Αφηρημένο

Εισαγωγή

Παρά το γεγονός ότι

cetuximab και panitumumab δείχνουν αυξημένο

αποτελεσματικότητα για τους ασθενείς με KRAS-NRAS-BRAF και PI3KCA άγριου τύπου μεταστατικό καρκίνο του παχέος εντέρου, την πρωτογενή αντοχή εμφανίζεται σε σχετικό υποσύνολο μοριακά εμπλουτισμένων πληθυσμών.

ασθενείς και Μέθοδοι

Εκτιμήσαμε την έκβαση των 68 ασθενών με προχωρημένο καρκίνο του παχέος εντέρου και RAS, BRAF και PI3KCA κατάστασης ανάλογα με την κατάσταση του γονιδίου ALK (disomic εναντίον κέρδος ALK αριθμού αντιγράφων του γονιδίου – που ορίζεται ως μέσος όρος των 3 έως 5 σήματα σύντηξης σε ≥10% των κυττάρων). Όλες οι διαδοχικοί ασθενείς έλαβαν cetuximab και ιρινοτεκάνη ή panitumumab και μόνο για chemorefractory νόσο.

Αποτελέσματα

Δεν μετατοπίσεις ALK ή ενισχύσεις εντοπίστηκαν. ALK κέρδος αριθμού αντιγράφων γονιδίου βρέθηκε σε 25 (37%) των όγκων. Το ποσοστό ανταπόκρισης ήταν σημαντικά υψηλότερη σε ασθενείς με disomic ALK σε σύγκριση με εκείνους με αύξηση του αριθμού αντιγράφων γονιδίου (70% έναντι 32%? p = 0,0048). Ομοίως, η επιβίωση χωρίς εξέλιξη ήταν σημαντικά διαφορετική κατά τη σύγκριση των δύο ομάδων (6,7 έναντι 5,3 μηνών? P = 0,045). Μια τάση που παρατηρήθηκε επίσης για τη συνολική επιβίωση (18,5 έναντι 15,6 μήνες? P = 0.885).

Συμπέρασμα

Αύξηση του αριθμού αντιγράφων του γονιδίου ALK μπορεί να αντιπροσωπεύει ένα αρνητικό προγνωστικό παράγοντα για την mCRC και μπορεί να έχουν ένα ρόλο στην αντίσταση σε αντι-EGFR θεραπείας

Παράθεση:. Pietrantonio F, Maggi C, Di Bartolomeo Μ, Facciorusso MG, Perrone F, Testi A, et al. (2014) Κέρδος του

ALK

Gene Αριθμός Copy μπορεί να προβλέψει την έλλειψη κέρδους από αντι-EGFR θεραπεία σε ασθενείς με προχωρημένο καρκίνο του παχέος εντέρου και

RAS-RAF-PI3KCA

Άγρια-Type Κατάσταση. PLoS ONE 9 (4): e92147. doi: 10.1371 /journal.pone.0092147

Επιμέλεια: Γιάννης Souglakos, Πανεπιστημιακό Γενικό Νοσοκομείο Ηρακλείου και Εργαστήριο όγκων Κυτταρικής Βιολογίας, Τμήμα Ιατρικής, Πανεπιστήμιο Κρήτης, Ελλάδα |

Ελήφθη: Δεκέμβριος 23, 2013? Αποδεκτές: 18 Φεβρουαρίου 2014? Δημοσιεύθηκε: 1 Απρ, 2014

Copyright: © 2014 Pietrantonio et al. Αυτό είναι ένα άρθρο ανοικτής πρόσβασης διανέμεται υπό τους όρους της άδειας χρήσης Creative Commons Attribution, το οποίο επιτρέπει απεριόριστη χρήση, τη διανομή και την αναπαραγωγή σε οποιοδήποτε μέσο, ​​με την προϋπόθεση το αρχικό συγγραφέα και την πηγή πιστώνονται

Χρηματοδότηση:. Αυτό το έργο υποστηρίχθηκε εν μέρει από κεφάλαια που λαμβάνονται μέσω του ιταλικού δικαίου νόμος 12 νοεμβρίου του 2011 n. 183 που επιτρέπει στους φορολογουμένους να διαθέσει 0,5 τοις εκατό μερίδιο του φόρου εισοδήματος συμβολή τους σε ένα ερευνητικό ίδρυμα της επιλογής τους. Οι χρηματοδότες δεν είχε κανένα ρόλο στο σχεδιασμό της μελέτης, τη συλλογή και ανάλυση των δεδομένων, η απόφαση για τη δημοσίευση, ή την προετοιμασία του χειρογράφου

Αντικρουόμενα συμφέροντα:.. Οι συγγραφείς έχουν δηλώσει ότι δεν υπάρχουν ανταγωνιστικά συμφέροντα

Εισαγωγή

η θεραπεία με αντι-υποδοχέα επιδερμικού αυξητικού παράγοντα (EGFR) μονοκλωνικά αντισώματα – cetuximab και panitumumab – βελτίωσε την έκβαση των ασθενών με προχωρημένο KRAS άγριου τύπου καρκίνου του παχέος εντέρου (CRC) σε συνδυασμό με πρώτης ή δεύτερης γραμμής φθοριοπυριμιδίνη με έδρα τη χημειοθεραπεία ή στη ρύθμιση των chemorefractory νόσου [1] – [6].

