Αφηρημένο

Ενεργοποίηση μεταλλάξεις του

BRAF

γονιδίου οδηγούν σε συστατική ενεργοποίηση του μονοπατιού MAPK. Αν και πολλούς ανθρώπινους καρκίνους φέρουν το μεταλλαγμένο

BRAF

γονιδίου, αυτή η μετάλλαξη δεν έχει ακόμη χαρακτηρίζεται από το κυνικός καρκίνων. Όπως καρκίνους του ανθρώπου και των σκύλων μοιράζονται μοριακή ανωμαλίες, υποθέσαμε ότι

BRAF

γονιδιακών μεταλλάξεων υπάρχουν επίσης σε κυνικός καρκίνων. Για να ελέγξει την υπόθεση αυτή, έχουμε την αλληλουχία του εξόνιο 15 του

BRAF

, μετάλλαξη hot spot του γονιδίου, σε 667 κυνικός πρωτοπαθείς όγκους και 38 ιστούς ελέγχου. Η ανάλυση αλληλουχίας αποκάλυψε ότι ένα μόνο νουκλεοτίδιο Τ προς Α στο νουκλεοτίδιο μεταστροφής 1349 εμφανίστηκε σε 64 πρωτογενείς όγκους (9,6%), με ιδιαίτερα υψηλή συχνότητα σε καρκίνωμα του προστάτη (20/25, 80%) και καρκίνωμα ουροθηλίου (30/45, 67%) . Αυτή η μετάλλαξη έχει ως αποτέλεσμα την υποκατάσταση αμινοξέος γλουταμικού οξέος για βαλίνη στο κωδικόνιο 450 (V450E) του σκύλου

BRAF

, που αντιστοιχεί στην πιο κοινή

BRAF

μετάλλαξη στο ανθρώπινο καρκίνο, V600E. Η εξελικτική διατήρηση του

BRAF

μετάλλαξη V600E υπογραμμίζει τη σημασία της ενεργοποίησης της οδού ΜΑΡΚ σε νεοπλασία και μπορεί να προσφέρει την ευκαιρία για τη μοριακή διάγνωση και στοχευμένη θεραπευτική για τα σκυλιά που φέρουν

BRAF

-mutated καρκίνους.

Παράθεση: Mochizuki Η Kennedy Κ, Shapiro SG, Breen Μ (2015) BRAF Μεταλλάξεις στο Canine καρκίνοι. PLoS ONE 10 (6): e0129534. doi: 10.1371 /journal.pone.0129534

Ακαδημαϊκό Επιμέλεια: Amanda Ewart Toland, Πολιτειακό Πανεπιστήμιο του Οχάιο Medical Center, Ηνωμένες Πολιτείες |

Ελήφθη: 6, Απρίλη του 2015? Αποδεκτές: 11η Μαΐου του 2015? Δημοσιεύθηκε: 8 του Ιούν 2015

Copyright: © 2015 Mochizuki et al. Αυτό είναι ένα άρθρο ανοικτής πρόσβασης διανέμεται υπό τους όρους της άδειας χρήσης Creative Commons Attribution, το οποίο επιτρέπει απεριόριστη χρήση, τη διανομή και την αναπαραγωγή σε οποιοδήποτε μέσο, ​​με την προϋπόθεση το αρχικό συγγραφέα και την πηγή πιστώνονται

Δεδομένα Διαθεσιμότητα: Όλα τα σχετικά δεδομένα είναι εντός του Υποστηρίζοντας αρχεία πληροφοριών του χαρτιού και

Χρηματοδότηση:. η μελέτη χρηματοδοτήθηκε από το North Carolina State University (NCSU) Καρκίνος Genomics Ταμείο (MB)

Αντικρουόμενα συμφέροντα:. Οι συγγραφείς έχουν δήλωσε ότι δεν υπάρχουν ανταγωνιστικά συμφέροντα.

