Αφηρημένο

Το στρες που προκαλείται από φωσφοπρωτεΐνη 1 (STIP1) έχει πρόσφατα αναγνωριστεί ως κυκλοφόρησε βιοδείκτη στον ανθρώπινο καρκίνο των ωοθηκών. Επιπλέον, STIP1 εκκρίνεται από ανθρώπινα καρκινικά κύτταρα των ωοθηκών έχει αποδειχθεί ότι προάγει τον πολλαπλασιασμό των κυττάρων του όγκου με σύνδεση προς Alk2 (ακτιβίνης Α υποδοχέα τύπου II που μοιάζει με την κινάση 2) ​​και την ενεργοποίηση των μονοπατιών σηματοδότησης SMAD-ID3. Σε αυτή τη μελέτη, ένα σύνολο 330 δειγμάτων όγκων του καρκίνου των ωοθηκών αξιολογήθηκαν για έκφραση STIP1 με ανοσοϊστοχημεία και αναλύθηκαν για πιθανή συσχέτιση με τα χαρακτηριστικά των ασθενών και την επιβίωση. Η ποσοτικοποίηση της ανοσοαντιδραστικότητας επιτεύχθηκε με την εφαρμογή ενός ανοσοϊστοχημική σύστημα βαθμολόγησης (histoscore). Οι ασθενείς με υψηλού επιπέδου έκφρασης STIP1 (histoscore ≥169) είχαν σημαντικά χειρότερη επιβίωση (υψηλή STIP1, ο μέσος χρόνος επιβίωσης = 76 μήνες? Χαμηλό STIP1, ο μέσος χρόνος επιβίωσης = 112 μήνες?

P

& lt? 0,0001). Επιπλέον, STIP1 histoscores ήταν σημαντικά υψηλότερη σε όγκους υψηλής ποιότητας (βαθμός 3) από ό, τι σε χαμηλού βαθμού (βαθμός 1-2) κακοηθειών (

P

& lt? 0,0001), γεγονός που υποδηλώνει ότι STIP1 μπορεί να είναι μια ένδειξη για όγκο επιθετικότητα. Τα αποτελέσματα της πολυπαραγοντική ανάλυση έδειξε ότι histoscores υψηλή STIP1, προχωρημένα στάδια, ιστολογική τους τύπους, και η παρουσία υπολειπόμενης νόσου (≥2 cm) ήταν ανεξάρτητοι προγνωστικοί παράγοντες της κακής πρόγνωσης. Η προσθήκη STIP1 histoscores βελτίωσε την πρόβλεψη της συνολικής και χωρίς εξέλιξη ποσοστά επιβίωσης στην πολυμεταβλητή μοντέλο αναλογικών κινδύνων Cox. Η θεραπεία του καρκίνου των ωοθηκών κυττάρων με ανασυνδυασμένο STIP1 διεγείρεται τον κυτταρικό πολλαπλασιασμό και τη μετανάστευση, αλλά συν-κατεργασία με αντισώματα αντι-STIP1 καταργηθεί αυτό το αποτέλεσμα. Τα ευρήματά μας υποδηλώνουν ότι η έκφραση STIP1 μπορεί να σχετίζεται με την πρόγνωση και την πορεία STIP1 μπορεί να αντιπροσωπεύει ένα νέο θεραπευτικό στόχο για τον καρκίνο των ωοθηκών ανθρώπινη

Παράθεση:. Chao Α, Lai CH, Tsai CL, Hsueh S, Hsueh C, Lin CY, et al. (2013) του όγκου που προκαλείται από στρες Phosphoprotein1 (STIP1) ως προγνωστικός βιοδεικτών στον καρκίνο των ωοθηκών. PLoS ONE 8 (2): e57084. doi: 10.1371 /journal.pone.0057084

Επιμέλεια: Salvatore V. Pizzo, του Πανεπιστημίου Duke Medical Center, Ηνωμένες Πολιτείες της Αμερικής

Ελήφθη: 6η Οκτωβρίου 2012? Αποδεκτές: 16 του Ιανουαρίου, 2013? Δημοσιεύθηκε: 27 Φεβρουαρίου 2013

Copyright: © 2013 Chao et al. Αυτό είναι ένα άρθρο ανοικτής πρόσβασης διανέμεται υπό τους όρους της άδειας χρήσης Creative Commons Attribution, το οποίο επιτρέπει απεριόριστη χρήση, τη διανομή και την αναπαραγωγή σε οποιοδήποτε μέσο, ​​με την προϋπόθεση το αρχικό συγγραφέα και την πηγή πιστώνονται

Χρηματοδότηση:. Αυτή η μελέτη υποστηρίχθηκε από επιχορηγήσεις από το Εθνικό Επιστημονικό Συμβούλιο (NSC100-2314-Β-182-016MY3 να THW), το Chang Gung Ίδρυμα Ιατρικής Έρευνας (CMRPG391451 /2 AC, CMRPG 391461/2 να THW), και το Υπουργείο Υγείας ( DOH101-TD-Ι-111-TM013 με THW, DOH101-TD-C-111-006 με AC και THW). Οι χρηματοδότες δεν είχε κανένα ρόλο στο σχεδιασμό της μελέτης, τη συλλογή και ανάλυση των δεδομένων, η απόφαση για τη δημοσίευση, ή την προετοιμασία του χειρογράφου

Αντικρουόμενα συμφέροντα:.. Οι συγγραφείς έχουν δηλώσει ότι δεν υπάρχουν ανταγωνιστικά συμφέροντα

Εισαγωγή

επιθηλιακού καρκίνου των ωοθηκών είναι ένα από τα πιο θανατηφόρα κακοήθειες που επηρεάζουν τις γυναίκες [1]. Σχεδόν 225.500 καρκίνο των ωοθηκών νέα περιστατικά συμβαίνουν σε όλο τον κόσμο κάθε χρόνο, υπεύθυνη για 140.200 θανάτους [2]. Ωοθηκών καρκινώματα περιλαμβάνει μια ετερογενή ομάδα νεοπλασμάτων, τα τέσσερα πιο κοινά ιστολογικών υποτύπων είναι ορώδες, ενδομητριοειδές, σαφείς κυττάρων, και βλεννώδες [3]. Η μέτρηση του καρκινικού αντιγόνου στον ορό 125 (CA125) επίπεδα έχει γίνει συνήθης πρακτική για την προεγχειρητική αξιολόγηση των ωοθηκών μαζών [4]. Επιπλέον, CA125 έχει αποδειχθεί ότι είναι χρήσιμη για την παρακολούθηση θεραπευτικής απόκρισης και στην επιτήρηση των ασθενών με επιθηλιακό καρκίνο των ωοθηκών [5]. Ωστόσο, CA125 δεν είναι αυξημένα σε όλους τους όγκους των ωοθηκών και δεν διαθέτει επαρκή θετική προγνωστική αξία για την αξιολόγηση των κινδύνων βάσει πληθυσμού ή πρώιμη ανίχνευση [6]. Λόγω των περιορισμών του CA125 σαν δείκτη ασθένεια, υπάρχει επείγουσα ανάγκη για νέες βιοδείκτες που μπορούν να χρησιμοποιηθούν ως δείκτες πρόγνωσης στον καρκίνο των ωοθηκών να διαφοροποιήσουν αποτελεσματικά μεταξύ επιθετικών και λιγότερο επιθετική ασθένεια.

