Αφηρημένο

Ο υποδοχέας του παράγοντα του ανθρώπινου επιδερμικού αυξητικού παράγοντα (EGFR) είναι ένα σημαντικό θεραπευτικός στόχος σε ασθενείς με μεταστατικό καρκίνο του παχέος εντέρου και αντισώματα αντι-ΕΟΡΚ cetuximab και panitumumab έχουν εγκριθεί για τη θεραπεία των ασθενών αυτών. Παρά αυτές τις προόδους, η διάρκεια της ανταπόκρισης σε ορισμένους ασθενείς μπορεί να περιορίζεται. Δεδομένου ότι, EGFR είναι ικανή να σχηματίζει ετεροδιμερή με τα άλλα μέλη της οικογένειας HER (ανθρώπινα επιδερμικά υποδοχέα), είναι σημαντικό να διερευνηθεί η συν-έκφραση και προγνωστική σημασία όλων των μελών της οικογένειας HER σε ασθενείς με καρκίνο του παχέος. Η έκφραση των μελών της οικογένειας HER προσδιορίστηκαν σε δείγματα όγκων από 86 ασθενείς με C κατά Dukes ‘και Δ (μεταστατικό) καρκίνο του παχέος εντέρου με χρήση ανοσοϊστοχημείας. Τα τμήματα βαθμολογήθηκαν από το ποσοστό των θετικών κυττάρων όγκου και την ένταση της χρώσης. ενώσεις τους με κλινικοπαθολογοανατομικές παραμέτρους, και τη συνολική επιβίωση και την ασθένεια επιβίωση χωρίς αξιολογήθηκαν χρησιμοποιώντας μονοπαραγοντική και πολυπαραγοντική ανάλυση. Συνολικά, 43%, 77%, 52% και 92% των περιπτώσεων ήταν EGFR, HER-2, HER-3 και HER-4 θετικών αντίστοιχα. Είναι ενδιαφέρον, 35%, 24%, 43%, και 18% των περιπτώσεων είχαν συν-έκφραση του EGFR /HER-2, EGFR /HER-3, EGFR /HER-4 και τα τέσσερα μέλη της οικογένειας HER αντίστοιχα. Από αυτά, μόνο η έκφραση του EGFR και συν-έκφραση του EGFR /HER-4 συνδέεται με φτωχότερη την ελεύθερη νόσου επιβίωση τόσο μονοπαραγοντική και πολυπαραγοντική ανάλυση. Συν-έκφραση όλων των μελών της οικογένειας HER σε καρκίνο του παχέος εντέρου υποστηρίζει την ανάγκη για περαιτέρω έρευνες επί προγνωστική αξία τους για την ανταπόκριση στη θεραπεία με αντι-EGFR mAbs και αν η υπο-πληθυσμός των ασθενών μπορεί να ωφεληθούν από τη θεραπεία με τη νέα γενιά τηγάνι -HER αναστολείς

Παράθεση:. Khelwatty Α.Ε., Essapen S, Bagwan Ι, Πράσινο M, Seddon AM, Modjtahedi Η (2014) Συν-έκφραση της οικογένειάς της Μέλη σε ασθενείς με Γ και Δ του καρκίνου παχέος εντέρου Dukes »και Επιπτώσεις τους στην πρόγνωση των ασθενών και την επιβίωση. PLoS ONE 9 (3): e91139. doi: 10.1371 /journal.pone.0091139

Επιμέλεια: Hiromu Suzuki, Σαπόρο Ιατρικό Πανεπιστήμιο, την Ιαπωνία

Ελήφθη: 11η Δεκεμβρίου, 2013? Δεκτές: 7 Φεβ του 2014? Δημοσιεύθηκε: 7, Μαρτίου 2014

Copyright: © 2014 Khelwatty et al. Αυτό είναι ένα άρθρο ανοικτής πρόσβασης διανέμεται υπό τους όρους της άδειας χρήσης Creative Commons Attribution, το οποίο επιτρέπει απεριόριστη χρήση, τη διανομή και την αναπαραγωγή σε οποιοδήποτε μέσο, ​​με την προϋπόθεση το αρχικό συγγραφέα και την πηγή πιστώνονται

Χρηματοδότηση:. Αυτό το έργο υποστηρίζεται από μια επιχορήγηση από το έντονο φιλανθρωπικό καρκίνο (UK). Οι χρηματοδότες δεν είχε κανένα ρόλο στο σχεδιασμό της μελέτης, τη συλλογή και ανάλυση των δεδομένων, η απόφαση για τη δημοσίευση, ή την προετοιμασία του χειρογράφου

Αντικρουόμενα συμφέροντα:.. Οι συγγραφείς έχουν δηλώσει ότι δεν υπάρχουν ανταγωνιστικά συμφέροντα