Εισαγωγή

Οι πρωτεΐνες RAF είναι εξελικτικά συντηρημένες σερίνης /θρεονίνης που ρυθμίζουν θεμελιώδεις κυτταρικές διεργασίες, συμπεριλαμβανομένης της ανάπτυξης, της διαφοροποίησης και της επιβίωσης. Η οικογένεια της RAF αποτελείται από τρία μέλη: Araf, BRAF και CRAF. Όλες οι πρωτεΐνες RAF ενεργοποιείται από RAS και στη συνέχεια την ενεργοποίηση ΜΕΚ, εγκαινιάζοντας τον καταρράκτη μεταγωγής σήματος της οδού ΜΑΡΚ. Συστατική ενεργοποίηση της οδού ΜΑΡΚ που προκαλείται από ογκογόνους μεταλλάξεις του

RAF

γονιδίων οδηγεί σε ανώμαλο πολλαπλασιασμό και διαφοροποίηση. Μεταξύ των τριών μορφών του

RAF

γονίδια,

BRAF

γονίδιο πιο συχνά μεταλλάσσεται σε ανθρώπινο καρκίνο [1-3]

Η πιο κοινή. (& Gt? 90%) σωματική μετάλλαξη του ανθρώπινου

BRAF

γονίδιο είναι ένα Τ-to-α μεταστροφής στο εξόνιο 15 στο νουκλεοτίδιο 1799 (c.1799T & gt? α), με αποτέλεσμα την υποκατάσταση αμινοξέος από βαλίνη προς γλουταμικό οξύ στο κωδικόνιο 600 ( V600E) [2]. Η μετάλλαξη V600E συμβαίνει εντός του τμήματος ενεργοποίηση του γονιδίου και μιμείται φωσφορυλίωση, δραστικά ανυψώνοντας κινάσης δραστηριότητα και ενεργοποίηση του κατάντη σήματος [3,4]. Αυτή η μετάλλαξη ενεργοποίησης έχει αναφερθεί σε μελάνωμα (~ 60%) [4,5], καρκίνος του θυρεοειδούς (20-40%) [6-9], λευχαιμία τριχωτών κυττάρων (~ 100%) [10] και πολλούς άλλους καρκίνους με μεταβλητής συχνότητας. Σε συνδυασμό με συχνές μεταλλάξεις του

RAS

γονίδια, η παρουσία του

BRAF

μεταλλάξεις σε μία ευρεία ποικιλία ανθρώπινων καρκίνων υπογραμμίζει τη σημασία της ενεργοποίησης της οδού ΜΑΡΚ ως κοινή ογκογόνο μοριακό μονοπάτι.

Σκύλοι αναπτύσσουν αυθόρμητη καρκίνοι με πολλές ομοιότητες με ανθρώπινους καρκίνους, συμπεριλαμβανομένων των ανατομική θέση, η ιστολογική εμφάνιση και θεραπευτική ανταπόκριση. Του καρκίνου σε σκύλους μοιράζεται όχι μόνο οι βιολογικές συμπεριφορές με τους ανθρώπους, αλλά και μοριακές ανωμαλίες [11,12]. Από την ενεργοποίηση

BRAF

μεταλλάξεις είναι παρούσα σε μια μεγάλη ποικιλία ανθρώπινου καρκίνου, υποθέσαμε ότι

BRAF

μεταλλάξεις γονιδίων παρομοίως εμπλέκονται σε καρκίνους κυνικός, οδηγώντας σε υπερενεργοποίηση του μονοπατιού ΜΑΡΚ και κυτταρικό μετασχηματισμό. Για να ελεγχθεί αυτή η υπόθεση, έχουμε διαλογή για την παρουσία του

BRAF

εξόνιο 15 μεταλλάξεις σε μία ομάδα από 667 παθολογικά επιβεβαίωσε δείγματα όγκου σκύλου, που περιλαμβάνει μια σειρά όγκων αιμοποιητικά (n = 245), σαρκώματα (n = 160) , καρκινώματα (n = 115), μελανοκυτταρικούς όγκου (n = 72), καθώς και άλλες, λιγότερο κοινή μορφή καρκίνου (n = 75).

