θάνατο του ασθενούς και στις αρχές της επανάληψης (

& lt? 0,01). Επιπλέον, τα αποτελέσματα δείχνουν ότι η κατανομή των περισσότερων από τις α-SMA-θετικά κύτταρα και αγγειακά ενδοθηλιακά κύτταρα επικαλύπτονται, δείχνοντας σημαντικές colocalization επί των αγγειακών τοιχωμάτων. Κακή ακεραιότητα μικροαγγείων, όπως υποδεικνύεται από υψηλό MVD, μαζί με χαμηλή περιαγγειακό κάλυψη α-SMA-θετικού κυττάρου σχετίζεται με πρώιμη υποτροπή, δυσμενής μετάσταση και μικρή επιβίωση μετά την εκτομή του όγκου. Η διαπίστωση αυτή υπογραμμίζει τη σημασία των αγγειακών ποιότητας στην εξέλιξη του όγκου, η οποία παρέχει μια βελτιστοποιημένη συμπλήρωμα αγγειακή ποσότητα στην πρόγνωση της μετεγχειρητικούς ασθενείς

Παράθεση:. Wang WQ, Liu L, Xu ΗΧ, Luo GP, Chen Τ, Wu CT, et al. (2013) Η ενδονεοπλασματική α-SMA Ενισχύει την Πρόγνωσης Ισχύς των CD34 σχετίζονται με τη συντήρηση των μικροαγγείων Ακεραιότητα σε ηπατοκυτταρικό καρκίνωμα και καρκίνο του παγκρέατος. PLoS ONE 8 (8): e71189. doi: 10.1371 /journal.pone.0071189

Επιμέλεια: Johannes Haybaeck, Ιατρικό Πανεπιστήμιο του Graz, Αυστρία

Ελήφθη: 26 Γενάρη 2013? Αποδεκτές: 27, Ιουνίου 2013? Δημοσιεύθηκε: 5 Αυγούστου 2013

Copyright: © 2013 Wang et al. Αυτό είναι ένα άρθρο ανοικτής πρόσβασης διανέμεται υπό τους όρους της άδειας χρήσης Creative Commons Attribution, το οποίο επιτρέπει απεριόριστη χρήση, τη διανομή και την αναπαραγωγή σε οποιοδήποτε μέσο, με την προϋπόθεση το αρχικό συγγραφέα και την πηγή πιστώνονται

Χρηματοδότηση:. Υποστηρίζεται από το Εθνικό Ίδρυμα Φυσικών Επιστημών της Κίνας (81172005 και 81172276), το Εθνικό Ίδρυμα Φυσικών Επιστημών της Σαγκάης (11ZR1407000), Ph.D. Προγράμματα Ίδρυμα του Υπουργείου Παιδείας της Κίνας (20110071120096), και η Chinesisch-Deutsches Forschungsprojekt (GZ 857). Οι χρηματοδότες δεν είχε κανένα ρόλο στο σχεδιασμό της μελέτης, τη συλλογή και ανάλυση των δεδομένων, η απόφαση για τη δημοσίευση, ή την προετοιμασία του χειρογράφου

Αντικρουόμενα συμφέροντα:.. Οι συγγραφείς έχουν δηλώσει ότι δεν υπάρχουν ανταγωνιστικά συμφέροντα

Εισαγωγή

Δυσλειτουργία της αγγειογένεσης είναι απαραίτητη για τη μετάσταση του όγκου, και είναι ένα από τα χαρακτηριστικά του καρκίνου [1]. προμήθειες νεοαγγείωση όχι μόνο το οξυγόνο και θρεπτικά συστατικά για πολλαπλασιαστικά κύτταρα όγκου αλλά επίσης χρησιμεύει ως αγωγός για τη μετανάστευση [2]. πυκνότητα μικροαγγείων (MVD) είναι η πιο αναγνωρισμένη δείκτης για την αξιολόγηση της αγγειογένεσης των συμπαγών όγκων. Η ανοσοχρώση ενός αγγειακού ενδοθηλιακού κυττάρου (ΕΚ) δείκτη, όπως CD34, χρησιμοποιείται για την επισήμανση MVD [3] – [6]. Έχει αναφερθεί ότι MVD είναι δυσμενής παράγοντας πρόβλεψης σε αρκετούς καρκίνους [7], [8], συμπεριλαμβανομένων ηπατοκυτταρικό καρκίνωμα (HCC) [3], [4], και τον καρκίνο του παγκρέατος (PC) [9]. Ωστόσο, το παράδοξο αποτελέσματα έχουν επίσης αναφερθεί [10], [11].

Το μικροπεριβάλλον του όγκου διαδραματίζει ουσιαστικό ρόλο στην ογκογένεση και την εξέλιξη. Εκτός από αγγειακή ΕΚ, ινοβλαστών καρκίνωμα που συνδέεται (CAF) είναι το κύριο συστατικό των κυττάρων σε αυτό το περιβάλλον [12], [13]. Παραμένει αμφιλεγόμενο το αν αντιπροσωπεύουν στρωματικά κύτταρα που είναι ανοσολογικά για την άλφα-λείου μυός ακτίνη (α-SMA) ενεργοποιείται CAF στην ενδο /περινεοπλασματικής ιστούς [14], [15]. Παρά το γεγονός ότι έχουν αναφερθεί στο παρελθόν ότι περινεοπλασματικής α-SMA-θετικών κυττάρων συσχετίζεται με κακή έκβαση των ασθενών με ΗΚΚ [16], η προγνωστική ικανότητα του εντός του όγκου α-SMA είναι ένα ανοικτό ερώτημα. Παρατηρήσαμε πρόσφατα συνεντόπισης α-SMA- και χρώση CD34-θετικά τόσο ενδο- και περιογκική ιστού, και πιστεύουμε ότι η σημασία του ευρήματος είναι αξίζει την εξερεύνηση.