Εισαγωγή

καρκίνος του παχέος εντέρου παραμένει μία από τις κύριες αιτίες των θανάτων από καρκίνο σε όλο τον κόσμο. Το 2013, καρκίνο του παχέος εντέρου υπολογίζεται να είναι το τέταρτο πιο συχνά διαγιγνώσκονται με καρκίνο (142.820), αλλά η δεύτερη κύρια αιτία θανάτου από καρκίνο (50.830) μετά τον καρκίνο του πνεύμονα στις ΗΠΑ [1]. Επί του παρόντος, τα διάφορα φάρμακα που αναπτύχθηκαν για την στοχευμένη θεραπεία ανθρώπινων καρκίνων, ο αντι-υποδοχέα επιδερμικού αυξητικού παράγοντα (EGFR) μονοκλωνικά αντισώματα (mAbs), cetuximab και panitumumab, και το αντι-αγγειακού ενδοθηλιακού αυξητικού παράγοντα (VEGF) mAb bevacizumab υπήρξαν ενσωματώνονται σε παραδείγματα θεραπείας για την πλειοψηφία των ασθενών με μεταστατικό ορθοκολικό καρκίνο [2] – [5]. Ενώ η συμπερίληψη αυτών των παραγόντων έχει βελτιώσει την επιβίωση των ασθενών με μεταστατικό καρκίνο του παχέος εντέρου, η διάρκεια της απόκρισης μπορεί να είναι περιορισμένη. Επιπλέον, δεν υπήρξε καμία αξιόπιστη προβλεπτική δείκτης για την αντιμετώπιση αυτών των αντι-ΕΟΡΚ στοχευμένες θεραπείες [6] – [10]. Η ανάπτυξη και η αναγνώριση των εν λόγω δεικτών, όχι μόνο θα μπορούσε να βοηθήσει στην επιλογή του μια πιο συγκεκριμένη υπο-πληθυσμού ασθενών καρκίνου του παχέος εντέρου οι οποίοι είναι πιθανότερο να ωφεληθούν από αυτές τις θεραπείες, αλλά μπορούν επίσης να μειωθούν οι περιττές θεραπείες και έτσι το υψηλό κόστος για τον τομέα της υγείας σύστημα [11].

τις τελευταίες τέσσερις δεκαετίες, η παρεκκλίνουσα έκφραση των διαφορετικών μελών της οικογένειας HER και τους συνδέτες τους έχουν αναφερθεί σε μία ποικιλία ανθρώπινων καρκίνων. Σε ορισμένες μελέτες, αυτά έχουν συνδεθεί με ανθεκτικότητα σε συμβατικές μορφές θεραπείας και μια φτωχότερη πρόγνωση [6], [12], [13]. Ωστόσο, υπάρχει μεγάλη διακύμανση στην αναφερόμενη έκφραση των μελών της οικογένειας HER σε ασθενείς με ορθοκολικό καρκίνο [6], [14] – [16]. Εκτός από το σχηματισμό ομοδιμερών, τα μέλη της οικογένειας HER όπως ο EGFR είναι ικανό να ενεργοποιείται από το σχηματισμό ετεροδιμερών με άλλα μέλη της οικογένειας HER [17] – [19]

Ενώ ένας περιορισμένος αριθμός. μελέτες έχουν διερευνήσει την έκφραση και προγνωστική σημασία των επιμέρους μελών της οικογένειας HER σε ασθενείς με καρκίνο του παχέος εντέρου [20] – [23], ωστόσο, με τις γνώσεις μας, δεν έχουν υπάρξει πλήρης μελέτες σχετικά με την συν-έκφραση και προγνωστική σημασία της πλήρη μέλη της οικογένειάς της σε ασθενείς με καρκίνο του παχέος μέχρι σήμερα [6]. Ως εκ τούτου, στην παρούσα μελέτη ερευνήσαμε τα επίπεδα έκφρασης όλων των μελών της οικογένειας HER, ατομικά καθώς και συν-έκφραση τους σε δείγματα όγκων από 86 ασθενείς με Γ και Δ καρκίνο του παχέος εντέρου Dukes ‘. Ερευνήσαμε επίσης κάθε συσχέτιση μεταξύ της έκφρασης των μελών της οικογένειας της και τις κλινικοπαθολογικών παραμέτρων, επιβίωσης ελεύθερης νόσου και τη συνολική επιβίωση.

