Αφηρημένο

Ιστορικό

Φυσικό κυτταροτοξικότητα, με τη μεσολάβηση των φυσικών φονικών κυττάρων (ΝΚ) διαδραματίζει σημαντικό ρόλο στην παρεμπόδιση και την εξάλειψη των κακοηθών κυττάρων του όγκου. Για τη διερεύνηση της ανοσορυθμιστική ρόλο των ΝΚ κυττάρων και των δυνατοτήτων τους ως διαγνωστικοί δείκτες, τη δραστηριότητα των κυττάρων ΝΚ (ΝΚΑ) αναλύθηκε στον καρκίνο του προστάτη (PCA) των ασθενών, με ιδιαίτερη έμφαση στην ΝΚ κυτταρική κατανομή υποσύνολο.

Μέθοδοι

Υποψήφιοι δεδομένων των προτύπων κατανομής των κυττάρων υποσύνολο ΝΚΑ και ΝΚ μετρήθηκαν από 51 ασθενείς αρχικά διαγνωστεί με προστάτη και 54 υγιείς μάρτυρες. ΝΚΑ εκπροσωπήθηκε από τα επίπεδα IFN-γ μετά από διέγερση του περιφερικού αίματος με Promoca®. Για να προσδιοριστεί η κατανομή των υποομάδων κυττάρων ΝΚ, PBMCs χρωματίστηκαν με μονοκλωνικά αντισώματα συζευγμένο με ένα φθοριόχρωμα. Στη συνέχεια, CD16

+ CD56

αμυδρό και CD16

-CD56

φωτεινά κύτταρα CD56 περίφραξη σε

+ CD3

-. Κύτταρα αναλύθηκαν χρησιμοποιώντας ένα κυτταρόμετρο ροής

Αποτελέσματα

ΝΚΑ και το ποσοστό των CD56

φωτεινά κύτταρα ήταν σημαντικά χαμηλότερη στους ασθενείς του προστάτη σε σύγκριση με τους μάρτυρες (430,9 pg /ml έναντι 975,2 pg /ml και 2,3% έναντι 3,8%, αντίστοιχα?

p & lt? 0.001

). Τόσο έτεινε να μειώνεται σταδιακά ανάλογα με την πρόοδο στάδιο του καρκίνου (

σ

για τάση =

0.001

). Ένα σημαντικά υψηλότερο CD56

dim-to-CD56

φωτεινό αναλογία των κυττάρων παρατηρήθηκε σε ασθενείς προστάτη (41.8 έναντι 30.3?

p & lt? 0.001

) μαζί με μια σταδιακή αύξηση, σύμφωνα με τον καρκίνο στάδιο εξέλιξης (

σ

για τάση =

0.001

), γεγονός που συνεπάγεται σημαντική μείωση των CD56

φωτεινά κύτταρα σε σχέση με τη μεταβολή του CD56

dim κύτταρα. Η ευαισθησία και η ειδικότητα της ΝΚΑ σχετικά με την ανίχνευση του προστάτη ήταν 72% και 74%, αντίστοιχα (καλύτερη τιμή αποκοπής στα 530,9 pg /ml, AUC = 0,786).

Συμπεράσματα

Μείωση της CD56

φωτεινά κύτταρα μπορεί να προηγείται της δυσλειτουργίας των κυττάρων ΝΚ, που οδηγεί σε διαταραγμένη κυτταροτοξικότητα εναντίον κυττάρων του προστάτη. Αυτές οι παρατηρήσεις μπορεί να εξηγήσει έναν από τους μηχανισμούς πίσω από δυσλειτουργία των κυττάρων ΝΚ που παρατηρείται σε προστάτη μικροπεριβάλλον και να υποστηρίξει την ανάπτυξη των μελλοντικών στρατηγικών για τον καρκίνο ανοσοθεραπευτική

Παράθεση:. Koo KC, Shim DH, Yang CM, Lee SB, Κιμ SM , Shin TY, et al. (2013) Μείωση του CD16

-CD56

φωτεινό ΝΚ κυττάρων υποομάδα Προηγείται ΝΚ κυττάρων δυσλειτουργία στον καρκίνο του προστάτη. PLoS ONE 8 (11): e78049. doi: 10.1371 /journal.pone.0078049

Συντάκτης: Stephanie Filleur, Texas Tech University Κέντρο Επιστημών Υγείας, Ηνωμένες Πολιτείες της Αμερικής

Ελήφθη: 12 Ιουνίου, 2013? Αποδεκτές: 8, Σεπτεμβρίου του 2013? Δημοσιεύθηκε: 4 Νοεμβρίου, 2013

Copyright: © 2013 Koo et al. Αυτό είναι ένα άρθρο ανοικτής πρόσβασης διανέμεται υπό τους όρους της άδειας χρήσης Creative Commons Attribution, το οποίο επιτρέπει απεριόριστη χρήση, τη διανομή και την αναπαραγωγή σε οποιοδήποτε μέσο, ​​με την προϋπόθεση το αρχικό συγγραφέα και την πηγή πιστώνονται