Υλικά και Μέθοδοι

Φρέσκα και σταθεροποιημένα με φορμαλίνη δείγματα όγκων των διαφόρων σκύλων συμπαγείς όγκους, και τα δείγματα EDTA αίματος από κυνικός περιπτώσεις λευχαιμίας, υποβλήθηκαν από τα σκυλιά του πελάτη ιδιοκτησίας (με ενημερωμένη συγκατάθεση του ιδιοκτήτη) από ιδιωτικές κτηνιατρικές πρακτικές σε όλη την Ηνωμένες Πολιτείες, ως μέρος της ρουτίνας διαγνωστικές διαδικασίες (δεν απαιτείται IACUC). Πρόσθετες δείγματα όγκων είχαν προσληφθεί μέσω του Πολιτειακού Πανεπιστημίου της Βόρειας Καρολίνας (NCSU) Κλινικές μελέτες πυρήνα, το καθένα με ενημερωμένη συγκατάθεση ιδιοκτήτη και κατόπιν NCSU IACUC εγκεκριμένο πρωτόκολλο (αριθμός έγκρισης 13-022-O), η οποία καλύπτει τη διαδικασία που χρησιμοποιείται για τη λήψη των δειγμάτων και μετέπειτα χρήση τους για την εφαρμογή της έρευνας. Αιματοξυλίνη και διαφάνειες ηωσίνη-χρώση των δειγμάτων φορμόλη σταθερό εμπεδωθεί με παραφίνη (FFPE) εξετάστηκαν με πίνακας-επικυρωμένο κτηνιατρικό παθολόγο και επιβεβαίωσε νεοπλασματικές σε όλα, αλλά τα δείγματα λευχαιμίας. διαγνώσεις λευχαιμίας βασίστηκαν στην αξιολόγηση της κυτταρολογικής και immunophenotypical εξέταση των λευχαιμικών κυττάρων από έναν πίνακας-επικυρωμένο κλινική παθολογοανατόμος.

Το γονιδιακό DNA απομονώθηκε από φρέσκο ​​ιστό δείγματα /αίμα ή ιστούς FFPE. Ένα σύνολο 667 δειγμάτων όγκου συμπεριελήφθησαν σε αυτή τη μελέτη. Λεπτομέρειες του πληθυσμού δείγματος παρουσιάζονται στους Πίνακες 1 και 2. DNA απομονώθηκε χρησιμοποιώντας κιτ εκχύλισης DNA QIAamp FFPE (Qiagen, Valencia, CA, USA) ή ένα DNeasy Blood Kit και ιστών (Qiagen). Φασματοφωτομετρία (NanoDrop, Thermo Scientific, Wilmington, DE) και ηλεκτροφόρηση σε πήκτωμα αγαρόζης χρησιμοποιήθηκαν για τον προσδιορισμό ποσότητα και την ακεραιότητα του DNA. Για μη-νεοπλασματική μάρτυρες (n = 38), το DNA απομονώθηκε από κυνόδοντα επιθήλιο της ουροδόχου κύστης από 30 σκύλους και τους αδένες του προστάτη, της 8ης σκύλων, που λαμβάνεται με νεκροψία χωρίς ενδείξεις νεοπλασματικές αλλοιώσεις κατά ιστοπαθολογική αξιολόγηση.

Η

το εξόνιο 15 του ανθρώπινου

BRAF

γονίδιο εξελικτικά συντηρημένη ανάμεσα σκύλους και ανθρώπους (Σχήμα 1). Έτσι, PCR ενίσχυση πραγματοποιήθηκε για να ενισχύσει ένα 391-bp θραύσμα DNA που εκτείνεται την γονιδιωματική κυνικός