Πρόσφατα, μερικές κλινικές μελέτες έχουν δείξει ότι η επιτυχία αντιαγγειογονικών μονοθεραπεία είναι γενικά εντυπωσιακές, με χαμηλά ποσοστά αντικειμενικής ανταπόκρισης και τα οφέλη μη-νόημα επιβίωσης [17] – [19]. Άλλες προκλινικές μελέτες έχουν δείξει ότι αντιαγγειογένεση αναστέλλει την ανάπτυξη του όγκου αλλά επιταχύνει μετάσταση [20], [21]. Αυτά τα ευρήματα πιθανώς σχετίζονται με την εστίαση σε ποσότητα σκάφος και μόνο, ενώ παραμελεί την ποιότητα των αγγείων, δηλαδή, της ακεραιότητας μικροαγγειακή (MVI). Με άλλα λόγια, θα μπορούσε να μειώσει την αντιαγγειογένεση MVD αλλά βλάπτουν MVI, οδηγώντας έτσι σε μετάσταση [22]. Στην πραγματικότητα, το αγγειακό τοίχωμα όγκος αποτελείται από ένα συνεχές κυτταρικών τύπων, που κυμαίνονται από ΕΚ, αγγειακά κύτταρα λείου μυός, και περικύτταρα [23], εκ των οποίων οι δύο τελευταίες ταξινομούνται ως περιαγγειακό κύτταρα (τα PVC) [19]. Δεδομένου ότι η MVD είναι ένας δείκτης μόνο για την ΕΚ, δεν μπορεί να εκπροσωπήσει το ολοκλήρωμα αγγειακό σύστημα. Το πιο σημαντικό, έχουμε βρει ένα μοτίβο colocalization για α-SMA και CD34, καθώς και επιπλέον δεικτών ΕΚ περιγράφεται από άλλες ομάδες [19], [24] – [26]. Σε αυτή τη βάση, υποθέσαμε ότι η συντονισμένη λειτουργία των περιαγγειακών α-SMA-θετικών κυττάρων και ECs στο αγγειακό τοίχωμα είναι η σταθεροποίηση καρκινικά αγγεία και μετανάστευση των κυττάρων του όγκου μέσω μπλοκ ενδο /εξαγγείωση. Ως εκ τούτου, ο συνδυασμός των α-SMA και CD34 ως προγνωστικοί δείκτες (CD34

+ /α-SMA

+) μπορεί να είναι χρήσιμη για την αξιολόγηση της MVI. Μεγάλο μέρος της συσσώρευσης στοιχεία για MVI στον καρκίνο προέρχεται από προκλινικές μελέτες. Η σπουδαιότητά του στην κλινική, ωστόσο, είναι άγνωστο.

Δύο κοινά και θανατηφόρα κακοήθειες, η οποία αντίθετα από την άποψη των ενδο /περινεοπλαστικό αγγειακό σύστημα, είναι HCC και PC. Οι ιστοί του HCC είναι ιδιαίτερα vascularized με χαμηλότερη περιεκτικότητα σε στρωματικά [3], ενώ αυτές των PC είναι φτωχά αγγειοποιημένου αλλά με άφθονη στρώμα [13]. Σε αυτή τη μελέτη, θα πραγματοποιηθεί ανάλυση της ακεραιότητας του αγγειακού αυτών των δύο τύπων όγκου, με σημαντική εκπροσώπηση. Ερευνήσαμε την προγνωστική αξία της α-SMA ξεχωριστά και συνδυαστικά με MVD μετά θεραπευτική εκτομή του πρωτογενούς όγκου, αρχικά σε HCC και στη συνέχεια στο PC. Αποτελέσματα σε υπολογιστή επιβεβαιώνουν αυτά που βρέθηκαν στο HCC.

Υλικά και Μέθοδοι

Οι ασθενείς, τα δείγματα, την παρακολούθηση και μετεγχειρητική αγωγή

Ένα σύνολο 305 ασθενών (κοόρτης 1, Πίνακας S1 στο S1 αρχείου) που υποβλήθηκαν σε θεραπευτική εκτομή ήπατος για την παθολογία-αποδεδειγμένη HCC σε καρκίνο του ήπατος Ινστιτούτο Zhongshan Νοσοκομείο, Πανεπιστήμιο Fudan, εξετάστηκαν. Κανένας από αυτούς δεν έλαβε καμία προεγχειρητική αντικαρκινική θεραπεία. Αυτοί οι ασθενείς παρατηρήθηκαν μεταξύ Οκτωβρίου 2004 και τον Νοέμβριο του 2010, με συνολικό χρόνο παρακολούθησης 72 μηνών. Τα κριτήρια για την τέλεσης οπισθοεκτομής, συλλογή δειγμάτων, καθορισμός του σταδίου του όγκου και τη διαφοροποίηση, και την παρακολούθηση των διαδικασιών περιγραφεί αλλού [27] – [29]. Η συνολική επιβίωση (OS) και επιβίωσης χωρίς υποτροπή (RFS) ορίστηκαν ως το διάστημα μεταξύ των ημερομηνιών της χειρουργικής επέμβασης και θανάτου, καθώς και μεταξύ των ημερομηνιών της χειρουργικής επέμβασης και της επανάληψης, αντίστοιχα. Αν υποτροπή ήταν ύποπτος, μηχανογραφημένη σάρωση τομογραφία ή μαγνητική τομογραφία έγινε αμέσως? αν η επανάληψη δεν είχαν διαγνωστεί, οι ασθενείς παρατηρήθηκαν μέχρι το θάνατο ή την τελευταία παρακολούθηση. Κατά την τελευταία παρακολούθηση της μελέτης, 132 ασθενείς είχαν υποτροπή του όγκου, και 108 βρέθηκαν να έχουν πεθάνει. Τα ποσοστά OS 1-, 3-, και 5-χρόνου ήταν 88%, 65%, και 64%, αντίστοιχα? τα ποσοστά υποτροπής πάνω σε αυτές τις ίδιες χρονικά διαστήματα ήταν 25%, 42% και 43%, αντίστοιχα.