Πολλά βιοδείκτες αντίσταση πέρα ​​από

KRAS

μελετήθηκαν προκειμένου να βελτιωθεί η επιλογή των ασθενών. Είχε προηγουμένως δείξει ότι το ποσοστό ανταπόκρισης στο cetuximab φτάσει στην τιμή των 41,2% για τους ασθενείς με

KRAS

,

BRAF

,

NRAS

και εξόνιο 20

PI3KCA

κατάσταση «τετραπλή άγριου τύπου» [7]. Ωστόσο, ακόμη και σε μοριακά εμπλουτισμένων πληθυσμών, υπάρχει ακόμα ένα σχετικό υποσύνολο των μη [8] ανταποκρίθηκαν. Η ταυτοποίηση των πρόσθετων βιοδεικτών αντίσταση είναι μία ανικανοποίητη κλινική ανάγκη για αντι-ΕΟΡΚ εξατομίκευση της θεραπείας σε αυτή τη ρύθμιση.

κινάσης αναπλαστικού λεμφώματος (ALK) είναι ένα μέλος της οικογένειας υποδοχέα ινσουλίνης με δραστικότητα κινάσης τυροσίνης, η οποία μπορεί να ενεργοποιήσει σήμα μεταγωγή από δέσμευσης συνδέτη, γονιδιακή ενίσχυση ή μετάλλαξη [9]. Η ανακάλυψη ενός νέου δυνητικά σχετική ογκογόνο εκδήλωση στον καρκίνο του πνεύμονα, το

EML4-ALK

μετατόπιση, και η ανάπτυξη των αναστολέων ALK με ελπιδοφόρα αποτελέσματα σε προκλινικά μοντέλα και τυχαιοποιημένες κλινικές δοκιμές προβλέπει το σκεπτικό για την ολοκληρωμένη χαρακτηρισμό

ALK

ανωμαλίες σε ασθενείς με άλλους συμπαγείς όγκους, όπως CRC [10], [11]. Μεταβολές του ALK μπορεί να επηρεάσει τη βιολογική δράση του EGFR μέσω της πολλαπλής-talk μονοπατιών σηματοδότησης. Στην πραγματικότητα, ογκογόνο

ALK

μπορεί να ενεργοποιήσει ανεξάρτητα κατάντη οδούς συμπεριλαμβανομένου του

PI3KCA

/Akt και

RAS-RAF-ΜΑΡΚ

, ακόμη και στην παρουσία απόφραξης EGFR [12].

Ο σκοπός της ανάλυσης ήταν να αξιολογηθεί ο ρόλος του κέρδους του

ALK

αριθμό αντιγράφων του γονιδίου όσον αφορά το ποσοστό ανταπόκρισης, επιβίωση χωρίς εξέλιξη (PFS) και τη συνολική επιβίωση (OS) στο ασθενείς που έλαβαν θεραπεία με ιρινοτεκάνη και cetuximab ή panitumumab ως μονοθεραπεία για προχωρημένους, chemorefractory CRC και άγριου τύπου

RAS-RAF-PI3KCA

κατάσταση.

ασθενείς και Μέθοδοι

πληθυσμό των ασθενών

Εξήντα οκτώ συνεχόμενους ασθενείς με ιστολογικά αποδεδειγμένη μεταστατικό CRC με

KRAS

,

NRAS

,

BRAF

,

PI3KCA

καθεστώς άγριου τύπου προοπτικά συλλέγονται 2007-2013 στο «Fondazione IRCCS Istituto Nazionale dei Tumori» και κρίθηκαν επιλέξιμες για την παρούσα μελέτη. Οι ασθενείς έλαβαν ένα συνδυασμό cetuximab και ιρινοτεκάνη ή panitumumab μετά από κλινικές ενδείξεις ανθεκτικότητα στη χημειοθεραπεία, συμπεριλαμβανομένων φθοριοπυριμιδινών, οξαλιπλατίνη και ιρινοτεκάνη. Το Διοικητικό Συμβούλιο Institutional Review της «Fondazione IRCCS Istituto Nazionale dei Tumori» εγκεκριμένη μελέτη αυτή και όλα υπόκεινται υπογράψει έγγραφη συγκατάθεση.