Χρηματοδότηση:. Αυτό το έργο υποστηρίχθηκε από τη Βασική Επιστήμη ερευνητικό πρόγραμμα μέσω του Εθνικού Ιδρύματος Ερευνών της Κορέας που χρηματοδοτείται από το Υπουργείο Παιδείας, Επιστημών και Τεχνολογίας (2012 – 0.000.807). Οι χρηματοδότες δεν είχε κανένα ρόλο στο σχεδιασμό της μελέτης, τη συλλογή και ανάλυση των δεδομένων, η απόφαση για τη δημοσίευση, ή την προετοιμασία του χειρογράφου

Αντικρουόμενα συμφέροντα:. Ο συγγραφέας, SMK, είναι ένας εργαζόμενος σε ATgen που βοήθησαν με την πειραματική διαδικασία. Ωστόσο, αυτό δεν αλλάζει την τήρηση των συγγραφέων σε όλες τις PLoS ONE πολιτικές για την ανταλλαγή δεδομένων και υλικών.

Εισαγωγή

κύτταρα φυσικοί φονείς (ΝΚ) εξυπηρετούν ένα σημαντικό ρόλο στην έμφυτη και προσαρμοστική ανοσοαποκρίσεις έναντι μετασχηματισμός όγκου ή κύτταρα παθογόνου μολυσμένα [1]. ΝΚ κύτταρα ασκούν φυσική κυτταροτοξικότητα για την εξάλειψη των κακοηθών κυττάρων χωρίς προηγούμενη ευαισθητοποίηση ή τάξης Ι MHC περιορισμού [1], [2]. Περαιτέρω, ΝΚ κύτταρα διεγείρουν την προσαρμοστική άνοση απόκριση με την έκκριση προφλεγμονωδών κυτταροκινών για την εξουδετέρωση των μηχανισμών διαφυγής προωθούνται από κύτταρα όγκου [3]. Έχει σημειωθεί πρόοδος στην κατανόηση της βιολογίας των κυττάρων ΝΚ? ωστόσο, περαιτέρω διευκρινίσεις παραμένει σχετικά αποτελέσματα αντι-όγκου δραστηριότητας ΝΚ κυττάρων (ΝΚΑ) και τα πρότυπα της διανομής υποσύνολο στην ΣΕΣΣ. Τα κύτταρα

NK ορίζεται φαινοτυπικά από την έκφραση του CD56 και η έλλειψη έκφρασης CD3 [4]. Σύμφωνα με πυκνότητες μεμβράνη των CD56 και CD16, τα κύτταρα ΝΚ ταξινομούνται σε CD16

+ CD56

αμυδρό και CD16

-CD56

φωτεινό υποσύνολα [5]. Η πλειοψηφία είναι CD56

dim κύτταρα που ασκούν κατά κύριο λόγο ισχυρή κυτταροτοξικότητα [6]. Σε αντίθεση, CD56

φωτεινά κύτταρα διαμεσολαβούν χαμηλή κυτταροτοξικότητα αλλά αποκτούν μεγαλύτερη κυτταρολυτική δράση από CD56

dim κύτταρα κατά την ενεργοποίηση λόγω της απελευθέρωσης των προφλεγμονωδών κυτοκινών όπως IFN-γ [7]. Το επίπεδο της IFN-γ, δηλαδή, ΝΚΑ, συνδέεται γενικά με ογκολογικές πρόγνωση, η οποία συνεπάγεται τον ουσιαστικό ρόλο της διαφορικής ΝΚ έκφρασης κυττάρου υποσύνολο στο ανοσοποιητικό ρύθμιση των καρκινικών κυττάρων [8]. ΝΚΑ έχει δείξει να εξυπηρετούν ένα σημαντικό ρόλο στην επιτήρηση και στην εξάλειψη των καρκινικών κυττάρων [9]. Μελέτες έχουν δείξει ότι η χαμηλή ΝΚΑ οδηγεί σε υψηλά επίπεδα της εμφάνισης του όγκου και της μετάστασης, και ότι ο βαθμός συσχετίζεται με τη διεισδυτικότητα της κακοήθειας [10]. Αντιθέτως, η υψηλή ΝΚΑ έχει δειχθεί ότι συσχετίζεται με χαμηλότερη συχνότητα εμφάνισης όγκων, και διείσδυση τους σε ορισμένους όγκους, δηλαδή, το μελάνωμα, το κεφάλι και το λαιμό καρκινώματα πλακωδών κυττάρων, είναι ένας δείκτης για μια καλύτερη ογκολογική έκβαση [11], [12] .

