Αφηρημένο

Ο διαβήτης τύπου 2 έχει συσχετιστεί με μειωμένο κίνδυνο καρκίνου του προστάτη σε μελέτες παρατήρησης, και αυτό αντίστροφη συσχέτιση έχει επιβεβαιωθεί πρόσφατα σε αρκετές μεγάλες μελέτες κοόρτης. Ωστόσο, οι μηχανισμοί που εμπλέκονται σε αυτή την προστατευτική δράση παραμένουν να διευκρινισθούν. Ο σκοπός της παρούσας μελέτης ήταν να διερευνήσει κατά πόσον διάφορα χαρακτηριστικά του διαβήτη τύπου 2 (υπερινσουλιναιμία, παράγοντας υπεργλυκαιμία και νέκρωσης όγκων α [TNF-α]) προστατεύουν από την ανάπτυξη του καρκίνου του προστάτη. Για το σκοπό αυτό τα κύτταρα LNCaP χρησιμοποιήθηκαν για το

in vitro

πειράματα και γυμνούς ποντικούς στους οποίους PAC120 (ορμονικά εξαρτώμενο καρκίνο του ανθρώπινου προστάτη) ξενομοσχεύματα είχαν εμφυτευθεί χρησιμοποιήθηκαν για το

in vivo

εξετάσεις. Παρέχουμε αποδείξεις ότι αυξανόμενες συγκεντρώσεις γλυκόζης ρυθμίζουν προς τα κάτω του υποδοχέα ανδρογόνων (AR) mRNA και τα επίπεδα πρωτεΐνης μέσω της ενεργοποίησης του ΝΡ-κΒ σε κύτταρα LNCaP. Επιπλέον, υπήρξε μια συνεργική επίδραση της γλυκόζης και TNFa σε προς τα κάτω ρύθμιση του AR σε κύτταρα LNCaP. Αντίθετα, η ινσουλίνη δεν είχε καμία επίδραση στη ρύθμιση AR.

In vivo

πειράματα έδειξαν ότι ο διαβήτης με στρεπτοζοτοκίνη (STZ-DM) παράγει επιβράδυνση ανάπτυξης όγκου και μια σημαντική μείωση στην έκφραση AR σε ποντικούς καρκίνο PAC120 προστάτη. Συμπερασματικά, τα αποτελέσματά μας δείχνουν ότι η υπεργλυκαιμία και TNF-α παίζουν σημαντικό ρόλο στην προστασία κατά του καρκίνου του προστάτη με τη μείωση των επιπέδων των υποδοχέων των ανδρογόνων μέσω NF-κΒ

Παράθεση:. Barbosa-Desongles Α, Hernández C, De Torres μου , Munell F, Poupon MF, Simó R, et al. (2013) Ο διαβήτης Προστατεύει από τον καρκίνο του προστάτη με ρύθμιση προς τα κάτω ανδρογόνων υποδοχέων: νέες ιδέες από LNCaP κύτταρα και PAC120 μοντέλο ποντικού. PLoS ONE 8 (9): e74179. doi: 10.1371 /journal.pone.0074179

Συντάκτης: Μινγκ Tat Λινγκ, Queensland University of Technology, Αυστραλία

Ελήφθη: 16η Απριλίου του 2013? Αποδεκτές: 29 του Ιούλη, 2013? Δημοσιεύθηκε: 10 Σεπτεμβρίου 2013

Copyright: © 2013 Barbosa-Desongles et al. Αυτό είναι ένα άρθρο ανοικτής πρόσβασης διανέμεται υπό τους όρους της άδειας χρήσης Creative Commons Attribution, το οποίο επιτρέπει απεριόριστη χρήση, τη διανομή και την αναπαραγωγή σε οποιοδήποτε μέσο, ​​με την προϋπόθεση το αρχικό συγγραφέα και την πηγή πιστώνονται

Χρηματοδότηση:. Αυτό το έργο υποστηρίχθηκε από μια επιχορήγηση από το Instituto de Salud Carlos III (DMS) και Centro de Investigación Biomedica en Red de διαβήτης y Enfermedades Metabólicas Asociadas (CIBERDEM), μια πρωτοβουλία του Instituto de Salud Carlos III (RF, ABD, CH και DMS) . DMS είναι ο αποδέκτης μιας σύμβασης Miguel Σερβέτ. Οι χρηματοδότες δεν είχε κανένα ρόλο στο σχεδιασμό της μελέτης, τη συλλογή και ανάλυση των δεδομένων, η απόφαση για τη δημοσίευση, ή την προετοιμασία του χειρογράφου

Αντικρουόμενα συμφέροντα:.. Οι συγγραφείς έχουν δηλώσει ότι δεν υπάρχουν ανταγωνιστικά συμφέροντα

Εισαγωγή

διαβήτη τύπου 2 (ΣΔ2) και του καρκίνου του προστάτη (PCA) είναι δύο σημαντικά, τα αυξανόμενα προβλήματα υγείας που επηρεάζουν εκατομμύρια άνδρες σε όλο τον κόσμο. PCA είναι ένα ανδρογόνο-εξαρτώμενη κακοήθεια η οποία αποτελεί την πιο κοινή μορφή καρκίνου συμπαγών οργάνων σε άνδρες στις ΗΠΑ, τον Καναδά και την Αυστραλία, και η δεύτερη πιο κοινή μορφή καρκίνου στους άνδρες παγκοσμίως [1].

T2D έχει αναγνωριστεί ως ένας βασικός παράγοντας που συμβάλλει στην ανάπτυξη κακοηθειών συμπαγών οργάνων, συμπεριλαμβανομένων του ήπατος, του παγκρέατος, του παχέος εντέρου, του μαστού, του ενδομητρίου, της μήτρας και της ουροδόχου κύστης [2], [3] Ωστόσο, αρκετές μεγάλες μελέτες κοόρτης έχουν δείξει μια σημαντική μειωμένο κίνδυνο PCA σε διαβήτη τύπου 2 [4 ] – [7]. Επιπλέον, έχει παρατηρηθεί ότι το μέγεθος αυτού του αντίστροφη συσχέτιση είναι μεγαλύτερη με την αύξηση της διάρκειας του διαβήτη [4], [8]. Αν και μακροχρόνιο διαβήτη προστατεύει από την ανάπτυξη του προστάτη, υπάρχουν ενδείξεις ότι οι διαβητικοί άνδρες μπορεί να έχουν χειρότερο αποτέλεσμα, επειδή έχουν ιστολογική πιο επιθετική προστάτη σε σύγκριση με τους μη διαβητικούς ασθενείς [9] – [11]. Ένας από τους λόγους για αυτό το χαρακτηριστικό θα μπορούσε να είναι τα χαμηλότερα επίπεδα στον ορό του ειδικού προστατικού αντιγόνου (PSA) ότι οι διαβητικοί ασθενείς τύπου 2 υπάρχουν σε σύγκριση με μη διαβητικά υποκείμενα [5], [12], [13]. Από το PSA είναι η τρέχουσα μέθοδος ελέγχου για την PCA, τα χαμηλότερα επίπεδα PSA που υπάρχουν σε διαβητικούς ασθενείς μπορεί να οδηγήσει σε καθυστέρηση της διάγνωσης, αυξάνοντας έτσι την επίπτωση της υψηλής ποιότητας /προχωρημένο προστάτη. Ωστόσο, θα πρέπει να σημειωθεί ότι η προστατευτική επίδραση του διαβήτη στην προστάτη δεν είναι απλά μια συνέπεια της μεροληψίας ανίχνευσης από καθυστερημένη διάγνωση, λόγω των χαμηλότερων επιπέδων PSA [5], [14], [15].