BRAF

αλληλουχία που αντιστοιχεί στην ανθρώπινη

BRAF

γονίδιο εξονίου 15 (CanFam3.1, κυνικός χρωμόσωμα (CFA) 16 : 8,296,227-8,296,345). Το ακόλουθο ζεύγος εκκινητών σχεδιάστηκε χρησιμοποιώντας το λογισμικό Primer-BLAST (https://www.ncbi.nlm.nih.gov/tools/primer-blast/): προς τα εμπρός, AAGCAGGTCACATATGCCAAA (CFA 16: 8,296,007-8,296,027)? αντίστροφη, ATTTTTGGACCCTGAGGTGC (CFA 16: 8,296,378-8,296,397). Κάθε αντίδραση PCR περιείχε 10-20 ng γενωμικού DNA, 250 ηΜ του προς τα εμπρός και αντίστροφο εκκινητή και 1 χ Taq RED Κύριο Μείγμα Kit (Genesee Scientific, San Diego, CA, USA). κύκλοι PCR αποτελούνται από αρχική μετουσίωση στους 95 ° C για 2 λεπτά, ακολουθούμενη από 40 κύκλους των 95 ° C για 30 s, 60 ° C για 30 s και 72 ° C για 30 s με ένα τελικό στάδιο επιμήκυνσης στους 95 ° C για 5 min. PCR προϊόντα έγιναν ορατά με χρήση ηλεκτροφόρησης πηκτής αγαρόζης και υποβλήθηκε σε στοχευμένη ανάλυση αλληλούχισης Sanger με την προς τα εμπρός και /ή αντίστροφους εκκινητές. Η ανάλυση της αλληλουχίας πραγματοποιήθηκε στο Πολιτειακό Πανεπιστήμιο της Βόρειας Καρολίνας Genome Research Laboratory (https://research.ncsu.edu/gsl/). Τα δεδομένα αλληλούχισης αναλύθηκαν χρησιμοποιώντας λογισμικό 4peaks (https://nucleobytes.com/index.php/4peaks) και σε σύγκριση με την αλληλουχία αναφοράς (XM_005629550.1) χρησιμοποιώντας CLC Sequence Viewer έκδοση 7 (CLC bio, Aarthus, Δανία).

Οι αλληλουχίες είναι εξαιρετικά διατηρημένες μεταξύ των ανθρώπων και των σκυλιών, συμπεριλαμβανομένων βαλίνη στο κωδικόνιο 600 σε ανθρώπινο BRAF (υπογραμμισμένη) και στο κωδικόνιο 450 σε κυνικός BRAF.

Η

ακριβής τεστ Fisher διεξήχθη για να εξετάζει τη διαφορά των

BRAF

συχνότητες μετάλλαξης μεταξύ των ομάδων στρωματοποιημένη ανά φύλο, στείρωση κατάσταση, την ηλικία ή φυλές. Όλες οι στατιστικές αναλύσεις πραγματοποιήθηκαν με την έκδοση JMP λογισμικό Pro 11 (SAS Institute, Cary, NC). Οι τιμές των P & lt? 0.05 θεωρήθηκαν σημαντικές.

Αποτελέσματα και Συζήτηση

Για να διερευνηθεί η παρουσία του

BRAF

μεταλλάξεις, μπορούμε αλληλουχία

BRAF

γονίδιο εξόνιο 15 σε 667 πρωτοπαθούς όγκου δείγματα και 38 δείγματα ιστών ελέγχου. Η ανάλυση αλληλουχίας αποκάλυψε μία Τ προς Α στο νουκλεοτίδιο μεταστροφής 1349 (c.1349T & gt? Α, αναφορά: XM_005629550.1) που σημειώθηκαν σε 64 πρωτογενείς όγκους, με αποτέλεσμα την υποκατάσταση αμινοξέος από βαλίνη προς γλουταμικό οξύ στο κωδικόνιο 450 (V450E) (Σχ 2). Αυτή η αλλαγή αμινοξέων αντιστοιχεί στο ανθρώπινο V600E μετάλλαξη (Σχήμα 1). Σημαντική παραλλαγή υπάρχει στην συχνότητα της μετάλλαξης V450E απέναντι καρκίνους κυνικός: 0% σε όγκους αιμοποιητικά και σαρκώματα σε 67% και 80% του καρκινώματος ουροθηλιακά (UC) και καρκίνωμα του προστάτη (PC), αντίστοιχα (Πίνακας 3). Σε όλες τις μεταλλάξεις V600E, ηλεκτροφορήματα έδειξε την παρουσία και των δύο μεταλλαγμένες και αλληλουχίες άγριου τύπου, υποδηλώνοντας ετεροζυγωτία μετάλλαξη. Δεν υπήρχε στατιστικά σημαντική διαφορά στη συχνότητα μετάλλαξης μεταξύ των διαφόρων ομάδων στείρωσης κατάσταση, την ηλικία ή φυλών στο UC και δείγματα PC και μεταξύ της κατάστασης μεταλλάξεων και των δύο φύλων σε δείγματα UC. Λεπτομέρειες των signalments των σκύλων με UC και PC φαίνεται στον Πίνακα S1.