Οι πρόσφατες τεχνολογικές εξελίξεις, ειδικά στους τομείς της γονιδιωματικής και πρωτεομικής, οι επίσπευση την ανακάλυψη νέων βιοδεικτών του καρκίνου [7], [8]. Με τη σύγκριση των των πρωτεϊνών του όγκου διάμεσου υγρού (TIF) και της κανονικής διάμεσο υγρό (NIF), έχουμε εντοπίσει πρόσφατα στρες που προκαλείται από φωσφοπρωτεΐνη 1 (STIP1) ως υποψήφιο βιοδείκτη για ανθρώπινο καρκίνο των ωοθηκών [9]. Τα επίπεδα ορού STIP1 είναι σημαντικά υψηλότερα σε ασθενείς με καρκίνο των ωοθηκών σε σχέση με την ηλικία υγιών [9] ελέγχων και να μειωθεί σημαντικά μετά από χειρουργική αφαίρεση του όγκου [10]. Επιπλέον, η συνδυασμένη μέτρηση του CA125 και STIP1 έχει δειχθεί ότι βελτιώνουν την έγκαιρη ανίχνευση του καρκίνου των ωοθηκών [9], υποστηρίζοντας την κλινική χρησιμότητα της STIP1 ως βιοδείκτη σε αυτή την κακοήθεια [11].

STIP1, επίσης γνωστή ως Hsp70 /Hsp90-οργάνωση πρωτεΐνη (ΕΔ), μετασχηματισμός ευαίσθητη πρωτεΐνη IEF SSP 3521 (ΙΕΡ-SSP-3521), Ρ60, STI1, STI1L, (GeneID 10963? HPRD 05454), μια πρωτεΐνη 62,6 kDa, περιέχει τρεις επαναλαμβανόμενες tetratricopeptide (TPR) τομείς [12] τα οποία είναι ικανά να αλληλεπιδρούν με πρωτεΐνες θερμικού σοκ για να σχηματίσουν σύμπλοκα τα οποία συμμετέχουν σε διάφορες βιολογικές διεργασίες που κυμαίνονται από RNA ματίσματος, μεταγραφής, αναδίπλωση πρωτεϊνών, τη μεταγωγή σήματος, και ρύθμιση του κυτταρικού κύκλου [13], [14]. Σε νευρωνικούς ιστούς, εξωκυτταρικό STIP1 δεσμεύεται με πρωτεΐνες πρίον και πυροδοτεί διαφορετικές οδούς σηματοδότησης – συμπεριλαμβανομένου του ενδογενούς ενεργοποιείται από μιτογόνο πρωτεΐνη κινάση 1/2 (ERK1 /ΕΚΚ2), την κινάση πρωτεΐνης Α, και φωσφατιδυλινοσιτόλη καταρράκτες σηματοδότησης 3-κινάσης – τελικά, οδηγεί σε αύξηση στο κελί πολλαπλασιασμού [15], [16], [17]. Στον καρκίνο των ωοθηκών, έχουμε δείξει ότι STIP1 δεσμεύεται σε μια μορφογενετική πρωτεΐνη του οστού (ΒΜΡ) υποδοχέα – ονομάζεται ακτιβίνης Α υποδοχέα τύπου II που μοιάζει με την κινάση 2 (Alk2) – για την ενεργοποίηση της οδού σηματοδότησης SMAD και τη μεταγραφική ενεργοποίηση του ID3 (αναστολέας του DNA δεσμευτική 3) [10]. Στο σύνολό τους, τα ευρήματα αυτά υποδηλώνουν ότι STIP1 εκκρίνεται από ανθρώπινα καρκινικά κύτταρα των ωοθηκών προάγει τον πολλαπλασιασμό των καρκινικών κυττάρων δρώντας με αυτοκρινή και /ή παρακρινή τρόπο.

Αν και η απελευθέρωση του STIP1 από ανθρώπινο καρκίνο των ωοθηκών έχει επιβεβαιωθεί από ανεξάρτητη ερευνητική ομάδα [18], λίγα στοιχεία είναι διαθέσιμα σχετικά με τη χρησιμότητα των STIP1 ανοσοϊστοχημική ανάλυση για την αξιολόγηση πρόγνωση στον καρκίνο των ωοθηκών [19]. Σε αυτή τη μελέτη, ένα σύνολο 330 δειγμάτων όγκων του καρκίνου των ωοθηκών αξιολογήθηκαν για έκφραση STIP1 με ανοσοϊστοχημεία και αναλύθηκαν για πιθανή συσχέτιση με τα χαρακτηριστικά των ασθενών και την επιβίωση.

Υλικά και Μέθοδοι

Δήλωση Ηθικής

Αυτή η μελέτη διεξήχθη σύμφωνα με τη δήλωση του Ελσίνκι και εγκρίθηκε από το Διοικητικό συμβούλιο Institutional Review του Memorial Hospital Chang Gung (CGMH-IRB # 99-0112B και # 97-1444C).

ασθενείς

από το 2000 έως και το 2005, συνολικά 403 διαδοχικών ασθενών που έχουν διαγνωστεί με καρκίνο των ωοθηκών στο Linkou Ιατρικό Κέντρο του Chang Gung Memorial Hospital συμπεριλήφθηκαν στη μελέτη. Οι ιστολογικές τύποι έχουν ως εξής: ορώδης (n = 160), βλεννώδες (n = 68), ενδομητριοειδές (n = 73), σαφείς καρκίνωμα (n = 64), και μικτού τύπου κυττάρου (n = 38). Τα κριτήρια αποκλεισμού ήταν οι εξής: (i) των ασθενών που υποβλήθηκαν σε εισαγωγική θεραπεία πριν οριστική χειρουργική επέμβαση ή που παραπέμφθηκαν από το εξωτερικό νοσοκομεία μετά την αρχική χειρουργική επέμβαση? (Ii) των ασθενών που υποβλήθηκαν σε λαπαροσκοπική χειρουργική ως κύρια θεραπεία? (Iii) ασθενείς που δεν παρακολουθήθηκαν κατά τους τρεις πρώτους μήνες μετά την αρχική θεραπεία? (Iv) οι ασθενείς με μη διαφοροποιημένα καρκινώματα που προκύπτουν σε τερατώματα? και (ν) ασθενείς με μη διαθέσιμη παθολογική μπλοκ παραφίνης. Επιβίωση χωρίς εξέλιξη (PFS) υπολογίστηκε ως το χρονικό διάστημα (σε μήνες) από την ημερομηνία της χειρουργικής επέμβασης για την ημερομηνία τεκμηριωμένη εξέλιξη της νόσου (αναδρομικά ορίζεται με βάση το υψόμετρο του CA125 στον ορό ή /και ακτινολογικά ευρήματα της εξέλιξης). Η συνολική επιβίωση (OS) ορίστηκε ως το χρονικό διάστημα μεταξύ της ημερομηνίας της χειρουργικής επέμβασης και την ημερομηνία του θανάτου.