Η ακριβής μηχανισμοί που εμπλέκονται στην προστατευτική επίδραση του διαβήτη τύπου 2 για την ανάπτυξη του προστάτη μένει να διευκρινιστεί. Έχει αναφερθεί ότι τα άτομα με αυξημένη γενετική ευαισθησία σε T2D έχουν μειωμένο κίνδυνο προστάτη [16] – [18]. Από την άποψη αυτή έχει δειχθεί ότι η ίδια παραλλαγή στην HNF1B (επίσης γνωστή ως TCF2) γονίδιο, το οποίο σχετίζεται με αυξημένο κίνδυνο προστάτη, παρέχει προστασία από T2D [19]. Άλλες εξηγήσεις που προτείνονται έχουν συμπεριλάβει την προοδευτική ανάπτυξη των βήτα κυττάρων εξάντλησης με εξάντληση της ινσουλίνης και τη συσχέτιση του διαβήτη με χαμηλότερα επίπεδα τεστοστερόνης και την ανάπτυξη της ινσουλίνης παράγοντα 1 (IGF1) [15]. Επιπλέον, θα πρέπει να σημειωθεί ότι τα χαμηλά βαθμού φλεγμονή είναι ένα σημαντικό συστατικό του T2D και ότι έχουν υψηλότερα επίπεδα του ορού του παράγοντα άλφα νέκρωσης όγκου (TNF-α) σε σύγκριση με τους μη διαβητικούς ελέγχους αναφερθεί [20]. Πρόσφατα στοιχεία που αποδεικνύουν ότι ο TNFa μπορεί να παίξει ουσιαστικό ρόλο στην αρνητική ρύθμιση των επιπέδων της SHBG και τον ορό της τεστοστερόνης [21], [22]. Ως εκ τούτου, ένα cross-talk μεταξύ των επιπέδων της φλεγμονής και ανδρογόνων θα μπορούσε να είναι ένας υποκείμενος μηχανισμός που αντιπροσωπεύουν χαμηλό κίνδυνο προστάτη που παρατηρείται σε διαβήτη τύπου 2. Επιπλέον, έχει πρόσφατα αποδειχθεί ότι πολλά γονίδια που σχετίζονται με φλεγμονή που σχετίζεται με τα επίπεδα ανδρογόνων στους άνδρες [23].

Από το PCA είναι εξαρτώμενη από ανδρογόνο, ο πρώτος στόχος της παρούσας μελέτης ήταν να εξετάσει κατά πόσον η ινσουλίνη ή τα επίπεδα της γλυκόζης είχε καμία επίδραση στον υποδοχέα ανδρογόνων (AR) σε κύτταρα προστάτη LNCaP (ένα ανδρογόνο ευαίσθητη αθανατοποιημένη προστάτη καρκινική κυτταρική γραμμή) [24]. Επιπλέον, δεδομένου ότι ο TNF-α υπερεκφράζεται σε διαβήτη τύπου 2 και αρνητική ρύθμιση της έκφρασης AR από τον TNF-α έχει αναφερθεί στο παρελθόν [25], θα θέλαμε να διερευνήσει κατά πόσον TNF-α είχε καμία επίδραση στη ρύθμιση AR σε μας

in vitro

σύστημα. Επιπλέον, δεδομένου ότι η υπεργλυκαιμία είναι ικανό να ενεργοποιεί NF-κΒ σε ενδοθηλιακά κύτταρα, περικύτταρα και κύτταρα αγγειακού λείου μυός [26] – [30], και την ενεργοποίηση του ΝΡ-κΒ μπορεί να εμπλέκεται σε AR μειορύθμιση [25], [31], εξετάσαμε αν υπεργλυκαιμία θα μπορούσε να μειώσει τα επίπεδα AR μέσω της ενεργοποίησης του ΝΡ-κΒ σε κύτταρα LNCaP. Τέλος, ένα μοντέλο PAC120 προστάτη ποντίκι του καρκίνου [32] που έλαβαν θεραπεία με στρεπτοζοτοκίνη (STZ) χρησιμοποιήθηκε για να αξιολογήσει

in vivo

τις συνέπειες της υπεργλυκαιμίας στη ρύθμιση AR και την ανάπτυξη του όγκου.

Υλικά και Μέθοδοι

Cell Culture

Οι ανθρώπινες καρκινικές κυτταρικές σειρές προστάτη LNCaP ελήφθησαν από την American Type Culture Collection (Rockville, MD, Η.Π.Α.) και καλλιεργήθηκαν σε 75 cm2 φιάλες και καλλιεργήθηκε σε RPMI 1640 (ΡΑΑ Laboratories , Pasching, Αυστρία) που περιέχει 10% FBS, 1% πενικιλίνη /στρεπτομυκίνη, 1% Hepes και διαφορετικές συγκεντρώσεις ινσουλίνης (20, 100 ή 200 μΐυ /ml) ή συγκέντρωση γλυκόζης (5, 10 ή 30 mM ϋ-γλυκόζη και 5 ή 30 mM L-γλυκόζη) για 4 ημέρες. LNCaP κύτταρα υποβλήθηκαν επίσης σε αγωγή με αυξανόμενες ποσότητες D-γλυκόζη (5 mM, 10 mM και 30 mM) παρουσία ή απουσία του ΤΝΡα (50 ng /ml) ή QNZ (Enzo Life Sciences International, Inc. ΡΑ, USA). Τα κύτταρα διατηρήθηκαν σε υγροποιημένο επωαστή με 5% CO

2 στους 37 ° C. Όλες τις φωτογραφίες

in vitro

πειράματα έγιναν σε δύο τουλάχιστον ανεξάρτητα πειράματα εις τριπλούν.

ζωικό μοντέλο

Για

in vivo

μελετά ένα PAC120 μοντέλο ποντικού προστάτη χρησιμοποιήθηκε. De Pinieux

et al

[33] δημιούργησε αυτό το μοντέλο της ανθρώπινης προστάτη χρησιμοποιώντας ιστό που λαμβάνεται με διουρηθρική εκτομή του ενός τοπικά υποτροπιάζοντα ΣΕΣΣ. Αυτός ο ιστός προστάτη καθιερώθηκε ως μεταφυτεύσιμων ξενομόσχευμα σε γυμνούς ποντικούς, όπου αυξήθηκε σε τοπικό επίπεδο και εμφανίζονται με τον ίδιο ανοσοφαινότυπο όπως τον αρχικό όγκο.