υπάρχουν συσσωρευμένα στοιχεία ότι μια εξασθενημένη ανοσολογική απόκριση είναι ένας κρίσιμος παράγοντας στην παθογένεια του καρκίνου του προστάτη (PCA) [13], [14]. δυσλειτουργία των κυττάρων NK έχει ενοχοποιηθεί στην PCa μαζί με μια ποικιλία όγκων [15], [16]. Παρά τις αρκετές προτεινόμενων μηχανισμών, συμπεριλαμβανομένων του μειωμένου αριθμού, ανοσοκατασταλτικές κυτοκίνες, και ο υποδοχέας ρεπερτόριο ανισορροπία, η παθοφυσιολογία της δυσλειτουργίας των κυττάρων ΝΚ στον προστάτη δεν είναι πλήρως κατανοητός [5]. Όσον αφορά το ρόλο της ΝΚΑ σε καταστολή του όγκου, αξιοποιώντας τους μηχανισμούς των κυττάρων ΝΚ θα μπορούσε σαφώς να είναι ένα σημαντικό συστατικό για την επιτυχή ανοσοθεραπεία κατά της ΣΕΣΣ. Του ειδικού προστατικού αντιγόνου (PSA) είναι το πιο ευρέως χρησιμοποιούμενο δείκτη ορού που έχει ξεσηκώσει την έγκαιρη ανίχνευση και διαχείριση του προστάτη. Ωστόσο, η σχετική έλλειψη του καρκίνου ειδικότητα και την έλλειψη ενός άνω ή κάτω οριακή τιμή είναι σημαντικά μειονεκτήματα.

Για να αντιμετωπιστούν αυτά τα ζητήματα, ΝΚΑ και τις κατανομές των CD56

αμυδρό και CD56

φωτεινό υποσύνολα αναλύθηκαν μεταξύ των ασθενών του προστάτη και των ελέγχων. Τα ευρήματά μας δείχνουν ότι ανοσοποίησης στο PCA είναι μειωμένη λόγω της μείωσης της ΝΚΑ προηγηθεί η ανακατανομή των υποσυνόλων των κυττάρων ΝΚ. Επιπλέον, η αξιολόγηση των επιδόσεων των διαγνωστικών ΝΚΑ αποκάλυψε ότι μπορεί να εφαρμοστεί ως ένα υποστηρικτικό δείκτη εκτός από PSA.

Υλικά και Μέθοδοι

1. Οι ασθενείς και οι έλεγχοι

Αυτή η ανάλυση των προοπτικών της εγκάρσιας τομής συμμετέχουν 51 ασθενείς με νεοδιαγνωσμένο βιοψία προστάτη οφείλεται σε αύξηση του PSA σημειωθεί στις εξετάσεις για την υγεία από το Μάρτιο μέχρι τον Δεκέμβριο, 2012. 54 ηλικία μάρτυρες ήταν αυτο-εθελοντικά υγιή άτομα των οποίων προστάτη όγκου, PSA και δακτυλική εξέταση ήταν εντός των φυσιολογικών ορίων αποδεκτή. Κανένας από τους ασθενείς είχαν λάβει προηγούμενη θεραπεία για την PCA, ήταν γνωστό ότι έχουν ανοσολογική ή άλλες κακοήθεις συνθήκες, και ήταν όλοι χωρίς ενεργού λοίμωξης ή φλεγμονής όπως αξιολογείται με αριθμό λευκών αιμοσφαιρίων & lt? 10.000 κύτταρα /μl και η C-αντιδρώσα πρωτεΐνη & lt? 1,0 mg /L (Πίνακας 1). Όλοι οι έλεγχοι ήταν απαλλαγμένες από φλεγμονώδεις καταστάσεις, χωρίς προηγούμενη έκθεση σε ανοσοκατασταλτικών παραγόντων. Ανεξάρτητη έγκριση ελήφθη από επιτροπή Yonsei University Δεοντολογίας (4-2011-0660), με όλα τα δείγματα αίματος που συλλέχθηκαν μετά από ενημερωμένη συγκατάθεση πριν από ριζική προστατεκτομή. Όλοι οι συμμετέχοντες παρείχαν έγγραφη συγκατάθεση για συμμετοχή στην παρούσα μελέτη.

Η

2. ΝΚ κυττάρων Δραστηριότητα

Η κυτταροτοξική δράση των ΝΚ κυττάρων προσδιορίστηκε χρησιμοποιώντας την ΝΚ Vue-Kit® (ATgen, Sungnam, Κορέα). Ολικού αίματος συλλέχθηκαν με χρήση BD Vacutainer® ηπαρίνη

Ν1 σωλήνες. 1 ml πλήρους αίματος επωάστηκε για 24 ώρες, στους 37 ° C, υπό 5% CO

2 με ενδεικνυόμενη δόση Promoca® και 1 ml RPMI 1640. Ελεύθερα κυττάρων υπερκείμενα συλλέχθηκαν και τα επίπεδα ΙΡΝ-γ προσδιορίστηκαν σύμφωνα με τα πρωτόκολλα του κατασκευαστή.

3. NK Διανομής Κυττάρων υποομάδα

3.1. Προετοιμασία των PBMCs.

λήφθηκε και αναλύθηκε μέσα σε 4 ώρες από τη συλλογή 3 ml ηπαρινοποιημένου φλεβικού αίματος. PBMCs απομονώθηκαν με φυγοκέντρηση βαθμίδωσης πυκνότητας χρησιμοποιώντας σωλήνες κυτταρικό παρασκεύασμα ΟΡΤ® εμφανίζουν (BD Vacutainer®) στα 1600 g για 20 λεπτά στους 20 ° C. Τα συλλεχθέντα PBMCs (1-2 × 10

6 κύτταρα /ml) πλύθηκαν και επαναιωρήθηκαν σε 5% ορό εμβρύου μόσχου (FBS) + αλατόνερο ρυθμισμένο με φωσφορικό (PBS).