Από Ιανουάριος 2010 – Ιούνιος 2011, 179 διαδοχικοί ασθενείς με παθολογία-αποδεδειγμένη PC υποβλήθηκαν σε θεραπευτική εκτομή στο ινστιτούτο μας, με χειρουργική επέμβαση που γίνεται από την ίδια ομάδα [30]. Τα χειρουργικά εξαιρέσιμων κριτήρια συναντήθηκε με τον Εθνικό Comprehensive Cancer Network (NCCN) Οδηγίες Κλινικής Πρακτικής στην Ογκολογία-καρκίνο του παγκρέατος κατευθυντήρια γραμμή 2010 (https://www.nccn.org). Από τους ασθενείς PC, 57 περιπτώσεις (Cohort 2, Πίνακας S2 σε S1 αρχείου) τυχαία ανακτώνται από ένα προοπτικά συλλέγονται βάση δεδομένων εντοπίστηκαν ότι έχει μικροσκοπικά παρατηρήσιμη υπολειπόμενο όγκο (R0). Κανένας από αυτούς δεν έλαβε καμία προεγχειρητική αντικαρκινική θεραπεία. Ολόκληρο όγκοι συλλέχθηκαν. Οι όγκοι σταδιακή σύμφωνα με το σύστημα του όγκου-node-μετάσταση (TNM) ταξινόμηση [31]. διαφοροποίηση του όγκου βαθμολογήθηκε από το NCCN κατευθυντήρια γραμμή. εμπλοκή λεμφαδένα προσδιορίστηκε από μετεγχειρητική παθολογική διάγνωση. Όλοι οι ασθενείς παρακολουθήθηκαν μέχρι τον Ιούλιο του 2012, με μέσο χρόνο παρακολούθησης 15,5 μήνες. μορφές θεραπείας μετά την υποτροπή χορηγήθηκαν επίσης σύμφωνα με την NCCN κατευθυντήριας γραμμής. Τα ποσοστά του OS και RFS ορίστηκαν ως ανωτέρω. Κατά την τελευταία παρακολούθηση, 33 ασθενείς είχαν υποτροπή του όγκου, και 22 είχαν πεθάνει. Τα ποσοστά OS 0,5-, 1 και 2-ετών ήταν 98%, 86% και 61%, αντίστοιχα? και τα 0,5-, 1-, και 2-χρόνια ποσοστά υποτροπής κατά τα ίδια χρονικά διαστήματα ήταν 21%, 42%, και 58%, αντίστοιχα. Μια άλλη ανεξάρτητη δοκιμή ομάδα 3, συμπεριλαμβανομένων 52 ασθενών PC σε επεξεργασία σε ινστιτούτο μας, επίσης συλλέγονται για τη μελέτη (Πίνακας S3 στο αρχείο S1).

Αυτή η μελέτη εγκρίθηκε από τις επιτροπές δεοντολογίας στην έρευνα του Zhongshan Νοσοκομείο και το Fudan Πανεπιστήμιο της Σαγκάης Κέντρο Καρκίνου. Η γραπτή συγκατάθεση λήφθηκε από κάθε ασθενή πριν από τη συμμετοχή σε αυτή τη μελέτη, σύμφωνα με τους κανονισμούς των δύο επιτροπών.

Ιστός μικροσυστοιχιών Κατασκευή, ανοσοϊστοχημεία, και Αξιολόγηση

Ιστός μικροσυστοιχίες (ΤΜΑ) κατασκευή ήταν ως περιγράφεται [28]. Εν συντομία, δύο πυρήνες για την ομάδα 1 και τρεις πυρήνες για ομάδες 2 και 3, διάτρητοι από κάθε εκπρόσωπο φορμόλη σταθερό, έχει εμπεδωθεί με παραφίνη ιστό του όγκου, χρησιμοποιήθηκαν για να κάνουν TMA διαφάνειες (Shanghai Biochip Company Ltd, Shanghai, Κίνα). Ελήφθησαν δύο ή τρεις κυλίνδρους από διαφορετικές περιοχές του όγκου δειγμάτων? Κατά συνέπεια, παρασκευάστηκαν συνολικά τέσσερις ΤΜΑ τσιπ για ομάδα 1 και δύο τσιπ για ομάδες 2 και 3.

Ο δείκτης που χρησιμοποιείται για το PVC ήταν α-SMA [13], [19], και CD34 χρησιμοποιήθηκε ως δείκτης για την ΕΚ [3], [4]. Υποξία επαγόμενου παράγοντα 1α (HIF-1α) και καρβονική ανυδράση IX (CA IX) έχουν επιλεγεί ως το βιοδείκτη υποξυγόνωση όγκου [24], [32], [33]. Ανοσοϊστοχημική ανάλυση (IHC) αυτών των δεικτών στα τμήματα ΤΜΑ (πάχους 4-μm) έγινε με μία μέθοδο δύο σταδίων όπως περιγράφεται [29]. Το αντι-ανθρώπινο α-SMA αντίσωμα πρωτογενούς μονοκλωνικού κουνελιού (1:100? Abcam, Cambridge, ΜΑ), μονοκλωνικό ποντικού αντι-ανθρώπινο CD34 (1:100? Abcam), μονοκλωνικά αντι-ανθρώπινης CA IX (1:150? Abcam ), και μονοκλωνικό ποντικού αντι-ανθρώπινο HIF-1α (1:100? Sigma, St. Louis, ΜΟ) χρησιμοποιήθηκαν. Η επώαση με πρωτογενή αντισώματα διεξήχθη όλη τη νύχτα στους 4 ° C σε ένα υγρό θάλαμο. Το σύστημα ανίχνευσης Envision-plus με ένα αντι-κουνελιού πολυμερούς /ποντίκι (EnVision + /HRP /Μο, Dako, Glostrup, Δανία) χρησιμοποιήθηκε. Τα προϊόντα της αντίδρασης έγιναν ορατά με επώαση με 3,3′-διαμινοβενζιδίνη. Οι αρνητικοί έλεγχοι έλαβαν θεραπεία με τον ίδιο τρόπο, αλλά με παράλειψη του πρωτογενούς αντισώματος.

Πυκνότητα θετική χρώση σε ολόκληρο άποψη μετρήθηκε χρησιμοποιώντας ένα μηχανογραφημένο σύστημα εικόνα αποτελείται από μία κάμερα Leica συζευγμένο φορτίο συσκευή, DFC500, συνδεδεμένο σε ένα Leica DM IRE2 μικροσκόπιο (Leica, Cambridge, UK). Εικόνες από πέντε αντιπροσωπευτικά πεδία σε × 200 μεγέθυνση συνελήφθησαν από το λογισμικό v3 Leica QWin Plus. Ένα ίδιο σκηνικό χρησιμοποιήθηκε για όλες τις εικόνες. Για την αξιολόγηση της αγγειακής πυκνότητας, αγγειακή ακεραιότητα, και την ένταση υποξία, περιοχή και ολοκληρωμένη οπτική πυκνότητα (IOD) του ανοσοχρώση σε κάθε εικόνα μετρήθηκαν χρησιμοποιώντας Image-Pro Plus v6.2 λογισμικού [28]. Τα αποτελέσματα ποσοτικά ως α-SMA- ή CD34-θετική περιοχή /συνολική έκταση, και HIF-1α ή CA IX IOD /συνολικό εμβαδόν.