Πέντε εβδομάδων αθυμικά swiss ποντίκια (Charles River Laboratories, Inc) στεγάστηκαν στην ενιαία παθογόνο ελεύθερη ζώνη των εργαστηρίων ζώων διευκόλυνση του Institut de Recerca de Vall d’Hebron και δόθηκαν με τροφή και νερό

κατά βούληση

. όγκων του προστάτη κόπηκαν σε κομμάτια 5 × 5 mm και μπολιασμένα υποδορίως όπως περιγράφηκε προηγουμένως [33]. Οι χειρουργικές επεμβάσεις έγιναν κάτω ισοφλουορανίου αναισθησία και αναλγησία μελοξικάμη, και όλες οι προσπάθειες έγιναν για να ελαχιστοποιήσουν την ταλαιπωρία. Το πρωτόκολλο εγκρίθηκε από το ΣΕΚΑΠ (Comité ETIC Experimentació Ζώων) του Ερευνητικού Ινστιτούτου Νοσοκομείο Vall d’Hebron (αριθμός αδείας 14/05 ΣΕΚΑΠ). Όλες οι πειραματικές διαδικασίες διεξήχθησαν σύμφωνα με τους θεσμικούς κανόνες, που πληρούσαν τις απαιτήσεις που καθορίζονται από την ισπανική κυβέρνηση και την Ευρωπαϊκή Κοινότητα (Real Decreto 223/1988 και BOE 256, 10.25.90). Η ανάπτυξη του όγκου αξιολογήθηκε με μέτρηση δύο κατακορύφων διαμέτρων με μία καλίμπρα. Ο όγκος (V) του κάθε όγκου μετρήθηκε μία φορά την εβδομάδα και υπολογίστηκε όπως περιγράφηκε προηγουμένως [33]. Η διάμεση τιμή των όγκων του όγκου υπολογίστηκε για κάθε ομάδα ποντικών

Animal Θεραπεία

Τα ποντίκια χωρίστηκαν σε τέσσερις ομάδες: α.) Ποντικούς που έλαβαν ένεση με 6 mg στρεπτοζοτοκίνης (STZ) (Sigma-Aldrich , Μαδρίτη, Ισπανία) ενδοπεριτοναϊκά (ΙΡ), μία εβδομάδα πριν από μεταμοσχεύθηκε ο όγκος? β) ποντικοί που υπέστησαν αγωγή με STZ IP μετά την εμφύτευση του όγκου? γ) ποντικών που υπέστησαν αγωγή με το όχημα (κιτρικό ρυθμιστικό 50 mM ρΗ 4,5) ΙΡ και δ) μη κατεργασμένων ποντικών. Ελήφθησαν δείγματα αίματος δύο φορές την εβδομάδα από σαφηνή φλέβα για μετρήσεις της γλυκαιμίας τους ως έλεγχος της διατήρησης της διαβητικής κατάστασης. Στο τέλος των πειραμάτων, αγωγή και ζώα ελέγχου ναρκώθηκαν με CO

2, και αμέσως θυσιάστηκαν με αυχενική εξάρθρωση. Ιστών συλλέχθηκαν και καταψύχθηκαν στους -80 ° ή σε φορμόλη

Ιστολογίας

δείγματα όγκου μονιμοποιήθηκαν με φορμαλίνη και εγκλεισμένα σε παραφίνη.? τότε πέντε μΜ πάχους τομές δείγμα όγκου ενυδατώθηκαν με ξυλόλιο (3 χ 10 λεπτά) και αιθανόλη σε μειούμενες συγκεντρώσεις (100%, 90%, 70%, 30%? 2 × 5 λεπτών η καθεμία) και χρωματίστηκαν με αιματοξιλίνη (30 δευτερόλεπτα) (Surgipath Medical Industries, Inc., IL, ΗΠΑ) και ηωσίνη (20 δευτερόλεπτα) (Sigma-Aldrich). Τέλος, τα δείγματα ήταν αφυδατωμένο με διαβαθμισμένη διαλύματα αιθανόλης (όπως περιγράφεται παραπάνω) και καθαρίστηκαν σε ξυλόλιο προτού τοποθετηθεί με DPX (Panreac SA, Βαρκελώνη, Ισπανία).

Η ανοσοϊστοχημεία

Μετά την de-κερωμένο και διεργασίες ενυδάτωση, τα πλακίδια προ-αγωγή με τη χρήση μίας μεθόδου ανάκτησης αντιγόνου μικροκυμάτων (Dako Diagnostics SA, Βαρκελώνη, Ισπανία). Η ενδογενής υπεροξειδάση αποσβέστηκε πριν από ολονύκτια επώαση στους 4 ° C με αντι υποδοχέα ανδρογόνων (AR κουνελιού πολυκλωνικό C-19, Santa Cruz Biotechnology Inc., Heidelberg, Germany) που χρησιμοποιείται στις 1:50 και με μονοκλωνικό αντίσωμα ποντικού αντι-ανθρώπινης κυτοκερατίνης, (κλώνοι ΑΕ1 /AE3? Dako, Δανία). Μετά από αρκετές πλύσεις, οι τομές επωάστηκαν 30 λεπτά σε θερμοκρασία δωματίου με δευτερογενή αντισώματα συζευγμένα με HRP (Dako Diagnostics SA), και αναπτύχθηκαν αντιδράσεις για 1 λεπτό με διαμινοβενζιδίνη και

2O

σύστημα το Η2. Κατάλληλα αρνητικοί έλεγχοι πραγματοποιήθηκαν τομές επώαση χωρίς το πρωτεύον αντίσωμα.

RNA Ανάλυση

Ολικό RNA εξήχθη από κύτταρα LNCaP D-γλυκόζη και L-γλυκόζη κατεργασία χρησιμοποιώντας RNeasy Mini κιτ, (QIAGEN SL, Μαδρίτη, Ισπανία) Αντίστροφη μεταγραφή (RT) εκτελέστηκε στους 42 ° C, για 50 λεπτά χρησιμοποιώντας 2 μg ολικού RNA και 200 ​​U Superscript II μαζί με ένα εκκινητή ολιγο-άΤ και αντιδραστήρια που παρέχονται από την Invitrogen. Ένα κλάσμα του προϊόντος RT ενισχύθηκε σε μια αντίδραση 25- μΐ χρησιμοποιώντας SYBRGreen (Invitrogen SA, Βαρκελώνη, Ισπανία) με κατάλληλα ζεύγη ολιγονουκλεοτιδικό εκκινητή που αντιστοιχεί σε ανθρώπινο υποδοχέα ανδρογόνων (εμπρόσθιος εκκινητής 5′-TGAAAGCCATGCTACTCTTCAG-3 ‘και αντίστροφος εκκινητής 5’- GCTCA CCATGTGTGACTTGAT-3 ‘), ανθρώπινο 18S (εμπρόσθιος εκκινητής 5′-TAACGAACG AGACTCTGGCAT-3′ και αντίστροφος εκκινητής 5’-CGGACATCTAAGGGCATCACAG-3 ‘). Τα αποτελέσματα αναλύθηκαν χρησιμοποιώντας το πρόγραμμα 7000 SDS και ποσοτικοποιείται με τη συγκριτική C

μέθοδο Τ (2

-ΔΔC

T μέθοδος).