3.2. χρώση αντισώματος.

Για την έκφραση των CD3, CD16, CD56 και σε κύτταρα ΝΚ, PBMCs χρωματίστηκαν με Alexa-αντι-CD3, ΡΕ-αντι-CD16, και FITC-αντι-CD56 συζευγμένο με ένα φθοριόχρωμα μονοκλωνικά αντισώματα (BD Biosciences). Μετά από χρώση για 30 λεπτά στους 4 ° C, τα κύτταρα πλένονται εκτεταμένα και σταθεροποιήθηκαν σε 1% παραφορμαλδεϋδη-ΡΒδ μέχρι την αξιολόγηση.

3.3. Κυτταρομετρία ροής.

Για να προσδιοριστεί το συνολικό ποσοστό των κυττάρων ΝΚ περιφραγμένη στο CD3

-CD56

+ κυτταρικό πληθυσμό, τουλάχιστον 10.000 κύτταρα-στόχους αποκτήθηκαν από LSRII κυτταρομετρία ροής (BD Biosciences). Η κατανομή των CD16

+ CD56

dim ΝΚ κύτταρα και CD16

-CD56

φωτεινά κύτταρα ΝΚ περιφραγμένη από το CD3

-CD56

+ κυτταρικό πληθυσμό παρουσιάζεται ως ποσοστό των συνολικών ΝΚ κυττάρων. Για κάθε δείγμα, τα δεδομένα αναλύθηκαν περαιτέρω με FlowJo 8.1.1.1 (Tree Star, Inc., Ashland, OR, USA).

4. Ταξινόμηση Στάδιο του καρκίνου

προστάτη σταδιοποίηση προσδιορίστηκε σύμφωνα με την 7

ου αμερικανική μεικτής επιτροπής για τον Καρκίνο (AJCC) σύστημα TNM. διανομής στάδιο και παθολογικά χαρακτηριστικά φαίνονται στον Πίνακα 2. Παθολογία επιβεβαιώθηκε από ένα μόνο παθολόγο.

Η

5. Στατιστική Ανάλυση

Οι στατιστικές αναλύσεις πραγματοποιήθηκαν με τη χρήση Mann-Whitney U δοκιμές κατά τη σύγκριση αταίριαστα στοιχεία των δύο ομάδων και οι δοκιμές Kruskal-Wallis με-hoc των υστέρων διόρθωση Bonferroni όταν συγκρίνονται περισσότερες από δύο ομάδες. Η ακρίβεια του ΝΚΑ και το CD56

dim-to-CD56

φωτεινό δείκτη στην ανίχνευση PCa προσδιορίστηκε με δέκτη λειτουργικά χαρακτηριστικά προερχόμενα περιοχή κάτω από την καμπύλη (AUC). ανάλυση συσχέτισης χρησιμοποιήθηκε για να αξιολογήσει τις ενώσεις μεταξύ των ΝΚΑ, CD56

dim-to-CD56

φωτεινό δείκτη, και κλινικοπαθολογοανατομικές μεταβλητές. Οι στατιστικές αναλύσεις πραγματοποιήθηκαν με τη χρήση του SPSS (v.18.0).

Αποτελέσματα

1. Δημογραφικά στοιχεία

Όλοι οι ασθενείς και οι έλεγχοι ήταν κλινικά και παθολογικά ερευνηθεί ως προς τους παράγοντες δείχνονται στον Πίνακα 1. Οι παράγοντες που μπορεί να επηρεάσουν την ανοσολογική κατάσταση του ατόμου που εκδηλώνεται καμία διαφορά μεταξύ των ομάδων.

2. Συχνότητα των ΝΚ κυττάρων και διανομή των CD56

αμυδρό και CD56

φωτεινό ΝΚ κυττάρων υποομάδες

Εκπρόσωπος δεδομένων κυτταρομετρίας ροής δείχνει την κατανομή του συνολικού πληθυσμού κυττάρων ΝΚ εκπροσωπήθηκαν ως CD3

-CD56

+ κύτταρα (Εικ. 1Α) και δύο κύριες υποομάδες, CD16

+ CD56

dim CD16 και

-CD56

φωτεινό, εκφραζόμενη ως ποσοστό των συνολικών κυττάρων ΝΚ (Εικ. 1Β). Σύνολο NK κυκλοφορούν συχνότητες δεν διέφερε μεταξύ ασθενών και μαρτύρων ή μεταξύ των ομάδων στάδιο του καρκίνου (Σχήμα 2Α?. Πίνακας 2). Ωστόσο, η προτιμησιακή μείωση στη συχνότητα των CD56

φωτεινά κύτταρα παρατηρήθηκε σε ασθενείς. Επιπλέον, CD56

φωτεινά κύτταρα έτειναν να μειώνονται σταδιακά σύμφωνα με καρκίνο στάδιο εξέλιξης, δηλαδή, εξωκαψική επέκταση, LN ή δίπλα μετάσταση οργάνου (Σχήμα 2Β?. Πίνακας 2). Ένα σημαντικά υψηλότερο CD56

dim-to-CD56

φωτεινό δείκτη ΝΚ κυττάρων παρατηρήθηκε σε ασθενείς σε σύγκριση με τους μάρτυρες, με μια τάση να αυξάνεται ανάλογα με την εξέλιξη της στάδιο (

σ

για τάση =

0.001

) (Πίνακας 2).