Μεταλλακτική ανάλυση των RAS-RAF-PI3KCA

φορμόλη-σταθερής εμπεδωθεί με παραφίνη ιστούς όγκων εξετάστηκαν για την ποιότητα και όγκο περιεχομένου. Ένας ιστός που περιέχει τουλάχιστον 80% των νεοπλασματικών κυττάρων επιλέχθηκε για κάθε περίπτωση. Macrodissection 7 μm μεθυλενίου μπλε-χρωματισμένες τομές επέτρεψε το διαχωρισμό των νεοπλασματικών και φυσιολογικών κυττάρων. Γονιδιωματικό ϋΝΑ εξήχθη χρησιμοποιώντας το κιτ Qiamp FFPE DNA (Qiagen, Chatsworth, CA, USA) ακολουθώντας τις οδηγίες του κατασκευαστή. Μεταλλακτική ανάλυση των

KRAS

εξόνια 2, 3 και 4 πραγματοποιήθηκε όπως περιγράφηκε προηγουμένως [13], [14].

KRAS

κατάσταση εξόνιο 2 επιβεβαιώθηκε περαιτέρω μέσω μιας αλυσιδωτής αντίδρασης συγκεκριμένο μεταλλαγμένο εμπλουτίζεται πολυμεράσης (PCR), που είναι γνωστό ότι είναι μια πιο ευαίσθητη προσέγγιση [15].

BRAF

(εξόνιο 15),

NRAS

(εξόνια 2 και 3) και

PI3KCA

(εξόνια 9 και 20) μεταλλακτική ανάλυση διεξήχθη με την βοήθεια PCR χρησιμοποιώντας ειδικούς εκκινητές περιγράφηκε προηγουμένως [13], [15]. Τα προϊόντα της PCR υποβλήθηκαν σε άμεσο καθορισμό αλληλουχίας χρησιμοποιώντας ένα ΑΒΙ Prism 3500 DX Genetic Analyzer (Applied Biosystems, Foster City, CA, USA) και στη συνέχεια αξιολογούνται με τη βοήθεια του λογισμικού ChromasPro.

ALK γονίδιο κατάσταση αριθμό αντιγράφων

Τρεις έως τέσσερις μm πάχους τομές κόπηκαν από μπλοκ παραφίνης και τοποθετήθηκαν σε θετικά φορτισμένες πλάκες και ξηραίνονται τουλάχιστον 1 ώρα στους 56 ° C. Τομές ιστού αποπαραφινοποιήθηκαν σε ξυλόλιο (3 φορές το καθένα από 10 λεπτά), επανυδατώθηκαν με αιθανόλη-νερού σειρά (100% -85% -70%). Στη συνέχεια, οι τομές προκατεργάστηκαν σε ΤΕ (Tris 5 mM EDTA-1 mM, ρΗ = 7) στους 96 ° για 15 λεπτά, ξεπλύθηκαν σε απεσταγμένο νερό και ενζυματικώς πέψη με πεψίνη 0,4% σε 0,01 Ν HCl για 6 έως 10 λεπτά στους 37 ° C, με παρακολούθηση της προόδου της ενζυματικής πέψης χρησιμοποιώντας ένα μικροσκόπιο αντίθεσης φάσης.

τα πλακίδια στη συνέχεια πλύθηκαν σε απεσταγμένο νερό για δύο φορές κάθε 5 λεπτά, αφυδατώθηκαν σε 96% αιθανόλη για 3 λεπτά, ξηραίνεται στον αέρα. Μετά την εφαρμογή του ανιχνευτή (ALK FISH DNA Probe, Split σήμα Dako) επί της περιοχής ενδιαφέροντος τα δείγματα codenatured στους 85 ° C για 1 λεπτό και στη συνέχεια υβριδοποιήθηκε στους 37 ° C όλη τη νύκτα χρησιμοποιώντας hybridizer (Dako). Την επόμενη ημέρα, καλυπτρίδες αφαιρέθηκαν και τα πλακίδια βυθίζονται σε διάλυμα μετά την υβριδοποίηση 2XSSC /0.3% ΝΡ40 (73 ° C για 2 λεπτά), στη συνέχεια σε 2XSSC /0.1% ΝΡ40 (1 λεπτό σε θερμοκρασία δωματίου) και τέλος brifly ξεπλύθηκαν σε απεσταγμένο νερό. Οι πλάκες στη συνέχεια αφήνονται να στεγνώσουν στο σκοτάδι σε θερμοκρασία δωματίου, και οι πυρήνες βάφτηκαν αντίθετα σε διάλυμα Vectashild αντιξεθωριάσματος με ϋΑΡΙ (4,6-διαμινο-2-phenyindole-2-υδροχλωρική) (Vector Laboratories, Inc. Burlingame CA).