Η ανοσοϊστοχημεία

Τα αρχεία της, τμήματα ιστού καρκίνου των ωοθηκών παραφίνη-ενσωματωμένες φορμόλη-σταθερής ήταν ανακτηθεί όπως περιγράφηκε προηγουμένως [9], [20], [21]. Οι τομές χρωματίστηκαν με ένα αντι-ανθρώπινο μονοκλωνικό αντίσωμα STIP1 πρωτογενή ποντικού (Abnova Corp., Taipei, Ταϊβάν? 1:1,800 αραίωση) χρησιμοποιώντας μια αυτοματοποιημένη συσκευή κηλιδώσεως ανοσοϊστοχημεία με την Ventana Basic DAB (3,3-διαμινοβενζιδίνη) κιτ ανίχνευσης (Tucson, AZ, USA). Τα πλακίδια αξιολογήθηκαν ανεξάρτητα από δύο παθολόγους (S. Η και Ο.Η.), οι οποίοι δεν γνώριζαν τα κλινικοπαθολογοανατομικών δεδομένων και των patients’identities. Η συνολική βαθμολογία ανοσοϊστοχημική (histoscore) εκφράστηκε ως το ποσοστό των θετικών κυττάρων όγκου (0-100%) πολλαπλασιάζονται με ένταση χρώσης τους (0 = αρνητική, 1 = ασθενής, 2 = μέτρια, 3 = ισχυρή). Ως εκ τούτου, η συνολική histoscore κυμαίνεται από 0 έως 300 [22]. Η επικύρωση της ειδικότητας του αντισώματος αντι-STIP1 έγινε με το φράξιμο των αντισωμάτων με 400 nM της ανασυνδυασμένης πρωτεΐνης ανθρώπινης STIP1 (rhSTIP1) κατά το στάδιο επώασης με αντι-STIP1.

Cell Culture

ωοθηκών καρκινικές κυτταρικές σειρές (BG1, MDAH2774) ελήφθησαν από την American Type Culture Collection (Manassas, VA, USA). Τα κύτταρα καλλιεργήθηκαν σε 10% FBS, πενικιλίνη (100 μονάδες /ml), στρεπτομυκίνη (100 μονάδες /mL), και DMEM /F12 media στους 37 ° C σε ένα 5% CO

2 ατμόσφαιρα.

κυττάρων η μετανάστευση Δοκιμασία

BG1 και MDAH2774 κύτταρα (10

6 /φρεάτιο) – αγωγή είτε με rhSTIP1 (400 nm) ή το όχημα μόνο του – καλλιεργήθηκαν σε μέσο άνευ ορού για 24 ώρες. Τα κύτταρα στη συνέχεια τοποθετήθηκαν σε ανώτερο θάλαμο ενός Transwell (24-φρεατίων, 8-μm μέγεθος πόρων? Corning Inc., Corning, ΝΥ, USA). Η κάτω θάλαμος γέμισε με 800 μΐ DMEM /F12 και 0.5 μg /mL της φιμπρονεκτίνης (Sigma, St. Louis, ΜΟ, USA). Μετά από 26 ώρες επώασης, τα κύτταρα που είχαν μεταναστεύσει διαμέσου πόρων και προσκολλάται στο κάτω μεμβράνη χρώστηκαν με φθοροσκεΐνη και καλσεΐνη-ΑΜ (4 μg /mL? BD Biosciences, San Diego, CA, USA). Ο αριθμός των βιώσιμων κυττάρων που είχαν διασχίσει το φίλτρο προσδιορίστηκε με μέτρηση του φθορισμού του κάθε δείγματος χρησιμοποιώντας αναγνώστη Tecan άπειρο M200 Multiwell (Tecan, Männedorf, Ελβετία). Η εξουδετέρωση του STIP1 πραγματοποιήθηκε χρησιμοποιώντας ένα αντίσωμα αντι-STIP1 (800 ηΜ). Ολες οι δοκιμασίες επαναλήφθηκαν τουλάχιστον τρεις φορές.

Wound Λήξη Δοκιμασία

Για να διερευνηθεί η επίδραση της STIP1 στην κυτταρική μετανάστευση, MDAH2774 κύτταρα (10

6 /φρεάτιο) που είχαν είτε σε επεξεργασία με 400 ηΜ rhSTIP1 ή το όχημα σπάρθηκαν σε δίσκους 3.5-cm μετά από 24 ώρες καλλιέργειας σε μέσο χωρίς ορό. Το μέσο στη συνέχεια αντικαταστάθηκε με ένα που περιείχε 0.4% FBS. Η μετανάστευση των κυττάρων παρατηρήθηκε μέσω ενός ανοίγματος. εικόνες αντίθεσης φάσης των κενών συνελήφθησαν στη βασική γραμμή και μετά από 24 ώρες θεραπείας με ένα ανεστραμμένο μικροσκόπιο (μεγέθυνση, 10 ×). Το λογισμικό WimScratch (Wimasis, Μόναχο, Γερμανία) χρησιμοποιήθηκε για την ανάλυση κλεισίματος τραύματος [23].

Βιωσιμότητα Δοκιμασία Κυττάρων χρησιμοποιώντας 3- (4,5-διμεθυλθειαζολ-2-υλ) -2,5 διφαινυλτετραζολίου (ΜΤΤ)

Η μετατροπή των κίτρινων άλατα τετραζολίου σε μωβ κρυστάλλους φορμαζόνης από μιτοχόνδρια χρησιμοποιήθηκε ως υποκατάστατο για τη βιωσιμότητα των κυττάρων. Σε πλάκες 48 φρεατίων, 5 × 10

4 κύτταρα καλλιεργήθηκαν σε 200 μΐ μέσου ανά φρεάτιο όλη τη νύκτα. Είκοσι μΐ αντιδραστηρίου ΜΤΤ προστέθηκαν σε κάθε φρεάτιο, και μετά από 4 ώρες, 200 μΙ του διαλύματος διαλυτοποίησης (10% SDS σε 0.01 Μ HCl) ανά φρεάτιο προστέθηκαν για όλη τη νύχτα. Η απορρόφηση προσδιορίστηκε στα 570 nm σε μία μικροπλάκα φασματοφωτομέτρου (PerkinElmer Life Science). Για τη δοκιμή της δράση στην εξουθένωση των STIP1 στη βιωσιμότητα των κυττάρων, τα καρκινικά κύτταρα των ωοθηκών επιμολύνθηκαν με 50 ηΜ δίκλωνων siRNA που στοχεύει STIP1 ή τον έλεγχο siRNA σε Lipofectamine RNAimas (Invitrogen, Calsbad, CA), όπως έχει ήδη αναφερθεί [10]. Μετά από 48 ώρες επιμόλυνσης, τα κύτταρα υποκαλλιεργήθηκαν στην πλάκα για δοκιμασίες ΜΤΤ.