Ανάλυση Western Blot

Μετά θεραπείες , τα κύτταρα LNCaP πλύθηκαν δύο φορές με ψυχρό PBS, ξύνεται η φιάλη και ομογενοποιούνται σε ρυθμιστικό διάλυμα RIPA συμπληρωμένο με Complete ™ κοκτέιλ αναστολέα πρωτεάσης (Roche Diagnostics, Βαρκελώνη, Ισπανία). Εκχυλίσματα πρωτεΐνης χρησιμοποιήθηκαν για κηλίδωση Western με αντισώματα εναντίον πολυκλωνικό αντίσωμα κουνελιού AR AR Ν-20 (Santa Cruz Biotechnology Inc), η ανθρώπινη φωσφο-NF-κΒ (SC-33039? Santa Cruz Biotechnology Inc.) και PPIA πολύκλωνο αντίσωμα κουνελιού (Α.Ε. 296?. ΒΙΟΜΟί Int, Μαδρίτη, Ισπανία) στους 4 ° C. Μετά από αρκετές πλύσεις, ανοσοαντιδραστικές ζώνες έγιναν ορατές με δευτερεύον αντίσωμα συζευγμένο με υπεροξειδάση αρμορακίας (Dako Diagnostics SA) που ακολουθείται από υπεροξειδάση εξαρτώμενη χημειοφωταύγειας αντιδραστήριο (Pierce Biotechnology Inc., Βαρκελώνη, Ισπανία) με έκθεση σε φιλμ ακτίνων Χ. Η πυκνομετρική ανάλυση πραγματοποιήθηκε με τη χρήση ImageJ πρόγραμμα.

Στατιστική Ανάλυση

Τα αποτελέσματα εκφράζονται ως μέση τιμή ± SD. Τα δεδομένα υποβλήθηκαν σε δοκιμασία και τη σημασία ANOVA (p & lt? 0,05? 0,01? P & lt) επιτεύχθηκε

Αποτελέσματα

θεραπεία με ινσουλίνη δεν έχει καμία επίδραση στην ανδρογόνων υποδοχέων (AR) Επίπεδα σε LNCaP κύτταρα

Από προστάτη είναι εξαρτώμενη από ανδρογόνα, πρέπει πρώτα ήθελε να εξετάσει εάν η ινσουλίνη είχε καμία επίδραση στα επίπεδα AR. Εμείς επεξεργασμένα κύτταρα LNCaP με διαφορετικές συγκεντρώσεις ινσουλίνης (20, 100 ή 200 μUI /ml) για τέσσερις ημέρες. Τα αποτελέσματα έδειξαν ότι οι θεραπείες ινσουλίνης δεν άλλαξε τα επίπεδα AR mRNA όταν συγκρίνονται με μη επεξεργασμένα κύτταρα LNCaP (Σχήμα 1Α). Επιπλέον, τα επίπεδα πρωτεΐνης AR ήταν επίσης αμετάβλητη από την αγωγή με ινσουλίνη σε σύγκριση με την ομάδα ελέγχου (Σχήμα 1Β). Η αποτελεσματικότητα της θεραπείας με ινσουλίνη προσδιορίστηκε με τη μέτρηση της φωσφορυλίωσης των πρωτεϊνών IRS-1 και PS6. Τα αποτελέσματα έδειξαν ότι η θεραπεία με ινσουλίνη αυξημένη φωσφορυλίωση αμφοτέρων των πρωτεϊνών σε σύγκριση με τα κύτταρα LNCaP ελέγχου (Σχήμα 1C).

(Α) Σχετικά επίπεδα AR mRNA σε παρουσία διαφόρων συγκεντρώσεων ινσουλίνης απεικονίζονται. Ανθρώπινα 18 S mRNA ενισχύθηκε ως έλεγχος. Τα σημεία των δεδομένων δείχνονται ως μέση τιμή ± SD του τριπλούν. (Β) Ανάλυση των επιπέδων της πρωτεΐνης AR στην παρουσία διαφόρων συγκεντρώσεων ινσουλίνης σε κύτταρα LNCaP με κηλίδα western. PPIA έχει χρησιμοποιηθεί ως πρωτεΐνη αναφοράς καθαριότητας. (C) Τα επίπεδα Φωσφορυλίωση IRS-1 και PS6 σε κύτταρα LNCaP αγωγή επί 4 ημέρες με διαφορετικές συγκεντρώσεις ινσουλίνης μετρήθηκαν με κηλίδωση Western. PPIA έχει χρησιμοποιηθεί ως μια πρωτεΐνη αναφοράς καθαριότητας.

Η

Αύξηση συγκεντρώσεις γλυκόζης ρυθμίζουν προς τα κάτω AR σε LNCaP κύτταρα

Είμαστε δίπλα ήθελε να μελετήσει τα αποτελέσματα της υπεργλυκαιμίας στα επίπεδα AR χρησιμοποιώντας κύτταρα LNCaP. LNCaP κύτταρα καλλιεργήθηκαν με αυξανόμενες συγκεντρώσεις γλυκόζης (5 mM, 10 mM και 30 mM) κατά τη διάρκεια τεσσάρων ημερών. Το μέσο αλλάχθηκε καθημερινά για να διατηρήσει σταθερή συγκεντρώσεις γλυκόζης. επίπεδα AR mRNA μειώθηκαν σημαντικά σε κύτταρα LNCaP καλλιεργήθηκαν σε 10 ή 30 mM γλυκόζη σε σύγκριση με τα κύτταρα LNCaP καλλιεργήθηκαν σε 5 mM γλυκόζη (Εικόνα 2Α). Επιπλέον, τα επίπεδα πρωτεΐνης AR ήταν επίσης σημαντικά μειωμένη σε κύτταρα LNCaP καλλιεργήθηκαν σε 10 ή 30 mM γλυκόζη σε σύγκριση με κύτταρα LNCaP καλλιεργήθηκαν σε 5 mM γλυκόζη (Σχήμα 2Β). Για να αποκλειστεί οποιαδήποτε οσμωτική επίδραση της γλυκόζης, επαναλάβαμε τα πειράματα χρησιμοποιώντας L-γλυκόζη και δεν βρήκαμε καμία μείωση στα επίπεδα πρωτεΐνης AR (τα δεδομένα δεν παρουσιάζονται).

(Α) Σχετικά επίπεδα AR mRNA σε παρουσία οι διαφορετικών συγκεντρώσεων ϋ-γλυκόζης απεικονίζεται. mRNA του Ανθρώπου 18S ενισχύθηκε ως έλεγχος. Τα σημεία των δεδομένων δείχνονται ως μέση τιμή ± SD του τριπλούν. (Β) Ανάλυση των επιπέδων της πρωτεΐνης AR στην παρουσία διαφορετικών συγκεντρώσεων ϋ-γλυκόζης σε κύτταρα LNCaP με κηλίδα western. PPIA έχει χρησιμοποιηθεί ως μια πρωτεΐνη αναφοράς καθαριότητας.