ανοσοϊστοχημική χρώση των διαδοχικών τομών

Δεκαπέντε ζεύγη (σύνολο τριάντα) του οιδηματώδης και συμφωνημένα περιογκική δείγματα (ιστό δίπλα στον όγκο σε απόσταση 10 mm) από ασθενείς με HCC και PC συλλέχθηκαν και χρησιμοποιήθηκαν για την παρασκευή σειριακών διαφάνειες εγκλεισμένο σε παραφίνη και κατεψυγμένο ιστό. Τα πλακίδια τμήμα παραφίνης χρησιμοποιήθηκαν για IHC του α-SMA και CD34. Οκτώ διατομές από κάθε δείγμα υποβλήθηκαν σε ποιοτική ανάλυση. Η διαδικασία IHC περιγράφηκε προηγουμένως [29]. Υπό × 200 μεγέθυνσης, εικόνες του εκπροσώπου πεδία στην ίδια θέση της σε συνδυασμό διαδοχικών τομών με θετική χρώση α-SMA και CD34 συνελήφθησαν χρησιμοποιώντας ένα μηχανογραφημένο σύστημα εικόνα.

ανοσοφθορισμού διπλή χρώση για την α-SMA και CD34

τα κατεψυγμένα τμήματα χρησιμοποιήθηκαν για ανοσοφθορισμού διπλή χρώση των α-SMA και CD34. Το πρωτόκολλο όπως περιγράφεται [29]. Μετά την αντίδραση με τα πρωτεύοντα αντισώματα (1:80) και μετέπειτα ξέβγαλμα, οι τομές επωάστηκαν με δύο Cy3-συζευγμένο αντίσωμα κατσίκας αντι-κουνελιού και ισοθειοκυανική φλουορεσκεΐνη αντισώματα συζευγμένα αντι-ποντικού κατσίκας (αμφότερα 1:100? Jackson, West Grove, ΡΑ) και αντίθετα με 4 ‘, 6-diamidine-2’-φαινυλινδόλης διυδροχλωρίδιο (ϋΑΡΙ) για τη χρώση των πυρήνων. Εκπρόσωπος εικόνες αποκτήθηκαν από μικροσκόπιο συνεστιακό λέιζερ.

Στατιστική Ανάλυση

Όλες οι στατιστικές αναλύσεις πραγματοποιήθηκαν με το λογισμικό SPSS 16.0 λογισμικού. Η Pearson chi-τετράγωνο ή ακριβές τεστ του Fisher χρησιμοποιήθηκε για να συγκρίνετε ποιοτικές μεταβλητές, και ποσοτικές μεταβλητές αναλύθηκαν από

δοκιμών ή Spearman test. Το σημείο αποκοπής της α-SMA ή η πυκνότητα CD34 για τον ορισμό των υποομάδων ήταν η μέση τιμή (Εικ. S1 στο S1 αρχείου). Οι κλινικοπαθολογοανατομικών χαρακτηριστικά συγκρίθηκαν μεταξύ των δύο ομάδων κινδύνου χρησιμοποιώντας ένα τεστ Mann-Whitney. Για την ανάλυση επιβίωσης, καμπύλες Kaplan-Meier σύρθηκαν, και οι διαφορές μεταξύ των καμπυλών υπολογίστηκαν από δοκιμασία log-rank. Ανεξάρτητη προγνωστική σημασία των παραγόντων κινδύνου που προσδιορίζονται από μονοπαραγοντική ανάλυση υπολογίστηκε από το μοντέλο αναλογικού κινδύνου του Cox. πραγματοποιούν ανάλυση χαρακτηριστικό (ROC) καμπύλη Receiver χρησιμοποιήθηκε για τον προσδιορισμό της τιμής πρόβλεψης μεταξύ παραμέτρων. Η τιμή του

& lt?. 0.05 θεωρήθηκε στατιστικά σημαντική

Αποτελέσματα

Μοτίβα περιαγγειακών α-SMA-θετική στρωματικά κύτταρα και ενδοθηλιακά

Διανομής

Σε όλους τους όγκους που συλλέγονται, HCC έδειξε πάντοτε μια πολύ χαμηλή περιεκτικότητα σε στρωματικό, ενώ PC περιείχαν άφθονα στρώμα (Εικ. 1). Αντιπροσωπευτικά υψηλού και χαμηλού χρώσης α-SMA /CD34 μπορεί να φανεί σε αυτό το σχήμα. Η μέση α-SMA-θετικών κυτταρική πυκνότητα για HCC ήταν 0,0540 ± 0,0611 (διάμεση τιμή των 0,0389? Εύρος, 0,000320 να 0.563), και ήταν 0,232 ± 0,111 για PC (διάμεσος, 0.202? Εύρος, 0,0494 να 0,474). (Σχ S1 Α και 1Γ σε S1 File). Ειδική χρώση των τριχοειδών που μοιάζει με πλοία από αντι-CD34 παρατηρήθηκε σε HCC (μέση MVD-CD34 των 0,116 ± 0,106? Διάμεσο, 0,0877? Φάσμα, 0,00102 έως 0,545) και PC (μέση MVD, 0,0217 ± 0,0212? Διάμεσο, 0,0112? Εύρος , 0,00103 έως 0,0928) (Εικ. S1B και 1D σε S1 αρχείου). Ένα πλούσιο περιεχόμενο μικροαγγείων βρέθηκε στο HCC, ενώ η περιεκτικότητα των μικροαγγείων σε PC ήταν φτωχή (Εικ. 1). Σε σύγκριση με το ομοιογενές σχήμα σκάφους σε περινεοπλασματικής φυσιολογικό ήπαρ ή πάγκρεας ιστού, η ενδοογκική αγγειακή μορφολογία ήταν ετερογενής (Σχήμα 1?. Εικ. S2 σε File S1). Ανοσοϊστοχημεία των διαδοχικών τομών αποκάλυψε ένα συνεντόπισης του α-SMA και κατανομές χρώση CD34 (Εικ. 2Α και 2Β, 2C και 2D), και μια παρόμοια εμφάνιση βρέθηκε επίσης σε περινεοπλασματικής ιστό (Εικ. S3 σε S1 File). Το φαινόμενο αυτό επιβεβαιώθηκε από ανοσοφθορισμού διπλή χρώση των α-SMA και CD34, όπου α-SMA-θετικά κύτταρα παρατηρήθηκαν για να τυλίξει γύρω από ΕΚ για αγγειακών τοιχωμάτων (Εικ. S4 στο αρχείο S1).