ένα ελάχιστο των 60 μη-επικαλυπτόμενες πυρήνες των χωροκατακτητικών καρκινικών κυττάρων βαθμολογήθηκαν χρησιμοποιώντας μικροσκόπιο της Olympus επιφθορισμού εξοπλισμένο με 100 × πετρελαίου αντικειμενικό φακό και 4,6-διαμινο-2-φαινυλινδόλη /Spectrum Πράσινο /Πορτοκαλί μονόκλινα και τρίκλινα ζωνοπερατό φίλτρα. Ο ανιχνευτής δύο DNA μέσα ALK FISH DNA Probe, Split σήματος, είναι σχεδιασμένες για να υβριδοποιούνται ανάντη και κατάντη της περιοχής breakpoint cluster. Συν-εντοπισμό των ανιχνευτών ως αποτέλεσμα ένα κίτρινο σήμα, ενώ τα γεγονότα μετατόπισης στην περιοχή breakpoint cluster θα χωρίσει ένα σήμα σε ξεχωριστές πράσινο (φλουορεσκίνη) και κόκκινο (Texas Red) σήματα. Τα κριτήρια για την ALK μετατόπιση θετικότητα ήταν η παρουσία της διάσπασης των ανιχνευτών σε μήπως το 15% των κυττάρων.

Ως κριτήρια για τον αριθμό αντιγράφων εκτροπές του

ALK

δεν έχει τεκμηριωθεί, εμείς αυθαίρετα χρησιμοποιούνται τα ακόλουθα cut-offs προσαρμοστεί από τα κριτήρια που έχουν καθοριστεί για το

EGFR

και

HER-2

σε μη-μικρά δείγματα καρκίνου του πνεύμονα [16], [17]. Σύμφωνα με Cappuzzo et al. [16], οι ασθενείς μπορούν να ταξινομηθούν σε έξι FISH στρώματα με αριθμό αύξουσα αντιγράφων του γονιδίου EGFR ανά κύτταρο σύμφωνα με την συχνότητα των κυττάρων του όγκου με συγκεκριμένο αριθμό αντιγράφων του γονιδίου EGFR. Στη μελέτη μας, υιοθετήσαμε cut-offs για την ταξινόμηση του αριθμού αντιγράφων του γονιδίου ALK αλλοιώσεις όπως περιγράφηκε προηγουμένως για μη-μικροκυτταρικό καρκίνο του πνεύμονα [18]. Εν συντομία, αύξηση των

ALK

αριθμού αντιγράφων γονιδίου (συμπεριλαμβανομένων τόσο χαμηλές και υψηλές γονιδιωματική κέρδος) ορίστηκε ως μέσο αριθμό αντιγράφων από 3 έως 5 τα σήματα σύντηξης σε ≥10% των κυττάρων και ενίσχυση, όπως η παρουσία του ≥6 αντίγραφα του

ALK

ανά κύτταρο σε ≥10% που αναλύθηκαν κυττάρων. Στις περιπτώσεις όπου παρατηρήθηκαν clusters, έχουμε αναφερθεί το ποσοστό των κυττάρων με συμπλέγματα και θεωρείται ενισχύεται περιπτώσεις με ≥10% των

ALK

clusters [18] (Σχήμα 1).

Αύξηση της ΑΛΚ GCN (συμπεριλαμβανομένων τόσο χαμηλές και υψηλές γονιδιωματική κέρδος) ορίστηκε ως μέσο από 3 έως 5 τα σήματα σύντηξης σε ≥10% των κυττάρων (Εικόνα στα δεξιά). Τα Disomic κύτταρα φαίνεται στο σχήμα στα αριστερά.

Η

Στατιστική Ανάλυση

Περιγραφική στατιστική μέθοδος αυτή χρησιμοποιήθηκε για την ανάλυση των αποτελεσμάτων και συγκρίθηκαν ποιοτικά δεδομένα από chi-square test, ανάλογα με την περίπτωση.

PFS ορίστηκε ως ο χρόνος από την ημερομηνία της εγγραφής από την ημερομηνία της πρώτης τεκμηριωμένη προοδευτική ασθένεια (PD) ή θανάτου για οποιαδήποτε αιτία. OS υπολογίστηκε από την ημερομηνία της εγγραφής μέχρι την ημερομηνία του θανάτου από οποιαδήποτε αιτία, ή λογοκρισία κατά την ημερομηνία της τελευταίας παρακολούθησης για τη ζωή των ασθενών. Οι καμπύλες επιβίωσης σχεδιάζονται με τη μέθοδο Kaplan-Meier και συγκρίθηκαν με δοκιμασία log-rank. Για τακτικός μεταβλητές, εφαρμόστηκε μια δοκιμασία log-rank της τάσης. Τα δεδομένα αναλύθηκαν ήταν με τη χρήση του SPSS έκδοση 16.0 για Windows (SPSS, Chicago, IL, USA). Τα αποτελέσματα αναφέρθηκαν με διαστήματα εμπιστοσύνης 95% (CI). Όλες οι στατιστικές δοκιμασίες διεξήχθησαν σε δύο όψεων 0.05 επίπεδο σημαντικότητας.