βρωμοδεοξυουριδίνη (BrdU) Δοκιμασία Ενσωμάτωσης

Για να διερευνηθεί η επίδραση της STIP1 στον πολλαπλασιασμό των κυττάρων, BG1 και MDAH2774 κύτταρα (10

4 κύτταρα /φρεάτιο) καλλιεργήθηκαν σε πλήρες μέσο για 24 ώρες, που ακολουθείται από 72 ώρες στέρησης ορού. Τα κύτταρα μετά υποβλήθηκαν σε αγωγή είτε με 400 ηΜ του rhSTIP1 ή οχήματος για 24 ώρες. σύνθεση του DNA προσδιορίστηκε με κυτταρικού πολλαπλασιασμού ELISA, BrdU Kit (Roche Applied Science, Indianapolis, ΙΝ, USA) χρησιμοποιώντας χρωματομετρική ανίχνευση σύμφωνα με το πρωτόκολλο του κατασκευαστή [21], [23]. Η εξουδετέρωση των εξωγενών STIP1 διεξήχθη χρησιμοποιώντας το αντίσωμα αντι-STIP1 (800 ηΜ).

Κί67 Δοκιμασία Ανοσοκυτοχημική

BG1 και MDAH2774 κύτταρα στερήθηκαν τον ορό για 72 ώρες και στη συνέχεια υποβλήθηκε σε επεξεργασία με είτε 400 ηΜ του rhSTIP1 ή οχήματος για 24 ώρες. Η πολλαπλασιαστική δραστηριότητα ελέγχθηκε με ανοσοκυτταροχημική χρώση του Κί67 χρησιμοποιώντας ένα μονοκλωνικό αντίσωμα έναντι Κί67 (NeoMarker, Fremont, CA, USA).

Στατιστική Ανάλυση

Οι διαφορές στα histoscore μεταξύ δύο ομάδες συγκρίθηκαν χρησιμοποιώντας το Mann-Whitney

U

δοκιμή. Η δοκιμή Kruskal-Wallis χρησιμοποιήθηκε για τη σύγκριση περισσότερες από δύο ομάδες. Η ικανότητα των STIP1 histoscores να διακρίνουν μεταξύ του επέζησε και ο θανών ασθενών αξιολογήθηκε με τη γραφική αναπαράσταση των χαρακτηριστικών λειτουργίας δέκτη (ROC) καμπύλη, η οποία συνδέει την πραγματική θετικό ποσοστό (ευαισθησία) στο ποσοστό ψευδώς θετικών (1-εξειδίκευση) και υπολογίζοντας το περιοχή κάτω από την καμπύλη (AUC). Χρονικά εξαρτώμενη καμπύλες ROC χρησιμοποιήθηκαν για να εκτιμηθούν οι AUCs σε διαφορετικά χρονικά σημεία [24]. Η αναλογικού κινδύνου του Cox ανάλυση παλινδρόμησης χρησιμοποιήθηκε για να προσδιοριστούν οι ανεξάρτητοι προγνωστικοί παράγοντες του OS και PFS. Όλες οι μεταβλητές με μονομεταβλητών ενώσεις σε

P

& lt? 0,05 εισήχθησαν στο πολυπαραγοντικό μοντέλο. Για να διερευνηθεί η επίδραση της προσθήκης STIP1 στο προγνωστικό μοντέλο Cox για ασθενείς με διηθητικό καρκίνο των ωοθηκών, που αφαιρείται την αποκλίνουσα συμπεριφορά του μοντέλου με την προσθήκη του STIP1 από την αποκλίνουσα συμπεριφορά του μοντέλου, χωρίς STIP1. Η διαφορά στη συνέχεια δοκιμάστηκε έναντι ενός chi-square κατανομή με βαθμούς ελευθερίας ίσο με τη διαφορά μεταξύ των βαθμών ελευθερίας των δύο μοντέλων (με ή χωρίς STIP1) [25]. Τα αποτελέσματα παρουσιάζονται ως προσαρμοστεί αναλογίες κινδύνου (HR) και τα διαστήματα εμπιστοσύνης 95% (CI). Όλες οι αναλύσεις πραγματοποιήθηκαν χρησιμοποιώντας το στατιστικό πακέτο SPSS 17.0 (SPSS Inc., Chicago, IL, USA). Χρησιμοποιήσαμε το πακέτο R

survivalROC

(R έκδοση 2.15.1? Το θεμέλιο R για στατιστικούς υπολογισμούς, Βιέννη, Αυστρία) για τον υπολογισμό του χρόνου που εξαρτώνται από τις καμπύλες ROC. Δύο ουρά

P

τιμές & lt?. 0.05 θεωρήθηκαν στατιστικά σημαντικές

Αποτελέσματα

Μια έκφραση υψηλού STIP1 Ανοσοϊστοχημική συνδέεται με την υψηλή σταδίων, υψηλής ποιότητας, και τα χωροκατακτητικά Καρκίνος των ωοθηκών

Τα αποτελέσματα της ανοσοϊστοχημείας (IHC) έδειξε ότι η θεραπεία με μια περίσσεια ποσότητα ανασυνδυασμένης STIP1 κατήργησε εντελώς το ανοσοποιητικό αναγνώριση των STIP1 ιστού από αντι-STIP1, επιβεβαιώνοντας την εξειδίκευση του αντισώματος αντι-STIP1 χρησιμοποιήθηκε σε αυτή τη μελέτη (Εικόνες 1Α-ϋ). Για την ταυτόσημη αντίσωμα αντι-STIP1 που χρησιμοποιούνται σε όλη την IHC μελέτη αυτή, ανάλυση Western blot των πολλαπλών κυτταρικών γραμμών καρκίνου ωοθηκών επιβεβαίωσε επίσης την ειδικότητα του στην αναγνώριση STIP1 (Σχήμα S1). Οι διαφορές σε ανοσοϊστοχημική χρώση STIP1 φαίνεται στα Σχήματα 1Ε-G.