Case 85 (HCC ) και PC περίπτωση 36 έδειξε υψηλή πυκνότητα α-SMA (A, G) και τις αξίες MVD-CD34 (D, J)? ενώ, περίπτωση HCC 226 και PC περίπτωση 19 έδειξε χαμηλής πυκνότητας α-SMA (Β, Η) και MVD (E, K) (× 200). (C, F, I, L) Μέση πυκνότητα α-SMA και MVD των ομάδων υψηλού ή χαμηλού κινδύνου σε HCC και PC.

* Ανεξάρτητα δείγματα

δοκιμή έδειξε μια στατιστικά σημαντική διαφορά μεταξύ των δύο ομάδων.

(Paired Α και Β, Γ και Δ) Ανοσοϊστοχημική χρώση των διαδοχικών τομών έδειξε συνέκφραση πρότυπο α-SMA και CD34 (× 200).

συσχετίσεις μεταξύ των όγκων α-SMA-θετική κυτταρική πυκνότητα ή MVD και κλινικοπαθολογοανατομικές Χαρακτηριστικά

Όταν η μέση τιμή ορίστηκε ως η αποκοπής σημείο για α-SMA και πυκνότητες CD34, οι ασθενείς χωρίστηκαν σε υποομάδες υψηλού ή χαμηλού κινδύνου (Σχήμα 1?. Εικ. S1 σε S1 File). Όπως φαίνεται στον Πίνακα 1 (που αναλύεται στους Πίνακες S4 και S5 σε S1 File), σε HCC, οι ασθενείς με χαμηλή πυκνότητα α-SMA ήταν επιρρεπείς να έχουν παρουσία ενδοηπατική μετάστασης και μικροαγγειακή εισβολή, και χαμηλή διαφοροποίηση του όγκου? υψηλή MVD σχετίστηκε με μεγάλο μέγεθος του όγκου, υψηλής ορό α-φετοπρωτεΐνης συγκέντρωση, παρουσία ενδοηπατική μετάστασης και μικροαγγειακή εισβολή, και το στάδιο υψηλής ΤΝΜ. Σε PC, χαμηλή α-SMA σχετιζόταν με υψηλή κομβική συμμετοχή, μικροαγγειακή εισβολή, χαμηλή διαφοροποίηση του όγκου, και το στάδιο υψηλής ΤΝΜ? υψηλή MVD συσχετίζεται με μεγάλο μέγεθος του όγκου, υψηλής λέμφος κομβικό ρυθμό εμπλοκή, και η παρουσία μικροαγγειακών εισβολής. Σε ασθενείς με κίρρωση HCC (στάδιο 4?

= 72), υπήρχαν σημαντικά χαμηλότερες τιμές α-SMA από ό, τι σε ασθενείς χωρίς κίρρωση (στάδια 1 έως 3?

= 233? 18.30 % έναντι 28.95%?

= 0.029)? MVD ήταν ισομερώς κατανεμημένα μεταξύ των δύο υποομάδων (22,88% έναντι 24,34%?

= 0,763)

Προγνωστική Επιπτώσεις των όγκων α-SMA-θετική κυτταρική πυκνότητα ή MVD στο. μετεγχειρητική επιβίωση και την επανάληψη

Στην μονοπαραγοντική ανάλυση του HCC, το μέγεθος του όγκου, η διαφοροποίηση του όγκου, παρουσία μικροαγγειακή εισβολής και ενδοηπατική μετάσταση, και το στάδιο TNM συνδέθηκαν τόσο με το λειτουργικό σύστημα και RFS? θετικές ηπατίτιδας Β e αντιγόνο συσχετίστηκε επίσης με RFS. Σε PC, η παρουσία μικροαγγειακή εισβολή συνδέθηκε τόσο με το λειτουργικό σύστημα και RFS? διαφοροποίηση του όγκου συσχετίστηκε επίσης με λειτουργικό σύστημα? και κομβική συμμετοχή ήταν ένας πιθανός παράγοντας επιρροής της RFS (Πίνακας 2). Οι τιμές α-SMA τόσο HCC και PC δεν συσχετίστηκαν με το OS ή την RFS (για HCC:

= 0,071 και

= 0,079, σχήμα 3Α και 3Β? Για PC.:

= 0.072 και

= 0.107, Σχ. 3θ και 3J). Η διάμεση OS και οι χρόνοι RFS για τους ασθενείς με υψηλή MVD ήταν 26,5 και 16,0 μήνες για HCC, και 15,0 και 9,7 μήνες για PC, αντίστοιχα. Αυτές οι περίοδοι ήταν σημαντικά μικρότερες από εκείνες για ασθενείς με χαμηλή MVD (για HCC: 57,4 και 33,1 μήνες, τόσο

& lt? 0.001, Σχ 3C και 3D? Για PC:. 20,0 και 17,8 μήνες,

= 0.046 και

= 0.008, Σχ. 3Κ και 3L).

(Α, Β, Θ, Ι) Η πυκνότητα α-SMA σχετίστηκε με καμία από τις δύο OS ούτε RFS. (C, D, K, L) Χαμηλή MVD συσχετίστηκε με την παρατεταμένη OS και RFS. (E, F, M, N) Οι ασθενείς σε κάθε ομάδα ταξινομήθηκαν σε τέσσερις ομάδες ανάλογα με το εντός του όγκου πυκνότητά τους α-SMA και MVD. (G, H, O, P) Οι προγνωστικές αξίες του συνδυασμού δείκτη και άλλους παράγοντες κινδύνου που προσδιορίζονται από πολυπαραγοντική ανάλυση μελετήθηκαν από λειτουργικού χαρακτηριστικού δέκτη ανάλυση (βλέπε Αποτελέσματα για λεπτομέρειες). UICC, Διεθνής Ένωση κατά του Καρκίνου

Οι παράγοντες κινδύνου που προσδιορίζονται από μονοπαραγοντική ανάλυση συγκεντρώθηκαν σε μια πολυπαραγοντική Cox ανάλογη ανάλυση κινδύνων. (Πίνακας 2? Επίσης λεπτομερώς στους πίνακες S6 και S7 στην S1 αρχείου). Τα αποτελέσματα δείχνουν ότι και στους δύο τύπους όγκων, α-SMA δεν είναι ένας ανεξάρτητος παράγοντας κινδύνου OS ή RFS. Υψηλή MVD ήταν ένας ανεξάρτητος παράγοντας κινδύνου του OS (για HCC: αναλογία κινδύνου [HR] = 4.236,