(Α) άγριου τύπου αλληλουχία που λαμβάνεται από ένα DNA ελέγχου του προστάτη αδένα. (Β) μεταλλαγμένη αλληλουχία αναμειγνύονται με αλληλουχία άγριου τύπου λαμβάνεται από ένα καρκίνωμα του προστάτη. Βέλος δείχνει την υποκατάσταση Τ-to-ένα νουκλεοτίδιο με αποτέλεσμα την αλλαγή της βαλίνης στο κωδικόνιο 450 σε γλουταμικό οξύ.

Η

Εκτός από τη μετάλλαξη V450E, ένα Τ-to-C μετάπτωση στο νουκλεοτίδιο 1305 (c.1305T & gt? C, σιωπηλή μετάλλαξη) παρατηρήθηκε σε ένα δείγμα από το στόμα πλακώδες καρκίνωμα. Μια ιντρονική διαγραφή Τ (c.1292-189delT) παρατηρήθηκε σε ένα κάθε δειγμάτων σάρκωμα μαλακών ιστών και το μελάνωμα. Όλα τα άλλα δείγματα όγκων και τον έλεγχο διατήρησε την άγριου τύπου αλληλουχία γονιδιώματος για

BRAF

εξώνιο 15.

ιδρυτική ενεργοποίηση της σηματοδότησης ΜΑΡΚ ενεργοποιώντας μεταλλάξεις του

BRAF

(~ 60%) ή

NRAS

(~ 15%) των γονιδίων διαδραματίζει έναν σημαντικό ρόλο στην παθογένεση του ανθρώπινου μελανώματος [4,5,11,12]. Ομοίως, συστατική ενεργοποίηση της οδού ΜΑΡΚ εμπλέκεται στην κυνικός μελάνωμα [13,14], αν και

RAS

γονίδια σπάνια μεταλλαγμένα [14-16]. Σε αυτή τη μελέτη, όμως, μόνο το 6% των μελανωμάτων (δύο βλεννογόνου και ένα δερματικό μελάνωμα) και το 17% των melanocytomas έτρεφε το

BRAF

μετάλλαξη V450E. Αυτή η μετάλλαξη δεν είχε εντοπιστεί σε προηγούμενες μελέτες του σκύλου μελανώματος [13,17], πιθανώς λόγω της χαμηλής συχνότητας του

BRAF

μετάλλαξη στο κυνικός μελάνωμα. Στο ανθρώπινο μελάνωμα, η παρουσία του

BRAF

μετάλλαξη σχετίζεται με την έκθεση του δέρματος σε υπεριώδη ακτινοβολία, και τα μελανώματα σε θέσεις βλεννογόνων ή μη-UV-εκτεθειμένο δέρμα σπανίως διαθέτουν την μετάλλαξη [18,19]. Όπως κυνικός μελάνωμα εμφανίζεται κυρίως σε στοματικό βλεννογόνο και σπάνια σε κρεβάτια νυχιών και μη-UV-εκτεθειμένη τρίχωμα του δέρματος, το γεγονός ότι

BRAF

μεταλλάσσεται συχνά σε κυνικός μελάνωμα είναι συνεπής με τα ευρήματα στην ανθρώπινη ομολόγους.

είναι ενδιαφέρον, κυνικός UC έδειξαν πολύ υψηλότερη συχνότητα από το

BRAF

μετάλλαξη από αυτή που αναφέρθηκε σε ανθρώπινους όγκους UC [20]. Μεταλλάξεις σε γονίδια ανάντη της οδού ΜΑΡΚ, συμπεριλαμβανομένων

HRAS

,

KRAS

και

FGFR3

γονίδια (τα οποία είναι όλα ανάντη μόρια BRAF σε ΜΑΡΚ μονοπάτι), βρέθηκαν σε & gt? 82% του ανθρώπινου θηλώδους UC, υποδηλώνοντας ότι η ενεργοποίηση του μονοπατιού είναι ένας κύριος παράγοντας για την οδήγηση της υποκατηγορίας των ανθρώπινων UC [21,22]. Παρά το γεγονός ότι οι μεταλλαγμένες μόρια στο μονοπάτι μπορεί να είναι διαφορετική μεταξύ των ανθρώπων και των σκύλων UC, η υψηλή συχνότητα των

BRAF

μετάλλαξη σε κυνικός UC δείχνει ότι απορύθμιση της ΜΑΡΚ μονοπάτι μπορεί να παίζει ένα σημαντικό ρόλο στην παθογένεση της νόσου.