STIP1 εκφράζονται στο κυτταρόπλασμα των καρκινικών κυττάρων των ωοθηκών χρωματίζεται καφέ. Η ανοσοαντιδραστικότητα του STIP1 με το αντίσωμα αντι-STIP1 σε ιστούς καρκίνου (A, C) καταργήθηκε με την προσθήκη 15 μg ανασυνδυασμένης ανθρώπινης STIP1 κατά την επώαση (Β, D)? Αυτά τα αποτελέσματα υποστηρίζουν την εξειδίκευση του αντισώματος αντι-STIP1. Η ένταση της χρώσης STIP1 βαθμολογήθηκε ως 1 (Ε), 2 (F), και 3 (G). Όλες οι διαφάνειες που παρουσιάζονται εδώ ήταν από ωοθηκικό ορώδες καρκίνωμα. Οι ράβδοι κλίμακας παριστούν 100 μm (Α, Β) ή 20 μm (C-G)

Η

Ένα σύνολο 330 ασθενών με καρκίνο των ωοθηκών (διάμεση ηλικία, 50,7 χρόνια?. Εύρος, 17-90 χρόνια ) συμπεριλήφθηκαν στη μελέτη. Τα γενικά χαρακτηριστικά των ασθενών της μελέτης παρουσιάζονται στον Πίνακα 1. Από τους 50 ασθενείς με οριακά όγκους των ωοθηκών (BOT), 49 (98%) ήταν σταδίου Ι ή ΙΙ. Αντίθετα, 146 (52,1%) από τους 280 ασθενείς με διηθητικό καρκίνο ήταν στο στάδιο ΙΙΙ ή IV. Υδαρής καρκίνωμα ήταν η πιο κοινή ιστολογική υπότυπο. Υψηλότερες histoscores STIP1 σημαντικά σχετίζονται με μεγαλύτερη ηλικία (≥50 ετών), σε προχωρημένο στάδιο, η παρουσία μη-βλεννώδες καρκίνους (ορώδες, σαφείς κυττάρων, ή ενδομητριοειδές καρκινώματα), βαθμού 3, διηθητικό καρκίνο, υψηλότερα επίπεδα CA125 (≥35 U /mL), και αναντίστοιχο πρωτογενή χειρουργική cytoreduction (υπολειπόμενη νόσος ≥2 cm) (Πίνακας 1).

Η

Μια έκφραση υψηλού STIP1 Ανοσοϊστοχημική σχετίζεται με μειωμένη συνολική επιβίωση (OS)

Η μέση διάρκεια της παρακολούθησης ήταν 69,3 μήνες (εύρος, 4-130 μήνες). Για να διερευνηθεί η δυνητική χρησιμότητα του STIP1 ανοσοϊστοχημικής έκφρασης ως βιοδείκτη σε καρκίνο των ωοθηκών, χρησιμοποιήσαμε την καμπύλη ROC για την ποσοτικοποίηση πόσο καλά θα μπορούσαν να χρησιμοποιηθούν διαφορετικά histoscores για την πρόβλεψη της επιβίωσης. Επειδή ένα ελάχιστο παρακολούθηση των 3 ετών που απαιτείται για την ανάλυση επιβίωσης προσδιορίζεται από την καμπύλη ROC, συνολικά 245 ασθενείς συμπεριλήφθηκαν στην παρούσα ανάλυση. Η βέλτιστη αποκοπής για την histoscore STIP1 να διακρίνει μεταξύ των ασθενών που επέζησαν (n = 191) και εκείνων που έχασαν τη ζωή τους (n = 54) ήταν 169 (ευαισθησία = 0,889, ειδικότητα = 0,492). Στην ανάλυση όλων των ασθενών που μελετήθηκαν συμπεριλαμβανομένων τόσο επεμβατικές (n = 280) και οριακές περιπτώσεις (n = 50), η σωρευτική OS των ασθενών με STIP1≤169 (n = 119) ήταν σημαντικά υψηλότερο (

P

& lt? 0,0001) από εκείνες με σκορ & gt? 169 (n = 211), στην ανάλυση Kaplan-Meier. Οι μέσες περίοδοι επιβίωσης ήταν 112 και 76 μήνες αντίστοιχα (Εικόνα 2Α)

Καμπύλη Kaplan-Meier αναλύσεις για τη συνολική επιβίωση έδειξε ότι οι γυναίκες με STIP1 histoscore & gt?. 169 (κόκκινη γραμμή) είχαν σημαντικά χαμηλότερη συνολική επιβίωση από αυτούς με ένα STIP1 histoscore ≤169 (μπλε γραμμή). Στατιστική έννοιες (

P

& lt? 0.0001) ανιχνεύθηκαν στις αναλύσεις του (Α) όλες τις περιπτώσεις (n = 330), συμπεριλαμβανομένων των διηθητικό καρκίνο και οριακά όγκου (BOT), (Β) της εισβολής των ωοθηκών καρκίνους όλων των τύπων κυττάρων (n = 280), και (C) μόνο επεμβατική ορώδης τύπος των καρκίνων των ωοθηκών (n = 107).

η

Επειδή οριακά όγκους των ωοθηκών γενικά χαρακτηρίζονται από μια καλή πρόγνωση και δεν συμπεριλαμβάνονται συχνά στις ωοθηκών καρκίνος κλινικές δοκιμές, η ανεξάρτητη προγνωστική σημασία των επιπέδων STIP1 αναλύθηκε μόνο στην υποομάδα των ασθενών με διηθητικό καρκίνο των ωοθηκών (n = 280). Τα αποτελέσματα της πολυπαραγοντικής ανάλυσης έδειξαν ότι STIP1 histoscores & gt? 169 ήταν ανεξάρτητες, σημαντικά προγνωστικό παράγοντα για το OS (

P

& lt? 0.005) και για το PFS (

P

& lt? 0,05) (Πίνακας 2 ). Kaplan-Meier αναλύσεις αποκάλυψαν επίσης ότι STIP1 histoscores & gt? 169 συσχετίστηκαν σε σημαντικό βαθμό με την κακή OS τόσο σε όλες τις επεμβατικές περιπτώσεις αυτής της μελέτης (n = 280) (Εικόνα 2Β) και σε επεμβατική ορώδες καρκίνους των ωοθηκών (n = 170) (Σχήμα 2C) .