Υλικά και Μέθοδοι

Πληροφορίες ασθενούς

Ηθικά έγκριση λήφθηκε από την Επιτροπή Ερευνών και Ανάπτυξης του Royal Surrey County Hospital για την εξέταση των δειγμάτων όγκων από ασθενείς με καρκίνο του παχέος εντέρου για χρήση σε αυτήν την αναδρομική μελέτη. Δεδομένου ότι μόνο αρχειοθετημένα δείγματα όγκων που περιλαμβάνονται σε αυτή τη μελέτη, η επιτροπή δεοντολογίας παραιτήθηκε από την ανάγκη για συναίνεση και τον ασθενή εγγραφές /πληροφορίες αναλύθηκαν ανώνυμα. Ογδόντα έξι ασθενείς με C και D καρκίνου του παχέος εντέρου Dukes », οι οποίοι υποβλήθηκαν σε ριζική χειρουργική επέμβαση στο Royal Surrey County Hospital (Guildford, Ηνωμένο Βασίλειο) από τον Απρίλιο του 2002 έως τον Νοέμβριο του 2007, συμπεριλήφθηκαν σε αυτήν την αναδρομική μελέτη. Εκείνοι με καμία πληροφορία παρακολούθησης, mis-διάγνωση και ελλιπής ιστολογία αποκλείστηκαν. Περιπτώσεις περι- και μετα-operative θάνατος αποκλείστηκαν επίσης από τη μελέτη αυτή, όπως ήταν εκείνοι με το μπλοκ του όγκου σε μια κατάσταση πολύ φτωχοί για ανοσοϊστοχημική χρήση. Λεπτομερείς κλινικοπαθολογοανατομικές πληροφορίες, όπως η ηλικία του ασθενούς και το φύλο ήταν διαθέσιμο για κάθε ασθενή.

Η ανοσοϊστοχημεία

φορμόλη σταθερά ενσωματωμένες σε παραφίνη (FFPE) τμήματα των δειγμάτων του όγκου (3 μΜ) κόπηκαν σε σειριακές τομές και χρωματίστηκαν χρησιμοποιώντας την ακόλουθη πρωτογενή αντισώματα ποντικού αντι-EGFR (1:10, Novacastra, UK), ποντικού αντι-HER-2 (1:150, Insight βιοτεχνολογία, UK), ποντικού αντι-HER-3 (1:20, Novacastra , UK) και κουνελιού αντι-HER-4 (1:20, Fisher Scientific, UK). Μετά ανάκτηση αντιγόνου, τομές όγκων επωάστηκαν με πρωτεύοντα αντισώματα αντι EGFR, HER-3 και HER-4 για 60 λεπτά και HER-2 για 32 λεπτά. βελτιστοποίηση πρωτόκολλο διεξήχθη χρησιμοποιώντας καθιερωμένες θετικά σφαιρίδια κυτταρική σειρά καρκίνου HER, δηλαδή ο EGFR που υπερεκφράζουν ανθρώπινο ορθοκολικό καρκίνο κυτταρική γραμμή DiFi, η οποία χορηγήθηκε ευγενώς από το Δρ Ζ Fan (MD-Anderson Κέντρο Καρκίνου, Η.Π.Α.), το HER-2 που υπερεκφράζουν ανθρώπινο καρκίνωμα μαστού κυτταρική γραμμή SKBR3 (HER-2), και το HER-3 και 4-HER θετική ανθρώπινη κυτταρική γραμμή καρκινώματος μαστού MCF-7 όπως περιγράφηκε προηγουμένως [24]. Χρώση πραγματοποιήθηκε σε Venatana Benchmark XT Autostainer με το κιτ ultraView DAB (Roche, Ηνωμένο Βασίλειο). Τέλος, όλες οι πλάκες ενυδατωμένο και αντίθετα με αιματοξυλίνη, τοποθετείται και το κάλυμμα γλίστρησε.

Σύστημα Βαθμολόγησης

Στην τρέχουσα βιβλιογραφία, οι τιμές cut-off για να σημειώσει θετική ανοσοχρώση HER των τμημάτων του όγκου είναι μεταβλητή . Σε αυτή τη μελέτη, η ανοσοχρώση των τμημάτων του όγκου βαθμολογήθηκαν με βάση το ποσοστό των κυττάρων του όγκου που είχε ανοσοχρώση HER (δηλαδή & gt? 5%, & gt? 10%, και & gt? 50%) και η ένταση της ανοσοχρώσης (δηλαδή αρνητική 0, ασθενές θετικό 1+, μετρίως θετική 2+ και ισχυρά θετικά 3+) και αν η χρώση ήταν κυρίως παρούσες στη μεμβράνη, κυτταρόπλασμα ή στον πυρήνα των κυττάρων [15]. Του ανοσοχρώση HER, HER-4 είχαν τα υψηλότερα επίπεδα της χρώσης υποβάθρου και, ως εκ τούτου ανοσοχρώση πάνω από το επίπεδο υποβάθρου μόνο θεωρήθηκε [22]. Δύο ανεξάρτητοι παρατηρητές (συμπεριλαμβανομένου ενός ιστοπαθολόγου σύμβουλος), χωρίς προηγούμενη γνώση των κλινικοπαθολογοανατομικών παραμέτρων, που πραγματοποιήθηκε το βαθμολόγησης και κάθε διαφορά στο σκορ επιλύθηκε με ταυτόχρονη επανεκτίμηση της χρώσης από τα δύο παρατηρητές.