(Β) Αντιπροσωπευτικά δεδομένα κυτταρομετρίας ροής δύο κύριες υποομάδες κυττάρων ΝΚ ανιχνεύονται στο περιφερικό αίμα. Αριστερά, πάνω κουτί: CD16

+ CD56

dim υποσύνολο κυττάρων ΝΚ. Δεξιά, κάτω πλαίσιο:. CD16

-CD56

φωτεινό υποσύνολο κυττάρων ΝΚ

Η

Δεν υπάρχουν σημαντικές διαφορές του συνολικού πληθυσμού ΝΚ σημειώθηκαν μεταξύ ασθενών και μαρτύρων, και εντός των ομάδων στάδιο. (Β) Boxplot διαγράμματα που παρουσιάζουν τα αποτελέσματα διανομή κυτταρομετρίας ροής των CD56

αμυδρό και CD56

φωτεινό διανομές υποσυνόλου στο σύνολο των ΝΚ κυττάρων μεταξύ των ελέγχων και των ασθενών, ομαδοποιούνται ανάλογα με το στάδιο του καρκίνου. * P & lt? 0,05, ** p & lt? 0,01 σε σχέση με τους ελέγχους

Η

3.. Τα ΝΚ κυττάρων Δραστηριότητα

Τα αποτελέσματα που προκύπτουν παρουσιάζονται στο Σχ. 3 και στον Πίνακα 2. Όπως αναφέρεται, οι ασθενείς έδειξαν σημαντικά χαμηλότερα ΝΚΑ. Σύμφωνα με την εξέλιξη της στάδιο, τα άτομα με υψηλότερα στάδια παρουσίασαν μεγαλύτερη μείωση του ΝΚΑ (

σ

για τάση & lt?

0.001

).

** p & lt? 0,01 σε σχέση με ελέγχους.

Η

4. Ανάλυση από την ROC καμπύλες

καμπύλες ROC και τις καλύτερες τιμές cut-off χρησιμοποιήθηκαν για τον υπολογισμό της ευαισθησίας και της ειδικότητας των παραμέτρων των κυττάρων που σχετίζονται με ΝΚ (Πίνακας 3). Η ευαισθησία και η ειδικότητα της ΝΚΑ σε σχέση με την ανίχνευση του προστάτη ήταν 72% και 74%, αντίστοιχα, ενώ η CD56

dim-to-CD56

φωτεινό αναλογία κυττάρων έδειξε ευαισθησία 66% και ειδικότητα 71% ( Σχ. 4Α). Σε περαιτέρω ανάλυση, η ευαισθησία και η ειδικότητα της ΝΚΑ προσδιορίστηκαν σύμφωνα με δύο τιμές PSA ομαδοποιηθούν ως 4 έως 10 ng /ml, η οποία είναι η διαγνωστική γκρίζα ζώνη, και επίπεδα μεγαλύτερα από 10 ng /ml. Σε μια σειρά ειδικότητα 74%, ΝΚΑ για τιμές PSA μέσα στην γκρίζα ζώνη έδειξε υψηλότερη ευαισθησία (73% έναντι 70%) και AUC (0,82 ± 0,06 έναντι 0,76 ± 0,07) σε σχέση με PSA τιμές μεγαλύτερες από 10 ng /ml (Εικ. 4Β).

(AUC = Περιοχή Κάτω από την καμπύλη). καμπύλες (Β) ROC σύγκριση των επιδόσεων των μετρήσεων δραστηριότητας των κυττάρων ΝΚ σύμφωνα με PSA ομαδοποιηθούν ως? 4 έως 10 ng /ml και μεγαλύτερη από 10 ng /ml. (AUC = Περιοχή Κάτω από την Καμπύλη).

Η

5. ΝΚ κυττάρων Δραστηριότητα και CD56

dim-to-CD56

φωτεινό τηλέφωνα Λόγος Σύμφωνα με κλινικοπαθολογοανατομικές μεταβλητές

ΝΚΑ έδειξε αρνητική συσχέτιση με την PSA, το στάδιο του καρκίνου, και το CD56

dim-to-CD56

φωτεινό δείκτη. Από την άλλη πλευρά, CD56

dim-to-CD56

φωτεινά αναλογία κυττάρων έδειξε θετικές συσχετίσεις με PSA και το στάδιο του καρκίνου (Πίνακας 4). ΝΚΑ και CD56

dim-to-CD56

φωτεινό δείκτη συγκρίθηκε μεταξύ των ελέγχων και των ασθενών ομαδοποιούνται ανάλογα με κλινικοπαθολογοανατομικές μεταβλητές (Πίνακας 5). Αν και CD56

dim-to-CD56

φωτεινό δείκτη απέτυχε να διακρίνει τους ασθενείς με Gleason σκορ & lt? 7 και εκείνων που δεν έχουν εξωκαψική επέκταση από τους ελέγχους, όλες οι άλλες υποομάδες ήταν διακριτές από ελέγχους από ΝΚΑ και CD56

dim-να -CD56

φωτεινό δείκτη. Ανάλυση-μεταξύ υποομάδες ασθενών αποκάλυψε σημαντικά υψηλότερο CD56

dim-to-CD56

φωτεινό δείκτη σε ασθενείς με παθολογικά επιβεβαίωσε μετάσταση LN (

p = 0,043

? Δεδομένα δεν παρουσιάζονται).