Αποτελέσματα

πληθυσμό των ασθενών

Εξήντα οκτώ συνεχόμενους ασθενείς με προχωρημένο άγριου τύπου

RAS-RAF-PI3KCA

CRC συμπεριλήφθηκαν σε αυτή την προοπτική το σύνολο δεδομένων σε Fondazione IRCCS Istituto Nazionale dei Tumori του Μιλάνου. Οι ασθενών και τα χαρακτηριστικά της νόσου παρουσιάζονται στον Πίνακα 1 και συνοψίζεται στο Σχήμα 2. Οι περισσότεροι από τους ασθενείς (n = 60, 88%) είχαν ταξινομηθεί ως chemorefractory και είχαν προηγουμένως λάβει τόσο οξαλιπλατίνη βάσης και ιρινοτεκάνη χημειοθεραπεία με βάση, και μετά την αποτυχία της τουλάχιστον δύο προηγούμενες γραμμές της χημειοθεραπείας. Ωστόσο, 8 (12%) των ασθενών που θεωρήθηκαν ιρινοτεκάνη μη επιλέξιμες και έλαβαν panitumumab ως θεραπεία δεύτερης γραμμής μετά την αποτυχία της οξαλιπλατίνη χημειοθεραπεία με βάση. Συνολικά, παρατηρήσαμε μια μερική απόκριση σε 34 ασθενείς (50%), και προοδευτική ασθένεια σε 17 περιπτώσεις (25%). Πρόσθετες 17 ασθενείς (25%) παρουσίασαν σταθερή νόσο (SD), ενώ δεν ελήφθησαν πλήρεις υποχωρήσεις. Διάμεση παρακολούθηση της όλης σειράς ήταν 32,5 μήνες. Συνολικά, 67 ασθενείς είχαν τεκμηριωμένη PD, και συνολικά 41 (60%) ασθενείς απεβίωσαν. Όλοι οι θάνατοι οφείλονταν σε PD, ενώ ένας ασθενής χάθηκε κατά την παρακολούθηση. Διάμεση PFS και OS ήταν 6,3 και 16,4 μήνες, αντίστοιχα. Οι καμπύλες OS είχαν περικοπεί στα 3 χρόνια, δηλαδή σε χρονικό διάστημα λίγο μεγαλύτερο από το διάμεσο χρόνο παρακολούθησης.

Η

Ασθενείς αποτέλεσμα σύμφωνα με ALK αντίγραφο γονιδίου κατάσταση αριθμό

Όχι

εντοπίστηκαν ALK

μετατοπίσεις ή ενισχύσεις.

ALK

αύξηση αριθμού αντιγράφων γονιδίου βρέθηκε σε 25 (37%) των όγκων, με διάμεσο αριθμό

ALK

σήματα ανά κύτταρο με μη φυσιολογικά αποτελέσματα FISH ήταν 3,52 (εύρος 3,0 – 5,8)? disomic

ALK

κατάσταση βρέθηκε σε 43 (63%) δείγματα, όπως φαίνεται στο σχήμα 1. Αναφορικά με συσχέτιση του

ALK

κατάσταση με τα αποτελέσματα, μόνο 8 από 25 (32%) ασθενείς στην ομάδα με αυξημένη

ALK

αριθμού αντιγράφων γονιδίου έδειξαν μερική απόκριση, σύμφωνα με RECIST 1.1 κριτηρίων [19], ενώ μέχρι 30 από 43 (70%) ασθενείς με disomic

ALK

κατάσταση ανταποκρίθηκε. Αυτή η διαφορά ήταν στατιστικά σημαντική (p = 0,0048). PFS ήταν σημαντικά επιδεινωθεί παρουσία αυξημένης

ALK

αριθμού αντιγράφων γονιδίου εναντίον disomic

ALK

κατάσταση (5,3 έναντι 6,7 μηνών? Αναλογία κινδύνου [HR] = 1.759, 95% CI, 1.013- 3.053? ρ = 0.045? Σχήμα 3). OS ελαφρώς επιδεινώθηκε σε ασθενείς με αυξημένο

ALK

αριθμό αντιγράφων του γονιδίου, αν και η διαφορά αυτή δεν ήταν στατιστικά σημαντική (15,6 έναντι 18,5 μήνες? HR = 1,181, 95% CI, 0,623 έως 1,738? P = 0,885? Σχήμα 4)

καμπύλες κατά Kaplan-Meier για την επιβίωση ελεύθερης υποτροπής ανάλογα με την κατάσταση ALK:.. αύξηση του αριθμού αντιγράφων του γονιδίου εναντίον disomic κατάσταση

Η

καμπύλες κατά Kaplan-Meier για ολική επιβίωση ανάλογα με την κατάσταση ALK:. αύξηση του αριθμού αντιγράφων του γονιδίου εναντίον disomic κατάσταση

η

Συζήτηση

Διεθνή οδηγίες συνιστούν

KRAS

δοκιμές μετάλλαξης πριν από τη συνταγογράφηση αντι-EGFR την μονοκλωνικά αντισώματα cetuximab και panitumumab σε ασθενείς με προχωρημένο CRC και δηλώνουν ότι εναλλακτική θεραπεία θα πρέπει να συνταγογραφείται όταν ανιχνεύονται μεταλλάξεις [20]. Στην πραγματικότητα,