Canine PC χαρακτηρίζεται από υψηλό μεταστατικό δυναμικό και τοπικές εισβολής, αλλά οι παράγοντες που συμβάλλουν στην επιθετική βιολογική συμπεριφορά είναι ακόμα σε μεγάλο βαθμό άγνωστες [23]. Αν και

BRAF

μεταλλάξεις V600E είναι σπάνια σε ανθρώπους [24-26], συσσωρεύοντας στοιχεία δείχνουν ότι ΜΑΡΚ μονοπάτι παίζει σημαντικό ρόλο στην ανάπτυξη και την εξέλιξη των ανθρώπινων PC, ειδικά σε μεταστατικούς όγκους [27]. Σωματικές μεταλλάξεις των

RAS

γονίδια και να αντιγράψετε τον αριθμό κέρδη

BRAF

και

CRAF

γονίδια που παρατηρήθηκε σε ανθρώπινο PC σε συχνότητες ~ 10, 30% και 15%, αντίστοιχα [24-27]. Αυτές οι γονιδιωματικές μεταβολές οδηγούν στην ενεργοποίηση ή /και την αύξηση της έκφρασης των πρωτεϊνών RAF, με αποτέλεσμα την ενεργοποίηση των κατάντη σηματοδότησης και την αύξηση μεταστατικών ιδιοτήτων [26-28]. Επιπλέον, επαναλαμβανόμενες χρωμοσωμικές μεταθέσεις περιλαμβάνουν

RAS

και

RAF

γονίδια, που οδηγούν σε ογκογόνο γονίδια σύντηξης, πρόσφατα ανακαλύφθηκε σε μια υποομάδα (~ 5%) των υποθέσεων ανθρωπίνων PC [29,30] .

Ένα μοναδικό χαρακτηριστικό του σκύλου PC είναι ότι η πλειονότητα των όγκων προκύπτουν σε ανδρογόνο-ανεξάρτητο τρόπο, με αύξηση του κινδύνου σε ευνουχισμένους σκύλους [23]. Από την άλλη πλευρά, η θεραπεία ορμονικής αποστέρησης είναι ένα στήριγμα για τη θεραπεία της ανθρώπινης PC, ως ανδρογόνο διαδραματίζει έναν κρίσιμο ρόλο στην παθογένεια. Οι περισσότεροι από ανθρώπινο PC, ωστόσο, να εξελιχθεί σε μια πιο επιθετική, ορμονικά ανθεκτικών (ευνουχισμός ανθεκτικά) καρκίνο κατά τη διάρκεια της κλινικής πορείας. Η ενεργοποίηση του BRAF σηματοδότησης /ΜΑΡΚ κάνει τα καρκινικά κύτταρα ανθρώπινου PC λιγότερο εξαρτημένη από ανδρογόνων για τον πολλαπλασιασμό

in vivo

και

in vitro

, συμβάλλοντας στην ορμονοάντοχου φαινότυπο [31]. Η υψηλή συχνότητα εμφάνισης του

BRAF

μετάλλαξη και επιθετική φύση των σκύλων PC μπορεί να αντανακλά το γεγονός ότι οι περισσότεροι κυνικός PC αναπτυχθεί ανεξάρτητα από ανδρογόνα διέγερσης. Αυτές οι κλινικές και μοριακές αναλογίες μπορούν να κυνικός PC χρησιμεύσει ως αυθόρμητα-συμβαίνουν μοντέλο καρκίνου ζώων που είναι συναφείς με ορμονοάντοχου ανθρώπινο PC.