Συζήτηση

Ο σκοπός της παρούσας μελέτης ήταν να διευκρινιστεί ο ρόλος των ΝΚ κυττάρων στην ανοσολογική απόκριση εναντίον του προστάτη. Αρκετοί μηχανισμοί ανάπτυξης και εξέλιξης PCa έχουν προταθεί, συμπεριλαμβανομένων των ορμονικών, μεταβολικές αλλαγές, και ανοσολογική απόκριση [6], [17]. Υπάρχουν συσσωρευμένα στοιχεία ότι οι διαφορετικοί πληθυσμοί λεμφοκυττάρων που εμπλέκονται στην μεσολάβηση κυττάρων ανοσοκαταστολή που οδηγεί στην εμφάνιση και την εξέλιξη του προστάτη [13], [18], [19]. Ωστόσο, υπάρχουν περιορισμένες πληροφορίες σχετικά με το λειτουργικό ρόλο των ΝΚ κυττάρων στην ανοσολογική απόκριση του προστάτη. Για την αντιμετώπιση αυτού του ζητήματος, ερευνήσαμε ΝΚΑ ως δείκτης για ΙΡΝ-γ επιπέδων και την κατανομή των υποσυνόλων κυττάρων ΝΚ σε ασθενείς PCa. Τα αποτελέσματα της μελέτης μας δείχνουν ότι η εξασθενημένη ΝΚΑ προηγείται πιθανώς από τη μείωση των CD56

φωτεινά κύτταρα και ότι το επίπεδο των ΝΚΑ θα μπορούσε να χρησιμοποιηθεί ως ένα υποστηρικτικό διαγνωστικός δείκτης για το PSA.

1. Προτιμησιακή μείωση των CD56

φωτεινά κύτταρα ΝΚ προστάτη ασθενείς

ΝΚ κυττάρων λειτουργικά ταξινομούνται σε CD56

αμυδρό και CD56

φωτεινό υποσύνολα. CD16

+ CD56

dim κύτταρα είναι κύτταρα-τελεστές με υψηλές ποσότητες των κυτταρολυτικών κόκκων που εκφράζουν ισχυρή κυτταροτοξικότητα έναντι κυττάρων όγκου [4]. CD16

-CD56

φωτεινά κύτταρα απελευθερώνουν προφλεγμονωδών κυτοκινών όπως IFN-γ, η οποία οδηγεί φλεγμονώδεις μηχανισμούς που ρυθμίζουν την έναρξη του όγκου, immunoevasion, την επιβίωση και έκφυση [20], [21]. Πρόσφατες ανακαλύψεις έχουν δείξει ότι CD56

φωτεινά κύτταρα αποτελούν την πλειοψηφία των ΝΚ κυττάρων του λεμφικού ιστού και ότι δεν είναι μόνο ένα μικρό υποπληθυσμό μεταξύ των ΝΚ κυττάρων, αλλά είναι ανώριμη πρόδρομοι των CD56

dim κύτταρα [22]. Η εργασία αυτή επικεντρώνεται σε αυτό το συγκεκριμένο υποσύνολο, σχετικά με τη σημασία του στη ρύθμιση των ΝΚ κυττάρων με τη μεσολάβηση απόκριση εναντίον καρκινικών κυττάρων.

Έρευνα για αναδιανεμητικές πρότυπα των υποσυνόλων κυττάρων ΝΚ αποκάλυψε μια σημαντική μείωση των CD56

φωτεινά κύτταρα χωρίς αλλοίωση του CD56

dim κύτταρα. Προηγούμενες μελέτες σε διάφορους ξενιστές που φέρουν όγκο έχουν αναφερθεί και όχι διακριτές σχέσεις μεταξύ CD56

αμυδρό και CD56

φωτεινό υποσύνολα. Σε αντίθεση με τα αποτελέσματα μας, η μείωση της CD56

dim κυττάρων χωρίς μεταβολή του CD56

φωτεινά κύτταρα σημειώθηκε στα γαστρικά και του οισοφάγου καρκίνων [23]. Από την άλλη πλευρά, η μείωση του CD56

λαμπρό κυττάρων παρατηρήθηκε σε καρκίνους του μαστού, της κεφαλής και του λαιμού, και μία ίση διανομή του CD56

dim κύτταρα σε PCa? αποτελέσματα που συνάδουν με την παρούσα μελέτη [7], [17].