η

Μια έκφραση υψηλού STIP1 Ανοσοϊστοχημική συνδέεται με υψηλής ποιότητας όγκοι

η ιστολογική διαβάθμιση είναι μια σημαντική παράμετρος για την αξιολόγηση του κινδύνου των ασθενών με καρκίνο των ωοθηκών. Όπως φαίνεται στον Πίνακα 1, οι histoscores STIP1 ήταν σημαντικά υψηλότερα σε υψηλής ποιότητας (βαθμού 3) όγκους από ό, τι σε χαμηλού βαθμού (βαθμός 1-2) κακοηθειών (

P

& lt? 0,0001). Ερευνήσαμε περαιτέρω την κλινική σημασία των STIP1 immunoexpression σε καρκίνους των ωοθηκών, σύμφωνα με ιστολογικό τύπο και το βαθμό τους. Η πλειοψηφία των βαθμού 3 όγκων έδειξε μια STIP1 histoscore & gt? 169? ιδίως, 92,8% (77/83) των ορώδες τύπου, 92,3% (12/13) των ενδομητριοειδές, και 76,5% (13/17) των μικτών καρκινώματα τύπου παρουσίασαν υψηλή έκφραση STIP1. Από τις 57 σαφής κύτταρο ωοθήκης καρκίνους οι οποίοι συνήθως δεν κατατάσσονται [3], 40 (70.2%) εμφάνισαν μια STIP1 histoscore & gt? 169. Τα αθροιστικά ποσοστά OS σε ασθενείς με χαμηλού βαθμού (βαθμός 1-2) κακοηθειών ήταν σημαντικά υψηλότερες από εκείνες των ασθενών με βαθμού 3 κακοήθειες (

P

& lt? 0,0001). Οι μέσες περίοδοι επιβίωσης ήταν 102 και 66 μήνες αντίστοιχα (Εικόνα S2). Στο σύνολό τους, τα αποτελέσματα αυτά δείχνουν ότι οι histoscores υψηλή STIP1 συνδέεται με μια ιδιαίτερα επιθετική συμπεριφορά στον καρκίνο των ωοθηκών.

Η προσθήκη του STIP1 Histoscores Βελτιώνει την προγνωστική διαστρωμάτωση των ασθενών με εν τω βάθει ωοθηκών

Για να δοκιμάσετε αν histoscores STIP1 παρέχονται επιπλέον πληροφορίες από αυτές που χρησιμοποιούνται σήμερα διαβάθμιση όγκου και στάσης, αναλύσαμε την επίδραση των επιπέδων STIP1 στην κλινική επιβίωση μόνο σε ασθενείς με τα ίδια βαθμίδα ή την ίδια κλινικά στάδια. Σε ασθενείς με βαθμού 3 καρκίνο των ωοθηκών, οι ασθενείς με STIP1 & gt? 169 (n = 102) είχαν σημαντικά (Ρ = 0.022) χειρότερο ποσοστό επιβίωσης 5 ετών το 44,5% από 63,6% σε αυτούς με STIP1≤169 (n = 11). Σε ασθενείς με βαθμολογία 1-2 καρκίνο των ωοθηκών, των περιπτώσεων με STIP1 & gt? 169 (n = 62) είχαν χειρότερη ποσοστό επιβίωσης 5 ετών το 73,8% από 85,3% σε αυτούς με STIP1≤169 (n = 48), αν και η διαφορά δεν κατέληξε σε στατιστικά σημαντική ακόμα (P = 0,197). Επιπλέον, σε ασθενείς με προχωρημένα στάδια (III και IV) ορώδους καρκινώματος και απροσδιόριστο βαθμού 2-3 (n = 8), όλοι τους είχαν STIP1 & gt? 169 και 7 από αυτούς (87,5%) υπέκυψαν στην ασθένεια κατά τη διάρκεια της παρακολούθησης up αυτής της μελέτης.

Πραγματοποιήσαμε επίσης ανάλυση της απόκλισης και να κατασκευάζονται τα χρονικά εξαρτώμενη από τις καμπύλες ROC (με ή χωρίς STIP1) να εξετάσει κατά πόσον η προσθήκη STIP1 histoscores θα μπορούσε να βελτιώσει την προγνωστική διαστρωμάτωση των ασθενών με εν τω βάθει ωοθηκών καρκίνους. Σε αυτές τις αναλύσεις, άλλες πιθανές παράγοντες πρόβλεψης που περιλαμβάνονται στο μοντέλο ήταν σταδίου, ο τύπος, CA125 στον ορό, και η παρουσία του υπολειμματικής νόσου. Το μοντέλο της προσθήκης του histoscore STIP1 σε άλλους προγνωστικούς παράγοντες ξεπέρασε σημαντικά το μοντέλο χωρίς STIP1, που δείχνει τόσο υψηλότερες τιμές AUC και κάτω deviances τόσο OS (Σχήμα 3Α,

P

= 0,0008) και PFS (Σχήμα 3Β,

P

= 0,014). Συλλογικά, αυτά τα αποτελέσματα έδειξαν ότι STIP1 όγκου histoscoring είχε μια προγνωστική αξία εκτός από την διαλογή και στάσης.

Η χρονο-εξαρτώμενη AUC (περιοχή κάτω από την καμπύλη ROC) του μοντέλου συμπεριλαμβανομένων STIP1 αναφέρεται ως ένα κόκκινο στερεό γραμμή, ενώ η AUC του μοντέλου χωρίς STIP1 εμφανίζεται ως μπλε διακεκομμένη γραμμή. Άλλες παράμετροι που περιλαμβάνονται στάδιο, το είδος, CA125 στον ορό, και υπολειμματικής νόσου. (Α) Η συνολική επιβίωση, (Β) επιβίωση χωρίς εξέλιξη.

Η

STIP1 διέγειρε τον πολλαπλασιασμό και τη μετανάστευση των ωοθηκών καρκινικά κύτταρα

Για να διερευνήσουν τις βιολογικές λειτουργίες του STIP1, που αντιμετωπίζονται BG1 και MDAH2774 ωοθηκών καρκινικά κύτταρα με rhSTIP1 (400 nm). Η θεραπεία με rhSTIP1 προκάλεσε μία 1,9-πλάσια διέγερση σε ενσωμάτωσης BrdU σε αμφότερες καρκινικά κύτταρα των ωοθηκών (Εικόνα 4Α). Επιπλέον, η θεραπεία με rhSTIP1 αποτέλεσμα την αύξηση Ki-67 ανοσοχρώση, γεγονός που υποδηλώνει ότι STIP1 επάγει ανθρώπινων καρκινικών κυττάρων των ωοθηκών πολλαπλασιασμό (Σχήμα 4Β).

Δύο κυτταρικές γραμμές καρκίνου ωοθηκών (BG1 και MDAH2774) υποβλήθηκαν σε θεραπεία με 400 ηΜ του rhSTIP1 και αναλύθηκαν με ενσωμάτωση BrdU (Α) και Κί67 ανοσοχρώση (Β). Οι Ki67-θετικά κύτταρα φαίνονται σε καφέ χρώμα? κλίμακα μπάρες αντιπροσωπεύουν 20 μ.