Η

Η συνεργική δράση της υψηλής γλυκόζης Συγκεντρώσεις και TNFα στην ρύθμιση προς τα κάτω του AR σε LNCaP κύτταρα

Οι διαβητικοί ασθενείς χαρακτηρίζονται από ένα ορισμένο κατάσταση του χαμηλού βαθμού φλεγμονής και παρουσιάζουν υψηλά επίπεδα κυκλοφορούντος TNF-α σε σύγκριση με μάρτυρες. Συνεπώς, θέλαμε να μελετηθεί η επίδραση της προσθήκης ΤΝΡ-α σε μας

in vitro

σύστημα. Για το σκοπό αυτό επαναλήφθηκε τις θεραπείες γλυκόζης παρουσία ή απουσία του ΤΝΡ-α (50 ng /ml). Τα αποτελέσματα έδειξαν ότι και πάλι AR mRNA και τα επίπεδα της πρωτεΐνης μειώθηκαν σημαντικά όταν τα κύτταρα καλλιεργήθηκαν σε 10 ή 30 mM γλυκόζη σε σύγκριση με κύτταρα LNCaP καλλιεργήθηκαν σε 5 mM γλυκόζης. Αξίζει να σημειωθεί ότι, ένας ισχυρός συνεργική επίδραση που οδηγεί σε σημαντική περαιτέρω μείωση των δύο επίπεδα AR mRNA και η πρωτεΐνη ελήφθη όταν ΤΝΡα προστέθηκε σε διαφορετικές συγκεντρώσεις ϋ-γλυκόζης σε κύτταρα LNCaP (Σχήμα 3Α και Β).

(Α) Σχετικά επίπεδα AR mRNA σε LNCaP αγωγή με μία αυξανόμενη συγκέντρωση της D-γλυκόζης με ή χωρίς TNFa. Ανθρώπινα 18 S mRNA ενισχύθηκε ως έλεγχος. Τα σημεία των δεδομένων δείχνονται ως μέση τιμή ± SD του τριπλούν. * Ρ & lt? 0.05 και ** Ρ & lt? 0,01 σε σύγκριση με 5 mM ϋ-γλυκόζη. (Β) Ανάλυση των επιπέδων της πρωτεΐνης AR σε κύτταρα LNCaP αντιμετωπίζονται ως το Α μετριέται με κηλίδωση Western χρησιμοποιώντας PPIA ως πρωτεΐνη αναφοράς καθαριότητας.

Η

Υπεργλυκαιμία ρυθμίζει προς τα κάτω AR μέσω NF-κΒ ενεργοποίησης σε LNCaP κύτταρα

για να εξεταστεί κατά πόσον η υπεργλυκαιμία ήταν σε θέση να ρυθμίζουν προς τα κάτω AR μέσω της ενεργοποίησης του NF-κΒ σε μας

in vitro

σύστημα εκτελέσαμε τα ακόλουθα πειράματα.

πρέπει πρώτα επεξεργασμένα κύτταρα LNCaP με 5 mm και 30 mM γλυκόζης και τα επίπεδα του mRNA του AR αναλύθηκαν κατά την έναρξη και μετά από 4 ημέρες καλλιέργειας. Τα αποτελέσματα έδειξαν ότι 30 mM γλυκόζης ήταν σε θέση να μειώσουν τα επίπεδα AR mRNA όταν συγκρίνονται με κύτταρα LNCaP αναπτύχθηκαν σε 5 mM γλυκόζη (Σχήμα 4Α). Τα επίπεδα πρωτεΐνης AR μειώθηκαν επίσης σε κύτταρα LNCaP αναπτύχθηκαν σε 30 mM γλυκόζης σε σύγκριση με 5 mM γλυκόζη. Το πιο σημαντικό, μία αύξηση στην φωσφορυλίωση ρ65, μία υπομονάδα ΝΡ-κΒ, ανιχνεύθηκε επίσης σε κύτταρα που αναπτύχθηκαν σε 30 mM γλυκόζης σε σύγκριση με τα κύτταρα αναπτύχθηκαν σε 5 mM γλυκόζη (Σχήμα 4Β).

(Α) Σχετική AR mRNA επίπεδα σε LNCaP σε επεξεργασία με 5 mM ή 30 mM γλυκόζης. Ανθρώπινα 18 S mRNA ενισχύθηκε ως έλεγχος. Τα σημεία των δεδομένων δείχνονται ως μέση τιμή ± SD του τριπλούν. * P & lt? 0.05 και ** Ρ & lt? 0,01 σε σύγκριση με 5 mM γλυκόζης. (Β) Ανάλυση AR και φωσφο-ρ-65 επίπεδα πρωτεΐνης σε κύτταρα LNCaP επεξεργασία όπως στο Α μετράται με κηλίδωση Western χρησιμοποιώντας PPIA ως πρωτεΐνη αναφοράς καθαριότητας. (Γ) Σχετικά επίπεδα AR mRNA σε LNCaP σε επεξεργασία με 5 mM ή 30 mM γλυκόζη εν τη απουσία ή παρουσία QNZ (25 ηΜ). Ανθρώπινα 18 S mRNA ενισχύθηκε ως έλεγχος. Τα σημεία των δεδομένων δείχνονται ως μέση τιμή ± SD του τριπλούν. * P & lt? 0.05 και ** Ρ & lt? 0,01 σε σύγκριση με 5 mM γλυκόζης. (Δ) ανάλυση των επιπέδων πρωτεΐνης AR σε κύτταρα LNCaP αντιμετωπίζονται ως το C μετριέται με κηλίδωση Western χρησιμοποιώντας PPIA ως πρωτεΐνη αναφοράς καθαριότητας.

Η

Είμαστε δίπλα αποφάσισε να θεωρήσει κύτταρα LNCaP με 5 mM ή 30 mM γλυκόζης με την παρουσία ή απουσία του QNZ (25 ηΜ), ενός αναστολέα του ΝΡ-κΒ. Τα αποτελέσματα έδειξαν ότι QNZ συν-θεραπείας ήταν σε θέση να εμποδίσουν την υπεργλυκαιμία που προκαλείται από προς τα κάτω ρύθμιση του AR mRNA και τα επίπεδα της πρωτεΐνης (Σχήμα 4C και D).

στρεπτοζοτοκίνη επαγόμενη Diabetes (STZ-DM) παράγει Καρκίνος του προστάτη (PCA ) καθυστέρηση της ανάπτυξης σε ένα PAC120 Mouse Μοντέλο

Είμαστε δίπλα θέλησε να μελετήσει αν υπεργλυκαιμία από μόνη της θα μπορούσε να προστατεύσει από την ανάπτυξη του καρκίνου του προστάτη

in vivo

. Για να το κάνετε αυτό, χρησιμοποιήσαμε ένα μοντέλο ποντικού PAC120 προστάτη με STZ-DM. Για το σκοπό αυτό ενδοπεριτοναϊκή ένεση STZ χορηγήθηκε σε γυμνούς ποντικούς swiss πριν (n = 7) και μετά (η = 7) υποδορίως εμφύτευση PAC120 όγκου. Μη επεξεργασμένα (n = 5) και το κιτρικό αγωγή (n = 5) ποντίκια χρησιμοποιήθηκαν ως μάρτυρες. Μη επεξεργασμένα και ποντίκια κιτρικό αγωγή έδειξε παρόμοια ανάπτυξη του όγκου (Σχήμα 5λε), ενώ τα ποντίκια από STZ DM επέδειξαν μειωμένη ανάπτυξη του όγκου (Σχήμα 5Αϋ) ή καμία ανάπτυξη του όγκου (Σχήμα 5Aiii).