2. Αλλοίωση του CD56

φωτεινά κύτταρα ΝΚ ως μηχανισμός απόκρισης σε μικροπεριβάλλον του όγκου

Η μελέτη μας παρατηρήθηκε κυρίως μια προτιμησιακή μείωση του CD56

φωτεινά κύτταρα χωρίς μεταβολή του CD56

dim κύτταρα. Αν και η βασική αιτία δεν έχει ακόμη οριστεί με σαφήνεια, δύο πιθανές εξηγήσεις μπορεί να αυξηθεί? διαδικασία ωρίμανσης και τη διαδικασία πρόσληψης.

Όπως αναφέρθηκε, τα CD56

φωτεινά κύτταρα γίνονται δεκτές ως πρόδρομες ουσίες για CD56

dim κύτταρα, με κάθε υποσύνολο αντιπροσωπεύει ένα στάδιο ωρίμανσης διακριτή [24]. Ενδεχομένως, η υπερβολική ζήτηση για τα κύτταρα-τελεστές για την αντιμετώπιση του όγκου μπορεί να προκαλέσει μια μετάβαση των ανώριμων CD56

φωτεινά κύτταρα σε CD56

dim κύτταρα. Μια παρόμοια εξήγηση έχει προταθεί για τη μείωση των CD56

φωτεινά κύτταρα σε ασθενείς με καρκίνο κεφαλής και τραχήλου [7]. Ωστόσο, αυτό προϋποθέτει μια ταυτόχρονη αύξηση του CD56

dim κύτταρα, τα οποία δεν παρατηρήθηκε στην παρούσα μελέτη.

Μια εναλλακτική εξήγηση, χωρίς απόδειξη είναι ότι οι περιφερειακές CD56

φωτεινά κύτταρα μπορεί να έχουν προσληφθεί για να λεμφικών τοποθεσίες ιστού ως μεταστατικός LNs να αποκτήσουν κυτταροτοξικότητα. Η ιδέα αυτή βασίζεται σε προηγούμενες παρατηρήσεις ότι CD56

φωτεινά κύτταρα συσσωρεύονται κατά προτίμηση στην περιοχή των κυττάρων Τ του LNs μέχρι να ενεργοποιηθεί για να παράγουν προφλεγμονώδεις κυτταροκίνες [7], [22,22]. Επιπλέον, η παρατήρηση ότι CD56

φωτεινά κύτταρα που απομονώνονται από ανθρώπινο LNs γίνει ισχυρή κυτταροτοξική δράση κατά τη διέγερση από την IL-2 υποδηλώνει ότι τα κύτταρα ΝΚ που προσλαμβάνονται για να LNs μπορεί να αντιπροσωπεύουν ένα ανώριμο πισίνα κυττάρων-τελεστών [25]. Ένα σημαντικά υψηλότερο CD56

dim-to-CD56

αναλογία φωτεινό κυττάρων σε ασθενείς με παθολογικά επιβεβαίωσε μετάσταση LN παρατηρήθηκε στη μελέτη μας, πράγμα που σημαίνει ότι αυτά τα κυκλοφορούντα κύτταρα μπορεί να έχουν προσληφθεί σε παθολογική ή δευτερογενής LNs σε απάντηση του όγκου. Αυτό είναι ενδιαφέρον, διότι LNs είναι συνήθως οι πρωτογενείς μεταστατικές θέσεις και CD56

φωτεινά κύτταρα είναι ο πρωταρχικός υποσύνολο βρίσκονται σε LNs που εξουδετερώνουν τα μεταστατικά κύτταρα [26]. Για να επιβεβαιώσετε αυτό το ζήτημα, θα ήταν ενδιαφέρον να εξεταστεί αν CD56

Τα φωτεινά κύτταρα συσσωρεύονται στο μεταστατικό LNs παρακάτω LN ανατομή.

3. ΝΚ κυττάρων δυσλειτουργία, ως συνέπεια της μείωσης των CD56

φωτεινά κύτταρα ΝΚ

ΝΚΑ διερευνήθηκε για να προσδιοριστεί η επίδραση της μείωσης του CD56

φωτεινά κύτταρα σε κυτταρολυτική δράση έναντι καρκινικών κυττάρων. Παράλληλα με τις παρατηρήσεις με CD56

φωτεινά κύτταρα, ΝΚΑ παρατηρήθηκε να είναι χαμηλότερη σε ασθενείς ΣΕΣ, μαζί με μια τάση να μειώνεται σταδιακά, ανάλογα με καρκίνο στάδιο εξέλιξης. Αυτά τα ευρήματα είναι σύμφωνα με προηγούμενες αναφορές που έδειξε ΝΚΑ έχει παραβιαστεί σε ένα ευρύ φάσμα των αιματολογικών και συμπαγών όγκων [8], [10], [27]. Αρκετοί μηχανισμοί παραβιαστεί ΝΚΑ έχουν προταθεί, όπως μειωμένος αριθμός ογκο-διηθητικά κύτταρα ΝΚ [23], η αυξημένη υποδοχείς επιφανείας για το ανοσοποιητικό παράγοντες καταστολής [28], και αδρανοποίηση των κυττάρων τελεστών [10].