KRAS

μεταλλάξεις έχουν επικυρωθεί ως προγνωστικοί βιοδείκτες της αντοχής σε αντι-EGFR θεραπείας [4] – [7]. Ωστόσο, ένα σημαντικό ποσοστό των ασθενών με άγριου τύπου

KRAS

όγκους αποτυγχάνει να ανταποκριθεί στη θεραπεία. Ως εκ τούτου, ο προσδιορισμός των πρόσθετων βιοδεικτών στην οδήγηση «αρνητική» επιλογή των ασθενών με προχωρημένο CRC είναι μία ανικανοποίητη κλινική ανάγκη. Μια πιο ακριβής εξατομίκευση της θεραπείας μπορεί να βοηθήσει να αποφευχθεί η άσκοπη τοξικότητα και sociosanitary κόστος για τους ασθενείς οι οποίοι δεν θα ωφεληθούν από τη θεραπεία. Οι περισσότεροι βιολογικοί παράγοντες που αναλύθηκαν στην προσπάθεια να βελτιωθεί η επιλογή των ασθενών σε αυτή τη ρύθμιση επικεντρώθηκε είτε στην κατάντη μονοπατιού σηματοδότησης EGFR ή στο ίδιο το υποδοχέα. Πρόσφατα, μια ευρύτερη δοκιμή μετάλλαξης του

RAS

γονίδιο (σε εξώνια 2, 3, ή 4 και των δύο

KRAS

και

NRAS

) έχει επικυρωθεί για την εξατομίκευση της θεραπείας σε προχωρημένο καρκίνο του παχέος εντέρου μέσω της υποστήριξης πολλών μελετών [21]. Παρόμοια με ras γονίδια,

BRAF

κωδικοποιεί επίσης πρωτεΐνες που δρουν στο μονοπάτι σηματοδότησης RAS-RAF-ΜΑΡΚ και μπορεί να εμπλέκεται στην αντίσταση σε αντι-EGFR θεραπεία. Ωστόσο, αυτές οι αρχικές παρατηρήσεις ήταν συχνά αντικρουόμενες και περιορίζεται σε ένα μικρό ποσοστό των ασθενών. Για παράδειγμα, τα προκαταρκτικά στοιχεία για το ρόλο της κατάστασης BRAF φαινόταν πολλά υποσχόμενη για μια απλή εφαρμογή στην κλινική πράξη [22], αλλά ένα μεγάλο μεταγενέστερη ανάλυση από το CRYSTAL ( «Το cetuximab σε συνδυασμό με ιρινοτεκάνη σε θεραπεία πρώτης γραμμής για το μεταστατικό καρκίνο του παχέος εντέρου») πυγμή -line δοκιμή έδειξε ότι BRAF μετάλλαξη είναι κακό προγνωστικό παράγοντα, αλλά όχι μια έξυπνη ένα [23]. Αποδείχθηκε επίσης ότι, ομοίως με ό, τι παρατηρείται για την ογκογόνο ενεργοποίηση της οδού ΜΑΡΚ, η συστατική απορρύθμιση των

PI3KCA

θα μπορούσε να παρακάμψει την οδό σηματοδότησης EGFR και είναι υπεύθυνη της κλινικής αντοχής [13]. Μια προηγούμενη συστηματική εξέταση διαπιστώθηκε ότι

PI3KCA

εξόνιο 20 μεταλλάξεων σχετίστηκε με χαμηλότερο ποσοστό ανταπόκρισης, συντομότερη ελεύθερη προόδου επιβίωση και τη συνολική επιβίωση και έτσι μπορεί να είναι ένας πιθανός βιολογικός δείκτης για την αντίσταση σε αντι-EGFR μονοκλωνικά αντισώματα σε

KRAS

άγριου τύπου μεταστατικό CRC, ενώ

PI3KCA

εξόνιο 9 μεταλλάξεις φαίνεται να έχουν κανένα τέτοιο ρόλο [24].