Στατιστική Ανάλυση

Η συσχέτιση μεταξύ των βαθμολογιών ανοσοϊστοχημεία και τον ασθενή κλινικοπαθολογοανατομικές δεδομένων αξιολογήθηκε χρησιμοποιώντας δοκιμασία Chi-Squared (Pearson Chi-Square) και αλιείς exact test. οικόπεδα επιβίωσης Kaplan-Meier χρησιμοποιήθηκε για να εκτελέσει μονοπαραγοντική ανάλυση και οι διαφορές μεταξύ των ομάδων αξιολογήθηκαν με την εκτέλεση log rank-test. Για την πολυπαραγοντική ανάλυση, το μοντέλο πολλαπλών παλινδρόμησης κατά Cox χρησιμοποιήθηκε και p ≤ 0,05 θεωρήθηκε στατιστικά σημαντική. Όλες οι στατιστικές αναλύσεις πραγματοποιήθηκαν με τη χρήση των στατιστικών PASW 21 (SPPS Inc.).

Αποτελέσματα

κλινικοπαθολογοανατομικές Χαρακτηριστικά

Οι Ασθενής κλινικοπαθολογοανατομικές χαρακτηριστικά συνοψίζονται στον Πίνακα 1. Η μέση ασθενή χρόνος παρακολούθησης ήταν 6 ετών. Κανένας από τους ασθενείς είχαν λάβει ακτινοθεραπεία ή χημειοθεραπεία πριν από τη χειρουργική επέμβαση. Πενήντα-δύο ασθενείς έλαβαν μετεγχειρητική επικουρική χημειοθεραπεία, η οποία ήταν κατά κύριο λόγο 5-φθοριοουρακίλη βάση με ορισμένους ασθενείς που λαμβάνουν οξαλιπλατίνη και ιρινοτεκάνη θεραπείες που βασίζονται. Μια φτωχότερες συνολική επιβίωση παρατηρήθηκε σε ασθενείς με Dukes ‘D σε σύγκριση με Dukes C (3.2 ± 0.6 έναντι 6.2 ± 0.4 χρόνια,

P = 0,005

), και εκείνες με περισσότερους από 3 θετικούς λεμφαδένες (4.3 ± 0.4 έναντι 6,7 ± 0,5

P = 0,008

). Καμία σημαντική συσχέτιση βρέθηκε μεταξύ έκβαση των ασθενών και των άλλων κλινικοπαθολογικών παραμέτρων (Πίνακας 1).

Η

Ανοσοϊστοχημική έκφραση της οικογένειάς της Μελών

Στο αποκοπή αξία των ≥5%, του όγκου δείγματα από 43%, 77%, 52% και 92% των περιπτώσεων ήταν EGFR, HER-2, HER-3 και HER-4 θετικών αντίστοιχα (Πίνακας 2). Σε αντίθεση με το EGFR, το οποίο είχε κατά κύριο λόγο μεμβρανώδη χρώση, η κυρίαρχη θέση του HER-2, HER-3 και HER-4 ανοσοχρώση ήταν κυτταροπλασματική (Πίνακας 2 & amp? Σχήμα 1). Σε αυτή τη μελέτη, ερευνήσαμε την συν-έκφραση όλων των μελών της οικογένειας HER σε ασθενείς με καρκίνο του παχέος εντέρου και τα αποτελέσματα παρουσιάζονται στον Πίνακα 3. Συν-έκφραση του EGFR με HER-2, HER-3, HER-4, και HER-2 /HER-4 ήταν παρόντα σε 35%, 24%, 43% και 76% των περιπτώσεων που εξετάστηκαν (Πίνακας 3). Είναι ενδιαφέρον ότι, το 18% των ασθενών σε αυτή τη μελέτη βρέθηκε να συν-εκφράζουν όλα τα τέσσερα μέλη της οικογένειας HER (Πίνακας 3 & amp? Σχήμα 2).

Ανοσοβαφή EGFR 3+, HER-2 3+, HER-3 2+, και HER-4 3+ σε τομές όγκων τομές παραφίνης φορμαλίνη βάφτηκαν ανοσοϊστοχημικώς, όπως περιγράφεται σύμφωνα με τις μεθόδους και τους ασθενείς τμήμα. Μεγέθυνση:. × 200

Η

Συν-έκφραση του EGFR, HER-2, HER-3, και HER-4 σε ένα σταθερό φορμαλίνη τομές όγκων ενσωματωμένα σε παραφίνη χρωματίστηκαν ανοσοϊστοχημικά, όπως περιγράφεται σύμφωνα με τις μεθόδους και τους ασθενείς τμήμα. Μεγέθυνση:. × 200