συσχετίσεις παρατηρήθηκε μεταξύ ΝΚΑ και CD56

dim-to-CD56

φωτεινό δείκτη κύτταρο μπορεί να είναι άμεσο ενδιαφέρον να προτείνει ένα πρόσθετο μηχανισμό που αδύναμα ΝΚΑ είναι συνέπεια της μειωμένης CD56

φωτεινά κύτταρα. CD56

Τα φωτεινά κύτταρα είναι γνωστό ότι είναι σημαντικές πηγές για την IFN-γ [22], όπως παρατηρήθηκε σε

in vitro

μελέτες όπου CD56

φωτεινά κύτταρα φαίνεται να πολλαπλασιάζονται κατά προτίμηση σε συγκαλλιέργεια με ανώριμα δενδριτικά κύτταρα και λιποπολυσακχαρίτες να παράγουν IFN-γ [29]. Επίσης, η διέγερση του CD56

φωτεινά κύτταρα με μετατραπέντα κύτταρα καρκινώματος είχε ως αποτέλεσμα μια αυξημένη ικανότητα να παράγουν ΙΡΝ-γ και προσδίδουν υψηλή κυτταροτοξικότητα [6]. Περαιτέρω,

in vivo

μελέτες έχουν δείξει ότι αμυγδαλών CD56

φωτεινά κύτταρα παράγουν IFN-γ πριν από την ωρίμανση στα κύτταρα-τελεστές [25]. Αντιστρόφως, μείωση του CD56

λαμπρό κυττάρων παρατηρήθηκε να επάγει εξασθενημένη έκκριση της ΙΡΝ-γ σε ασθενείς με αλλεργική ρινίτιδα [30]. Λαμβάνοντας υπόψη αυτά τα υποστηρικτικά ευρήματα ότι η έκκριση της IFN-γ εξαρτάται άμεσα από CD56

φωτεινά κύτταρα, προτείνουμε ότι η μείωση των CD56

φωτεινά κύτταρα είναι ένας πιθανός μηχανισμός εμπλέκονται σε χαμηλό ΝΚΑ, η οποία οδηγεί σε διαταραγμένη κυτταροτοξικότητα εναντίον κυττάρων του προστάτη.

4. ΝΚ κυττάρων Δραστηριότητα, υποστηρικτικό διαγνωστικό δείκτη για την PSA

καμπύλες ROC αποκάλυψε ότι ΝΚΑ μπορεί να χρησιμεύσει ως ένα υποστηρικτικό δείκτη για το PSA στη διάγνωση του προστάτη. Αν και είναι σαφές ότι το PSA παρέχει την υψηλότερη διαγνωστική αξία για την PCA, ένας σημαντικός περιορισμός είναι η έλλειψη της ειδικότητας καρκίνου που προκαλεί περιττούς κινδύνους και το κόστος, ιδιαίτερα στην διαγνωστική ασαφή ζώνη [31]. Παρά το γεγονός ότι συνεχείς προκλήσεις προσπαθούν να αναπτύξουν νέες μεθόδους ανίχνευσης προστάτη, κανένας δεν έχει σαφώς υπερτερούν τα πλεονεκτήματα έναντι των μειονεκτημάτων [14]. Αυτή η έρευνα αυξάνει την πιθανότητα ότι ΝΚΑ μπορεί να χρησιμοποιηθεί σε συνδυασμό με την PSA για να παράσχει πρόσθετη διαγνωστική αξία, ειδικά για εκείνες που εμπίπτουν στο διαγνωστικό γκρίζα ζώνη.

Αυτή η μελέτη βασίστηκε σε ελέγχους έναντι των ασθενών που έχουν διαγνωστεί με προστάτη που οφείλεται σε αυξημένα PSA σε μια εξέταση ρουτίνας για την υγεία. Ως εκ τούτου, η απουσία των ασθενών προστάτη με φυσιολογικό PSA (& lt? 4 ng /ml) ήταν ο σημαντικός περιορισμός της μελέτης αυτής, η οποία παρεμποδίζεται σε άμεση σύγκριση των διαγνωστικών απόδοσης μεταξύ PSA και ΝΚΑ. Μια εκτεταμένη μελέτη του πληθυσμού είναι απαραίτητη για να επιβεβαιώσει τα προκαταρκτικά ευρήματα μας και να εκτιμήσει το κόστος-αποτελεσματικότητα.

Συμπεράσματα

Αυτή η μελέτη παρατήρησης παρέχονται νέα ευρήματα ότι CD56

φωτεινά κύτταρα να διαδραματίσουν σημαντικό ρόλο στην προσαρμοστική απόκριση εναντίον των κυττάρων του προστάτη. Αυτή η έννοια προσδίδει περαιτέρω στήριξη που διαχρονικές μελέτες σχετικά με ΝΚ κυττάρων ανοσολογικής αξίζουν σαφώς επιπλέον έρευνα για να δυνητικά να οδηγήσει σε νέες ανοσοθεραπευτικές στρατηγικές για την ενίσχυση ογκολογικά αποτελέσματα της ΣΕΣ.