& lt? 0.001? Για PC: HR = 3,578,

= 0,018) και της RFS (για HCC: HR = 2,585,

& lt? 0.001? για PC: HR = 2.230,

= 0,034)

Λαμβάνοντας υπόψη την υποτροπή. χαρακτηριστικά του HCC [34], υιοθετήσαμε 24 μήνες από την τιμή αποκοπής για να διαχωρίσετε νωρίς σε σχέση με τα τέλη υποομάδες της επανεμφάνισης του όγκου. Δυστυχώς, δεν διαπιστώθηκε καμία διαφορά μεταξύ των ασθενών με υψηλή και χαμηλή α-SMA είτε σε πρώιμη υποτροπή (66 153 έναντι 89 152 ασθενείς,

= 0,528? Σχ. S5A στο αρχείο S1) ή καθυστερημένη επανεμφάνιση (87 153 έναντι 63 152 ασθενείς,

= 0,665). Περισσότεροι ασθενείς με υψηλή MVD (σε σύγκριση με τους ασθενείς με χαμηλή MVD) είχαν μια πρώιμη υποτροπή (110 153 έναντι 45 των 152 ασθενών,

= 0.001? Σχ. S5B στο S1 File) και όχι μια καθυστερημένη επανεμφάνιση (43 153 έναντι 107 των 152 ασθενών,

= 0,429). Για PC, 6 και 12 μηνών είχαν καθοριστεί ως τιμές αποκοπής για τη διάκριση νωρίς σε σχέση με τα τέλη υποτροπής [35], αντίστοιχα? υπό αυτές τις συνθήκες, δεν βρέθηκε σημαντική διαφορά για την α-SMA και MVD μεταξύ των υποομάδων.

Για να εξαλειφθεί η επίδραση του μεγέθους του όγκου στην έκβαση των ασθενών, ερευνήσαμε περαιτέρω τους προγνωστικούς παράγοντες στο HCC υποομάδα μικρού όγκου (μέγιστη διάμετρο ≤5 cm,

= 179)? στο PC, το μέγεθος του όγκου δεν συσχετίζεται με το OS ή την RFS. Οι τιμές MVD συνδέθηκαν με το λειτουργικό σύστημα και RFS (

& lt? 0.001 και

= 0,001, αντίστοιχα) σε αυτή την υποομάδα? εκτιμώντας ότι, α-SMA είχε σχέση με καμία από τις δύο OS ούτε RFS (

= 0.520 και

= 0,153, αντίστοιχα? Σχ. S6a να 6δ στην S1 αρχείου). Λεπτομερείς συσχετισμοί άλλων παραγόντων με αποτέλεσμα ασθενή για την HCC υποομάδα μικρό όγκων συνοψίζονται στον Πίνακα S8 σε S1 File.

προγνωστική αξία της Συνδυασμός α-SMA-θετικά πυκνότητα κυττάρων και MVD και ROC Ανάλυση

ασθενών μελέτης χωρίστηκαν σε τέσσερις ομάδες ανάλογα με το εντός του όγκου πυκνότητα και MVD αξίες τους α-SMA: ομάδα Ι (HCC /Υ:

= 68/14), χαμηλή α-SMA και χαμηλή MVD? ομάδα ΙΙ (HCC /Υ:

= 84/15), υψηλής α-SMA και χαμηλή MVD? ομάδα III (HCC /Υ:

= 86/13), χαμηλή α-SMA και υψηλή MVD? και η ομάδα IV (HCC /Υ:

= 67/15), υψηλής α-SMA και υψηλής MVD (βλέπε πίνακα S9 στο αρχείο S1, οι λεπτομερείς κλινικοπαθολογοανατομικών χαρακτηριστικά των ασθενών των διαφόρων υποομάδων της α-SMA και MVD). Προγνωστική ανάλυση έδειξε σημαντικές διαφορές στα ποσοστά OS (

& lt? 0.001 και

= 0,026 για HCC και PC, αντίστοιχα) και τα ποσοστά RFS (

& lt? 0.001 για τα δύο) μεταξύ των τεσσάρων συνδυαστικών ομάδων (Πίνακας 2). Στο HCC Cohort 1, το λειτουργικό σύστημα και RFS ποσοστά 5-ετών ήταν 88,1% και 70,2%, αντίστοιχα, για την ομάδα ΙΙ? αλλά μόνο 38,4% και 44,2%, αντίστοιχα, για την ομάδα III (Σχ. 3Ε και 3F). Σε PC Cohort 2, το λειτουργικό σύστημα και RFS ποσοστά 2-ετών ήταν 100% και 86,7%, αντίστοιχα, για την ομάδα ΙΙ? αλλά ήταν μόνο 40,0% και 15,4%, αντίστοιχα, για την ομάδα III (Εικ. 3Μ και 3Ν). Τα αποτελέσματα της πολυπαραγοντικής ανάλυσης έδειξαν ότι ο συνδυασμός της πυκνότητας α-SMA και MVD ήταν ένας ανεξάρτητος προγνωστικός παράγοντας για το OS και RFS (Πίνακας 2 και Πίνακες S6 και S7 στην S1 αρχείου). Ένα παρόμοιο αποτέλεσμα βρέθηκε στις αρχές του HCC υποτροπής (Εικ. S5c στο αρχείο S1) και μικρού όγκου HCC υποομάδες (Εικ. S6E και 6F, και ο πίνακας S8 στο S1 File), και επιβεβαιώθηκε στην ανεξάρτητη δοκιμή PC Cohort 3 ( . Εικ. 4)

οι παράγοντες κινδύνου που προσδιορίζονται από πολυπαραγοντική ανάλυση και ο συνδυασμός των α-SMA και MVD εγκρίθηκαν, και προγνωστική αξία τους προσδιορίστηκε με ανάλυση ROC (Πίνακας 3? λεπτομερώς στους πίνακες S10 και S11 στο S1 αρχείου). Όγκου MVD προβλέψει τον θάνατο και την επανάληψη (

& lt? 0,05). Αν και α-SMA προβλέψει ούτε ο θάνατος, ούτε στην επανάληψη, ο συνδυασμός των α-SMA και MVD ακριβώς προέβλεψε το θάνατο και την πρώιμη υποτροπή (