Η

Η

Το ποσοστό των θετικών παχέος εντέρου HER περιπτώσεων καρκίνου αξιολογήθηκε επίσης όταν ανοσοχρώση παρούσα σε περισσότερες than10% και 50% των κυττάρων του όγκου (Πίνακας 2). Χρησιμοποιώντας τις τιμές αποκοπής άνω του 10% και 50%, το ποσοστό των περιπτώσεων με EGFR θετικά όγκοι ήταν 30% και 4%, HER-2 θετικούς όγκους were12% και 8% και-3 HER θετικών όγκων ήταν 45% και 22 %, αντίστοιχα (Πίνακας 2). Ο αριθμός των HER-4 θετικών όγκων παρέμεινε η ίδια, ανεξάρτητα από τις τιμές cut-off του ποσοστού των θετικών κυττάρων όγκου, όπως όλοι οι ασθενείς είχαν HER-4 ανοσοχρώση σε περισσότερο από το 50% των κυττάρων του όγκου σε αυτή τη μελέτη (Πίνακας 2) .

η έκφραση και Συν-έκφραση της HER μέλη της οικογένειας συνδέεται με κλινικοπαθολογικών παραμέτρων

η συσχέτιση μεταξύ κλινικοπαθολογοανατομικών χαρακτηριστικά και την έκφραση των μελών της οικογένειας HER καθορίστηκε από το Chi-τετράγωνο τεστ. Όλες οι υπο-κατηγορίες (ήτοι ποσοστό θετικών κυττάρων, την ένταση και τη θέση του ανοσοχρώση), τα οποία βρέθηκαν να έχουν στατιστικά σημαντική συσχέτιση με κλινικοπαθολογοανατομικές παραμέτρους συνοψίζονται στον Πίνακα 4.

Η

Όταν ανοσοχρώση παρούσα σε μεγαλύτερη από 5% των κυττάρων του όγκου, μία σημαντική συσχέτιση βρέθηκε μεταξύ της έκφρασης του EGFR και την ηλικία (

Ρ = 0,022

), και θέση του όγκου (

Ρ = 0,022

), με σημαντικά αύξηση του αριθμού των ασθενών άνω των 70 ετών που έχουν EGFR θετικών όγκων στο αριστερό κόλον (Πίνακας 4). Επιπλέον, σημαντικά μεγαλύτερος αριθμός όγκων C κατά Dukes βρέθηκαν να εκφράζουν HER-4 (

Ρ = 0,011

) (Πίνακας 4). Όπως έκφραση EGFR, συν-έκφραση του EGFR /HER-4 επίσης σημαντική συσχέτιση με ασθενείς ηλικίας άνω των 70 ετών (

Ρ = 0,031

) και παρουσιάζουν όγκους στο αριστερό κόλον (

Ρ = 0,039

) σε αυτή τη μελέτη. Επιπλέον, σημαντικά υψηλότερο αριθμό όγκων στο αριστερό κόλον βρέθηκε να συν-εκφράζουν EGFR /HER-2 /HER-4 (

Ρ = 0,036

) (Πίνακας 4).

στο διακόπτει τιμή άνω του 10%, η έκφραση του HER-2 συνδέθηκε με συμμετοχή άνω των 3 θετικούς λεμφαδένες (

Ρ = 0,047

) (Πίνακας 4). Επιπλέον, σημαντικά υψηλότερο αριθμό των όγκων που εκφράζουν HER-3 (

Ρ = 0.037

), ή συν-εκφράζουν EGFR /HER-3 (

Ρ = 0.035

), ή HER-3 /HER-4 (

Ρ = 0,026

) βρέθηκαν σε όγκους & lt? στάδιο pT4 σε αυτή τη μελέτη (Πίνακας 4). Όταν αναλύθηκαν με βάση την ένταση της χρώσης της, μια σημαντική συσχέτιση βρέθηκε μεταξύ HER-4 ανοσοχρώση ένταση 1+ και 2+ και αύξηση του αριθμού των όγκων G3 (Πίνακας 4).

ελεύθερη νόσου επιβίωση είναι σημαντική συσχέτιση με την έκφραση και συν-έκφραση της οικογένειάς της μελών

Η συσχέτιση μεταξύ της έκφρασης του ατόμου, δύο, τρία ή και τα τέσσερα μέλη της οικογένειας και ελεύθερη νόσου επιβίωση HER διερευνήθηκε χρησιμοποιώντας Kaplan-Meier καμπύλες και log rank-test. Ελεύθερη νόσου επιβίωση βρέθηκε να είναι σημαντικά χαμηλότερο σε ασθενείς με έκφραση EGFR σε αποκοπεί τιμές και των δύο άνω του 5% (

P = 0,019

) και 50% (

P = 0,005

), μεμβρανώδη έκφραση του EGFR (Ρ = 0,004) και EGFR ανοσοχρώση ένταση του 1+ (

Ρ = 0,041

) (Σχήμα 3 &? Πίνακας 5). Επιπλέον, υπήρξε μια σημαντική συσχέτιση μεταξύ της συν-έκφραση του EGFR και HER-4 στο άνω του 5% ή πάνω από το 10% των κυττάρων του όγκου και φτωχότερες ελεύθερη νόσου επιβίωση (

Ρ = 0,019

) (Πίνακας 5 ). Η συν-έκφραση της HER-2 /HER-3 βρέθηκε επίσης να σχετίζεται σημαντικά με φτωχότερη επιβίωση ελεύθερη νόσου (

P = 0,031

) (Πίνακας 5).