Η

Η θεραπεία με rhSTIP1 διεγείρεται σημαντικά τη μετανάστευση των ωοθηκών καρκινικών κυττάρων (2,4-φορές αύξηση σε κύτταρα BG1 και 1,6-πλάσια αύξηση στην MDAH2774 κύτταρα, αντιστοίχως) (Σχήμα 5Α). Σε συμφωνία με τα δεδομένα που ελήφθησαν στην δοκιμασία μετανάστευσης transwell, τα αποτελέσματα της δοκιμασίας το κλείσιμο του τραύματος (Σχήμα 5Β) αναλύονται χρησιμοποιώντας το λογισμικό WimScratch έδειξε μία αύξηση κατά 1.8 φορές του ρυθμού μετανάστευσης του MDAH2774 κύτταρα κατεργασμένα με rhSTIP1 (τα δεδομένα δεν παρουσιάζονται).

Η θεραπεία με rhSTIP1 προωθείται μετανάστευση των κυττάρων σύμφωνα με τα αποτελέσματα των δύο μετανάστευσης Transwell (Α) και το κλείσιμο του τραύματος (Β) δοκιμασίες. Ποσοτική ανάλυση του ποσοστού που μεταναστεύουν MDAH2774 κύτταρα χρησιμοποιώντας το λογισμικό WimScratch έδειξαν ότι η έκθεση σε rhSTIP1 προκάλεσε μία 1,8-πλάσια αύξηση στην μετανάστευση (Β). Τα αποτελέσματα είναι αντιπροσωπευτικά τριών ανεξάρτητων πειραμάτων.

Η

Είναι σημαντικό ότι, οι παρατηρούμενες αυξήσεις σε κυτταρικό πολλαπλασιασμό και τη μετανάστευση που προκαλείται από rhSTIP1 καταργήθηκαν από την συν-θεραπεία με αντισώματα αντι-STIP1 (Σχήματα 6Α και 6Β). Τα αποτελέσματα αυτά όχι μόνον να επιβεβαιώσει ότι οι παρατηρούμενες επιδράσεις που προκαλούνται από STIP1, αλλά και να παρέχει προκαταρκτική απόδειξη για να υποστηρίξει το θεραπευτικό δυναμικό των αντισωμάτων αντι-STIP1 στον καρκίνο των ωοθηκών.

Όταν προστέθηκαν αντισώματα αντι-STIP1 (800 ηΜ) για τα καρκινικά κύτταρα έχουν προηγουμένως εκτεθεί σε 400 ηΜ rhSTIP1, τον πολλαπλασιασμό των κυττάρων (Α) και τη μετανάστευση (Β) ανεστάλησαν. Τα δεδομένα παρουσιάζονται ως μέσο ± τυπικά σφάλματα των μέσων τριών ανεξάρτητων πειραμάτων.

Η

Στα καρκινικά κύτταρα των ωοθηκών που έλαβαν θεραπεία με rhSTIP1, siRNA knockdown του STIP1, ή αντισώματα αντι-STIP1, χρησιμοποιήσαμε επίσης προσδιορισμούς ΜΤΤ προς αξιολογούν τη βιωσιμότητα των κυττάρων ως υποκατάστατο για τον αριθμό των κυττάρων, με την προϋπόθεση ότι ο αριθμός των κυττάρων διαμορφώνεται από τις δυνάμεις των δύο κυτταρικών πολλαπλασιασμό και την απόπτωση. Σε συμφωνία με τα αποτελέσματα στο Σχήμα 4 και Σχήμα 6Α, θεραπεία με rhSTIP1 σημαντικά (Ρ & lt? 0,01) αύξηση του αριθμού των ωοθηκών καρκινικών κυττάρων με βάση την ανάλυση ΜΤΤ (Σχήμα S3A), ενώ knockdown του STIP1 σημαντικά (Ρ & lt? 0.005) κατέστειλε ωοθηκών καρκινικά κύτταρα (Σχήμα S3b). Σε αντίθεση με την επίδραση εξουδετέρωσης αντι-STIP1 στην rhSTIP1-διεγερμένο πολλαπλασιασμό των κυττάρων (Σχήμα 6Α), απευθείας κατεργασία των ωοθηκών καρκινικά κύτταρα με διάφορους κλώνους αντι-STIP1 δεν άλλαξε τα αναγνώσεις ΜΤΤ (Σχήμα S3C).

Συζήτηση

Αυτή η μελέτη δείχνει για πρώτη φορά ότι STIP1 είναι ένα προγνωστικό βιοδείκτη σε ανθρώπινο καρκίνο των ωοθηκών. Σύμφωνα με τις ατομικές μοριακά χαρακτηριστικά τους, οι βιοδείκτες έχουν πρόσφατα ομαδοποιούνται στις ακόλουθες κατηγορίες: βιοδεικτών καρκινογένεσης, κυκλοφόρησε βιοδείκτες, βιοδείκτες απάντηση, και βιοδεικτών κινδύνου [11]. Με βάση την εφαρμογή τους στο χαρακτηρισμό της νόσου, βιοδείκτες μπορεί επίσης να χαρακτηριστεί ως προγνωστικό, έξυπνη, και δείκτες κινδύνου [19]. Σε προηγούμενες μελέτες μας [9], [10], έχουμε αποδείξει ότι STIP1 εκκρίνεται από καρκίνους των ωοθηκών στην κυκλοφορία του αίματος, υποδηλώνοντας ότι αυτό το μόριο μπορεί να χρησιμεύσει ως απελευθερώνεται βιοδείκτης του καρκίνου των ωοθηκών. Αξίζει να σημειωθεί ότι, το παρόν τα ευρήματά μας δείχνουν ότι η υψηλή έκφραση STIP1 σχετίζεται με κακή OS (Σχήμα 2? Πίνακας 2). Και χαμηλά ποσοστά PFS (Πίνακας 2) και έτσι μπορεί να αντιπροσωπεύουν ένα νέο προγνωστικό δείκτη

Ένας σημαντικός προγνωστικός παράγοντας στον καρκίνο των ωοθηκών είναι η ιστολογική βαθμολογία (Σχήμα 2Β)? Δυστυχώς, διαβάθμιση μπορεί να είναι υποκειμενική, ακόμη και μεταξύ έμπειροι παθολόγους και ορισμένοι όγκοι δεν ταιριάζουν τακτοποιημένα σε ένα συγκεκριμένο βαθμό [26]. Για παράδειγμα, μια σημαντική διακύμανση μεταξύ των παρατηρητών μεταξύ παθολόγοι στη βαθμολόγηση του καρκίνου του μαστού έχει αναφερθεί [27]. Για την αντιμετώπιση αυτού προειδοποίηση, η ταξινόμηση του καρκίνου του μαστού σε μοριακό υποτύπους με υπογραφές έκφραση διακριτικό γονίδιο έχει προταθεί ως μέσο για την κατανόηση της μοριακής βάσης της ιστολογικής βαθμού [28]. Σε αυτή τη μελέτη, δείξαμε ότι οι histoscores STIP1 μπορεί να είναι χρήσιμη στη συμπλήρωσή του ιστοπαθολογική ταξινόμηση του Ιατροδικαστή των καρκίνων των ωοθηκών με την παροχή αντικειμενικών, ποσοτικές εκτιμήσεις. Ειδικότερα, STIP1 histoscores μπορεί να αποδειχθεί χρήσιμη για την πρόβλεψη πρόγνωση σε ασθενείς με σαφή καρκινικών κυττάρων (τα οποία είναι συνήθως δεν βαθμολογείται) [3]. Οι αναλύσεις μας αποκάλυψε επίσης ότι, ακόμη και σε ασθενείς του ίδιου βαθμού όγκου, ένα υψηλότερο επίπεδο STIP1 συσχετίστηκε με φτωχότερη την κλινική έκβαση.