& lt? 0,01 για όλους). Εκτός από το στάδιο TNM και την επανάληψη στο HCC, καθώς και για τη διαφοροποίηση του όγκου και του θανάτου στο PC, η προγνωστική αξία του συνδυασμού των α-SMA και MVD ήταν μεγαλύτερη από άλλους παράγοντες. Όταν η τιμή αποκοπής ορίστηκε ως η ομάδα ΙΙΙ (χαμηλής α-SMA και υψηλή MVD) έναντι άλλων τριάρια ομάδες, η αρνητική προγνωστική αξία, θετική προγνωστική αξία, ευαισθησία και ειδικότητα της HCC ομάδα 1 ήταν 0,749, 0,616, 0,491, 0,832 για το OS και 0,616, 0,558, 0,364, 0,780 για RFS, και της κλάσης PC 2 ήταν 0.690, 0.600, 0.409, 0.829 για το OS και 0.476, 0.733, 0.333, 0.833 για RFS, αντίστοιχα. Οι περιοχές κάτω από την καμπύλη αυτού του συνδυασμού ήταν 0,743 /0,758 (HCC /Υ) για το θάνατο (

& lt? 0.001 και

= 0,001, αντίστοιχα) και 0.615 /0.790 (HCC /PC) για υποτροπή (

= 0.001 και

& lt?.. 0.001, αντίστοιχα) (Σχήμα 3G, 3Η, 3Ο, και 3P)

Ένταση του HIF-1α και CA Έκφραση IX σε υποομάδες Διαφορετικές MVI

οι τιμές του HIF-1α και CA IX χρησιμοποιήθηκαν ως δείκτης της υποξίας των όγκων, και οι εντάσεις τους χωρίστηκαν σε τέσσερις ομάδες ανάλογα με το συνδυασμό του α-SMA και MVD. Η μέση HIF-1α ή CA IX πυκνότητα ήταν μεγαλύτερη για συνδυαστική ομάδα Ι και μικρότερη για την ομάδα IV στο HCC Cohort 1 και PC Cohort ανάλυση 2 (μονόδρομη διακύμανσης,

& lt? 0.001 και

= 0.008 για HIF-1α, και

= 0.012 και

& lt? 0,001 για CA IX, αντίστοιχα? Εικ. 5). Σε σύγκριση με την ομάδα μου, ο HIF-1α ή CA IX της ομάδας ΙΙ ήταν σημαντικά χαμηλότερη? σε σύγκριση με την ομάδα III, HIF-1α ή CA IX της ομάδας IV ήταν επίσης χαμηλότερη (και τα δύο

& lt? 0,05).

Ο δείκτης της υποξίας όγκου ήταν HIF-1α και CA IX, και εντάσεις τους χωρίστηκαν σε τέσσερις ομάδες, όπως περιγράφεται. Ο HIF-1α ή CA IX πυκνότητα ήταν μεγαλύτερη στην ομάδα Ι και το χαμηλότερο στην ομάδα IV για δύο (Α) ηπατοκυτταρικό καρκίνωμα (HCC) ομάδα 1, και (Β) του καρκίνου του παγκρέατος (PC) ομάδα 2? (

& lt? 0.001 και

= 0.008 για HIF-1α, και

= 0.012 και

& lt? 0,001 για CA IX , αντίστοιχα).

* Σε σύγκριση με την ομάδα Ι, και

** σε σύγκριση με την ομάδα III? τόσο

& lt? 0,05. IOD, ολοκληρωμένη οπτική πυκνότητα.

Συζήτηση

Στην παρούσα μελέτη, έχουμε βρει ότι ένα χαμηλό εντός του όγκου α-SMA-θετική κυτταρική πυκνότητα, σε συνδυασμό με υψηλές τιμές MVD-CD34, συνδέεται σημαντικά με υψηλή συχνότητα εμφάνισης της ενδαγγειακής θρόμβου όγκου και κακή επιβίωση μετά από εκτομή του HCC. Από αυτούς τους δύο σημειωτές, μόνο MVD είναι ένας ανεξάρτητος προγνωστικός παράγοντας? Ωστόσο, ο συνδυασμός των δύο έχει μεγαλύτερη δύναμη για να προβλέψει τον θάνατο του ασθενούς και στις αρχές της επανάληψης. Επιπλέον, το έργο μας αποκαλύπτει ότι η εντόπιση των πλέον περιαγγειακών α-SMA-θετικών κυττάρων και ECs επικαλύπτει σε αγγειακά τοιχώματα, και υπάρχει μεγαλύτερη από 80% colocalization στο διάμεσο όγκο. Το εύρημα αυτό παρατηρήθηκε επίσης σε PC και μια ανεξάρτητη ομάδα δοκιμής PC. Ως εκ τούτου, προτείνουμε ότι ο συνδυασμός των α-SMA και MVD μπορεί, εν μέρει, να είναι ένας καλός δείκτης της MVI (CD34

+ /α-SMA

+)? ότι MVI είναι πιο κρίσιμη από MVD μόνη της σε ανάπτυξη μικροαγγειακών εισβολή? και ότι MVI είναι κρίσιμης σημασίας για την περαιτέρω κατανόηση πιθανών υποκείμενων μηχανισμών της αγγειογένεσης ως επιταχυντής της μετάστασης των όγκων.

Ένα αναγνωρισμένο ανθρώπινο δείκτης ΕΚ είναι CD34. Υπήρξαν αναφορές σε ένα μοντέλο ποντικού που α-SMA και CD31 ενός δείκτη ΕΚ μπορεί να συνεκφράζουν στα αγγειακά τοιχώματα [24], [26]? Ωστόσο, αυτό είναι σαφές στον άνθρωπο. Η εργασία μας επιβεβαιώνει αυτό το μοτίβο συνέκφραση α-SMA και CD34 (βλέπε διάγραμμα στο Σχ. S7 στο S1 αρχείου). Αυτές περιαγγειακή α-SMA-θετικά κύτταρα που τυλίγονται γύρω από ECs ταυτοποιήθηκαν ως PVCs, και η πυκνότητα του PVC χρησιμοποιήθηκε ως δείκτης της MVI. Πριν από αυτή τη μελέτη, μια μεγάλη πρόκληση ήταν να επιλέξετε ένα κατάλληλο μοριακό δείκτη των PVC. Η έκφραση των διαφόρων δεικτών έχει αναφερθεί σε PVCs? δηλαδή, NG2, που προέρχεται από αιμοπετάλια υποδοχέα αυξητικού παράγοντα-βήτα (PDGFRβ), α-SMA, δεσμίνη, και RGS5 [23], και η έκφρασή τους μπορεί να είναι ειδικό ιστό. Παρά τις κάποιες δείκτες PVC του HCC και PC έχουν εντοπιστεί σε πειράματα σε ζώα [25], [26], [36], [37], η μελέτη της έκφρασης τους σε ανθρώπινο βιοψίες ήταν σε μεγάλο βαθμό ανεξερεύνητη. Τα αποτελέσματά μας δείχνουν ότι α-SMA είναι ένας κατάλληλος δείκτης για MVI, λόγω του ρυθμού θετικής χρώσης και colocalized έκφρασης με CD34. Ως εκ τούτου, τα ευρήματά μας αποδεικνύουν ότι είναι ένας δείκτης των PVC. Αυτό είναι σύμφωνο με Feig et al. [13] ο οποίος θεωρείται ότι α-SMA-θετική ινοβλάστες στρωματικά θα μπορούσε πιθανότατα αντιπροσωπεύουν τα PVC. Για αν NG2 θα μπορούσε να βάφονται θετικά δείγματα ποντίκι [38], η έρευνα του και άλλα μόρια προγνωστικό απέτυχαν έγιναν σε ανθρώπινους ιστούς που συλλέγονται στο ινστιτούτο μας (βλ. S8 στο αρχείο S1).