(Α) Εικόνες των όγκων αναπτύχθηκαν σε ποντίκια που έλαβαν φορέα (n = 5) (i), STZ κατεργασία μετά ή πριν από την εμφύτευση του όγκου (η = 7 για τα δύο) με μειωμένη (ii) ή όχι την ανάπτυξη του όγκου (iii). (Β) Σύγκριση του μεγέθους του όγκου για μη επεξεργασμένα (n = 5) και (η = 5) ποντικούς κιτρικό αντιμετωπίζεται. (Γ) Ο όγκος του όγκου των ζώων που έλαβαν STZ μετά την εμφύτευση του όγκου σε σύγκριση με τον όγκο του όγκου των ποντικών που έλαβαν κιτρικό. (Δ) Ο όγκος του όγκου των ζώων που STZ-επεξεργασία πριν την εμφύτευση του όγκου σε σύγκριση με τον όγκο του όγκου των ποντικών που έλαβαν κιτρικό. Τα δεδομένα είναι μέσες ± SD. * Ρ & lt? 0.05 και ** Ρ & lt?. 0.01 σε σύγκριση με τον έλεγχο

Η

Η ανάπτυξη όγκου ακολουθήθηκε από μέτρηση όγκων του όγκου μία φορά την εβδομάδα. Μη επεξεργασμένα και ποντίκια κιτρικό αγωγή έδειξαν παρόμοια αύξηση κατά τη διάρκεια του πειράματος των 40 ημερών (Σχήμα 5Β). Αμφότερες οι ομάδες των διαβητικών ποντικών έδειξαν μειωμένη ανάπτυξη του όγκου σε σύγκριση με τους ποντικούς ελέγχου (Σχήμα 5C και D). Οι ποντικοί που ήταν διαβητικοί πριν από την εμφύτευση του όγκου (Σχήμα 5D) έδειξε μια υψηλότερη μείωση στην ανάπτυξη του όγκου σε σύγκριση με τα ποντίκια που ήταν διαβητικοί μετά την εμφύτευση του όγκου (Σχήμα 5C).

στρεπτοζοτοκίνη επαγόμενη Diabetes (STZ-DM) Μειώνει AR Έκφραση σε όγκους και ενδογενής προστάτες του PAC120 μοντέλου ποντικού

η ιστολογική εξέταση του αιματοξυλίνη /ηωσίνη (ΗΕ) χρωματίζονται τμήματα από τις δύο ομάδες διαβητικών ποντικών (Σχήμα 6G και J) δεν έδειξε καμία μορφολογικές αλλαγές στον όγκο σε σχέση με στους ελέγχους ή κιτρικό αγωγή ποντίκια (Σχήμα 6Α και D). Έδειξαν σπάνιες αδενική διαφοροποίηση, υψηλού δείκτη μιτωτικά και ταξινομήθηκαν ως Gleason 9 (4 + 5) από τον παθολογοανατόμο.

(Α) HE χρώση των ξενομοσχευμάτων όγκου του προστάτη από ποντικούς ελέγχου, (D) ποντικοί κιτρικό αγωγή, (G) STZ-επεξεργασία πριν την εμφύτευση του όγκου και (J) STZ που έλαβαν μετά την εμφύτευση του όγκου. (Β) χρώση AR ξενομοσχευμάτων όγκου προστάτη από μη επεξεργασμένα ποντίκια, (Ε) ποντικοί κιτρικό αγωγή, (H) STZ ποντίκια με αγωγή πριν από την εμφύτευση του όγκου και (Κ) STZ ποντίκια με αγωγή μετά την εμφύτευση του όγκου. (Γ) κυτοκερατίνης χρώση των ξενομοσχευμάτων όγκου του προστάτη από ποντικούς ελέγχου, (F) ποντικοί κιτρικό αγωγή, (Ι) STZ ποντίκια με αγωγή πριν από την εμφύτευση του όγκου και (L) ποντικούς STZ που έλαβαν μετά την εμφύτευση του όγκου.

Η

Από

in vitro

πειράματά μας έδειξαν ότι η υπεργλυκαιμία μειωμένα επίπεδα AR αποφασίσαμε να διερευνήσει τη δυνατότητα που STZ-γερμανικών μάρκων που επηρεάζουν τα επίπεδα AR

in vivo

. Πραγματοποιήσαμε ανοσοϊστοχημεία έναντι του υποδοχέα ανδρογόνων, στους όγκους του ελέγχου και διαβητικούς ποντικούς. Τα ζώα ελέγχου εμφάνισαν θετική και ισχυρή πυρηνική χρώση για τον υποδοχέα ανδρογόνων σε όλα τα επιθηλιακά κύτταρα (Σχήμα 6Β και Ε). Διαβητικοί ποντικοί έδειξαν επιθηλιακά κύτταρα χωρίς χρώση ή λίγα κύτταρα με χρώση πυρηνικό ή κυτταροπλασματικό AR, αλλά η πλειοψηφία των κυττάρων ήταν αρνητικά AR (Σχήμα 6Η και Κ). Επιβεβαιώσαμε ότι οι αρνητικές AR κύτταρα του επιθηλίου εκτελώντας μια ανοσοϊστοχημεία έναντι παν-κυτοκερατίνη στους όγκους ελέγχου, κιτρικό και STZ-DM ποντίκια (Σχήμα 6C, F, I, L).

επόμενο μετριέται AR mRNA επίπεδα σε ξενομοσχεύματα από τον έλεγχο και ποντικούς STZ-DM και βρήκαμε ότι η υπεργλυκαιμία μειώνει τα επίπεδα AR mRNA σε όγκους ποντικών STZ-DM, σε σύγκριση με τα ποντίκια ελέγχου (Εικόνα 7Α). Επιπλέον, όπως συμβαίνει στα κύτταρα LNCaP μια προς τα κάτω ρύθμιση των επιπέδων AR συνοδεύτηκε από αύξηση της φωσφορυλίωσης p65, μια υπομονάδα ΝΡ-κΒ, σε ξενομοσχεύματα από ποντίκια STZ-DM (Figure7B).