Kaplan-Meier καμπύλες επιβίωσης που δείχνει την επίπτωση στην ελεύθερη νόσου επιβίωση των ασθενών με έκφραση EGFR (Α), μεμβρανώδη έκφραση EGFR (Β), EGFR 1+ ανοσοχρώση (C) και EGFR /HER-4 συν-έκφραση (D). Μια τιμή δοκιμασία log-rank του

p ≤ 0,05

θεωρήθηκε στατιστικά σημαντική.

Η

Τέλος, στην πολυπαραγοντική ανάλυση, η έκφραση του EGFR σε αποκοπεί τιμές τόσο above5 % (

Ρ = 0,027

) και 50% (

Ρ = 0,015

), η μεμβρανώδης έκφραση του EGFR (

Ρ = 0,007

) και EGFR 1+ ανοσοχρώση (

P = 0,048

) βρέθηκαν να παραμείνουν ανεξάρτητοι προγνωστικοί παράγοντες για την κακή ελεύθερη νόσου επιβίωση. Κοιτάζοντας το συν-έκφραση των υποδοχέων, μόνο EGFR /HER-4 ανοσοχρώση άνω των 5 κύτταρα% του όγκου παρέμεινε ως ανεξάρτητος προγνωστικός παράγοντας για την κακή ελεύθερη νόσου επιβίωση σε αυτή τη μελέτη (Πίνακας 5). Καμία σημαντική συσχέτιση μεταξύ της έκφρασης της και τη συνολική επιβίωση σε αυτή τη μελέτη.

Συζήτηση

Η ανώμαλη έκφραση των μελών της οικογένειας της και, ειδικότερα, EGFR έχει αναφερθεί σε ένα ευρύ φάσμα καρκίνους του ανθρώπου και έχει συσχετισθεί με μετάσταση και φτωχή πρόγνωση [6], [25], [26]. Ως αποτέλεσμα, υπήρξε σημαντική ανάπτυξη μοριακών θεραπειών που στοχεύουν EGFR και η επακόλουθη έγκριση των αντι-EGFR mAbs, όπως cetuximab και panitumumab, για τη θεραπεία ασθενών με μεταστατικό καρκίνο του παχέος εντέρου [2], [27]. Ωστόσο, παρά τις εκτεταμένες μελέτες, δεν υπάρχουν σήμερα αξιόπιστα δείκτες για την πρόβλεψη της απόκρισης σε θεραπεία με αυτούς τους αναστολείς EGFR [6], [28]. Σε αρκετές μελέτες,

KRAS

μεταλλάξεις σε ασθενείς με καρκίνο του παχέος εντέρου συνδέονται με την αντίσταση στη θεραπεία με αντι-ΕΟΡΚ αντισώματα και είναι η μόνη βιοδείκτη για την πρόβλεψη έκβαση των ασθενών κατά τη θεραπεία με στοχευμένες αντι-HER θεραπειών σε καρκίνο του παχέος εντέρου [ ,,,0],29]. Ωστόσο, παρά αυτές τις εξελίξεις, είναι σαφές ότι δεν είναι όλοι οι ασθενείς με ορθοκολικό καρκίνο με άγριου τύπου KRAS θα κέρδιζε όφελος από αντι-ΕΟΡΚ mAbs και αντικειμενικές αποκρίσεις έχουν επίσης αναφερθεί σε ασθενείς με KRAS μεταλλαγμένο όγκους [30]. Ένας λόγος για αυτό θα μπορούσε να είναι ότι KRAS δεν έχει άμεση αλληλεπίδραση με τη δέσμευση του αντισώματος στη θέση του αντιγόνου και ως εκ τούτου είναι φρόνιμο να διερευνηθεί η έκφραση των άλλων μελών της οικογένειας HER, το οποίο έχει αποδειχθεί ότι ενεργοποιούν τα κατάντη οδούς, μέσω ετεροδιμερισμού και εγκάρσια -Συζητήστε, και οδηγούν την ογκογένεση του καρκίνου του παχέος εντέρου σε αυτούς τους ασθενείς [17] – [19]