Πρόσφατες πρόοδο στη μοριακή τεχνολογία μας έδωσε τη δυνατότητα για την ανίχνευση κυκλοφορούντων καρκινικών κυττάρων σε υγρό δείγματα, όπως περιφερική αίμα. Ανίχνευση

BRAF

μεταλλάξεις μπορούν να χρησιμοποιηθούν ως μέσο για τη διάγνωση και την παρακολούθηση φορτίο όγκου σε υγρά δείγματα, όπως το αίμα ή τα ούρα, χωρίς να απαιτείται βιοψία των όγκων (όπως ονομάζεται υγρό βιοψίας, που επισκοπείται στο [32,33] ). Αν και ιστοπαθολογική εξέταση βιοψίας του όγκου είναι το χρυσό πρότυπο για τη διάγνωση του σκύλου UC και Υ, οι ανατομικές θέσεις αυτών των όγκων συχνά καθιστούν δύσκολη την απόκτηση επαρκούς ποσότητας των ιστών για τη διάγνωση. Επιπλέον, οι κλινικοί γιατροί και οι ιδιοκτήτες μπορούν να αποθαρρύνονται από την επιλογή αυτή διαγνωστικό έλεγχο λόγω του κόστους και τις επεμβατικές διαδικασίες που σχετίζονται με βιοψία. Ως εκ τούτου, η πρόσβαση σε μια μη επεμβατική μέσο διάγνωσης αυτών των καρκίνων είναι μια ανικανοποίητη ανάγκη. Η υψηλή

BRAF

ρυθμός μετάλλαξης σε αυτούς τους όγκους κάνει το BRAF V450E μετάλλαξη ένας δυνητικός διαγνωστικός δείκτης για τις πληγείσες καρκίνους.

Ο προσδιορισμός των

BRAF

μετάλλαξη στο κυνικός καρκίνων αυξάνει τις δυνατότητες ότι η θεραπεία στοχεύει συστατικά που ενεργοποιούνται μονοπατιού MAPK μπορεί να παρέχει ένα κλινικό όφελος για εκείνους που φέρουν το

BRAF

V450E μετάλλαξη, ιδιαίτερα UC και PC ασθενείς. Πρόσφατα, vemurafenib και dabrafenib, εκλεκτικοί αναστολείς BRAF, βελτιωμένες κλινικές εκβάσεις σε ασθενείς με μελάνωμα σε σύγκριση με συμβατική χημειοθεραπεία [34,35]. Αυτοί οι αναστολείς BRAF έχουν επίσης δείξει θεραπευτικές δυνατότητες σε άλλα νεοπλάσματα υπόθαλψη

BRAF

μεταλλάξεις [36-38]. Επί του παρόντος, οι θεραπευτικές επιλογές για τα σκυλιά με UC και το PC είναι περιορισμένης αποτελεσματικότητας. Δεδομένης της αποτελεσματικότητας του BRAF /θεραπεία ΜΑΡΚ στόχευσης σε ανθρώπινους καρκίνους, το BRAF και ΜΑΡΚ μπορεί να υπόσχεται θεραπευτικοί στόχοι για αυτούς τους καρκίνους κυνικός. Οι αξιολογήσεις των

in vitro

και

in vivo είναι

επιδράσεις των αναστολέων BRAF σε σκύλους εγγύηση για την κλινική εφαρμογή του αναστολέα BRAF για τα σκυλιά που φέρουν καρκίνο με μεταλλαγμένο

BRAF

.

Εν κατακλείδι, έχουμε εντοπίσει το

BRAF

μετάλλαξη V450E σε κυνικός καρκίνων με διάφορες συχνότητες. Συχνές

BRAF

μετάλλαξη στο κυνικός UC και PC υπογραμμίζει ένα πιθανό ρόλο του μονοπατιού σηματοδότησης ΜΑΡΚ στην παθογένεια αυτών των όγκων και μπορεί να προσφέρει διαγνωστικές και θεραπευτικές εφαρμογές για τα σκυλιά που φέρουν

BRAF

μεταλλάξεις.

Υποστήριξη Πληροφορίες

πίνακα S1. Signalments των σκύλων διαγνωστεί με ουροθηλιακά και καρκίνωμα του προστάτη στην παρούσα μελέτη

doi:. 10.1371 /journal.pone.0129534.s001

(XLSX)