(Α) Σχετική AR mRNA επίπεδα για το κιτρικό και STZ-ποντίκια με αγωγή. Ανθρώπινα 18 S mRNA ενισχύθηκε ως έλεγχος. Τα σημεία των δεδομένων δείχνονται ως μέση τιμή ± SD του τριπλούν. (Β) Ανάλυση του AR (αριστερό πάνελ) και τα επίπεδα πρωτεΐνης από κιτρικά και STZ-ποντίκια με αγωγή μετρήθηκαν με κηλίδωση Western χρησιμοποιώντας PPIA ως πρωτεΐνη αναφοράς housekeeping φωσφο-ρ-65 (δεξιά πλευρά).

Η

Τέλος, βάφονται τα ενδογενή προστάτες ελέγχου και στις δύο ομάδες διαβητικών ποντικών για να διερευνηθεί κατά πόσον η υπεργλυκαιμία ρυθμίζει προς τα κάτω και τα ενδογενή επίπεδα AR. Πράγματι, η χρώση AR μειώθηκε σε προστάτες των ποντικών STZ-DM, σε σύγκριση με τους ποντικούς ελέγχου (Σχήμα 8).

χρώση AR εμφανίζεται σε όγκους ξενομοσχεύματος προστάτη (i) και με ενδογενή προστάτες (ii) από ποντίκια ελέγχου. χρώση AR εμφανίζεται σε όγκους ξενομοσχεύματος προστάτη (iii) και ενδογενείς προστάτη (iv) από STZ- ποντίκια με αγωγή.

Η

Συζήτηση

προστάτη είναι η πιο κοινή μορφή καρκίνου συμπαγών οργάνων σε άνδρες με τις ΗΠΑ, τον Καναδά και την Αυστραλία, και η δεύτερη πιο κοινή μορφή καρκίνου στους άνδρες παγκοσμίως. ΗΠΑ οι άνδρες έχουν ένα τρέχον εκτιμώμενο κίνδυνο της ζωής του ένας στους έξι και προστάτη αντιπροσωπεύει, μετά τον καρκίνο του πνεύμονα, η δεύτερη κύρια αιτία θνησιμότητας σχετίζονται με τον καρκίνο [1]. Ιδρύθηκε παράγοντες κινδύνου του προστάτη είναι μεγαλύτερης ηλικίας, Αφροαμερικανός εθνικότητα και ένα ιστορικό της νόσου σε συγγενή πρώτου βαθμού. T2D έχει συσχετιστεί με χαμηλό κίνδυνο εμφάνισης προστάτη και αυτό έχει επιβεβαιωθεί πρόσφατα σε μια μετα-ανάλυση που περιελάμβανε 29 κοόρτης και 16 μελέτες ασθενών-μαρτύρων που αφορούν 8,1 εκατομμύρια συμμετέχοντες και 132.331 περιπτώσεις προστάτη [34]. Τα ευρήματά μας δώσει την πρώτη πειραματική υποστήριξη σε αυτή την ιδέα.

Το μονοπάτι AR διαδραματίζει καίριο ρόλο στη δομική και λειτουργική ακεραιότητα του προστάτη, καθώς και για την ανάπτυξη και την εξέλιξη [15] του προστάτη. Από αυτή την άποψη, έχει αναφερθεί ότι η knockdown του AR οδηγεί σε αναστολή της ανάπτυξης και την απόπτωση των δύο εξαρτώμενων από ανδρογόνα και μη εξαρτώμενου από ανδρογόνα κύτταρα προστάτη [35] – [37]. Ωστόσο, η επίδραση του διαβήτη στην AR και ανάπτυξη του όγκου δεν είχε ποτέ διερευνηθεί. Στην παρούσα μελέτη παρέχουμε πρώτη απόδειξη ότι η υπεργλυκαιμία ρυθμίζει προς τα κάτω AR μέσω της ενεργοποίησης του ΝΡ-κΒ, και ότι αυτή η ανασταλτική δράση αυξάνεται περαιτέρω από τον TNFa. Επιπλέον, βρήκαμε ότι αυτή η προς τα κάτω ρύθμιση του AR που προκαλείται από το διαβήτη σχετίζεται με σημαντική καθυστέρηση της ανάπτυξης του όγκου σε ένα

in vivo

μοντέλο του προστάτη. Θα ήθελα να επισημάνω ότι στις

in vitro

πειράματα που έχουμε συγκεντρώσει είναι πάντα συνεπή αποτελέσματα από την άποψη της γλυκόζης που προκαλείται από τη μείωση των επιπέδων AR. Ωστόσο, έχουμε ανιχνευθεί μία σημαντική μεταβλητότητα στην έκταση της μείωσης των επιπέδων AR που προκαλούνται από τη θεραπεία της γλυκόζης.

Η γενετική ευαισθησία και χαμηλά επίπεδα ινσουλίνης, IGF-1 και τεστοστερόνης είναι μεταξύ των προτεινόμενων παραγόντων που παρέχουν προστασία για την PCA σε διαβήτη τύπου 2. Αντιθέτως, ο πιθανός ρόλος των δύο ουσιώδη γεγονότα που συμβαίνουν στο διαβήτη τύπου 2: υπεργλυκαιμία και η αύξηση των προφλεγμονωδών κυτταροκινών (δηλ. TNFα) δεν έχουν εξεταστεί στο παρελθόν

προστάτη έχει μια από τις ισχυρότερες σχέσεις μεταξύ της ηλικίας για οποιονδήποτε. ανθρώπινου καρκίνου, καθώς και γενετικοί παράγοντες υπολογίζεται ότι αντιπροσωπεύουν το 42% του κινδύνου [15]. Είναι πιθανό ότι η παρουσία γενετικών παραγόντων όπως TCF2 παραλλαγές, οι οποίες συνδέονται τόσο με T2D και του χαμηλού κινδύνου προστάτη συμμετέχουν στην χαμηλό κίνδυνο προστάτη παρατηρούνται T2D [20]. Ωστόσο, η χρονική σχέση μεταξύ διάγνωσης DM και τον κίνδυνο του προστάτη (ως χρόνος δεδομένου ότι οι αυξήσεις DM-διάγνωση, ο κίνδυνος του προστάτη μειώνεται) υποστηρίζει σθεναρά εναντίον αυτής της έννοιας [4]. Προς υποστήριξη αυτού βρήκαμε μια χαμηλότερη ανάπτυξη του προστάτη xenofraft στην ομάδα των ποντικών με μεγαλύτερη διάρκεια του σακχαρώδη διαβήτη.