Αρκετές άλλες μελέτες έχουν διερευνήσει την έκφραση των επιμέρους μελών της οικογένειας HER ως προγνωστικός δείκτης, ακόμη σαφής. οι ενώσεις έχουν βρεθεί μεταξύ της έκφρασης των πρωτεϊνών HER και την πρόγνωση σε ασθενείς με καρκίνο του παχέος [31] – [37]. Η αναφερόμενη έκφραση του EGFR κυμαίνεται από 8 έως 100%, HER-2 από 1% έως 89%, HER-3 από 16 έως 89%, και HER-4 από 11 έως 81% σε ασθενείς με ορθοκολικό καρκίνο [6], [14 ] – [16], [20] – [22], [38]. Η μεγάλη διακύμανση στην αναφερόμενη έκφραση των πρωτεϊνών της οικογένειας HER με ανοσοϊστοχημεία σε καρκίνο του παχέος εντέρου μπορεί να συνέβαλαν τα αντικρουόμενα στοιχεία σχετικά με προγνωστική σημασία τους σε καρκίνο του παχέος εντέρου [6]. Πράγματι, παράγοντες όπως η χρήση διαφορετικών αντισωμάτων, οι διαφορές στις τεχνικές ανάκτησης αντιγόνου, συστήματα βαθμολόγησης, διαφορετικούς πληθυσμούς ασθενών, μεγέθη δείγματος [π.χ. μικροσυστοιχίες ιστού (ΤΜΑ)], και διαφορετικούς αριθμούς δείγμα θα μπορούσε να συμβάλει στην ευρεία διακύμανση στην αναφερόμενη έκφραση των μελών της οικογένειας HER στη βιβλιογραφία [6], [28].

Στην παρούσα μελέτη, διερευνήθηκε η έκφραση όλων των μελών της οικογένειας HER σε 86 ασθενείς με Γ και Δ καρκίνο του παχέος εντέρου Dukes ‘. Από ασυνέπειες στο σύστημα βαθμολόγησης, όπως η χρήση διαφορετικών cut off τιμές για ανοσοχρώση της είναι ένας σημαντικός παράγοντας που συμβάλλει για την ευρεία διακύμανση ανέφεραν έκφραση τους στην βιβλιογραφία, σε αυτή την ανοσοχρώση μελέτη βαθμολογήθηκαν και αξιολογήθηκαν χρησιμοποιώντας τρεις διαφορετικές cut off τιμές του & gt? 5%, & gt? 10%, και & gt? 50% (Πίνακας 2). Από τις 86 περιπτώσεις που εξετάστηκαν, βρήκαμε 43%, 77%, 52% και 92% των περιπτώσεων να έχουν EGFR, HER-2, HER-3, και HER-4 ανοσοχρώση παρούσα σε & gt? 5% των κυττάρων του όγκου, αντιστοίχως ( Φιγούρα 1). Εδώ, ενώ εμείς δεν βρήκε καμία συσχέτιση μεταξύ της έκφρασης των μελών της οικογένειας της και τη συνολική επιβίωση, αυτό είναι σε συμφωνία με άλλες μελέτες στη βιβλιογραφία [6]. Σε αντίθεση με τη συνολική επιβίωση, σε αυτή τη μελέτη η έκφραση του EGFR και συν-έκφραση του EGFR /HER-4 συσχετίστηκαν με ελεύθερη νόσου επιβίωση τόσο μονοπαραγοντική και πολυπαραγοντική ανάλυση (Σχήμα 3 & amp? Πίνακας 5). Η έκφραση του EGFR έχει σημαντική συσχέτιση με φτωχή ελεύθερη νόσου επιβίωση και την υποτροπή της νόσου σε δύο άλλες μελέτες. Σε μια μελέτη, Γαλικία et al. [34] ερεύνησε την έκφραση του EGFR σε δείγματα όγκων από 154 ασθενείς με καρκίνο του παχέος εντέρου Α-Δ Dukes »και βρήκε μεμβρανώδη έκφραση του EGFR να σχετίζεται σημαντικά με την κακή ελεύθερη νόσου επιβίωση, τόσο στην μονοπαραγοντική και πολυπαραγοντική ανάλυση. Σε μια άλλη μελέτη στην οποία συμμετείχαν 102 ασθενείς με προχωρημένο καρκίνο του παχέος εντέρου, το 75,5% των περιπτώσεων βρέθηκαν να εκφράζουν EGFR, η οποία συσχετίστηκε με υποτροπή της νόσου [39]. Σε αντίθεση, Leung et al. [23] στη μελέτη τους 127 ασθενείς με καρκίνο του παχέος εντέρου χρησιμοποιώντας τμήματα TMA, δεν βρήκε καμία σημαντική συσχέτιση μεταξύ της έκφρασης του EGFR, και την έκβαση των ασθενών, αλλά βρήκε-HER 3 έκφρασης αποτελεί σημαντικό προγνωστικό παράγοντα για την έκβαση της επιβίωσης. Όπως εξηγήθηκε παραπάνω, οι διαφορές, όπως η χρήση τμημάτων TMA αντί για πλήρες μπλοκ ιστού, την ετερογενή φύση των όγκων, και η χρήση διαφορετικών cut off τιμές θα μπορούσαν να είναι ορισμένοι από τους παράγοντες που συμβάλλουν για τα συγκρουόμενα δεδομένα σχετικά με την έκφραση και την προγνωστική σημασία του πρωτεΐνες της σε καρκίνο του παχέος εντέρου. Επιπλέον, όπως μελετήθηκε η προγνωστική σημασία των μελών της οικογένειας HER μόνο σε 86 ασθενείς σε αυτή τη μελέτη, αυτό θα απαιτήσει περαιτέρω επικύρωση σε μεγαλύτερη ομάδα ασθενών με καρκίνο του παχέος εντέρου.