Τα επίπεδα ορού STIP1 δεν φαίνεται να διαφέρουν σημαντικά μεταξύ των ασθενών με 4 κλινικά στάδια των ωοθηκών καρκίνος [9], αλλά σε αυτόν τον όγκο μελέτη histoscores STIP1 ήταν σημαντικά υψηλότερα σε στάδια III-IV (n = 147) από ό, τι τα στάδια Ι-ΙΙ (n = 183) (Πίνακας 1). Η διαφορά αυτή μπορεί να οφείλεται απλώς και μόνο με το μικρό αριθμό υπόθεσης (n = 43) σε προηγούμενη μελέτη μας [9]. Τα ευρήματα ότι histoscores υψηλή STIP1 συσχετίστηκαν σε σημαντικό βαθμό με την υψηλή κλινικά στάδια (III-IV) και υψηλού βαθμού (3) (Πίνακας 1) αύξησε επίσης τη δυνατότητα ότι η υψηλή histoscores μπορεί να είναι συνάρτηση των βαθμών υψηλού όγκου ή /και υψηλή κλινικά στάδια, η οποία μένει να αποδειχθεί σε μελλοντικές μελέτες του μεγαλύτερου αριθμού υπόθεσης. Παρ ‘όλα αυτά, όγκου STIP1 histoscoring ασκεί σαφώς μια προγνωστική αξία εκτός από τα συνήθως χρησιμοποιούμενα, οι κλινικές παράμετροι (Σχήμα 3). Αυτά τα αποτελέσματα συλλογικά υποστηρίζουν τη χρησιμότητα του STIP1 histoscore ως προγνωστικός βιοδείκτη.

Ως φωσφοπρωτεΐνη, STIP1 υποβάλλεται σε φωσφορυλίωση της κινάσης cdc2, η οποία συνοδεύεται από την κυτταροπλασματική μετατόπιση του STIP1 [14]. Η έκφραση του STIP1 σε διάφορους τύπους καρκίνου [15], [29], [30], [31] δείχνει ότι το μόριο αυτό έχει μια αντι-αποπτωτική ρόλο και /ή προάγει την επιβίωση των καρκινικών κυττάρων. Η knockdown του STIP1 έχει αποδειχθεί ότι καταστέλλουν την διεισδυτικότητα των καρκινικών κυττάρων του παγκρέατος [31]. Έχουμε αναφέρει προηγουμένως ότι STIP1 εκκρίνεται από τα καρκινικά κύτταρα των ωοθηκών στο μικροπεριβάλλον του όγκου και η συστηματική κυκλοφορία [9]. Έχουμε περιγράφονται επίσης τους μοριακούς μηχανισμούς με τους οποίους εκκρίνεται STIP1 διεγείρει τον πολλαπλασιασμό των καρκινικών κυττάρων των ωοθηκών [10]. Τα αποτελέσματα της παρούσας μελέτης (σχήματα 4 και 5) όχι μόνο επιβεβαιώνουν τον ρόλο των STIP1 στην προώθηση ογκογένεση αλλά επίσης δείχνουν ότι το μόριο αυτό μπορεί να χρησιμεύσει ως προγνωστικό βιοδείκτη (Σχήματα 2 και 3, Πίνακας 2).

Οι αποτελεσματικός αποκλεισμός της rhSTIP1 διεγείρεται τον κυτταρικό πολλαπλασιασμό και μετανάστευση των ωοθηκών κυττάρων που προκαλείται από τα αντισώματα αντι-STIP1 (Σχήμα 6) δείχνει ότι εκκρινόμενη STIP1 από καρκινικούς ιστούς μπορεί να είναι ένας στόχος για την ανάπτυξη θεραπευτικών αντισωμάτων στον καρκίνο των ωοθηκών. STIP1 αντιπροσωπεύει ένα ελκυστικό υποψήφιο για θεραπεία του καρκίνου. Για παράδειγμα, μία ένωση που αποτρέπει Hsp90 από την αλληλεπίδραση με STIP1 έχει πρόσφατα σχεδιαστεί και έχει αποδειχθεί ότι μειώνουν την Hsp90 που εξαρτάται αναδίπλωσης μονοπάτι, τελικά ασκώντας κυτταροτοξικά αποτελέσματα επί κυττάρων καρκίνου του μαστού [32]. Επιπλέον, ένας αναστολέας Hsp90 Ο-τερματικό νοβοβιοκίνη προερχόμενο, KU135, έχει δειχθεί ότι αναστέλλουν τον πολλαπλασιασμό και επάγει την απόπτωση σε κύτταρα μελανώματος [33]. Τέλος, ένας

in vitro

μελέτη από Horibe et al. [34] έχει αναφερθεί ότι ένα πεπτίδιο αντι-TPR που αναστέλλει την αλληλεπίδραση της Hsp90 με τον τομέα TPR2A του STIP1 είναι ικανό να επάγει κυτταρικό θάνατο σε παγκρεατικά, νεφρικά, του πνεύμονα, του προστάτη, και κυτταρικές γραμμές γαστρικού καρκίνου.

Παρά τις σταδιακές βελτιώσεις της χειρουργική επέμβαση και χημειοθεραπεία, η πλειοψηφία των ασθενών με καρκίνο των ωοθηκών πεθαίνουν από την ασθένεια εντός πέντε ετών από τη διάγνωση [3]. Για κατάλληλων ασθενών, προσθέτοντας στοχευμένη θεραπεία με χημειοθεραπεία μπορεί να αυξήσει τόσο την πιθανότητα ότι ο όγκος θα ανταποκρίνονται καλά στη θεραπεία, καθώς και να αυξήσει τη διάρκεια που ο όγκος μπορεί να κατασταλεί? μαζί, αυτό μπορεί να οδηγήσει σε κάποια παράταση της ζωής. Αν επιβεβαιωθεί από άλλες μελέτες, τα δεδομένα μας δείχνουν ότι STIP1 μπορεί να χρησιμεύσει ως μια πολλά υποσχόμενη στόχος για τη θεραπεία του καρκίνου των ωοθηκών που βασίζονται σε αντισώματα.

Υποστήριξη Πληροφορίες

Εικόνα S1.