Η ινσουλίνη είναι ένας αυξητικός παράγοντας για προστατικό επιθήλιο και διεγείρει επίσης την ανάπτυξη ενός αρουραίου κυτταρική γραμμή προστάτη in vitro [38]. Πιο πρόσφατα, μια πειραματική μελέτη ανέφερε ενδοκυτταρική

de novo

στεροειδογένεση που προωθείται από την ινσουλίνη στον προστάτη [39], αλλά η επίδραση στο AR δεν ήταν αναλυθεί. Αυτά τα αποτελέσματα υποδηλώνουν ότι η ινσουλίνη μπορεί να προωθούν άμεσα τον πολλαπλασιασμό των κυττάρων καρκίνου του προστάτη. Ωστόσο, αυτές οι παρατηρήσεις βασίζονται σε ένα πειραματικό μοντέλο για ευνουχισμό ανθεκτικά καρκίνο του προστάτη, και η δράση της ινσουλίνης επί ογκογένεση του προστάτη κατά την πρώιμη φάση ή σε ορμόνη-αφελή καρκίνου (όπως LNCaP) παραμένει να διευκρινιστεί. Επιπλέον, οι δόσεις ινσουλίνης που χρησιμοποιήθηκαν ήταν supraphysiological και περαιτέρω μελέτες χρησιμοποιώντας δόσεις ινσουλίνης στο picomolar εύρους (όπως χρησιμοποιήθηκε στην παρούσα μελέτη) απαιτούνται. Στο κλινικό περιβάλλον, ενώ κάποιες προοπτικές μελέτες δείχνουν ότι μπορεί να υπάρχει μια σχέση μεταξύ υπερινσουλιναιμία και τον κίνδυνο του προστάτη, υπάρχουν επίσης αρκετές μελέτες που δεν υποστηρίζουν ένα ρόλο για την ινσουλίνη σε προστάτη του κινδύνου και έτσι συνεχίζει να είναι μια περιοχή της έρευνας [4 ], [15]. Παρ ‘όλα αυτά, η εξάντληση της ινσουλίνης που συμβαίνουν με την αύξηση της διάρκειας του διαβήτη μπορεί να περιορίσει τη δράση της ινσουλίνης και ως εκ τούτου προστατεύουν από ΣΕΣΣ. Από αυτή την άποψη, οι άνδρες με χαμηλά επίπεδα ινσουλίνης λόγω του διαβήτη φαίνεται να έχουν μειωμένο κίνδυνο ανάπτυξης προστάτη [40], [41]. Στην πραγματικότητα, τα χαμηλά επίπεδα της ινσουλίνης θα μπορούσε να είναι ένας παράγοντας που συμβάλλει εμπλέκεται στην κατώτερη ανάπτυξης του όγκου που παρατηρείται σε PAC120 PCa ποντίκια που έλαβαν θεραπεία με STZ που χρησιμοποιείται στην παρούσα μελέτη.

Μια προτεινόμενη υπόθεση για το πώς μπορεί να μειωθεί υποϊνσουλιναιμία καρκινογένεση προστάτη είναι περιορίζοντας την βιοδιαθεσιμότητα της ινσουλίνης αυξητικού παράγοντα Ι (IGF-I) [15]. Ωστόσο, πρόσφατες μελέτες δείχνουν ότι τα επίπεδα του IGF-1 δεν είναι σημαντικά διαφορετικές μεταξύ τους διαβητικούς και τους ελέγχους [41], [42]. Επιπλέον, μια πρόσφατη μεγάλη προοπτική μελέτη κατέληξε στο συμπέρασμα την απουσία συσχέτισης μεταξύ του IGF-1 επίπεδα στο πλάσμα και την αντίσταση στην ινσουλίνη [42]. Ως εκ τούτου, η ένωση IGF-1-PCA σε τύπου 2 διαβητικό πληθυσμό παραμένει θεωρητική.

Από το PCA είναι εξαρτώμενη από ανδρογόνο είναι πιθανό ότι τα χαμηλότερα επίπεδα της τεστοστερόνης που αναφέρονται στο διαβήτη μακροπρόθεσμα (κυρίως παχύσαρκοι άνδρες) μπορούν να φθάσει σε επίπεδα κάτω από το όριο σε χαμηλότερο κίνδυνο προστάτη [4], [15]. Ωστόσο, είναι καλά αναγνωρισμένο ότι αφορούν ένα επίπεδο τεστοστερόνης ορού σε ένα κλινικό φαινότυπο είναι μία υπεραπλούστευση, δεδομένου ότι τα κυκλοφορούντα επίπεδα τεστοστερόνης, είτε δωρεάν είτε σύνολο, είναι απίθανο να αντικατοπτρίζει με ακρίβεια δράση των ανδρογόνων στο επίπεδο των ιστών. Παρ ‘όλα αυτά, ορισμένα στοιχεία δείχνουν ότι τα χαμηλά επίπεδα κυκλοφορούντων τεστοστερόνης μπορεί να είναι ένας παράγοντας κινδύνου για την PCA επιθετικότητα [43], [44] και αυτό μπορεί να είναι ένας λόγος για τον οποίο, όταν εμφανίζεται PCA σε διαβήτη τύπου 2 έχει μια χειρότερη έκβαση [15], [44]. Από την άποψη αυτή, είναι πιθανό ότι τα χαμηλά επίπεδα AR λόγω της υπεργλυκαιμίας, τα υψηλά επίπεδα ΤΝΡα και χαμηλά επίπεδα τεστοστερόνης, εκτός από προσδίδει προστασία έναντι της ανάπτυξης του προστάτη θα μπορούσε επίσης να λειτουργήσει ως μηχανισμός για την οδήγηση των κυττάρων του προστάτη έναντι κάποιου βαθμού ανεξαρτησία από ανδρογόνα. Στην πραγματικότητα, η ενεργοποίηση του NF-κΒ έχει εμπλακεί στην ανδρογόνων-ανεξάρτητη ανάπτυξη του προστάτη [45]. Μόλις ΠΑΠ που αναπτύσσεται σε ασθενείς με σακχαρώδη διαβήτη τύπου 2, αυτό θα μπορούσε να εξηγήσει την επιθετικότητα και την κακή έκβαση της [9] – [11]. Σε κάποιο βαθμό, αυτό θα μπορούσε να συμβεί και σε παχύσαρκους ασθενείς, δεδομένου ότι η παχυσαρκία μπορεί να μειώσει τον κίνδυνο της μη επιθετική προστάτη, ενώ ταυτόχρονα προωθώντας τον κίνδυνο επιθετικής προστάτη [46], [47].

Οι μηχανισμοί που βρίσκονται πίσω υπεργλυκαιμία σχετικά με τη ρύθμιση AR δεν έχουν αναφερθεί στο παρελθόν. Στην παρούσα μελέτη βρήκαμε ότι η υπεργλυκαιμία ρυθμίζει προς τα κάτω AR μέσω της ενεργοποίησης του ΝΡ-κΒ, και ότι αυτή η ανασταλτική δράση αυξάνεται περαιτέρω από τον TNFa. Επιπλέον, η ρύθμιση προς τα κάτω του AR που προκαλείται από το διαβήτη συσχετίστηκε με μείωση της ανάπτυξης του όγκου ή ακόμη και χωρίς την ανάπτυξη του όγκου στο μοντέλο ποντικού PAC120 προστάτη που έλαβαν θεραπεία με STZ. Επιπλέον, ανιχνεύθηκε μία σημαντική μείωση στην έκφραση AR στο ενδογενές προστάτες αυτού του

in vivo

μοντέλο. Συνολικά, τα αποτελέσματα μας δείχνουν ότι δύο βασικές συνιστώσες του T2D: υπεργλυκαιμία και η προφλεγμονώδης κυτοκίνη ΤΝΡα συμμετέχει στην μείωση του κινδύνου PCA σε T2DM.