Τα αποτελέσματά μας καταδεικνύουν επίσης ότι σε ασθενείς με MVD υψηλό όγκο, όσο MVI τους είναι επίσης υψηλή, η μεταστατική πιθανότητα θα μπορούσε να είναι χαμηλή, και σε αυτή την περίπτωση, η πρόγνωση θα είναι μια χαρά. Σε αντίθεση, η πρόγνωση μπορεί να είναι κακή για ασθενείς με χαμηλό MVD και επίσης χαμηλή MVI. Κακή ακεραιότητα των σκαφών παρέχει πολλές λεωφόρους για κυττάρου όγκου ενδο /εξαγγείωση από τη διαρροή αγγειακής αρχιτεκτονικής, και αυτά τα κύτταρα θα μπορούσαν να μεταμοσχευθούν σε όργανα στόχους, με αποτέλεσμα την μετάσταση. Αυτό που κάνει τα πράγματα χειρότερα είναι ότι σε περιοχές με αγγειακή κατάρρευση, που προκύπτουν από κακή κάλυψη PVC, μειώνεται δραματικά όγκου αιμάτωση θα μπορούσε να οδηγήσει και να παράγει περιφερειακές υποξία [19]. Τα προκύπτοντα υποξία-προικισμένο καρκινικά κύτταρα θα πρέπει μεταναστευτικών και επεμβατικές ακίνητα μέσω HIF-1α-επαγόμενη επιθηλιακά-μεσεγχυματικά μετάβαση [22], [32], [39]. Η κατάσταση αυτή θα δημιουργήσει ένα εχθρικό περιβάλλον του όγκου, όπου τα κύτταρα αυτά θα μπορούσαν εύκολα να εισβάλλουν μέσα από τα ανώμαλα αγγεία και σχηματίζουν θρόμβους όγκου. Αυτή η υπόθεση υποστηρίζεται από μια εξαιρετική μελέτη που δείχνει ότι η εξάντληση των περικύτταρα προκαλεί υποξία και μετάσταση όγκου [22], και με προηγούμενη μελέτη μας δείχνει ότι η ενίσχυση της MVI ανακουφίζει υποξία και αναστέλλει τη μετάσταση [38]. Τα ευρήματα αυτά είναι όλα σύμφωνο με τις κλινικές παρατηρήσεις μας. Η παρούσα εργασία εξετάζει επίσης υποξία βιοδείκτες HIF-1α και εντάσεις CA IX σύμφωνα με συνδυαστικές ομάδες δείκτη διαφορετικών MVI, και βρήκαμε τους παρουσιάζει πράγματι μια κατανομή κλίση. Και στις δύο ομάδες χαμηλού MVD Ι και II, και οι δύο ομάδες υψηλού MVD III και IV, το υψηλότερο MVI συσχετίζεται με χαμηλότερο HIF-1α και CA IX. Πώς MVI ρυθμίζεται είναι ασαφής. Mazzone et al. ανέφεραν ότι η υποξία και η HIF-1α /-2α σχετιζόμενη PHD2 πρωτεΐνη θα μπορούσε να βλάψει MVI [24], και έχει βρεθεί ότι η γονιδιακή στόχευση του

Phd2

αποτέλεσμα ενισχυμένη MVI και βελτιωμένη ανταπόκριση του όγκου στη χημειοθεραπεία [40 ]. Η τελευταία παρατήρηση δείχνει ότι MVI θα μπορούσε να ρυθμίζεται από υποξία /HIF-1α μέσω μίας οδού ανάδρασης. Ωστόσο, δεν έχουμε μια ανεξάρτητη προγνωστική αξία για τα PVC που χαρακτηρίζεται από α-SMA, το οποίο είναι διαφορετικό από τα ευρήματα των Cooke και οι συνεργάτες του [22]. Πιθανοί λόγοι για τη διαφορά αυτή μπορεί να είναι η ετερογένεια των διαφόρων όγκων, ή η δυνητική έλλειψη εξειδίκευσης των α-SMA. Τα αποτελέσματά μας υποδηλώνουν ότι η εξέταση των PVC και μόνο είναι ανεπαρκής? το σημείο κλειδί, μάλλον, βρίσκεται στην ένωση των PVC με ΑΕΚ.

Πρόσφατα νέα δεδομένα, τόσο από την ομάδα μας και τους άλλους, έχει αποκαλύψει ότι αγγειακού ενδοθηλιακού αυξητικού παράγοντα ή υποδοχέα του αγγειακού ενδοθηλιακού αυξητικού παράγοντα (VEGFR) αποκλεισμός από sorafenib ή sunitinib οδηγεί σε αυξημένη μετάσταση [20], [21], [41]. Υπάρχουν κάποιες γνώσεις σχετικά με τον μηχανισμό αυτού του φαινομένου, αλλά αυτό δεν είναι ακόμη πλήρως κατανοητή. Θεωρούμε ότι είναι πιθανώς επειδή οι στόχοι αντιαγγειογένεση τόσο ΕΚ και PVC, όπως sunitinib μπορεί να εμποδίσει VEGFR2 και PDGFRs [42]. Ωστόσο, τα αποτελέσματα ήταν ασυνεπής. Πίνακας S1. Πίνακας S4. Εικόνα S2. Εικόνα S3. Εικόνα S4. Εικόνα S5. Εικόνα S6. Εικόνα S7. Εικόνα S8.

Χρόνιες ασθένειες