Από το ποσοστό ανταπόκρισης στο cetuximab είναι 41,2% σε ασθενείς με όγκους «τετραπλή άγριου τύπου» [7], είναι προφανές ότι οι άλλοι βιοδείκτες πρέπει να συμμετέχουν στη θεραπεία πρωτογενή αντίσταση. Μεταβολές των υποδοχέων τυροσινικής κινάσης μεμβράνη «ανταγωνίζονται» με EGFR – όπως HER-3, ΚΟΑ ή IGFR – μπορεί να παίζουν ρόλο στην ανθεκτικότητα της θεραπείας, λόγω cross-talk στη σηματοδότηση προς τα κάτω [25] – [27]. Παρά τον σχετικό αριθμό των προκλινικών παρατηρήσεων, έχουν μερικές κλινικές μελέτες έχουν διεξαχθεί για να διερευνήσει την υποτιθέμενη λειτουργία της αλληλεξάρτησης υποδοχέα αυξητικού παράγοντα και της συμπληρωματικότητας στον επηρεασμό κλινικό αποτέλεσμα με αντι-EGFR θεραπείας. Επιπλέον, τα αποτελέσματα σε αυτό το πεδίο έρευνας συχνά υπήρξαν αντιφατικές και δεν είναι εύκολο να μεταφερθούν σε κλινική πρακτική. Στην πραγματικότητα, προηγούμενες μελέτες σε αυτό το σκηνικό μπορεί να έχει σημαντικές μεροληψίες λόγω ανάλυση της σειράς με την εκ των υστέρων-προσδιορίζονται υποομάδες και την ένταξη της RAS, BRAF και PI3KCA μεταλλαγμένων όγκων. Αυτό μπορεί να επηρεάσει σημαντικά τα αποτελέσματα, όπως το μικρό μέγεθος του δείγματος θα μπορούσε να ήταν σαφώς στατιστικά ανεπαρκής για πολλαπλές συγκρίσεις της ταυτόχρονης παράγοντες.

Πρόσφατα, ALK μετατόπιση έχουν αναφερθεί σε περίπου 2,5% του CRC χαρακτηρίζεται από C2orf44-ALK και συντήξεις γονιδίου EML4-ALK [28], [29]. Ωστόσο, άλλοι εταίροι ALK σύντηξης έχουν περιγραφεί σε μη μικροκυτταρικό καρκίνο του πνεύμονα και άλλους τύπους όγκων, περιορίζοντας τη δυνατότητα να βρεθεί σε όλες τις μεταθέσεις ALK που μπορεί να υπάρχουν σε δείγματα CRC. Επιπλέον, απαρίθμηση σήματος σε τμήματα στερεών όγκων με FISH είναι δύσκολο να ερμηνεύσει και τις κατευθυντήριες γραμμές για τις αναλυτικές μεθόδους και τα συστήματα βαθμολόγησης δεν είναι διαθέσιμα για CRC, εν μέρει εξηγεί γιατί

ALK

γονίδιο αριθμού αντιγράφων ως βιοδεικτών δεν έχει εκτενώς ερευνηθεί ακόμα. Όσον αφορά το ρόλο του ALK στην ανάπτυξη και την πρόοδο του CRC, μια πρόσφατη μελέτη από Aisner et al. βρίσκεται σημειωμένο εντός του όγκου ετερογένεια τόσο για KRAS μετάλλαξη και ALK αναδιάταξη στο CRC και στην περιοχή της δυσπλασίας υψηλού βαθμού [30]. Συγγραφείς προτείνουν σαν αυτά τα στοιχεία μπορεί να δημιουργήσει τη βάση για διάφορες υποθέσεις που εξηγούν τους μηχανισμούς με τους οποίους συνδυασμούς KRAS και το καθεστώς ALK μπορεί να υπάρχουν μέσα κλωνική εξέλιξη του καρκίνου [30]. Όσον αφορά το προγνωστικό ρόλο του ALK, η συσχέτιση μεταξύ του αριθμού αντιγράφων των σχετικών τροποποιήσεων και του κλινικού αποτελέσματος δεν έχει μελετηθεί σε CRC. Πρόσφατα, η αύξηση του ALK αριθμού αντιγράφων του γονιδίου αναγνωρίστηκε ως ανεξάρτητο φτωχός προγνωστικός παράγοντας σε μια αναδρομική σειρά 770 ασθενών με CRC [31]. ALK αριθμού αντιγράφων γονιδίου (ενίσχυση /κέρδος) βρέθηκε μόνο σε 3,4% του συνόλου των δειγμάτων CRC που μελετήθηκαν, πιθανώς αντανακλώντας το σχετικά χαμηλό αριθμό σταδίου IV ασθενών περιλαμβάνονται και λόγω της στατιστικά σημαντική συσχέτιση της ALK αντιγράψετε τον αριθμό αλλαγών με πιο προχωρημένο στάδιο της νόσου [31].