Αρκετές μελέτες δείχνουν ότι η ετεροδιμερισμού της οικογένειάς της μέλη διαδραματίζει έναν κρίσιμο ρόλο στην ογκογένεση, και ειδικότερα μπορούν επίσης να παίξουν σημαντικό ρόλο στην ανάπτυξη της αντοχής στη θεραπεία σε ασθενείς με καρκίνο του παχέος εντέρου [17] – [19]. Ωστόσο, μέχρι σήμερα μόνο 4 μελέτες έχουν καθορίσει την έκφραση όλων των μεμονωμένων μελών της οικογένειας HER, αλλά τα επίπεδα συν-έκφραση όλων των μελών της οικογένειας HER δεν έχει προηγουμένως αναφερθεί σε καρκίνο του παχέος εντέρου [20] – [23]. Για τις γνώσεις μας, αυτή είναι η πρώτη μελέτη που αναφέρει τόσο την ατομική έκφραση και συν-έκφρασης όλων των μελών της οικογένειας HER σε δείγματα όγκων από ασθενείς με C και D καρκίνου του παχέος εντέρου Dukes ». Είναι ενδιαφέρον ότι, λαμβάνοντας υπόψη τις τιμές cut-off του 5% και 10% θετικών καρκινικών κυττάρων, βρήκαμε την συν-έκφραση του EGFR /HER-4 να σχετίζεται σημαντικά με την ελεύθερη νόσου επιβίωση σε ασθενείς με C κατά Dukes ‘και Δ του καρκίνου του παχέος εντέρου σε Η μελέτη αυτή (Πίνακας 5). Ενώ μερικές μελέτες αναφέρουν τις ενώσεις μεταξύ των συν-έκφραση της HER-2 /HER-4 ή HER-3 /HER-4 και αργά όγκου στάδια [21], [22], με τις γνώσεις μας, η σημαντική συν-έκφραση του EGFR /HER-4 με φτωχότερες ελεύθερη νόσου επιβίωση σε ασθενείς με καρκίνο του παχέος εντέρου δεν έχει προηγουμένως αναφερθεί. Τα αποτελέσματά μας δείχνουν ότι ο σχηματισμός ετεροδιμερούς του EGFR και HER-4 μπορεί να διαδραματίσει σημαντικό ρόλο στην ογκογένεση του καρκίνου του παχέος εντέρου και να συμβάλλουν στην ταχύτερη υποτροπή της νόσου στους ασθενείς αυτούς. Είναι ενδιαφέρον, βρήκαμε την συν-έκφραση και των τεσσάρων μελών της οικογένειας HER σε 18% των περιπτώσεων που εξετάστηκαν και 35%, 24% και 43% των περιπτώσεων είχαν συν-έκφραση του EGFR με HER-2, HER-3 και HER-4, αντίστοιχα. Κατά συνέπεια, είναι σημαντικό να διερευνηθεί κατά πόσο η συν-έκφραση των άλλων μελών της οικογένειας της στο EGFR θετικά καρκίνους μπορεί να συνεισφέρει στην αντίσταση, ή μια φτωχή ανταπόκριση στη θεραπεία με την cetuximab αντι-ΕΟΡΚ mAbs και panitumumab σε ασθενείς με καρκίνο του παχέος εντέρου [ ,,,0],6].

Εν κατακλείδι, η συν-έκφραση όλων των μελών της οικογένειας της σε ένα σημαντικό ποσοστό των ασθενών με ασθενείς μεταστατικό καρκίνο του παχέος εντέρου που αναφέρονται εδώ, μαζί με τη σημασία της ετεροδιμερισμού μεταξύ των μελών της οικογένειας της στην ενεργοποίηση μονοπάτια σηματοδότησης HER, υποστηρίζει την ανάγκη για περαιτέρω μελέτες σχετικά με συν-έκφραση τους, προγνωστική σημασία και προγνωστική αξία για την ανταπόκριση στη θεραπεία με αναστολείς της, σε ένα μεγαλύτερο πληθυσμό των ασθενών με καρκίνο του παχέος. Ειδικότερα, οι μελέτες αυτές θα πρέπει να διαλευκάνουν αν αυτή η υπο-πληθυσμό ασθενείς μπορεί να ωφεληθούν από τη θεραπεία με τη νέα γενιά της παν-HER αναστολείς [40], [41].