για τις γνώσεις μας, η μελέτη μας είναι η πρώτη για τη διερεύνηση του ρόλου της ALK ως προγνωστικός παράγοντας σε ασθενείς με προχωρημένο CRC που λαμβάνουν cetuximab ή panitumumab. Στην ανάλυσή μας, η υποομάδα των ασθενών με chemorefractory CRC και αυξημένο αριθμό γονίδιο ALK αντίγραφο είχε ha σημαντικά χαμηλότερη πιθανότητα να ανταποκριθεί στις αντι-EGFR θεραπεία, παρά την κατάσταση άγριου τύπου RAS-RAF-PI3KCA. κατάσταση ALK φάνηκε να επηρεάζει μόνο την ταχύτητα απόκρισης και PFS, αλλά όχι η διάρκεια OS, περιορίζοντας έτσι το σκεπτικό για τη χρήση του ως προγνωστικός παράγοντας. Ωστόσο, πρέπει να επισημανθεί ότι οι πιθανές διαφορές του OS, σύμφωνα με το καθεστώς ALK μπορεί να έχουν επηρεαστεί από τις θεραπείες μετά εξέλιξης συνήθως συνταγογραφείται σε τριτοβάθμιο κέντρο του καρκίνου μας – συμπεριλαμβανομένης της χημειοθεραπείας επαναχορήγηση του φαρμάκου, regorafenib, αντι-EGFR επαναχορήγηση του φαρμάκου, τεμοζολομίδη σε MGMT μεθυλιωμένη όγκους και μοριακό προφίλ για να συμπεριληφθούν σε μελέτες φάσης Ι με στοχευμένες παράγοντες [32] – [34]. Επιπλέον, το μικρό μέγεθος του δείγματος και η έλλειψη ομάδας ελέγχου της μελέτης μας αφήνουν ανοιχτό το ενδεχόμενο που ALK αριθμού αντιγράφων αλλοιώσεις μπορεί να είναι ένας προγνωστικός παράγοντας και όχι πρόβλεψης μία, δεδομένου ότι δεν υπάρχει κανένας τρόπος να τεμαχίσει την προγνωστική από προγνωστική σημασία. Στην πραγματικότητα, η πιθανή προγνωστική ρόλο της κατάστασης του γονιδίου ALK ως βασικό μονοπάτι της αντίστασης στην αντι-EGFR θεραπεία πρέπει να επιβεβαιωθεί περαιτέρω μέσω επαρκώς τροφοδοτείται, τυχαιοποιημένες μελέτες. Ωστόσο, παρά τις κάποιες εγγενείς περιορισμούς, οι ασθενείς που περιλαμβάνονται σε αυτή την ανάλυση ελήφθησαν από μια προοπτική βάση δεδομένων και υποβλήθηκαν σε επεξεργασία ομοιογενώς με αντι-EGFR μονοκλωνικά αντισώματα για chemorefractory ασθένεια. Όλοι οι ασθενείς επιλέχθηκαν μέσω μιας διαδικασίας «μοριακή εμπλουτισμού.» – Και τα άτομα με πιθανή διαψεύδοντας μεταλλάξεις RAS, BRAF, και /ή PI3KCA κρίθηκαν μη επιλέξιμες

Τέλος, αν υψηλό

ALK

αριθμό αντιγράφων του γονιδίου μπορεί να αντιπροσωπεύει μια πραγματική προγνωστικός παράγοντας της ανταπόκρισης στους αναστολείς ALK δεν έχει μελετηθεί σε CRC. Είναι ενδιαφέρον, ALK μπορεί να είναι μια πιθανή μοριακό στόχο ως μέρος ενός πρωτοκόλλου θεραπείας επικεντρώθηκε σε έλεγχο είτε EGFR και υποδοχείς ALK, ή την οδό PI3KCA. Η δυνατότητα χρήσης αναστολέων ALK σε βιολογικά επιλεγμένα όγκους αντι-EGFR-ανθεκτικά υπόσχεται να είναι μια κρίσιμη πρόκληση για τη μελλοντική ανάπτυξη της στοχευμένης θεραπείας σε ασθενείς με CRC. Η έλλειψη ALK μετατοπίζεται περιπτώσεις, μαζί με το χαμηλό ποσοστό των κυττάρων με ενίσχυση σε όλες τις περιπτώσεις, δείχνει ότι το κέρδος του αριθμού αντιγράφων γονιδίου μπορεί να μην είναι ένα βιολογικώς σχετικό συμβάν ή να προβλέψει απόκριση σε ALK μόρια στόχευσης. Επιπλέον,

ALK

κέρδος αντίγραφο του γονιδίου μπορεί να σχετίζεται με τον αριθμό αντιγράφων εκτροπή των άλλων ανταγωνιστικών γονιδίων, όπως η ΚΟΑ ή το ίδιο EGFR [35], [36]. Παρ ‘όλα αυτά, οι παρατηρήσεις αυτές δεν σίγουρα αποκλείει το ενδεχόμενο όφελος των αναστολέων ALK σε αυτόν τον πληθυσμό, όπως αποδεικνύεται στην παχέος ασθενείς χωρίς έκφραση της πρωτεΐνης EGFR που ανταποκρίνονται στις θεραπευτικές μονοκλωνικά αντισώματα που στοχεύουν EGFR [37].

Ευχαριστίες

Αποποίηση ευθυνών: Το χειρόγραφο δεν έχει δημοσιευθεί ούτε υποβληθεί για δημοσίευση αλλού. Όλοι οι συγγραφείς έχουν συμβάλει σημαντικά, και είναι σε συμφωνία με το περιεχόμενο του χειρογράφου.